Después de colocar la fibra de microdiálisis en el antebrazo, coloque la jeringa de un solo uso en la bandeja portajeringas de las bombas de microinfusión. Durante la fase de hiperemia, perfundir zumbadores lactatos, solución salina o solución vehicular. Fije la unidad de calentamiento local a la piel, asegurándose de que cubra la membrana semipermeable, utilizando el disco adhesivo de la sonda.
Inserte la sonda de flujo doppler láser en la abertura en el centro del calentador local y comience a registrar los valores de flujo de glóbulos rojos o glóbulos rojos haciendo clic en Iniciar en el software de adquisición de datos. Coloque un manguito automático de presión arterial en el brazo de un sujeto no instrumentado. Ajuste los calentadores locales a 33 grados centígrados para mantener una temperatura termoneutra de la piel.
Para agregar un comentario a la grabación continua en el software de adquisición de datos, haga clic en el cuadro de texto en la esquina superior derecha de la pantalla. Escriba un comentario, seleccione qué canal debe recibir el comentario y haga clic en Agregar. Comience la recopilación de datos de línea de base una vez que el flujo de glóbulos rojos se estabilice a 33 grados centígrados de calor local ingresando el comentario, comience la línea de base.
Mida y registre la presión arterial de referencia después de cinco a 10 minutos de la recopilación de datos de referencia. Introduzca el comentario, finalice la línea de base en el software de adquisición de datos. Apague las bombas de microinfusión y reemplace las jeringas de solución de ringer lactato por la jeringa que contenga la concentración más baja de acetilcolina.
Después de asegurar las nuevas jeringas y confirmar la perfusión de líquido a través de la sonda, vuelva a encender las bombas de microinfusión. Introduzca start menos 10 como comentario en la grabación del software de adquisición de datos. Durante el último minuto de perfusión, mida y registre la presión arterial.
Una vez finalizada la perfusión para una concentración determinada, reemplace la jeringa con la siguiente concentración más alta. Después de la perfusión final, eleve la temperatura del calentador local a 43 grados centígrados. Deje que el flujo de glóbulos rojos se estabilice y reemplace la solución de timbre con nitroprusiato de sodio.
Mida y registre la presión arterial aproximadamente cada tres minutos durante esta fase de vasodilatación máxima. Una vez que se haya producido una meseta de flujo de RBC máxima, seleccione Detener en la esquina inferior derecha del software de adquisición de datos. Registre la recopilación de datos de referencia como se demostró anteriormente.
Según los requisitos del protocolo, aumente los calentadores locales a 39 o 42 grados centígrados. Después de que el flujo de glóbulos rojos se estabilice en respuesta a la aplicación de calor local, perfunda L-Name a través de la sonda de microdiálisis. A continuación, ajuste los calentadores locales a 43 grados centígrados.
A continuación, inicie la profusión de la sonda de microdiálisis con nitroprusiato de sodio después de que el flujo de glóbulos rojos se estabilice a 43 grados centígrados, lo que permite que el flujo alcance su meseta máxima. Una vez que comenzó la profusión de cada dosis, se observó un aumento continuo en el flujo de glóbulos rojos hasta un pico, seguido de una meseta inducida por calor y SNP. La profusión de nitroprusiato de sodio produjo una vasodilatación local máxima, representada como un aumento en el flujo de glóbulos rojos.
Se observó un flujo de glóbulos rojos relativamente menor en presencia de un inhibidor de la óxido nítrico sintasa. Durante la vasodilatación local máxima, habrá un aumento exponencial en el flujo de glóbulos rojos, debido a la inhibición previa de la óxido nítrico sintasa. En el protocolo de calentamiento local, L-Name se perfundió después de lograr una meseta estable en el flujo de glóbulos rojos.
Se observó una rápida disminución en el flujo de glóbulos rojos hasta que alcanzó una nueva meseta en respuesta a L-Name. El calentamiento produjo una respuesta adicional de pico y nadir en el flujo de glóbulos rojos.
