Recolección de bazo de rata para la preparación de matriz de bazo descelularizado

Para comenzar, coloque una rata afeitada anestesiada en posición supina sobre una mesa quirúrgica. Inyectar dos mililitros de solución salina heparinizada en la vena dorsal del pene para la anticoagulación sistémica. Desinfecte la piel abdominal afeitada con una solución de povidona yodada y cúbrala con un paño estéril.

Con unas tijeras quirúrgicas, haga una incisión cruciforme en el abdomen. Estirando la cavidad abdominal con las pinzas hemostáticas, voltee el hígado hacia el diafragma, exteriorice el tracto gastrointestinal hacia el lado derecho del abdomen y cúbralo con una gasa húmeda. Separe y corte cuidadosamente el ligamento esplenogástrico para exponer el hilio esplénico.

Diseccionar gradualmente a lo largo del hilio esplénico para separar y exponer la arteria hepática común, la arteria gastroduodenal y la arteria esplénica. Ligar y cortar la arteria gastroduodenal y la arteria hepática común mientras disocia progresivamente el tejido circundante. Voltea el bazo hacia el lado derecho para exponer la aorta abdominal.

Realice suavemente una disección roma con hisopos de algodón para exponer la aorta abdominal y el tronco celíaco. Colocar una sutura de seda 3-0 de aproximadamente tres centímetros de longitud por encima y por debajo de las ramas del tronco celíaco. A continuación, coloca una sutura de seda 6-0 de 10 centímetros de largo en la rama del tronco celíaco.

Ligar la aorta abdominal por debajo y por encima de las ramas del tronco celíaco. Luego, haga una pequeña incisión en la rama arterial. Levante suavemente la sutura de seda 6-0 e inserte un catéter venoso de calibre 24 en la arteria esplénica a lo largo del tronco celíaco.

Lime el catéter para asegurarlo en su lugar. Use una bomba de jeringa para infundir 50 mililitros de solución salina normal heparinizada a una velocidad de cuatro mililitros por minuto. Al mismo tiempo, corte la vena porta como un canal de salida para permitir que el líquido infundido fluya fuera del bazo.

Diseccionar cuidadosamente el tejido circundante del bazo, evitando dañar el páncreas y preservando los principales vasos accesorios. Verifique si hay alguna fuga alrededor del bazo. Luego, retire el bazo y el páncreas y enjuáguelos con solución salina normal.

Transfiera el bazo a un tubo de centrífuga de 50 mililitros lleno de solución salina normal. Y guárdalo en un congelador a 80 grados centígrados.