Comience rociando al ratón debidamente sacrificado con alcohol al 75% para desinfectar la piel. A continuación, coloque el ratón en posición supina. Levante la piel de la región abdominal del animal y, con unas tijeras quirúrgicas, haga una pequeña incisión en ella.
Luego, con las tijeras, separe sin rodeos la piel y los músculos abdominales de la pelvis hasta el cuello, a lo largo de la línea media ventral. Exponga el corazón y los pulmones cortando el diafragma y las costillas a lo largo de ambos lados de la línea media. A continuación, extirpe con cuidado el hígado, el bazo, los intestinos y el riñón, evitando dañar la pared intestinal.
A continuación, extirpa los pulmones y el esófago. Ahora levante suavemente el corazón con fórceps sostenidos en una mano y separe la aorta de la columna vertebral con unas tijeras quirúrgicas sostenidas en la otra mano. A continuación, coloque el corazón y la aorta en una placa de Petri de 60 milímetros, que contenga PBS suplementado con antibióticos.
Recupere las pinzas microquirúrgicas y las tijeras microquirúrgicas del alcohol y enjuáguelas con 25 mililitros de PBS para eliminar el exceso de alcohol. Trabajando bajo un microscopio estereoscópico, extirpa el timo y otros tejidos del corazón y la aorta. A continuación, se extirpa el corazón, dejando la aorta con los tejidos adiposos perivasculares o PVAT.
Transfiera la aorta junto con los PVAT a una placa de Petri limpia de 60 milímetros que contenga PBS suplementado con antibióticos. Con un par de pinzas microquirúrgicas, sostenga la aorta y, con otro par, retire los tejidos adiposos adheridos para separar los PVAT de la aorta. Extirpar la mayor cantidad posible de tejido vascular causando un daño mínimo a los PVAT.
Finalmente, transfiera los PVAT recolectados a un tubo de microcentrífuga de dos mililitros, que contiene DMEM con alto contenido de glucosa suplementado con antibióticos, colocado en hielo.
