Los autores agradecen al equipo en el Laboratorio de Investigación Quirúrgica, Hospital Marie Lannelongue, de asistencia técnica y cuidado de los animales. El sistema de ultrasonido cardiaco VividE9 (Sistema Médico General Electric) fue financiado por una subvención de la cardio-vasculaire-Obésité Domaine D&#39;Intérêt Maggiore (CODDIM cod 100158, RégionIle-de-France, Francia).

Este protocolo fue aprobado por el comité de ética local en experimentos con animales y por el Comité Institucional de Protección de los Animales de nuestra institución. Todos los animales recibieron atención humanitaria de conformidad con los &quot;Principios de Laboratorio Animal Care&quot; formuladas por la Sociedad Nacional para la Investigación Médica y de la &quot;Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio&quot;, elaborado por el Instituto de Laboratorio de Recursos Animales y publicados por la National Institutos de Salud (NIH Publication No. 86-23, versión revisada en 1996). Consideraciones generales: Todos los animales deben ser tratados con respeto, de acuerdo con las normas 3Rs (Centro Nacional de Perfeccionamiento de reemplazo y reducción de los Animales en la Investigación). Los procedimientos quirúrgicos se deben realizar con una esterilidad estricta y de la misma manera que para los seres humanos. Todos los dispositivos médicos deben ser estériles. Protocolo 1. Anestesia NOTA: Gran WhitSe han usado e lechones de un peso 20 Kg (3-semanas de edad). La hipertensión pulmonar se indujo progresivamente. La primera etapa implicaba una arteria pulmonar (AP) ligadura de izquierda a través de una toracotomía izquierda. Los siguientes pasos consistieron en la realización de embolizaciones semanales PA durante 5 semanas. Todos los procedimientos se realizaron bajo anestesia general. <ol><li> No alimentar a los animales 12 horas antes del procedimiento. </li><li> Haga una premedicación del lechón, realice una inyección intramuscular utilizando 30 mg / kg de ketamina Clorhidrato y aropine 0,05 mg / kg en los músculos del cuello, 30 minutos antes del procedimiento. 8 </li><li> Cuando está sedado el cerdo, insertar un catéter en la vena de la oreja. </li><li> Realizar intravenosa de un bolo de fentanilo (0,005 mg / kg) y propofol (2 mg / kg) antes de la intubación. Inyectar por vía intravenosa en la vena de la oreja Cisatracurio (0,3 mg / kg) y intubar el cerdo (intubación no selectivo con una sonda francesa 7) 9. </li><li> Coloque los dispositivos de monitoreo continuo sobre el lechón: ECG continua, CO espiratorio 2 y oximetría de 8,9. Insertar un catéter arterial campo de fluido a través de la arteria carótida bajo la guía ecografía para monitorizar la presión arterial sistémica 8-10. </li><li> Mantener la anestesia general con isoflurano (2%) en el suplemento de oxígeno al 100%, infusión continua intravenosa de fentanilo (0,004 mg / kg) y propofol (3 mg / kg). </li><li> Añadir un antibioprophylaxy con una inyección de Cefatoxine (1 g) y gentamicina (80 mg). </li><li> Prevenir intraoperatoria y el dolor post operatorio con la inyección de nalbufina (0,01 mg / kg) tres veces al día </li><li> Compruebe cada 15 minutos, la integridad de la anestesia: ausencia de movimiento, la frecuencia cardiaca estable, la presión sanguínea, la oxigenación. </li><li> El uso de ungüento veterinario en los ojos para evitar la sequedad mientras que bajo anestesia. </li></ol> 2. La ligadura de la arteria pulmonar izquierda <ol><li> Instale el cerdito en la posición de decúbito lateral izquierdo, afeitar el área operativa y desinfectar la piel con un alcoholisolución c. Utilice un campo estéril local. </li><li> Abra el pecho a través de una pequeña toracotomía lateral izquierda (de 5 a 10 cm) en el espacio de los 4 th intercostales. No vaya a detrás de la punta de la escápula. Retraer con cuidado el pulmón hacia el diafragma. </li><li> Una vez que la ventana quirúrgica ideales ubicado, retraer la izquierda vena ácigos y disecar la arteria principal izquierda pulmonar antes de atar con un no absorbible 2/0 seda. NOTA: Es muy importante no abrir el pericardio. </li><li> Cierre la capa de pecho después de capas con suturas absorbibles. Use un tubo de tórax para eliminar el neumotórax postoperatorio. Retire el tubo de tórax después de la extubación lechón. </li></ol> 3. La embolización de la arteria lóbulo inferior derecho pulmonar <ol><li> Después de la anestesia general, poner el cochinillo en una posición supina. Llevar a cabo un seguimiento continuo de la oximetría, CO 2 espiratorio, ECG, presión arterial media sistémica (MPA) y la media de la presión arterial pulmonar (PAPm) Durante todo el procedimiento. </li><li> Inserte todos los catéteres por vía percutánea con guía ecográfica. Inserte un arterial 6 catéter francés en la arteria carótida para la monitorización de la presión arterial y un 8 vaina francés en la vena cava superior a través de la vena yugular (Realizar la punción 2 cm por encima de la escotadura supraesternal con una dirección de 45 ° de ángulo). </li><li> Bajo guía fluoroscópica, inserte, a través de la vaina 8 Fr, un catéter angiográfico 5 Francés en la arteria pulmonar derecha. La punta del catéter debe estar en una arteria pulmonar del lóbulo inferior segmentaria. </li><li> Preparar el material para la embolización de la arteria pulmonar: 1 ml de pegamento de tejido blando que contiene N-butil-2-cianoacrilato se añade a 2 ml de un medio de contraste lipídica. ATENCIÓN: Evitar la piel o los ojos contacto con la N-butil-2-cianoacrilato. </li><li> Cuando el catéter angiográfico está bien posicionada, inyectar 0,2 ml a 0,4 ml de la preparación en la arteria pulmonar. Evaluar la tolerancia de la embolización midiendo larelación PAPm / AMP que no debe exceder de 0.5. Deje de embolización si la saturación de oxígeno era &lt;90% y / o el AMP cayó por debajo de 60 mm Hg y / o el gasto cardíaco era bajo 2 L / min. </li><li> Retire el catéter angiográfico y vainas y realizar compresiones digitales del sitio de la punción. </li></ol> 4. Evaluación hemodinámica <ol><li> Después de la anestesia general, la posición de los lechones en una posición supina. Llevar a cabo un seguimiento continuo de la oximetría, espiratorio CO 2, ECG, presión arterial sistémica (MPA) y la presión arterial pulmonar (PAPm) durante todo el procedimiento. </li><li> Ventilar los lechones con el más bajo FiO 2 como sea posible de acuerdo con la saturación de oxígeno (&gt; 95%). </li><li> Inserte todos catéter por vía percutánea bajo guía ecográfica. Un catéter arterial 6 francesa se inserta en la arteria carótida y una vaina Francés 8 se inserta en la vena cava superior (Realizar la punción 2 cm por encima de la horquilla esternal con unos 45 °dirección del ángulo). </li><li> Inserte un francés de Swan-Ganz catéter 7 en el tronco de la arteria pulmonar. Evaluar el gasto cardiaco por la técnica de dilución thermo, con la inyección de 10 ml de solución salina a 4 ° C. </li><li> Registre los siguientes parámetros: sistólica, diastólica y media de la presión arterial sistémica y pulmonar, la frecuencia cardíaca, saturación de oxígeno, la presión de la aurícula derecha, el gasto cardíaco. </li></ol> 5. Evaluación ecocardiográfica del ventrículo derecho <ol><li> Después de la anestesia general, instale el lechón en posición supina y realizar una ecocardiografía transtorácica según directrices humanos para la detección de RV. Grabar vídeo bucles durante una pausa de final de la espiración. </li></ol> 6. Presión-Volumen Bucles de Evaluación con el Método de la conductancia <ol><li> Después de la anestesia general, instalar el cochinillo en una posición supina. Llevar a cabo un seguimiento continuo de la oximetría, CO 2 espiratorio, ECG, presión arterial sistémica (MPA) yla presión pulmonar arterial (PAPm) durante todo el procedimiento. </li><li> Inserte un arterial 6 catéter francés en la derecha o la arteria carótida izquierda y un catéter angiográfico en el ventrículo izquierdo. Insertar un 9 vaina francés en la vena cava superior, a 8 de Francia en la derecha o la vena femoral izquierda y un arterial PiCCO catéter en la arteria femoral derecha o la izquierda. Inserte todos los catéteres por vía percutánea bajo guía ecográfica. </li><li> Realice la calibración de la presión y el volumen de la sonda de conductancia de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. Medir la resistividad de la sangre (Rho) mediante el muestreo de 5 ml de sangre arterial. Cosecha de 5 ml de sangre arterial, de-aire de la jeringa y llenar la sonda para la medición de la resistividad de la sangre. 10-13. </li><li> Inserte el catéter de conductancia en el ventrículo derecho a través de la vaina 9Fr en el Veina cava superior. Coloque adecuadamente el extremo del catéter con guía fluoroscópica. Coloque el extremo del catéter en el ápice de la plataformaventrículo ht e insertar todo el tiempo posible en el ventrículo. </li><li> Controlar la calidad de los bucles. (Figura 6) </li><li> Insertar un ballon prescindible en el Veina cava inferior a través de la vena femoral. Coloque el extremo justo debajo de la aurícula derecha. Utilice guía fluoroscópica. </li><li> Bucles Registro de presión-volumen del ventrículo derecho en el estado basal y durante la oclusión de la vena cava inferior como antes descritos 10-12. (Figura 7) </li></ol> 7. Las biopsias endomiocárdica del ventrículo derecho <ol><li> Después de la anestesia general, la posición de los lechones en una posición supina. Llevar a cabo un seguimiento continuo de la oximetría, espiratorio CO 2, ECG, presión arterial sistémica (MPA) y la presión arterial pulmonar (PAPm) durante todo el procedimiento. </li><li> Inserte percutánea una vaina 10 de Francia en la vena cava superior. Inserte un (SG) de la sonda 7 Francés Swan-Ganz y una larga 7.5 vaina del catéter francés en el atri derechoum. Cuando la punta de la sonda SG está bien situado en el ventrículo derecho (VD), inflar el globo de la sonda SG, empuje el catéter vaina larga en la RV contra el globo. Desinflar el globo y retire la sonda SG dejando el catéter vaina larga en la RV. La buena posición de la punta del largo vaina se controla mediante fluoroscopia y ecocardiografía. </li><li> Inserte el biotome en la vaina larga y realizar biopsias endomiocárdicas bajo ecográfico, fluoroscópica y control ECG. </li></ol> 8. Consideraciones generales Cuidados después de la cirugía <ol><li> Después de la cirugía, la extubación el lechón sólo después de la recuperación de las funciones respiratorias espontáneas. </li><li> Para la medicación postoperatoria, realice una inyección intramuscular de Cefatoxine (1 g) Die durante 5 días y entregar la analgesia appropieted (buprenorfina, la inyección intramuscular de 0,01 mg / kg de la subasta por 10 días. </li><li> No deje a un animal que ha sido sometido a una cirugía para la compañía de otros animales hasta que esté completamente recovered. </li></ol> 9. Método de eutanasia <ol><li> La eutanasia a los animales en las situaciones seguidos; Fin de la experimentación, la pérdida de peso del 15% o más en una semana, unibability para alimentar adecuadamente a sí mismos, la anorexia, la infección no tratable, dolor u otro didease, desease demasiado grave: cianosis, disnea importante </li><li> Durante la anestesia general con sevoluorane 8%, inyectar una alta dosis de propofol (0,5 mg / kg) asociado con una dosis letal de cloruro de potasio (0,2 g / kg). Cuando el corazón se detiene en la diástole, Harveste el corazón y el bloque de pulmón con el fin de hacer un estudio histológico y molecular. </li></ol>

<ol>
	<li>Simonneau, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Updated+clinical+classification+of+pulmonary+hypertension.">Updated clinical classification of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 54, S43-S54 (2009).</li><li>Dartevelle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. 23 (4), 637-648 (2004).</li><li>Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Circulation. 113 (16), 2011-2020 (2006).</li><li>Galie, N., Kim, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+microvascular+disease+in+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).</li><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+in+patients+with+idiopathic,+familial,+and+anorexigen-associated+pulmonary+arterial+hypertension+in+the+modern+management+era.">Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era.</a> Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+right+heart+failure:+a+window+for+translational+research+in+pulmonary+hypertension.">Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension.</a> Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).</li><li>Mercier, O., Fadel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension:+animal+models.">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models.</a> Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).</li><li>Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+handling+and+anesthesia+for+experimental+surgery+in+pigs.">General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs.</a> J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).</li><li>Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+monitoring+equipment+for+laboratory+animals.">Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals.</a> Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+reserve+in+a+piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension.">Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. , (2014).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+plasticity+in+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload.">Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload.</a> J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).</li><li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+indices+of+right+ventricular+function+are+markers+of+ventricular-arterial+coupling+rather+than+ventricular+contractility:+insights+from+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload.">Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).</li><li>Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relationships+by+the+conductance+(volume)+catheter+technique.">Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique.</a> Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).</li><li>Mercier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension.">Piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).</li><li>Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+the+right+ventricle+under+stress:+relation+to+right+coronary+flow.">Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow.</a> J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).</li><li>Boulate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+microvascular+lesions+regress+in+reperfused+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension.">Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> J Heart Lung Transplant. , (2014).</li></ol>

Sin conflicto de intereses a revelar.

Al igual que en la práctica clínica humana, el respeto de las normas de asepsia es obligatorio durante todos los procedimientos quirúrgicos. En el modelo de los lechones HPTEC original descrito por O. Mercier et al., La ligadura de la arteria pulmonar izquierda se llevó a cabo después de abrir el pericardio, a través de una esternotomía mediana 14. Debido a que el pericardio se dejó abierta, la interacción entre el ventrículo derecho y el pericardio se deteriora y la insuficiencia cardíaca...

Hipertensión pulmonar tromboembólica crónica (HPTEC) es un subtipo de la hipertensión pulmonar (HP), debido a la obstrucción vascular pulmonar crónica cama por coágulos persistentes y organizados relacionados con uno o más agudas embolias pulmonares 1-3. Una combinación de la enfermedad microvascular obstructiva y no obstructiva conduce a un aumento adicional en la resistencia vascular pulmonar 4. El ventrículo derecho debe primero adaptarse a la hipertrofia compensada para mantener el gasto cardíaco. Sin tratamiento, el ventrículo derecho se dilata y no en el tiempo. En la era moderna, PH sigue siendo una enfermedad progresiva ya menudo mortal a pesar del uso de terapias dirigidas modernos 5. Muchos estudios han demostrado que el ventrículo derecho (VD) la adaptación a la sobrecarga de presión es el principal determinante de la supervivencia en pacientes con HP. Por esa razón, la comprensión de los mecanismos subyacentes a la transición de la adaptación a la remodelación RV maladaptive es una piedra angular para el tratamiento y Develollo de nuevas terapias. Debido PH es rara y toma de muestras de tejido es casi inviable en estos pacientes frágiles, se requieren estudios experimentales. Además, los estudios preclínicos son obligatorios para determinar que un fármaco con beneficio en la vasculatura pulmonar no causa deterioro RV. Durante muchos años, diferentes modelos experimentales de PH y la insuficiencia del VD se han desarrollado con ventajas y limitaciones 6,7. En los modelos murinos farmacológicos (monocrotaline, SU5416, hipoxia), pH y la insuficiencia del VD se producen secundario a una inflamación masiva, isquemia o factor de estrés tóxico que podría inducir varias &quot;partes&quot; y efectos de polarización en vía de análisis molecular. AdemÃ, biopsias endomiocárdicas RV en un modelo murino deben ser muy difícil sin sacrificar el animal. Modelos quirúrgicas en animales más grandes son más fisiológica, pero no afectan a la vasculatura pulmonar (cerclaje de la arteria pulmonar, derivación sistémico-pulmonar) o inducen PH aguda y RVF (embolia pulmonar aguda). El objetivo de este artículo es describir un modelo original de HPTEC en los lechones que es más representativo de la HPTEC fisiopatología. Este modelo animal grande permite repetir las mediciones no invasivas e invasivas por lo general se realizan en la práctica clínica (cateterismo cardíaco derecho) para seguir los cambios en la hemodinámica pulmonar y la función del VD.

chronic thromboembolic pulmonary hypertension and assessment of right ventricular function in the piglet

Un modelo del cochinillo original de hipertensión pulmonar tromboembólica crónica (HPTEC) asociado con ventrículo derecho (VD) disfunción crónica se describe. La hipertensión pulmonar (HP) se indujo en lechones de 3 semanas de edad por una obstrucción progresiva del lecho vascular pulmonar. Una ligadura de la arteria pulmonar izquierda (PA) se realizó primero a través de un mini-toracotomía. En segundo lugar, embolizaciones semanales del lóbulo pulmonar inferior derecha se realizaron bajo guía fluoroscópica con n-butil-2-cianoacrilato durante 5 semanas. Presión arterial pulmonar (PAPm) medida por cateterismo cardíaco ritght media, aumentando progresivamente, así como la presión auricular derecha y pulmonares vasculares Resistencias (PVR) después de 5 semanas en comparación con los animales sham. Del ventrículo derecho (VD) remodelación estructural y funcional fueron evaluados mediante ecocardiografía transtorácica (RV diámetros, espesor de la pared del VD, la función sistólica del VD). Elastancia RV y acoplamiento RV-pulmonar fueron evaluados por bucles presión-volumen(PVL) el análisis con el método de la conductancia. También se realizaron estudio histológico del pulmón y el ventrículo derecho. Los análisis moleculares de RV tejidos frescos podrían realizarse a través de biopsias endomiocárdicas transcutánea repetidas. Enfermedad microvascular pulmonar en los territorios obstruidas y no obstruidas se estudió a partir de biopsias pulmonares utilizando análisis molecular y patología. Además, la fiabilidad y la reproducibilidad se asoció con un rango de severidad PH en animales. La mayoría de los aspectos de la enfermedad HPTEC humana se reproducen en este modelo, que permite nuevas perspectivas para la comprensión de los mecanismos subyacentes (mitocondrias, inflamación) y nuevos enfoques terapéuticos (dirigidos, terapias celulares o genes) del ventrículo derecho sobrecargado, sino también microvascular pulmonar enfermedad.

Factibilidad Este modelo del cochinillo de la hipertensión pulmonar post-embólica crónica se ha establecido en nuestro laboratorio en el período 2009-2010. Desde 2011, se utilizaron 70 lechones y hemos realizado 63 modelos terminados. En nuestra experiencia, la realización de este modelo requiere una curva de aprendizaje. En cuanto a la mortalidad, se observó 5 muertes imprevistas (7,1%), sobre todo en la primera parte de nuestra experiencia. ...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet at JoVE.com

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Hipertensión pulmonar tromboembólica crónica y Evaluación de la función ventricular derecha en el Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

chronic-thromboembolic-pulmonary-hypertension-assessment-right

Research

JoVE Journal

Medicine

12.1K vistas.  Marie Lannelongue Hospital. Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Video: Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential therapies. Given the expense and time involved in creating animal models of disease, it is critical that researchers have tools to accurately assess phenotypic expression of disease. Right ventricular dysfunction is the major manifestation of pulmonary hypertension. Echocardiography is the mainstay of the noninvasive assessment of right ventricular function in rodent models and has the advantage of clear translation to humans in whom the same tool is used. Published echocardiography protocols in murine models of PAH are lacking.
In this article, we describe a protocol for assessing RV and pulmonary vascular function in a mouse model of PAH with a dominant negative BMPRII mutation; however, this protocol is applicable to any diseases affecting the pulmonary vasculature or right heart. We provide a detailed description of animal preparation, image acquisition and hemodynamic calculation of stroke volume, cardiac output and an estimate of pulmonary artery pressure.

This article provides a protocol for the echocardiographic assessment of right ventricular size and pulmonary hypertension in mice. Applications include phenotype determination and serial assessment in transgenic and toxin-induced mouse models of cardiomyopathy and pulmonary vascular disease.

Evaluación ecocardiográfica de la parte derecha del corazón en ratones

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

Investigación

Medicina

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, the RV is significantly affected in pulmonary diseases such as pulmonary artery hypertension (PAH). In addition, the RV is remarkably sensitive to cardiac pathologies, including left ventricular (LV) dysfunction, valvular disease or RV infarction4. To understand the role of RV in the pathogenesis of cardiac diseases, a reliable and noninvasive method to access the RV structurally and functionally is essential.
A noninvasive trans-thoracic echocardiography (TTE) based methodology was established and validated for monitoring dynamic changes in RV structure and function in adult mice. To impose RV stress, we employed a surgical model of pulmonary artery constriction (PAC) and measured the RV response over a 7-day period using a high-frequency ultrasound microimaging system. Sham operated mice were used as controls. Images were acquired in lightly anesthetized mice at baseline (before surgery), day 0 (immediately post-surgery), day 3, and day 7 (post-surgery). Data was analyzed offline using software.
Several acoustic windows (B, M, and Color Doppler modes), which can be consistently obtained in mice, allowed for reliable and reproducible measurement of RV structure (including RV wall thickness, end-diastolic&#160;and end-systolic dimensions), and function (fractional area change, fractional shortening, PA peak velocity, and peak pressure gradient) in normal mice and following PAC.
Using this method, the pressure-gradient resulting from PAC was accurately measured in real-time using Color Doppler mode and was comparable to direct pressure measurements performed with a Millar high-fidelity microtip catheter. Taken together, these data demonstrate that RV measurements obtained from various complimentary views using echocardiography are reliable, reproducible and can provide insights regarding RV structure and function. This method will enable a better understanding of the role of RV cardiac dysfunction.

Right ventricle (RV) dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease, yet limited methodologies are available for its evaluation. Recent advances in ultrasound imaging provide a noninvasive and accurate option for longitudinal RV study. Herein, we detail a step-by-step echocardiographic method using a murine model of RV pressure overload.

Evaluación del ventrículo derecho Estructura y función en modelo de ratón de la constricción de la arteria pulmonar mediante ecocardiografía transtorácica

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this is only partially explained by traditional CVD risk factors. Vascular dysfunction is an important non-traditional risk factor, characterized by vascular endothelial dysfunction (most commonly assessed as impaired endothelium-dependent dilation [EDD]) and stiffening of the large elastic arteries. While various techniques exist to assess EDD and large elastic artery stiffness, the most commonly used are brachial artery flow-mediated dilation (FMDBA) and aortic pulse-wave velocity (aPWV), respectively. Both of these noninvasive measures of vascular dysfunction are independent predictors of future cardiovascular events in patients with and without kidney disease. Patients with CKD demonstrate both impaired FMDBA, and increased aPWV. While the exact mechanisms by which vascular dysfunction develops in CKD are incompletely understood, increased oxidative stress and a subsequent reduction in nitric oxide (NO) bioavailability are important contributors. Cellular changes in oxidative stress can be assessed by collecting vascular endothelial cells from the antecubital vein and measuring protein expression of markers of oxidative stress using immunofluorescence. We provide here a discussion of these methods to measure FMDBA, aPWV, and vascular endothelial cell protein expression.

The degree of vascular dysfunction and contributing physiological mechanisms can be assessed in patients with chronic kidney disease by measuring brachial artery flow-mediated dilation, aortic pulse-wave velocity, and vascular endothelial cell protein expression.

Evaluación de la función vascular en pacientes con enfermedad renal crónica

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

La cirugía de derivación, un cateterismo derecho, y Vascular Morfometría en un modelo de rata de flujo inducido por la hipertensión arterial pulmonar

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

Medición ecocardiográfica de parámetros diastólicos ventriculares derecho en ratón

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

A Pulmonary Trunk Banding Model of Pressure Overload Induced Right Ventricular Hypertrophy and Failure

Right ventricular (RV) failure induced by sustained pressure overload is a major contributor to morbidity and mortality in several cardiopulmonary disorders. Reliable and reproducible animal models of RV failure are therefore warranted in order to investigate disease mechanisms and effects of potential therapeutic strategies. Banding of the pulmonary trunk is a common method to induce isolated RV hypertrophy but in general, previously described models have not succeeded in creating a stable model of RV hypertrophy and failure.
We present a rat model of pressure overload induced RV hypertrophy caused by pulmonary trunk banding (PTB) that enables different phenotypes of RV hypertrophy with and without RV failure. We use a modified ligating clip applier to compress a titanium clip around the pulmonary trunk to a pre-set inner diameter. We use different clip diameters to induce different stages of disease progression from mild RV hypertrophy to decompensated RV failure.
RV hypertrophy develops consistently in rats subjected to the PTB procedure and depending on the diameter of the applied banding clip, we can accurately reproduce different disease severities ranging from compensated hypertrophy to severe decompensated RV failure with extra-cardiac manifestations.
The presented PTB model is a valid and robust model of pressure overload induced RV hypertrophy and failure that has several advantages to other banding models including high reproducibility and the possibility of inducing severe and decompensated RV failure.

We present a surgical method to induce right ventricular hypertrophy and failure in rats.

Un tronco pulmonar las bandas modelo de sobrecarga de presión inducida por el fracaso y la hipertrofia Ventricular derecha

Right ventricular (RV) failure induced by sustained pressure overload is a major contributor to morbidity and mortality in several cardiopulmonary ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The morphological and functional phenotyping of the right ventricle is of particular importance in the context of hemodynamic compromise in patients with ARHF. Here, we describe a method to induce ARHF in a previously described large animal model of chronic PH, and to phenotype, dynamically, right ventricular function using the gold standard method (i.e., pressure-volume PV loops) and with a non-invasive clinically available method (i.e., echocardiography). Chronic PH is first induced in pigs by left pulmonary artery ligation and right lower lobe embolism with biological glue once a week for 5 weeks. After 16 weeks, ARHF is induced by successive volume loading using saline followed by iterative pulmonary embolism until the ratio of the systolic pulmonary pressure over systemic pressure reaches 0.9 or until the systolic systemic pressure decreases below 90 mmHg. Hemodynamics are restored with dobutamine infusion (from 2.5 &#181;g/kg/min to 7.5 &#181;g/kg/min). PV-loops and echocardiography are performed during each condition. Each condition requires around 40 minutes for induction, hemodynamic stabilization and data acquisition. Out of 9 animals, 2 died immediately after pulmonary embolism and 7 completed the protocol, which illustrates the learning curve of the model. The model induced a 3-fold increase in mean pulmonary artery pressure. The PV-loop analysis showed that ventriculo-arterial coupling was preserved after volume loading, decreased after acute pulmonary embolism and was restored with dobutamine. Echocardiographic acquisitions allowed to quantify right ventricular parameters of morphology and function with good quality. We identified right ventricular ischemic lesions in the model. The model can be used to compare different treatments or to validate non-invasive parameters of right ventricular morphology and function in the context of ARHF.

We present a protocol to induce and phenotype an acute right heart failure in a large animal model with chronic pulmonary hypertension. This model can be used to test therapeutic interventions, to develop right heart metrics&#160;or to improve the understanding of acute right heart failure pathophysiology.

Inducción y fenotipado de la insuficiencia cardíaca derecha aguda en un modelo animal grande de hipertensión pulmonar tromboembólica crónica

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

Estenosis Atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

Evaluación hemodinámica invasiva para el sistema ventricular derecho y hipertensión arterial pulmonar inducida por hipoxia en ratones

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In contrast to the extensively used mouse myocardial infarction (MI) model generated by left coronary artery ligation, the RVI mouse model is rarely employed due to the difficulty associated with model generation. Research on the mechanisms and treatment of RVI-induced RV remodeling and dysfunction requires animal models to mimic the pathophysiology of RVI in patients. This study introduces a feasible procedure for RVI model generation in C57BL/6J mice. Further, this model was characterized based on the following: infarct size evaluation at 24 h after MI, assessment of cardiac remodeling and function with echocardiography, RV hemodynamics assessment, and histology of the infarct zone at 4 weeks after RVI. In addition, a coronary vasculature cast was performed to observe the coronary arterial arrangement in RV. This mouse model of RVI would facilitate the research on mechanisms of right heart failure and seek new therapeutic targets of RV remodeling.

There are several differences between the right and left ventricles. However, the pathophysiology of right ventricular infarction (RVI) has not been clarified. In the present protocol, a reproducible method for RVI mouse model generation is introduced, which may provide a means to explain the mechanism of RVI.

Generación y caracterización del infarto de miocardio del ventrículo derecho inducido por ligadura permanente de la arteria coronaria derecha en ratones

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...