Apoyada por los Institutos Nacionales de Salud subvenciones R01-AA015614, R01-AA014973, AA014127 y T32-K12-GM088021. Los autores agradecen a Samantha L. Blomquist para la asistencia técnica y los Dres. Kevin Caldwell y Donald Partridge para evaluar críticamente el manuscrito y video.

Todos los animales procedimientos fueron aprobados por la Universidad de Nuevo México-Ciencias de la Salud Animal del Centro de Atención Institucional y el empleo Comisión. 1. Vapor Asamblea Cámara <ol><li> Hojas de corte de policarbonato con una sierra circular o sierra de calar a las dimensiones previstas en el video de arriba, abajo, delante, detrás, a los lados, y la puerta (Figura 1 y Tabla 1). </li><li> Con una sierra circular o sierra de calar, cortar una abertura 8 pulgadas de alto por 16 pulgadas de ancho en el medio del panel frontal. </li><li> Mida y marque los agujeros para la bisagra de piano en el de 18 pulgadas por 10 pulgadas de hoja de policarbonato que se convertirá en la puerta de la cámara. </li><li> En la puerta, taladre agujeros del fregadero del contador con un poco de 5/16 de pulgada de perforación, y con un poco de 3/16 de pulgada de perforación, perforar el agujero para los tornillos. Asegúrese de perforar agujeros del fregadero de venta libre en el interior de la puerta para que las cabezas de los tornillos. </li><li> Preparar las láminas de policarbonato para la soldadura. </li><li> Ensamble front, paneles traseros y laterales en el panel inferior utilizando para soldar # 16. </li><li> Selle todos los espacios entre los paneles con autógena-en # 16. </li><li> Coloque el panel superior con autógena-en # 16. </li><li> Utilice abrazaderas de barra o libros de texto pesados ​​para mantener todo en su lugar, mientras que las soldaduras curan. </li><li> Adjuntar un 1 pulgada de una pieza de 12 pulgadas de policarbonato en la parte frontal del panel 1 pulgada por debajo de la abertura para la fijación de la bisagra de la puerta. </li><li> Deje por lo menos 24 horas para soldar de curar. </li><li> Corte 2 pedazos de tubería PEX 12 pulgadas de largo y 1 trozo de tubo PEX largo de 1 pulgada. </li><li> Con una broca de 5/16, perforar un agujero en cada uno de la tubería de PEX 12 pulgadas aproximadamente 1 a 2 pulgadas de un extremo. </li><li> Adjuntar 2 x 12 pulgadas tubería de PEX a un conector en T 3/8 pulgadas con los agujeros situados fuera del conector. </li><li> Tape los extremos abiertos de la tubería de PEX con 3/8 pulgadas tapones. </li><li> Fije la bisagra al panel frontal y la puerta usando tornillos 4-40 y tuercas. </li><li> Uso de la puerta como una guía, marca de los agujeros necesarios para la bisagra de piano sobre el espaciador de 1 pulgada en el panel frontal de la cámara. </li><li> Con una broca de 3/16 pulg pulgadas, perfore los agujeros en el panel frontal de la bisagra de piano. </li><li> Coloque la puerta y bisagra al panel frontal mediante tornillos 4-40 y tuercas. </li><li> Montar las abrazaderas de palanca como se muestra en el vídeo con una arandela y una tuerca en cada lado del brazo lateral. </li><li> Marque y perfore orificios de 3/16 pulgadas para el SUJETADORES en el panel frontal y se adhieren basculante abrazaderas con tornillos 4-40 y tuercas. </li><li> Añadir juntas de bulbo de caucho de 3/8 pulgadas a la parte interior de la puerta. </li><li> Con una broca de perforación 5/8 de pulgada, perforar un agujero en el centro del panel superior para el puerto de entrada. </li><li> Perforar un agujero de 1/2 pulgada de la parte inferior / centro del panel posterior de la boca de salida. </li><li> Montar el puerto de salida empujando la parte roscada de 3/8 pulgadas a través de la pared a través de los adaptadores de la pared posterior de la cámara de vapor en el orificio del puerto de salida. Coloque la tuerca delinterior de la cámara para mantenerlo en su lugar. </li><li> Quite la cubierta protectora de láminas de policarbonato. </li><li> Coloque la pieza de 1 pulgada de tubería PEX para el conector en T y forzar la tubería PEX a través del agujero en la parte superior de la cámara desde el interior. </li><li> Adjuntar un 3/8 pulgadas 90 codazo en la parte superior de la tubería PEX de 1 pulgada desde el exterior. NOTA: Realice un orificio de 1/2 pulgada de la puerta e inserte un sello septos 1/2 pulgada en el agujero. </li><li> Repita los pasos 1 a 22 para el aire de control sólo de la cámara. </li></ol> 2. Bastidor y Asamblea Air Delivery <ol><li> Si la colocación de las cámaras en la cesta / bastidor mencionado en la lista de materiales, montar la cesta de acuerdo con las instrucciones del fabricante. </li><li> Con tuercas y tornillos de repuesto, coloque un trozo de policarbonato a la cremallera para sujetar los reguladores de flujo de aire. </li><li> En cualquier lugar en el trozo de policarbonato, marque y taladre agujeros de 3/4 pulgadas para los reguladores de flujo de aire y conecte los reguladores con las tuercasproporcionado. </li><li> Adjuntar 3/8 pulgadas a través de la pared del adaptador a los puertos de entrada y salida de los reguladores de flujo de aire. </li><li> Montar el frasco de etanol con la piedra de aireación, # 8 tapón y cierre rápido en la línea de conectores. </li><li> Uso de tubo Tygon de 3/8 pulgadas, conectar los reguladores de flujo a la bomba de aire y matraz de etanol como se muestra en la Figura 1. </li><li> Para la única cámara de aire, conectar el puerto de salida del regulador de flujo de aire a la entrada 3/8 de pulgada 90 codo con tubo Tygon de 3/8 pulgadas, como se muestra en la Figura 1. </li></ol><img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51839/51839fig1highres.jpg" width="500" /> Figura 1. Representación esquemática de la configuración de las cámaras de vapor. Un conector en T está unido a la bomba de aire de bajo ruido. Un lado del conector en T está conectado directamente a un regulador de flujo de aire para la única cámara de vapor de aire. Los otros sIDE se divide de nuevo y se fija a 2 reguladores de flujo de aire diferentes, una para el aire y uno para el etanol. La cámara de aire está conectado directamente al regulador como se muestra. Para la cámara de vapor de etanol, un regulador de flujo de aire está conectado a la piedra aireador sumergido en etanol líquido en el matraz de filtración. El puerto de brazo lateral del matraz de filtro se conecta con la salida del regulador de aire, como se indica. El vapor de etanol fusionado y aire se conecta entonces a la entrada de la cámara de vapor de etanol. Los tubos de salida (no mostrados) están conectados a una salida de ventilación en la sala. 3. Prueba de Cámaras y ajustar los niveles de vapor de etanol <ol><li> Añadir 600 ml de 190 pruebas de etanol al matraz de filtro, inserte la piedra de aireación, y conectar a la entrada del tubo al brazo lateral del matraz. </li><li> Cierre las puertas de la cámara y encienda la bomba de aire. </li><li> Ajuste los reguladores de flujo de aire de manera que aproximadamente la mitad de la cantidad de aire fluye a través del líquido de alcohol como el aire que se mezcla con. Adjust el aire sólo el flujo de aire para el flujo combinado del alcohol y el aire de la cámara de etanol. </li><li> Permitir a cámaras de equilibrar durante al menos 30 min antes de medir la concentración de etanol de aire. </li><li> Medir la concentración de etanol de aire mediante la extracción de 5 ml de aire con una aguja 18G y una jeringa de 60 ml a través del septo. Diluir la muestra con el aire de la habitación dibujando el émbolo hacia atrás hasta 60 ml (dilución 1:12). Mida el nivel de etanol aire utilizando un alcoholímetro de conformidad con las instrucciones del fabricante. Es necesaria la dilución de la cámara de aire para lograr los niveles de vapor de alcohol dentro del rango de detección del alcoholímetro. NOTA: Si utiliza diferentes niveles de la exposición al alcohol puede necesitar la dilución que ser ajustada. </li><li> Como punto de partida, ajuste los reguladores de flujo de aire según sea necesario para lograr una concentración de alcohol de aire de aproximadamente 4,5 a 5 g / dl (gramos de alcohol vaporizado por dl de aire). </li></ol> 4. Reproducción Animal <ol><li> Las mujeres de la casa Grupo C578BL / 6 ratones (2-3 meses de edad) durante al menos 1 semana para sincronizar los ciclos ováricos. </li><li> Albergar Individualmente masculinos C57BL / 6 ratones (2-5 meses de edad) durante al menos 2 semanas. </li><li> Después de sincronizar, colocar una sola hembra con un macho durante 5 días para permitir el apareamiento. </li><li> Después del apareamiento, los machos y eliminar de forma individual las hembras de las casas y colocarlos en cámaras. </li></ol> 5. Pre y post-natal Exposición Ethanol Vapor <ol><li> La exposicion presas embarazadas a vapor de etanol durante 4 horas al día, comenzando a las 10 horas durante el ciclo de luz (luces de 06 a.m.-6 p.m.), excepto el día del nacimiento para prevenir la muerte cachorro. </li><li> Pesar represas en días de gestación (G) 5, G13-G14, y G18-G20 para vigilar embarazos; ropa de cama fue cambiado el día que las hembras se pesaron para reducir al mínimo la manipulación. </li><li> Cada día reemplazar la comida para los grupos de etanol expuesta para evitar el consumo de gránulos con cualquier etanol absorbido en ellos. </li><li> En el día denacimiento no exponga animales. Después del nacimiento exponer las presas y cachorros durante 4 horas al día, comenzando a las 10 am de P1-P12. </li><li> Pesar cachorros en P2, P8, P12, y P25; y cambiar la ropa de cama en P8 y P12 a minimizar la manipulación adicional. </li><li> Inmediatamente después de la última exposición (P12), la transferencia de las jaulas a una habitación estándar albergar a los animales. </li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

A continuación, describimos en detalle los métodos para la construcción de cámaras de inhalación de vapores. Los materiales y las herramientas requeridas para construir las cámaras están fácilmente disponibles a partir de un número de proveedores comerciales y los pasos para la construcción de las cámaras son relativamente sencillos. El sistema que se describe aquí no contiene válvulas de retención en línea para evitar el reflujo y la mezcla. No fue posible medir cualquier etanol detectable en el aire só...

Beber alcohol durante el embarazo puede dañar al feto, causando alteraciones persistentes en muchos órganos y sistemas que disminuyen significativamente la calidad de vida de las personas afectadas y sus familias. Se estima que aproximadamente el 10-30% de las mujeres beben durante el embarazo en los EE.UU., con 1-8% de beber en un 1,2 patrón de atracones. El rango de los efectos producidos por la exposición al etanol durante el desarrollo fetal se conoce colectivamente como trastornos del espectro alcohólico fetal (TEAF). Estimaciones recientes indican que TEAF son un importante problema de salud pública con una prevalencia de hasta el 2-5% en los EE.UU. 3. Cuanto más grave manifestación de TEAF es el Síndrome de Alcohol Fetal (FAS), que se caracteriza por retraso del crecimiento, anomalías craneofaciales, y los déficits neuroconductuales, incluyendo problemas de aprendizaje. La prevalencia de la FAS ha sido estimada en 0,2-0,7% en los EE.UU. 3. Los tratamientos actualmente disponibles para los FASD son sólo parcialmente eficacesy el desarrollo de tratamientos más eficaces se ve limitada por la falta de comprensión de las bases celulares y moleculares de este complejo espectro de trastornos. Datos de los Defectos de Nacimiento Nacionales Prevention Study (NBDPS) indican que las mujeres embarazadas con más frecuencia beben durante el 1 º trimestre del embarazo, antes de que el embarazo ha sido detectado, seguido de la abstinencia durante las últimas etapas de gestación 2. El NBDPS también encontró que el segundo patrón más común de consumo de etanol durante la gestación implica beber a través de todos los trimestres del embarazo 2. Las razones de esto son la falta de conciencia acerca de los efectos potencialmente nocivos de la exposición fetal etanol (incluso a dosis bajas), el acceso limitado a la atención prenatal, la historia positiva de los trastornos neuropsiquiátricos, y abuso o dependencia de etanol 4. Curiosamente, el NBDPS informó de que el tercer patrón más común de consumo involucrado abstinencia durante la 1 <sup&gt; ª y 2 ª trimestres seguidos de consumo durante el 3er trimestre, cuando a menudo se supone que la bebida es seguro porque la organogénesis se ha completado en su mayoría. Sin embargo, el 3 º trimestre es un período de alta susceptibilidad a daños en el sistema nervioso inducido por etanol porque se trata de un período en que los circuitos neuronales sufren profunda refinamiento 2. El NBDPS también identificó otros patrones menos frecuentes de consumo de alcohol que se producen durante el embarazo, incluyendo el consumo a lo largo de la 1 ª y 2 ª trimestres seguidos de abstinencia durante el 3 º trimestre 2. En un intento de modelar los diferentes patrones de consumo de etanol observados en mujeres embarazadas, un número de paradigmas de desarrollo de exposición etanol haber establecido mediante diversas especies animales, con ratas y ratones que son 5,6 más común. La duración de la gestación en estos animales normalmente lasct aproximadamente 3 semanas, lo que corresponde a la 1 ª y 2 ª trimestre del embarazo humano. Muchos estudios en roedores han evaluado el impacto de diferentes dosis y pautas de exposición a etanol durante este período. Los ejemplos de los métodos utilizados frecuentemente para administrar etanol a ratones y ratas preñadas incluyen la administración a través de dietas líquidas 7,8, adición de etanol al agua de bebida 9,10, beber voluntaria de soluciones sacarina endulzadas con 11, sonda gástrica 12, la inhalación de vapor 13 , y la inyección subcutánea o intraperitoneal 14. Los resultados de estos estudios han recapitulado varias de las deficiencias observadas en los seres humanos con TEAF, lo que demuestra que la exposición durante las primeras etapas del embarazo es suficiente para dañar los circuitos neuronales a través del cerebro (revisado en 6,15). Los experimentos con roedores también han demostrado que la exposición durante el equivalente a la 3 ª </sup&gt; Trimestre del embarazo humano, lo que corresponde aproximadamente a las primeras 1-2 semanas de vida postnatal en ratas y ratones, puede afectar de manera significativa el desarrollo del cerebro. La exposición durante este período se ha modelado mediante la administración de etanol a ratas o ratones neonatales. El etanol se ha administrado a estos animales usando una variedad de métodos, incluyendo la alimentación por gastrostomía en animales criados artificialmente-16-18, intubación intragástrica 19, la inyección subcutánea 20, y la inhalación de vapor de 21,22. Estos estudios han demostrado de forma convincente que la aceleración del crecimiento del cerebro es un período de gran vulnerabilidad a los efectos del desarrollo de etanol 6. Como se mencionó anteriormente, el consumo durante todos los trimestres del embarazo es un patrón común de consumo de etanol en las mujeres 2. Sin embargo, relativamente pocos estudios han evaluado el impacto de este modelo de exposición utilizando modelos animales. Algunos de estos estudios han tenido advantagE de grandes animales donde se produce la 3 ª trimestre equivalente en el útero en lugar de el período neonatal como en el caso de ratas y ratones. Estos modelos animales incluyen primates no humanos 23,24 y ovejas 25-27. Sin embargo, estos modelos animales no han sido ampliamente utilizado en la investigación FASD, en parte, debido al alto costo y la necesidad de instalaciones de atención especializada. Los roedores se han utilizado más comúnmente para caracterizar el efecto de la exposición de etanol todos trimestre sobre el desarrollo fetal 5. Los conejillos de indias han sido particularmente ventajoso a este respecto dado su desarrollo prenatal extensa y similitudes en la maduración del cerebro a la de los seres humanos 28,29. Con los conejillos de indias, que ha sido posible caracterizar el efecto de la exposición de etanol en el útero que incluye el período de desarrollo equivalente de la humana 3 ª trimestre. El comparativamente alto coste de estos animales, así como la duración relativamente larga de su embarazo(~ 67 días), ha limitado su uso a unos pocos laboratorios que trabajan en la investigación TEAF. Debido a su uso rentabilidad y amplia en la investigación biomédica, los investigadores han utilizado ratas para modelar la exposición al etanol durante todos los trimestres del embarazo. En los estudios iniciales, las ratas fueron expuestas durante el embarazo a través de dietas líquidas seguidas por la administración de etanol a través de gastrostomía para criar artificialmente a los recién nacidos (día postnatal (P) 1-10) resulta en niveles de etanol en sangre de pico (BEC) en los embalses de 0,08 g / dl y en las crías de 0,16 g / dl. Este paradigma causó alteraciones duraderas en la mielinización del nervio óptico y redujo el número de fibras de glía de Bergmann en el cerebelo 30-32. Del mismo modo, Maier y colaboradores utilizando condiciones de cría artificial administrados etanol para ratas madres embarazadas de manera compulsiva, como a través de la intubación intragástrica seguido de la administración neonatal durante parte del 3er trimestre equivalente (P4-9) 33,34. PBEC maternas y las crías EAK fueron 0,3 g / dl en dos días de gestación 20 y P6. Este paradigma de la exposición todos trimestre resultó en el retraso del crecimiento que fue significativamente mayor que la observada en cachorros expuestos durante períodos seleccionados de gestación 33. Además, las ratas expuestas a etanol durante el equivalente a todos los trimestres mostraron una reducción en el número de células granulares que fue mayor que el observado en los animales expuestos durante otros períodos 34 de Purkinje del cerebelo y. Las reducciones en el número de células del hipocampo También se informó con este paradigma, pero estos efectos parecen ser principalmente una consecuencia de la exposición durante el tercer trimestre 3-equivalente 35. Un método que consiste en la administración de etanol a través de sonda intragástrica a ratas embarazadas y ratones recién nacidos también se ha utilizado para modelar toda la exposición trimestre 36. Este método, que cedió BEC de 0,13 g / dl en los embalses (día gestacional 17) y 0,24 g / dl en las crías P6, lon inducidaalteraciones g duración de los niveles de neurotransmisores de monoamina en el hipocampo y el hipotálamo, y el aumento de expresión de DNA methyltransferases y metil CpG proteína 2 de unión en el hipocampo 37,38. El uso de un paradigma exposición similar (BEC = 0,14 a 0,2 g / dl en presas y 0,2 g / dl en cachorros), Gil-Mohapel et al. 39 detecta un aumento en el número de nuevas neuronas inmaduras en el giro dentado de ratas adultas que puede representar un mecanismo compensatorio al daño neuronal inducido por etanol o una alteración en la maduración de las neuronas adultas-nacido. Asimismo, los investigadores han tratado de modelar toda la exposición de etanol trimestre mediante la exposición de las presas a través de dietas líquidas o agua potable durante el embarazo y la lactancia 9,40. Sin embargo, la utilidad de la exposición de las crías a través de la leche de su madre es limitada, ya que normalmente se traduce en BEC bajos cachorros (por ejemplo, ,002-,05 g / dl; 41,42). Los ratones también se han utilizado extensIVELY para caracterizar los efectos de la exposición del desarrollo de etanol. Este modelo animal comparte muchas de las ventajas descritas anteriormente para el modelo animal de rata, con la ventaja adicional de que muchas cepas de ratón genéticamente modificados están disponibles 5. Los ratones se han utilizado con éxito para caracterizar los efectos del etanol durante la 1 ª, 2 ª o 3 ª trimestre del embarazo 43,44. Sin embargo, el impacto de toda la exposición trimestre en estos animales no ha sido bien caracterizado porque es técnicamente más difícil de exponer a los ratones durante el equivalente a todos los trimestres de embarazo humano. Por ejemplo, la cría artificial y sonda gástrica, que se han utilizado con éxito en ratas, requieren procedimientos más especializados en ratones 45. A lo mejor de nuestro conocimiento, sólo un estudio hasta la fecha ha tratado de estudiar el efecto de toda la exposición de etanol trimestre utilizando ratones; estos animales fueron expuestos a una solución de etanol en agua potable during embarazo y la lactancia 46. BEC maternas fueron 0,07 g / dl y las crías BEC no fueron determinadas, pero espera que sea una fracción de los de las presas. Aquí se describe un nuevo modelo para la exposición de etanol toda trimestre de los ratones en el que se administró alcohol a ambas presas embarazadas y los recién nacidos a través de cámaras de inhalación de vapores. Cámaras de vapor fueron construidas sobre la base de un diseño previo 47. Proporcionamos instrucciones detalladas sobre la forma de construir las cámaras de inhalación y llevar a cabo los procedimientos de exposición. También ofrecemos información sobre las CEBs que se pueden lograr y los efectos de la exposición sobre la supervivencia de las crías y el crecimiento.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
			<td style="width:180px;">Company</td>
			<td style="width:72px;">Cat #</td>
			<td style="width:64px;">Qty</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>8574K23</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>93085K67</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>7515A11</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1658A11</td>
			<td>2 x 1ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5126A26</td>
			<td>8</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>51275K88</td>
			<td>10ft</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K608</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5462K79</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K596</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>5463K851</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>91772A112</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>90480A005</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>41945K76</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89001-800</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89084-490</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
			<td>VWR</td>
			<td>59581-367</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-556</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89068-502</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
			<td>VWR</td>
			<td>32573-007</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-060</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
			<td>VWR</td>
			<td>46600-110</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
			<td>Colder Products Company</td>
			<td>HFCD17612</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
			<td>LMI Manufacturers</td>
			<td>DB60L</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A990135</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
			<td>Global industrial</td>
			<td>T9A500591</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
			<td>Intoximeters, Inc.</td>
			<td>ASIII</td>
			<td>1
			<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="636">
				<colgroup>
					<col />
					<col />
					<col />
					<col />
				</colgroup>
				<tbody>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;width:320px;">Item</td>
						<td style="width:180px;">Company</td>
						<td style="width:72px;">Cat #</td>
						<td style="width:64px;">Qty</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Polycarbonate 1/4&#34; clear 48&#34; x 24&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>8574K23</td>
						<td>10</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Foam Rubber bulb seal 3/8&#34;w x 7/32&#34;h&#160;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>93085K67</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Weld-on #16</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>7515A11</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Piano hinge 12&#34; long</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>1658A11</td>
						<td>2 x 1ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Hold-down toggle clamps standard</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5126A26</td>
						<td>8</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">PEX tubing 1/2&#34;</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>51275K88</td>
						<td>10ft</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K608</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed plug fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5462K79</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K596</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>5463K851</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Phillips Machine screw 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>91772A112</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Machine screw hex nut 4-40</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>90480A005</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Panel-mount flowmeter 2-20</td>
						<td>McMaster-Carr</td>
						<td>41945K76</td>
						<td>3</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89001-800</td>
						<td>2</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Precision Seal Septa</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89084-490</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole</td>
						<td>VWR</td>
						<td>59581-367</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-556</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50&#39;</td>
						<td>VWR</td>
						<td>89068-502</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Aerator Stone P2120</td>
						<td>VWR</td>
						<td>32573-007</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8&#34; T-connectors Pk of 20</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-060</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">VWR Disconnectors tapered Pk of 10</td>
						<td>VWR</td>
						<td>46600-110</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">3/8 Hose Barb valved in-line coupling</td>
						<td>Colder Products Company</td>
						<td>HFCD17612</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Air pump medium capacity</td>
						<td>LMI Manufacturers</td>
						<td>DB60L</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Nexelate Wire Shelving 36&#34;W X 24&#34;D X 63&#34;H</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A990135</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Stem Casters Set of (4) 5&#34; Polyurethane Wheel</td>
						<td>Global industrial</td>
						<td>T9A500591</td>
						<td>1</td>
					</tr>
					<tr height="20">
						<td height="20" style="height:20px;">Breathalyzer Alco-Sensor III</td>
						<td>Intoximeters, Inc.</td>
						<td>ASIII</td>
						<td>1</td>
					</tr>
				</tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

construction of vapor chambers used to expose mice to alcohol during the equivalent of all three trimesters of human development

La exposición al alcohol durante el desarrollo puede dar lugar a una constelación de anormalidades morfológicas y de comportamiento que se conocen colectivamente como trastornos del espectro alcohólico fetal (TEAF). En el extremo más grave del espectro es el síndrome de alcoholismo fetal (FAS), que se caracteriza por retraso del crecimiento, dismorfología craneofacial, y los déficits neuroconductuales. Los estudios con modelos animales, incluidos los roedores, se han dilucidado muchos mecanismos moleculares y celulares implicados en la fisiopatología de los FASD. Administración de etanol a los roedores gestantes se ha utilizado para modelar la exposición humana durante el primer y segundo trimestres del embarazo. Tercer trimestre el consumo de etanol en los seres humanos ha sido modelado usando roedores neonatales. Sin embargo, son pocos los estudios en roedores han caracterizado el efecto de la exposición de etanol durante el equivalente a los tres trimestres del embarazo humano, un patrón de exposición que es común en las mujeres embarazadas. Aquí, se muestra cómo construir cámaras de vapor de fácil omateriales btainable que cada uno puede alojar hasta seis jaulas de ratón estándar. Se describe un paradigma cámara de vapor que puede ser utilizado para modelar la exposición al etanol, con una mínima manipulación, durante los tres trimestres. Nuestros estudios demuestran que las presas embarazadas desarrollaron tolerancia metabólica significativa a etanol. Sin embargo, los ratones recién nacidos no se desarrolló tolerancia metabólica y el número de fetos, el peso del feto, el peso de la placenta, el número de crías / camada, número de crías muertas / camada, y peso de las crías no se vieron afectados significativamente por la exposición de etanol. Una ventaja importante de este paradigma es su aplicabilidad a estudios con ratones genéticamente modificados-. Además, este paradigma minimiza la manipulación de los animales, un factor de confusión importante en la investigación del alcoholismo fetal.

Figura 2A muestra que tanto en ratones embarazadas y los hijos recién nacidos fueron expuestos a concentraciones de vapores de etanol relativamente estables en las cámaras. Estos variaron entre 4-6 g / dl. Figura 2B muestra las BEC obtenidos en los ratones embarazadas como una función del tiempo. BEC se midieron usando un alcohol deshidrogenasa estándar basado ensayo 48. En G5, las BEC se elevó rápidamente a ~ 60 mM de 2 h después del inicio de la exposición y alcanz?...

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Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

Se demuestra la construcción de cámaras de vapor de alcohol utilizando materiales fácilmente disponibles que albergan simultáneamente 6 jaulas de ratón. Se describe aún más su uso en un modelo de ratón de la exposición fetal de alcohol equivalente a los 3 trimestres del embarazo humano. Este paradigma expone los animales durante la gestación y después del parto 1-12 días.

Construcción de cámaras de vapor utiliza para exponer los ratones al alcohol durante el equivalente de los tres trimestres del Desarrollo Humano

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

construction-vapor-chambers-used-to-expose-mice-to-alcohol-during

Research

JoVE Journal

Medicine

14.6K vistas.  University of New Mexico Health Sciences Center.  Se demuestra la construcción de cámaras de vapor de alcohol utilizando materiales fácilmente disponibles que albergan simultáneamente 6 jaulas de ratón. Se describe aún más su uso en un modelo de ratón de la exposición fetal de alcohol equivalente a los 3 trimestres del embarazo humano. Este paradigma expone los animales durante la gestación y después del parto 1-12 días. 

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Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

Humanos mamaria interna arteria (IMA) de Trasplantes y colocación de un stent: un modelo humano para estudiar el desarrollo de la reestenosis intra-stent

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Investigación

Medicina

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current estimates put the prevalence of amblyopia at approximately 1-3%1-3, the majority of cases being monocular2. Amblyopia is most frequently caused by ocular misalignment (strabismus), blur induced by unequal refractive error (anisometropia), and in some cases by form deprivation.
Although amblyopia is initially caused by abnormal visual input in infancy, once established, the visual deficit often remains when normal visual input has been restored using surgery and/or refractive correction. This is because amblyopia is the result of abnormal visual cortex development rather than a problem with the amblyopic eye itself4,5 . Amblyopia is characterized by both monocular and binocular deficits6,7 which include impaired visual acuity and poor or absent stereopsis respectively. The visual dysfunction in amblyopia is often associated with a strong suppression of the inputs from the amblyopic eye under binocular viewing conditions8. Recent work has indicated that suppression may play a central role in both the monocular and binocular deficits associated with amblyopia9,10 .
Current clinical tests for suppression tend to verify the presence or absence of suppression rather than giving a quantitative measurement of the degree of suppression. Here we describe a technique for measuring amblyopic suppression with a compact, portable device11,12 . The device consists of a laptop computer connected to a pair of virtual reality goggles. The novelty of the technique lies in the way we present visual stimuli to measure suppression. Stimuli are shown to the amblyopic eye at high contrast while the contrast of the stimuli shown to the non-amblyopic eye are varied. Patients perform a simple signal/noise task that allows for a precise measurement of the strength of excitatory binocular interactions. The contrast offset at which neither eye has a performance advantage is a measure of the "balance point" and is a direct measure of suppression. This technique has been validated psychophysically both in control13,14 and patient6,9,11 populations.
In addition to measuring suppression this technique also forms the basis of a novel form of treatment to decrease suppression over time and improve binocular and often monocular function in adult patients with amblyopia12,15,16 . This new treatment approach can be deployed either on the goggle system described above or on a specially modified iPod touch device15.

Amblyopia is a developmental disorder of the visual cortex that is often accompanied by strong suppression of one eye. We present a new technique for measuring and treating interocular suppression in patients with amblyopia that can be deployed using virtual reality goggles or a portable iPod Touch device.

La medición y tratamiento de la represión en la ambliopía

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

A Phenotyping Regimen for Genetically Modified Mice Used to Study Genes Implicated in Human Diseases of Aging

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to lessen the impact of debilitating conditions but remain elusive in many cases. Only by understanding the causes and pathology of diseases associated with aging, can scientists begin to identify potential therapeutic targets and develop strategies for intervention. The most common age-related conditions are neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease and blindness. Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the elderly. Genome wide association studies have previously identified loci that are associated with increased susceptibility to this disease and identified two regions of interest: complement factor H (CFH) and the 10q26 locus, where the age-related maculopathy susceptibility 2 (ARMS2) and high-temperature requirement factor A1 (HtrA1) genes are located. CFH acts as a negative regulator of the alternative pathway (AP) of the complement system while HtrA1 is an extracellular serine protease. ARMS2 is located upstream of HtrA1 in the primate genome, although the gene is absent in mice. To study the effects of these genes, humanized knock-in mouse lines of Cfh and ARMS2, knockouts of Cfh, HtrA1, HtrA2, HtrA3 and HtrA4 as well as a conditional neural deletion of HtrA2 were generated. Of all the genetically engineered mice produced only mice lacking HtrA2, either systemically or in neural tissues, displayed clear phenotypes. In order to examine these mice thoroughly and systematically, an initial phenotyping schedule was established, consisting of a series of tests related to two main diseases of interest: AMD and Parkinson's. Genetically modified mice can be subjected to appropriate experiments to identify phenotypes that may be related to the associated diseases in humans. A phenotyping regimen with a mitochondrial focus is presented here alongside representative results from the tests of interest.

A reverse-genetics approach to understanding gene families associated with human disease is presented, using mouse as a model system, and the subsequent mouse phenotyping schedule is described. Because mice defective in a gene of interest, HtrA2, manifested Parkinsonian symptoms, the phenotyping regimen is focused on identifying neurological defects.

Un régimen del fenotipo de ratones genéticamente modificados empleadas para el estudio genes implicados en enfermedades humanas de envejecimiento

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We describe methods to measure ex vivo myometrium contractility. This assay can be used to investigate factors and molecules involved in the modulation of myometrial contraction and to determine their excitatory or inhibitory actions, and hence their therapeutic potential in vivo. Biopsies are obtained from women undergoing cesarean section delivery with informed consent. Fine strips of myometrium are dissected, clipped and attached to a force transducer within 1 mL organ baths superfused with physiological saline solution at 37 &#176;C. Strips develop spontaneous contractions within 2&#8211;3 h under set tension and remain stable for many hours (&#62;6 h). Strips can also be stimulated to contract such as by the endogenous hormones, oxytocin and vasopressin, which cause concentration-dependent modulation of contraction frequency, force and duration, to more closely resemble contractions in labor. Hence, the effect of known and novel drug leads can be tested on spontaneous and agonist-induced contractions.
This protocol specifically details how this assay can be used to determine the potency of known and novel agents by measuring their effects on various parameters of human myometrial contraction. We use the oxytocin- and V1a receptor antagonists, atosiban and SR49059 as examples of known compounds which inhibit oxytocin- and vasopressin-induced contractions, and demonstrate how this method can be used to complement and validate pharmacological data obtained from cell-based assays to aid drug development. The effects of novel agonists in comparison to oxytocin and vasopressin can also be characterized. Whilst we use the example of the oxytocin/ vasopressin system, this method can also be used to study other receptors and ion channels that play a role in uterine contraction and relaxation to advance the understanding of human uterine physiology and pathophysiology.

This article describes experimental protocols to study ex vivo contractions of human myometrium and their application in drug discovery. This technique is used to improve the understanding of myometrial physiology and pathophysiology as well as to validate pharmacological data from novel research probes or drug leads.

Mediciones de la contractilidad del musculo liso uterino humano desarrollo de fármacos de ayuda

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

A Clinical Trial Assessing the Safety, Efficacy, and Delivery of Olive-Oil-Based Three-Chamber Bags for Parenteral Nutrition

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based three-chamber bags (3CBs) and soybean-oil-based compounded bags (CoBs) in hospitalized adult patients. We designed a multicenter, randomized, prospective, open-label, noninferiority protocol to compare the efficacy, safety, and distribution of olive-oil-based 3CBs and soybean-oil-based CoB formulations in adult Chinese patients requiring PN during surgical intervention. Subjects were randomized to receive either one of the study treatments using an interactive voice or web-based recognition system in accordance with the randomization code. Randomization was further stratified based on the study site and surgical category. Both treatment groups received similar amounts of calories and protein. In addition, the two study treatments contained a similar composition of the amino-acid component. The only difference between the two PN formulations was the lipid constitution. The duration of administration of study treatments was a minimum of 5 days up to a maximum of 14 days after the surgical procedure. The primary efficacy endpoint was serum prealbumin levels on day 5 of the study. Noninferiority was proved if the anti-log of the lower bound of the 95% confidence interval (CI) of the treatment difference was at least 0.80. Other efficacy measures included treatment preparation time; duration to achieve tolerability of oral nutrition; associated infectious complications; length of hospitalization; and laboratory assessment of markers of nutrition, inflammation, metabolism, and oxidative stress. A total of 458 patients were enrolled in the study. The results showed that olive-oil-based 3CBs were non-inferior to soybean-based CoBs, besides being well tolerated. The infection rate was found to be significantly lower in the olive-oil-based 3CB group. Thus, this study may be used as a reference for future research on lipid emulsion and 3CBs.

Here, we present a protocol for a study comparing the efficacy, safety, and delivery of olive-oil-based 3CB and soybean-oil-based CoB formulations in adults requiring parenteral nutrition. The results revealed that olive-oil-based 3CBs is non-inferior and well tolerated compared to soybean formulations.

Un ensayo clínico que evalúa la seguridad, eficacia y entrega de bolsas de tres cámaras basadas en aceite de oliva para la nutrición parenteral

Limited evidence exists to precisely estimate efficacy and safety differences between parenteral nutrition (PN) prepared using olive-oil-based ...

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold (TDT) Test

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a reliable measure of sweet, salty, and umami taste detection thresholds from childhood to adulthood. Advantages of the method include procedures that are identical for children and adults, thus allowing the determination of age-related and individual differences in taste perception, if any, and tasks that can be completed in a relatively short time frame, do not rely on continuous attention or require memorization, control for subjective response biases, and minimize the impact of language development. After a 1 hour fast, participants are presented with pairs of solutions; in each pair, one solution is water, and the other solution contains varying concentrations of the tastant.
Using a whole-mouth tasting method, participants taste each solution (without swallowing and with rinsing between tastings) and then point to the solution with a taste or that tastes different from water. The concentration of the stimulus in the subsequent pair increases after a single incorrect response and decreases after two consecutive correct responses. A reversal occurs when the concentration sequence changes direction. The task is deemed completed after the occurrence of four reversals, provided there are a maximum of two dilution steps between two successive reversals, and the series of reversals do not form an ascending pattern. These additional criteria ensure greater reliability in outcomes. The TDT is then calculated as the geometric mean of the concentrations of the four reversals. This method has real-world relevance as it provides information on a dimension of taste perception that is independent of hedonics, and that can change with aging and certain disease states, making it a valuable psychophysical test.

Psychophysical Tracking Method to Assess Taste Detection Thresholds in Children, Adolescents, and Adults: The Taste Detection Threshold TDT Test

Psychophysical tools measure the functionality of the taste system for both research and health assessment purposes. This paper describes a method to measure taste detection thresholds that can determine the lowest concentration of sucrose, sodium chloride, or monosodium glutamate that can be tasted by individuals as young as 6 years.

Método de seguimiento psicofísico para evaluar los umbrales de detección del gusto en niños, adolescentes y adultos: la prueba del umbral de detección del gusto (TDT)

This paper describes a two-alternative, forced-choice, staircase, tracking procedure, called the Taste Detection Threshold (TDT) test, that provides a ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

Un método no invasivo para generar el modelo de lesión de cartílago intraarticular inducida por carga cíclica de la rodilla de rata

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Manipulación estandarizada de Tuina para la artrosis de rodilla en ratas

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its mechanism. Therefore, the manipulation of animal models of knee osteoarthritis is critical. This protocol provides a standard process for Tuina manipulation on KOA rats and a preliminary exploration of the mechanism of Tuina for KOA. The press and kneading manipulation method (a kind of Tuina manipulation that refers to pressing and kneading the specific area of the body surface) is applied on 5 acupoints around the knee joint of rats. The force and frequency of the manipulation were standardized by finger pressure recordings, and the position of the rat during manipulation is described in detail in the protocol. The effect of manipulation can be measured by pain behavior tests and microscopic findings in synovial and cartilage. KOA rats showed significant improvement in pain behavior. The synovial tissue inflammatory infiltration was reduced in the Tuina group, and the expression of tumor necrosis factor (TNF)-&#945; was significantly lower. Compared to the control group, chondrocyte apoptosis was less in the Tuina group. This study provides a standardized protocol for Tuina manipulation on KOA rats and preliminary proof that the therapeutic effects of Tuina may be related to reducing synovial inflammation and delayed chondrocyte apoptosis.

Autor destacado: Entendiendo el mecanismo de la manipulación de la tuina en ratas 

We present a protocol for Tuina manipulation performed on plaster-immobilized-induced knee osteoarthritis rats. Based on the preliminary results, it suggested that the efficacy of the method relied on the reduction of inflammation and cartilage loss.

Manipulación de Tuina para reducir la inflamación y la pérdida de cartílago en ratas con artrosis de rodilla

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...