Para comenzar la preparación de la muestra para el ensayo de proteína Bradford, diluya las muestras de proteína para obtener concentraciones de proteína dentro del rango de la curva estándar de 0,025 a 1,0 miligramos por mililitro. Cree varias diluciones de muestra por muestra dentro de este rango. Para el punto cero de proteína, agregue 10 microlitros del tampón o medio utilizado para preparar las soluciones estándar a los pocillos designados.
Luego agregue 10 microlitros de cada solución estándar de proteína en un conjunto de tres pocillos que sirven como triplicados en una microplaca de 96 pocillos. En un conjunto separado de pocillos en la misma microplaca de 96 pocillos, agregue 10 microlitros de cada dilución de muestra por triplicado. A continuación, agregue 250 microlitros de reactivo de ensayo de proteína Bradford a todos los pocillos.
En la pantalla se muestra un diseño de la configuración final de la microplaca. Proceda a registrar los resultados en una habitación bien iluminada dentro de los 5 a 15 minutos posteriores a la adición del reactivo de ensayo. Con una mano, sostenga la microplaca contra un fondo blanco uniforme, asegurándose de que esté paralela al banco de trabajo.
Mientras usa la otra mano, sostenga un teléfono inteligente paralelo al banco y la microplaca. Proceda a capturar varias imágenes de toda la microplaca. Para dispositivos iOS, habilite la opción de cuadrícula en la configuración de la cámara para activar el indicador de nivel de la cámara.
Para dispositivos Android, active las líneas de cuadrícula en la configuración de la cámara para lograr lo mismo. Aunque no se requiere ningún aparato de iluminación especial, tenga cuidado al capturar las imágenes correctamente. Evite sombrear la placa o el fondo y evite reflejos excesivos.
Además, asegúrese de no inclinar el plato. Inspeccione la imagen en busca de fondo, uniformidad, sombras y reflejos. Compruebe también el ángulo de los pocillos: El centro de cada pocillo debe ser directamente visible Si lo desea, lea la microplaca en un lector de microplacas para comparar los datos de color de la imagen con las lecturas de absorbancia de la microplaca.
