Para comenzar, sujete el tubo de 3 por 8 pulgadas justo antes del puerto aórtico para detener el flujo de perfusión. Coloque el corazón del cerdo preparado con su pared posterior hacia el operador e incline la cámara del órgano aproximadamente 20 grados. Luego, coloque la cánula aórtica en un ángulo de 90 grados con respecto al puerto aórtico y desenganche la línea aórtica lentamente.
Desairee la cánula aórtica permitiendo que la perfusión fluya hacia ella gradualmente. Ahora, disminuya lentamente el ángulo de la cánula aórtica hasta que se alinee con el puerto aórtico, luego conéctela completamente a la línea aórtica. Una vez que esté completamente conectado, masajee suavemente el corazón de forma intermitente para evitar la distensión debida al llenado del ventrículo izquierdo.
Ventile el ventrículo izquierdo a través de la aurícula izquierda abierta durante este período. Inicie la adquisición de datos e inicie el goteo de adenosina a 333 microlitros por minuto. Luego, conecte los cables de estimulación a la caja de estimulación y configúrelo a 60 latidos por minuto para el ritmo de respaldo.
Si hay fibrilación, desfibrile el corazón con 30 paletas JUULs. Una vez que haya un ritmo organizado, suspenda la ventilación manual y coloque los electrocardiogramas directamente en el corazón con agujas de gancho. Conecte la cánula de ángulo recto al puerto auricular de la cámara del órgano.
Una vez conectada, sujete la cánula y suelte la abrazadera Hoffman en la línea entre el oxigenador y el depósito de carga para permitir que el líquido entre en el depósito de carga. Luego, llene el depósito de carga hasta que la presión alcance de 15 a 20 milímetros de mercurio. Aumente la salida de la bomba para mantener la presión aórtica y auricular.
A continuación, inserte la mitad de la punta metálica en ángulo recto en la aurícula izquierda con la punta apuntando hacia el apéndice para promover la competencia de la válvula mitral. Inserte el sensor de presión dentro del ventrículo izquierdo para registrar la presión del ventrículo izquierdo. Después de eso, suelte la pinza de la cánula para permitir que la aurícula izquierda se llene.
Una vez desaireado, utilice las suturas y los lazos de torniquete previamente colocados para cerrar completamente la abertura de la aurícula izquierda. Ajuste la cánula y los asas según sea necesario para minimizar las fugas de líquido. Después de asegurar la cánula en la aurícula izquierda, sujete la línea desde el oxigenador hasta la bolsa de windkessel para detener completamente la perfusión retrógrada a la aorta.
Finalmente, mueva el goteo de adenosina desde la línea que conduce a la bolsa de windkessel hasta la línea entre el depósito de carga y el puerto auricular. La resistencia vascular, la tasa de absorción de oxígeno, la acumulación de lactato, el consumo de glucosa y la acumulación de potasio no mostraron diferencias estadísticas a lo largo del período de perfusión. Del mismo modo, no se observaron diferencias en el peso ganado por los injertos.
Sin embargo, la frecuencia cardíaca de los injertos fallidos disminuyó constantemente después de dos horas de tiempo cargado, y el área debajo de la curva no mostró diferencias estadísticamente significativas hasta tres horas de perfusión. Además, las métricas dependientes de la carga sugirieron una pérdida de la función cardíaca a los 30 minutos del tiempo de carga, siendo la medida de la contractilidad la primera métrica que indicó una pérdida de función. Al igual que la frecuencia cardíaca, la presión del pulso del ventrículo izquierdo disminuyó de manera constante después de dos horas de perfusión cargada, con diferencias estadísticamente significativas entre los injertos, la presión del pulso y la relajación observadas después de 1,5 horas de perfusión.
