Para comenzar, coloque un ratón macho C57 negro seis anestesiado de ocho a 10 semanas en el banco quirúrgico. Con unas pinzas romas, saque la lengua y sujétela con los dedos. Inserte un laringoscopio en la boca y visualice las cuerdas vocales.
Estabilice la barbilla del ratón en el laringoscopio y sostenga el catéter intravenoso o intravenoso de calibre 20 con un alambre guía insertado en él. A continuación, inserte ligeramente la guía en la cuerda vocal y empuje lentamente el catéter IV de calibre 20 en la tráquea hasta que la parte del ala esté a la altura de la punta de la nariz. Una vez que el mouse esté conectado al ventilador, manténgalo en posición lateral con el área temporal derecha hacia arriba.
Mantenga la temperatura rectal a 37 grados centígrados con una almohadilla térmica y una lámpara de calor. Después de localizar el arco cigomático e incidir el músculo temporal, use dos fórceps para diseccionar el arco cigomático subyacente y exponer la articulación entre el maxilar y los huesos cigomáticos. Luego, con unas tijeras, corta una porción de tres milímetros del arco cigomático y retíralo.
Por último, separa el músculo masetero de la base del cráneo. Coloque cuatro retractores pequeños en diferentes direcciones y exponga la base del cráneo craneal con un retractor tirando de las ramas del nervio trigémino lateralmente. Aplique una gota de solución salina en el cráneo por encima de la arteria cerebral media, o tronco MCA y proximal a la rama de la corteza rinal.
Use una amoladora eléctrica para adelgazar el cráneo hasta que se vea una pequeña fractura. Y con la punta de las pinzas, retira el cráneo delgado. Coloque un lazo de una sola hebra de seda trenzada negra encima del MCA.
A continuación, inserte un 8-O aguja microquirúrgica para levantar el tronco MCA y atar la sutura debajo de la aguja, dejando los dos extremos de la aguja en la parte superior del nudo del bucle de hilo de seda. Para la oclusión transitoria de la arteria cerebral media (MCAO, por sus siglas en inglés), apriete ligeramente el nudo de hilo de seda debajo de la aguja para bloquear el flujo sanguíneo arterial, lo que representa el inicio de la MCAO. Use las pinzas para sujetar la sutura y retire lentamente la aguja al final de la isquemia.
Las imágenes de contraste con manchas láser confirmaron la reducción del suministro de sangre en el ACM derecho. En el caso de la OCM transitoria después de la retirada de la sutura, la reperfusión del flujo sanguíneo cerebral fue evidente y mejoró aún más después de 24 horas. La tinción TTC del cerebro después de 24 horas de accidente cerebrovascular demostró la generación de tejido infartado en las áreas cortical y lateral del estriado en ratones jóvenes y viejos.
El tamaño del infarto fue moderado en comparación con el filamento MCAO.
