Processing the Single-Cell Shear Assay Imaging Data

Para realizar la correlación de imágenes digitales, o DIC, utilizando el software DIC, importe las imágenes derivadas de la grabación del ensayo puro al software DIC, preferiblemente en el formato de archivo TIF. Para una correlación optimizada, seleccione la opción suma de diferencial que rastrea la deformación de una nueva imagen con respecto a la última imagen. Seleccione un tamaño de subconjunto de 31 por 31 píxeles con un tamaño de paso de 20 píxeles.

Planifique la región de interés para una sola celda elegida. Para una forma irregular, como una celda, use una máscara de polígono para trazar la geometría de la celda. Seleccione puntos arbitrarios dentro de la celda asignada para realizar un seguimiento de la deformación.

Después del mapeo, elija puntos específicos en la célula, como el núcleo o el citoplasma, para analizar haciendo clic en Agregar un galgas extensométricas y dibujando galgas extensométricas individuales en puntos dentro del límite celular definido. Haga clic en Inicio para comenzar el procesamiento de la deformación y obtener datos de deformación frente al tiempo. La gráfica de tiempo de deformación generada como resultado de esta correlación se puede exportar como un archivo CSV para su posterior análisis en MATLAB.

Haga doble clic o haga clic con el botón derecho en el gráfico de tiempo de deformación generado y seleccione Exportar datos. El DIC de los fotogramas de imagen extraídos de grabaciones de ensayos puros produjo con éxito datos de tiempo de deformación compatibles con la respuesta de tensión de fluencia. Los resultados de los estudios que utilizaron la técnica de ensayo puro mostraron que las células cancerosas eran generalmente más compatibles mecánicamente y menos viscosas que las células normales.

Se observó que la rigidez y la viscosidad de las células disminuyeron con el aumento de la progresión del cáncer de un estado celular normal a un estado ligeramente metastásico y finalmente a un estado altamente metastásico. Sin embargo, el tiempo de relajación para estos tipos de células no mostró variaciones significativas.