Preparación de reactivos y material de álamo para la inoculación in vivo de hojas

Comience agregando extracción de papa, dextrosa y barrena en agua para preparar una barrena de dextrosa de papa o un medio de cultivo PDA para cepas de hongos. Caliente la solución a 100 grados centígrados durante 10 minutos para disolver completamente los componentes. Pobre medio PDA en tubos de 25 mililitros.

Esterilice todos los tubos a 121,1 grados centígrados durante 30 minutos. A continuación, enfríe los tubos esterilizados en un banco limpio a 50 o 60 grados centígrados. Vierta el medio en placas de cultivo de 9,0 centímetros de diámetro y enfríelas a temperatura ambiente.

A continuación, corte el micelio del patógeno fúngico cultivado en medio PDA a 28 grados centígrados durante siete días en cubos cuadrados de aproximadamente 0,5 centímetros. Inocular los cubos de hongos en el centro de las placas de PDA, asegurándose de que los lados del micelio miren hacia el medio. A continuación, se cultivan los patógenos fúngicos inoculados en una incubadora termostática durante siete a 10 días.

Después de la incubación, corte el medio PDA que contiene el micelio fúngico en cubos cuadrados con lados de 1,0 a 1,2 centímetros de largo. Seleccione las hojas recién maduras completamente extendidas de la parte superior de las ramas principales de los clones de álamo de 1 año, asegúrese de que las hojas estén libres de plagas, enfermedades y daños mecánicos. Para las ramas de un año de edad de clones híbridos de álamo perenne, seleccione las hojas superiores de la quinta a la séptima de las ramas seleccionadas como materiales inoculados.

Rocíe los clones o ramas de álamo seleccionados con agua limpia. Después del secado, limpie las hojas seleccionadas con alcohol al 75%, ya sea una hora o un día antes de las manipulaciones de inoculación.