Extracción química de callos de zanahoria tratados con plaguicidas para evaluar la citotoxicidad de los metabolitos de los plaguicidas

Para empezar, mezcle 0,2 gramos de polvo molido de cada muestra de callo de zanahoria liofilizada y tratada con pesticidas, con tres mililitros de acetonitrilo en un tubo de centrífuga de 10 mililitros. Agite el tubo de la centrífuga durante ocho minutos y luego sonicélo durante cinco minutos a 150 vatios y 40 kilohercios. A continuación, centrifugar el tubo a 8.000 g y cuatro grados centígrados durante 10 minutos, antes de recoger el sobrenadante mediante pipeteo.

Usando un concentrador de soplado de nitrógeno a 40 grados centígrados, concentre los extractos agrupados hasta que se sequen. Vuelva a disolver los residuos del extracto en un mililitro de DMEM, que contiene 0,3% de DMSO para producir la solución de exposición al metabolito del pesticida. De manera similar, vuelva a disolver los residuos del extracto obtenido de las muestras callosas en blanco.

en un mililitro de DMEM, que contiene 0,3% de DMSO. Luego, disuelva un miligramo de cada pesticida utilizado en diferentes tubos que contienen la solución de residuo de muestra en blanco para producir soluciones de exposición aparente a pesticidas.