Para empezar, se cosechan digestos de pollo homogeneizados de un intestino de pollo extraído en un vórtice durante 10 a 15 segundos. Transfiera la muestra homogeneizada al tubo que contiene el medio de enriquecimiento. Después de la incubación, use un mezclador de vórtice para mezclar bien el tubo enriquecido durante 10 a 15 segundos.
A continuación, transfiera la muestra mezclada a un medio de caldo mínimo estéril antes de incubar como antes. A continuación, diluya las muestras en serie en una solución salina estéril, comenzando con una dilución de uno a 10 y continuando hasta una dilución de 1 a 1000. Homogeneizar la muestra a fondo en un mezclador de vórtice después de cada dilución.
Transfiera un mililitro de la muestra diluida a una placa de Petri en condiciones estériles y anaeróbicas. A continuación, vierta de 15 a 20 mililitros de medio de agar mínimo derretido en la placa de Petri. Agite el plato suavemente para asegurar una mezcla uniforme.
Cuando el agar se haya solidificado, incubar las placas en posición invertida en una estación anaeróbica durante 24 horas. a 39 grados centígrados. Las colonias deben aparecer como pequeños puntos incrustados distintos al final de la incubación.
Ahora use un circuito de inoculación estéril para seleccionar cuidadosamente cada colonia bacteriana individual. Transfiera las colonias a tubos separados que contengan cinco mililitros de caldo mínimo. El aumento de la turbidez del final de la incubación es indicativo de crecimiento bacteriano.
Se observaron colonias bacterianas capaces de utilizar mioinositol en un medio de agar mínimo.
