Midline Laparotomy Surgery in Donor Mice for Orthotopic Liver Transplantation

Para comenzar, coloque el ratón donante anestesiado bajo el microscopio de alta potencia. Con unas tijeras, realice una laparotomía de la línea media desde la apófisis xifoides hasta la síntesis púbica. A continuación, haz una incisión transversal debajo de las costillas para crear un patrón en forma de cruz.

Después de retraer el proceso xifoides, eviscerar los intestinos y colocarlos en la esponja de gasa húmeda en el lado izquierdo de la cavidad abdominal. Para movilizar el hígado, sepáralo de todas sus uniones ligamentosas. Una vez que la arteria hepática adecuada o PHA esté expuesta, esqueletiza con pinzas curvas.

Después de ligar el PHA, diseccione toda la longitud del conducto biliar común o CBD. Inserte el stent del conducto biliar en el CBD y asegúrelo con una sutura de nailon 10-O, luego ligar el aspecto distal del CBD. Con una esponja de gasa húmeda, retraiga el lóbulo hepático derecho hacia el xifoides y exponga la vena cava inferior o IVC.

Movilizar la vena cava inferior infrahepática, o IHIVC, lejos del retroperitoneo y cauterizar la vena suprarrenal derecha. Una vez que la arteria renal derecha y la vena estén diseccionadas y ligadas, corte ambas y las inserciones ligamentosas restantes. Después de extirpar el riñón derecho, inyecte 0,5 mililitros de solución fría de histidina triptófano cetoglutarato con 100 unidades de heparina a través de la vena porta, o PV. Después de un minuto de inyección, corte la vena porta superior a la esplénica y la vena mesentérica superior.

Para perfundir el hígado, inyecte lentamente una solución fría de conservación de histidina triptófano cetoglutarato en la IHIVC hasta que el líquido proveniente de la VP esté limpio. Coloque una micropinza o sutura fina en la IHIVC justo por encima de la vena renal derecha y corte justo por debajo de la pinza. Una vez que el CBD se corta distalmente al stent, identifique y lige el conducto cístico con una sutura de nailon 10-O.

Con unas pinzas, agarre la cúpula de la vesícula biliar y, con unas tijeras de resorte, corte el conducto cístico por encima de la sutura para completar la colecistectomía. Retraer el hígado inferiormente para exponer la vena cava inferior suprahepática, o SHIVC, y cortarlo, conservando una longitud adecuada para la anastomosis en los ratones receptores. Después de retirar los aditamentos ligamentosos adicionales.

Coloque el hígado en solución salina fría.