Paso de células Caco-2 para evaluar la citotoxicidad de los metabolitos de los plaguicidas del callo de zanahoria tratado con pesticidas

Proceda a pasar las células después de cultivarlas hasta que alcancen una densidad celular superior al 80%Después de desechar el medio de cultivo, lave las células tres veces con PBS. A continuación, añada un mililitro de solución de tripsina-EDTA al matraz y extiéndalo uniformemente para que entre en contacto con toda la célula. Una vez que las células cambien de una forma adherente a puntos pequeños y redondos, como se observa bajo el microscopio con un aumento de 100X, retire la solución digestiva.

Golpee suavemente la pared del matraz para separar las celdas. Agregue dos mililitros de DMEM y repita enjuague la pared del matraz 10 veces. Golpee suavemente la pared del matraz y transfiera un mililitro de la suspensión de celdas a otro matraz de vidrio.

Agregue cinco mililitros de DMEM a cada matraz de vidrio. Golpee suavemente la pared del matraz para distribuir las células de manera uniforme. Cultive las células a 37 grados centígrados con 5% de dióxido de carbono hasta que la densidad celular sea superior al 80%