Oral Submucous Fibrosis Tissue Sample Preparation for Hematoxylin-Eosin Staining

Para comenzar, usando un micrótomo, corte los tejidos de fibrosis submucosa oral incrustados en parafina fijados en formol en secciones continuas de tres en 10 micrómetros de espesor, luego despliegue las secciones en agua. Coloque secciones de tres micras en el portaobjetos del microscopio de adhesión o en el portaobjetos A, y 10 micras en el portaobjetos de membrana de pluma o en el portaobjetos B. Coloque ambos portaobjetos en una placa calefactora a 60 grados centígrados. Después de dos horas, coloque los portaobjetos A y B en xileno durante 10 minutos, luego hidrate los portaobjetos en concentraciones graduadas de etanol durante un minuto en cada concentración.

A continuación, coloque los portaobjetos en agua destilada ultrapura durante 30 segundos. Remoje los portaobjetos en la solución de colorante de hematoxilina Harris durante 90 segundos. Vuelva a lavar los portaobjetos tres veces en agua destilada ultrapura durante 30 segundos cada uno.

Después de eso, sumerja los portaobjetos en una solución de div-hematoxilina durante dos segundos. Regrese los portaobjetos en agua destilada ultrapura durante 30 segundos, repitiendo tres veces. A continuación, sumerja las diapositivas A y B en una solución azul al 1% durante dos segundos.

Después de lavar los portaobjetos con agua destilada, colóquelos en una solución de eosina durante dos segundos. Vuelva a sumergir los portaobjetos en agua destilada ultrapura durante 30 segundos antes de deshidratar y aumentar las concentraciones de etanol, luego sumerja el portaobjetos A en xileno durante tres minutos. Finalmente, aplique una gota del medio de montaje a la diapositiva A y cúbrala con una cubierta de vidrio.