Para comenzar, sostenga firmemente la cabeza de los ratones recién nacidos sacrificados en su lugar. Con unas tijeras microquirúrgicas, abra el cuero cabelludo a lo largo de la sutura sagital. A continuación, separar e inmovilizar el cuero cabelludo bilateralmente con los dedos.
Use unas tijeras para cortar el cráneo y voltéelo hacia adelante para acceder al cráneo. Emplea un pequeño elevador perióstico para extraer el cerebro y luego usa la punta de las tijeras para raspar suavemente el cerebro, revelando la base del cráneo. Ahora, examina los huesos temporales bilaterales en la base del cráneo.
Emplea unas tijeras para incidir la base del cráneo a lo largo de la línea media. Luego, raspe la piel y elimine cualquier hueso innecesario. Conserve y transfiera los huesos temporales a placas de Petri estériles de 35 milímetros llenas de HBSS fresco.
A continuación, use un par de pinzas puntiagudas de 5 números para eliminar la bola y el tejido circundante de la porción petrosa del hueso temporal. Sostenga las pinzas con una mano para estabilizar la parte semicircular del hueso temporal. Use la otra mano para insertar la punta inferior de las pinzas en el nicho redondo de la ventana, separando el hueso lateral de la cóclea de la escama del vestíbulo.
Retire con cuidado la porción petrosa del hueso temporal sin entrar en contacto con el epitelio del órgano de Corti. A continuación, separar y extraer meticulosamente el laberinto óseo de la cóclea, empezando por el extremo basal hasta el apical. Usando 5 pinzas puntiagudas, microaísle cuidadosamente el epitelio sensorial del órgano de Corti del modiolo.
A continuación, emplee pinzas microquirúrgicas para sujetar el ligamento espiral y sepárelo suavemente de la estría vascular. Transfiera el epitelio auditivo limpio, utilizando una pipeta de 200 microlitros, a una placa de cultivo estéril de tres milímetros que contenga HBSS. Coloque el epitelio auditivo aislado en una placa de Petri estéril de 100 milímetros llena de HBSS para los pasos de preparación posteriores.
