Comience preparando las fases móviles para la cromatografía líquida de alta resolución o HPLC. Para la fase móvil A, o MPA, use cinco formiato de amonio milimolar en agua con ácido fórmico al 0,05%. Para la fase B móvil, o MPB, use ácido fórmico al 0,05 % en una mezcla de acetonitrilo de metanol uno a uno.
Para comenzar el desarrollo del método de HPLC, abra el software de cromatografía líquida o LC y cree un nuevo protocolo. A continuación, haga clic en el botón Editar método para editar el degradado binario. En la pestaña Gradiente binario, establezca las marcas de tiempo y las concentraciones de MPA y MPB.
Establezca el tiempo de parada en 18 minutos, el caudal en 0,400 mililitros por minuto y los límites de presión mínima y máxima en cero y 6.000 PSI respectivamente. Para inicializar la HPLC, inserte la columna LC y los protectores de columna en la sección de columna HPLC. Observe cuidadosamente las presiones mínima y máxima de la columna.
