1. Equipo de preparación <ol><li> Examine el transductor de ultrasonidos para detectar defectos. Dependiendo del equipo utilizado, este paso puede no ser necesario. <ol><li> Si se observa una burbuja de aire, extraiga el tornillo situado en el lado derecho de la cabeza del transductor, y añadir agua estéril a través del agujero con una aguja de 26. Las burbujas de aire en el interior del cabezal del transductor son comunes. Se impedirá la adquisición de imágenes de calidad. </li><li> Compruebe la membrana que cubre la sonda en busca de fugas o agujeros. Reemplace si es necesario. </li></ol></li><li> Abra el software e inicializar la sonda. <ol><li> Elija el paquete cardiaca desde el menú desplegable, junto con el transductor adecuado. Haga clic en &quot;inicializar&quot;. Utilice una sonda de 20 a 60 MHz para los ratones de menos de 35 g, y una sonda de 15 a 45 MHz para los ratones de más de 35 g. </li><li> Seleccione el operador, animal y fecha en la pantalla de la demografía, y seleccione &quot;start&quot;. </li></ol></li></ol> 2. Ratón Preparation incluida la anestesia, Depilación, y Posicionamiento <ol><li> Anestesia: coloque el ratón en una cámara de inducción y anestesiar con una mesa máquina de anestesia portátil que contenga un vaporizador de isoflurano y un recipiente de gas residual. <ol><li> Ajuste el vaporizador a 3% con una tasa de flujo de oxígeno de 3 L / min. Se utiliza este índice relativamente alto de anestesia para lograr el efecto anestésico rápido y por lo tanto minimizar la respuesta de estrés que pueden influir en la función cardíaca. La corta duración del protocolo minimiza cualquier posible riesgo para el animal. Es muy importante mantener siempre el tipo de anestesia el mismo. Este protocolo ha sido optimizado para el uso exclusivo de isoflurano como la anestesia, por lo tanto, las condiciones óptimas para otros agentes pueden variar de este protocolo. Una menor profundidad de la anestesia se puede elegir, dependiendo de las necesidades experimentales, pero una vez que se estableció un protocolo de anestesia, no debe ser cambiado. Anestesia afecta el ritmo cardíaco y other mediciones hemodinámicas. Por lo tanto, si se cambia la profundidad de la anestesia durante un experimento, los datos pueden no ser útiles para análisis. Si varios ratones son a ser fotografiado en un día, anestesiar por separado. </li><li> Monitorear la temperatura ambiente para asegurar que es la misma entre los grupos experimentales. La temperatura ambiente puede afectar la reactividad vascular, incluso cuando el ratón está sobre una mesa se calienta, por lo que debe ser controlado y mantuvo el mismo entre los grupos experimentales que se compararán. Aunque este protocolo no mide directamente la temperatura de los animales, la temperatura ambiente y la tabla de constante asegura que hay poca variación en la temperatura entre los grupos experimentales. </li></ol></li><li> Depilación: Eliminar el vello del pecho con una crema depilatoria después se anestesia el ratón. Comience la aplicación con un aplicador con punta de algodón, en las clavículas, y continuar hasta justo por debajo del diafragma. <ol><li> Coloque el ratón de nuevo en la cámara de anestesia durante 1 minpara permitir que el depilatorio para trabajar. Para determinar si la anestesia es eficaz, presione firmemente la uña del pulgar contra una de las patas del ratón. Si no hay retirar, la anestesia es adecuada. Si el miembro se retira, coloque el ratón de nuevo en la cámara de anestesia durante otro minuto. </li><li> Aplique una pequeña cantidad de lubricante ungüento para los ojos del ratón para evitar daños en la córnea. </li><li> Retire el cabello del pecho con un 2 en x 2 en gasa. El producto químico utilizado en la crema depilatoria es cáustico y daña la piel si se deja por mucho tiempo, por lo que se debe tener cuidado de eliminar todo el producto de la piel. </li><li> Aplicar una crema hidratante de la piel después de la depilación. </li></ol></li><li> Posicionamiento: Coloca el ratón en una posición ventrodorsal en una mesa de calefacción ajustada a 37 ° C. La colocación correcta es imprescindible para la adquisición de imágenes de calidad. Utilice una tabla que puede capturar la temperatura del cuerpo, la respiración y la frecuencia cardíaca. El uso de un sistema ferroviario integrado todaows para un posicionamiento preciso y, posteriormente, la optimización de la imagen. <ol><li> Cinta suavemente las cuatro patas y aplique una cantidad del tamaño de moneda de diez centavos de gel de transducción en el pecho. </li></ol></li></ol> 3. Adquisición de Imágenes: Imágenes en paraesternal eje largo View <ol><li> Bloquee el transductor de ultrasonido en su lugar dentro del montaje en el sistema ferroviario, y girarlo 10 ° en sentido contrario, de modo que la sonda de metal del transductor se coloca directamente sobre el corazón. Más específicamente, la sonda debe estar en el lado izquierdo del pecho, en la segunda o tercera espacio intercostal, y lateral al esternón. <ol><li> Manipular las x e y ejes ubicados en el sistema ferroviario, hasta que se obtenga el punto de vista correcto. </li><li> Seleccione &quot;Modo B&quot;. Esto se encuentra en la parte superior derecha de la consola del sistema, con el fin de proyectar una imagen en vivo 2D. </li><li> Ver las siguientes estructuras anatómicas en el monitor: <ol><li> Todo el corazón desde el vértice a aorta - El vértice se visualizará en el extremo izquierdo de la pantalla, y la aorta en el extremo derecho. </li><li> El lumen del ventrículo izquierdo (VI) </li><li> La pared posterior del ventrículo izquierdo (LPW) </li><li> Septo interventricular (IVS) </li><li> El lumen del ventrículo derecho (VD) </li><li> Anteriores y posteriores valvas de la válvula mitral (AML y PML) </li><li> Aorta ascendente (AO) </li><li> Aurícula izquierda (LA) </li></ol></li></ol></li><li> Obtener una medida de diámetro de la aorta en esta vista pulsando el botón de escaneo / congelación para &quot;congelar&quot; la imagen. A continuación, utilice el ratón para tirar hacia atrás a través del bucle de vídeo en la parte inferior de la imagen hasta el ventrículo izquierdo está en la sístole y la aorta está en su máximo diámetro. <ol><li> Haga clic en la herramienta de medición en la esquina superior izquierda de la pantalla y seleccione el icono que se parece a una línea diagonal. Izquierda haga clic en el ratón y dibujar una línea recta desde la parte anterior a la pared posterior de la aorta, perpendicular de su eje longitudinal. Guarde pulsando el botón &quot;enmarcados&quot;. </li><li> Creación de un bucle de vídeo pulsando &quot;Cine Store&quot; </li></ol></li></ol> . 4 Adquisición de Imágenes: Imágenes en paraesternal eje corto View <ol><li> Vuelva a colocar el transductor a las 3 y 9 horas (transversales). Ángulo ligeramente caudal mediante la manipulación del soporte del transductor para lograr la mejor vista de la aorta y la luz de baja tensión. La sonda de metal se coloca horizontalmente y directamente sobre el esternón. <ol><li> Manipular los X e Y-ejes en el sistema ferroviario hasta obtener el punto de vista correcto. El lumen de LV se verá, junto con los músculos papilares anterolateral y posteromedial, que son visibles a la derecha del monitor. Este es el punto de referencia estándar para el eje corto, lo que indica la porción media del ventrículo izquierdo, Donde se hacen las mediciones de dimensión. Desviarse un poco desde el punto de referencia con las x e y ejes para lograr diferentes estructuras anatómicas a la vista, será necesario, pero el posicionamiento se explica haciendo referencia a la opinión anterior. </li></ol></li><li> Obtener las siguientes medidas en el eje corto: <ol><li> Modo B <ol><li> Dos mediciones más diametrales de la aorta. </li><li> Tres mediciones de la arteria pulmonar. </li></ol></li><li> Modo Doppler pulsado (DP) <ol><li> Tres mediciones integrales de tiempo de velocidad (IFP) de la aorta </li><li> Tres mediciones VTI de la arteria pulmonar medida justo proximal a la válvula pulmonar. </li><li> Medir la arteria pulmonar tiempo de aceleración mediante el trazado de la curva de VTI desde el principio del flujo de sangre a la velocidad pico. </li></ol></li><li> Modo M <ol><li> Tres mediciones del diámetro interno del ventrículo izquierdo en diastole (LVIDd) </li><li> Tres mediciones del diámetro interno del ventrículo izquierdo en sístole (LVIDs) </li><li> Tres mediciones del diámetro interno del ventrículo derecho (RVID). El lumen RV sólo serán visibles en esta vista si se dilata. </li><li> Medir la frecuencia cardiaca tres veces usando m-mode trazando la distancia entre dos picos diastólico de la pared anterior del ventrículo izquierdo durante tres ciclos cardíacos diferentes. </li></ol></li></ol></li><li> Mediciones de modo B: <ol><li> Manipular el eje Y cranealmente desde el punto de vista del músculo papilar, hasta que la válvula semilunar de la aorta entra en el foco. </li><li> Obtener mediciones de la aorta justo por encima de la válvula en el diámetro mayor. </li><li> Haga clic en la herramienta de medición en la esquina superior izquierda de la pantalla, y seleccione el icono que se parece a una línea diagonal. </li><li> Izquierda haga clic en el ratón y dibujar una línea recta desde la parte anterior a la pared posterior de la aorta. </li><li> Manipular tque x e y ejes hasta que la arteria pulmonar principal se bifurca. Esta estructura será visto anteriormente, y a la derecha de la aorta en el monitor. </li><li> Manipular el cranealmente eje y hasta que el anillo de la arteria pulmonar principal está a la vista. Esto no será tan claramente definida como la aorta. </li><li> &quot;Congelar&quot; la imagen y obtener la medida en sístole. </li><li> Recoge tres mediciones en total. </li></ol></li><li> Onda pulsada (PW) mediciones Doppler: Modo PW se utiliza principalmente para la evaluación hemodinámica del flujo de sangre a través de arterias y venas. En este protocolo, se puede utilizar para recuperar tres mediciones integrales de tiempo la velocidad de la aorta y la arteria pulmonar. <ol><li> Traiga la aorta nuevo a la vista, como se describe en el paso 4.3.1, y el punto 1 bala. <ol><li> Seleccione &quot;Modo PW&quot;. Esta se encuentra en la esquina superior derecha de la consola del sistema y producirá una lectura Doppler del flujo sanguíneo a través de la aorta. </li><li> Coloque la savolumen mple justo por encima del nivel de la válvula aórtica. Pueden necesitar ser ajustado ligeramente para obtener sobres Doppler suficientes Las x e y ejes. Los sobres deben tener bordes blancos, y un interior que indica el flujo de sangre laminar hueca. </li><li> Una vez que se obtiene una visión suficiente, &quot;congelar&quot; la imagen y trace el borde del sobre Doppler. Esto calculará el VTI. </li><li> Con la perilla de &quot;ángulo&quot;, situado en la consola del sistema hacia la derecha hasta la línea amarilla segmentado ve en la imagen en la parte superior derecha del monitor se encuentra a 0 °. Esta línea amarilla representa la dirección del flujo sanguíneo a través del vaso. Dado que el propio transductor está en ángulo de tal manera para producir una vista en sección transversal o transversal del corazón, la línea debe ser ajustado a 0 °, para alinearse con el flujo vertical de sangre a través de la aorta ascendente. </li></ol></li><li> Coloque el volumen de la muestra proximal al nivel de la válvula pulmonar en el centro de laventrículo derecho del tracto de salida y repetir las mediciones de las IFP que el anterior. El flujo de sangre debe aparecer invertida, o frente al flujo de la sangre en relación a la aorta en el monitor. </li></ol></li><li> Mediciones en modo M: formación de imágenes en modo M ofrece alta resolución temporal de movimiento del tejido a lo largo de un único haz de ultrasonidos, y se utiliza para cuantificar dimensiones de la cavidad, así como para estudiar valvular, infarto, y el movimiento de la pared del vaso. <ol><li> Reanudar &quot;Modo B&quot; y la posición del transductor para obtener la &quot;vista de referencia&quot; (la vista en sección transversal del ventrículo izquierdo a nivel de los músculos papilares). </li><li> Pulse el botón &quot;M-mode&quot;. Esto producirá una señal de video continuo en el que el movimiento de las siguientes estructuras anatómicas será visible como una &quot;cinta&quot;. Si dilatada, aparecerá el lumen de RV en la parte superior de la alimentación como un lazo negro muy fino. El septo interventricular (SIV) será visible como una cinta opaca directamente por debajo de la RVlumen. El lumen de LV se verán directamente debajo de los IVS. Es el gran espacio negro que ocupa la mayor parte de la alimentación. Debajo de la luz del LV es la pared posterior del VI (LVPW), que se ve como una cinta opaca. </li><li> Congelar la imagen y tire hacia atrás a través del bucle de vídeo si es necesario a un punto donde la respiración no se está produciendo. Cuando los respira ratón, la adquisición de la imagen se interrumpe por el movimiento de la pared del diafragma y el pecho, produciendo de este modo un artefacto distorsionada &quot;manchado&quot; en la alimentación que se produce con frecuencia regular. </li><li> Obtenga los siguientes mediciones usando el icono de la línea diagonal: <ol><li> Tres mediciones de LV terminan dimensión diastólica, que aparece como la mayor distancia entre el IVS y VEPP. </li><li> Tres mediciones de LV dimensión sistólica final, que aparece como la distancia más corta entre el IVS y LVPW. </li><li> Tres mediciones de la frecuencia cardíaca, que se realiza haciendo clic en el icono del corazón y la medición del pico sistólicasistólica máxima del LVPW. </li><li> Si la luz del RV se dilatan, obtener tres mediciones utilizando el icono de la línea diagonal. </li></ol></li><li> Grabar un bucle de vídeo de la corta en eje paraesternal en modo &quot;B&quot; pulsando el botón &quot;Cine Store&quot;. </li><li> Ir a &quot;Archivo&quot;, seleccione &quot;Examinar Study&quot; para recapitular sus medidas, haga clic en &quot;Fin de sesión&quot;, y luego &quot;Confirmar datos de sesión.&quot; </li><li> Recuperar el ratón como se describe en el protocolo del IACUC y limpiar. </li><li> Exportar datos como un archivo CSV a una unidad flash para su posterior análisis. </li></ol></li><li> Calcular los siguientes parámetros de la función cardíaca (Tabla 1): <ol><li> Ventricular izquierdo del área del tracto de salida </li><li> Izquierda volumen sistólico del ventrículo </li><li> Ventrículo izquierdo del gasto cardíaco </li><li> Fracción de acortamiento </li><li> Área de la arteria pulmonar </li><li> Arteria pulmonar tiempo de aceleración </li><li> Derecho volumen sistólico del ventrículo </li><li> El índice cardíaco</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. H., Thenappan, T., Archer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+high-resolution+echocardiography+and+magnetic+resonance+imaging+vs.+high-fidelity+catheterization+in+experimental+pulmonary+hypertension.">Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 299, 401-412 (2010).</li><li>Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+evaluation+of+ventricular+function+in+mice.">Echocardiographic evaluation of ventricular function in mice.</a> Echocardiography. 24, 83-89 (2007).</li><li>West, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension+in+transgenic+mice+expressing+a+dominant-negative+BMPRII+gene+in+smooth+muscle.">Pulmonary hypertension in transgenic mice expressing a dominant-negative BMPRII gene in smooth muscle.</a> Circ. Res. 94, 1109-1114 (2004).</li><li>Ghofrani, H. A., Seeger, W., Grimminger, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imatinib+for+the+treatment+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Imatinib for the treatment of pulmonary arterial hypertension.</a> N. Engl. J. Med. 353, 1412-1413 (2005).</li><li>Gomberg-Maitland, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dosing/cross-development+study+of+the+multikinase+inhibitor+sorafenib+in+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension.">A dosing/cross-development study of the multikinase inhibitor sorafenib in patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Clin. Pharmacol. Ther. 87, 303-310 (2010).</li><li>Brittain, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+plasticity+and+functional+imaging.">Right ventricular plasticity and functional imaging.</a> Pulm. Circ. 2, 309-326 (2012).</li><li>Yang, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Echocardiographic assessment of cardiac function in conscious and anesthetized mice.</a> Am. J. Physiol. 277, 1967-1974 (1999).</li><li>Suehiro, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+segmental+wall+motion+abnormalities+using+contrast+two-dimensional+echocardiography+in+awake+mice.">Assessment of segmental wall motion abnormalities using contrast two-dimensional echocardiography in awake mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ Physiol. 280, 1729-1735 (2001).</li><li>Jones, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+noninvasive+assessment+of+progressive+pulmonary+hypertension+in+a+rat+model.">Serial noninvasive assessment of progressive pulmonary hypertension in a rat model.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, 364-371 (2002).</li><li>Devaraj, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+pulmonary+hypertension+with+multidetector+CT+and+echocardiography+alone+and+in+combination.">Detection of pulmonary hypertension with multidetector CT and echocardiography alone and in combination.</a> Radiology. 254, 609-616 (2010).</li><li>Kitabatake, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+evaluation+of+pulmonary+hypertension+by+a+pulsed+Doppler+technique.">Noninvasive evaluation of pulmonary hypertension by a pulsed Doppler technique.</a> Circulation. 68, 302-309 (1983).</li><li>Yared, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+artery+acceleration+time+provides+an+accurate+estimate+of+systolic+pulmonary+arterial+pressure+during+transthoracic+echocardiography.">Pulmonary artery acceleration time provides an accurate estimate of systolic pulmonary arterial pressure during transthoracic echocardiography.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 24, 687-692 (2011).</li><li>Cheung, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+surface+area+prediction+in+normal,+hypermuscular,+and+obese+mice.">Body surface area prediction in normal, hypermuscular, and obese mice.</a> J. Surg. Res. 153, 326-331 (2009).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure:+development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ. Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li><li>Baumgartner, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+valve+stenosis:+EAE/ASE+recommendations+for+clinical+practice.">Echocardiographic assessment of valve stenosis: EAE/ASE recommendations for clinical practice.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 22, 1-23 (2009).</li><li>Arkles, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shape+of+the+right+ventricular+Doppler+envelope+predicts+hemodynamics+and+right+heart+function+in+pulmonary+hypertension.">Shape of the right ventricular Doppler envelope predicts hemodynamics and right heart function in pulmonary hypertension.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 183, 268-276 (2011).</li><li>Wiesmann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+right+ventricular+function+in+healthy+mice+and+a+murine+model+of+heart+failure+by+in+vivo+MRI.">Analysis of right ventricular function in healthy mice and a murine model of heart failure by in vivo MRI.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, 1065-1071 (2002).</li><li>West, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+potential+role+for+Insulin+resistance+in+experimental+pulmonary+hypertension.">A potential role for Insulin resistance in experimental pulmonary hypertension.</a> Eur. Respir. J. , (2012).</li><li>Johnson, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytoskeletal+defects+in+Bmpr2-associated+pulmonary+arterial+hypertension.">Cytoskeletal defects in Bmpr2-associated pulmonary arterial hypertension.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 302, L474-L484 (2012).</li><li>Johnson, J. A., West, J., Maynard, K. B., Hemnes, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACE2+improves+right+ventricular+function+in+a+pressure+overload+model.">ACE2 improves right ventricular function in a pressure overload model.</a> PLoS One. 6, e20828 (2011).</li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Los modelos de ratón de la enfermedad, ya sea transgénica o relacionados con la toxina, requieren la validación fenotípica que el modelo de realidad recapitula la enfermedad humana que se pretende imitar. Esta validación a menudo se puede lograr por la presencia o ausencia de una característica particular, por ejemplo el desarrollo de un tumor. Sin embargo, los modelos que dan lugar a alteraciones hemodinámicas, como los modelos de constricción de la aorta de la hipertrofia ventricular izquierda o nuestro modelo...

Presión pulmonar elevada y ventrículo derecho (VD) disfunción son las características de la enfermedad vascular pulmonar en modelos animales y pacientes humanos con hipertensión arterial pulmonar (HAP). Modelos tóxicos (por ejemplo monocrotalina o hipoxia) Transgénicos y de HAP son ampliamente utilizados para estudiar la fisiopatología de la HAP y para investigar las posibles terapias. Dado el costo y el tiempo necesarios para la creación de modelos animales de la enfermedad, es fundamental que los investigadores tengan herramientas para evaluar con precisión la expresión fenotípica de la enfermedad. La ecocardiografía es el pilar de la evaluación no invasiva de la función ventricular en modelos de roedores 1,2. La ecocardiografía tiene la ventaja de traducción claro para los seres humanos en los que se utiliza la misma herramienta. Además, algunos modelos genéticos muestran una penetración incompleta 3, la capacidad de identificar a los animales afectados de forma no invasiva permite ahorrar tiempo y recursos valiosos. La evaluación no invasiva de la enfermegravedad en sí, sin sacrificar un animal también permite a los investigadores estudiar en serie los efectos de las terapias de investigación. Esto es especialmente importante dada la rapidez con la que las terapias de traslación pueden progresar a ensayos en humanos 4,5. En los seres humanos, la evaluación ecocardiográfica del tamaño del VD y la hipertensión pulmonar es particularmente difícil debido a la posición retroesternal y la forma irregular de la RV 6. Modelos de roedores tienen los problemas y retos de pequeño tamaño y la frecuencia cardíaca muy rápida (300-700 latidos / min). Los avances recientes, incluyendo mayores velocidades de fotogramas y transductores más pequeños han mejorado la calidad de imagen y la imagen consciente siquiera se les permite en algunos protocolos experimentales, aunque la mayoría de imágenes de roedores se realiza bajo anestesia 7,8. Protocolos experimentales excelentes de la ecocardiografía en modelos de rata de la HAP se han descrito y validado en contra de ambos resonancia magnética y hemodinámica invasiva 1,9. Sin embargo, la ecocardiografía publicadoprotocolos en los modelos murinos de PAH son insuficientes. En este artículo, se describe un protocolo para evaluar la RV y la función vascular pulmonar en un modelo de ratón de la HAP con una mutación dominante negativa BMPRII y un modelo de RV postcarga aislada después de cerclaje de la arteria pulmonar, sin embargo, este protocolo es aplicable a cualquier enfermedad que afecte a la vasculatura pulmonar o cardiaca derecha. Vamos a describir la preparación de los animales y la evaluación detallada de su tamaño RV y función, así como principal arteria pulmonar (AP) de tamaño. También demostrar las técnicas y los cálculos necesarios para estimar el volumen sistólico y el gasto cardíaco. Las limitaciones técnicas impiden estimaciones Doppler exactas de la presión pulmonar, pero hemos aplicado un sustituto humano bien validado, arteria pulmonar tiempo de aceleración, para estimar la presión PA.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="55">
			<td height="55" style="height:55px;width:251px;">Vevo 770 High Resolution Micro-Ultrasound System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="66">
			<td height="66" style="height:66px;width:251px;">RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH Scanhead w/ Encapsulated Transducer</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:251px;">Vevo Integrated Rail System including the Physioogical Monitoring System</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Computer Monitor set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">DELL or other General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:251px;">Computer Mouse set up for use with the Vevo770</td>
			<td style="width:164px;">General Supplier</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:251px;">Vevo770 Cardiac Package Software</td>
			<td style="width:164px;">Visualsonics Inc.</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td style="width:247px;">get more info at www.visualsonics.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:86px;width:251px;">VetEquip Portable Tabletop Anesthesia Machine with an Isoflurane Vaporizer</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip</td>
			<td style="width:188px;"></td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Activated Charcoal Waste Gas Containers</td>
			<td style="width:164px;">VetEquip/Vaporguard</td>
			<td style="width:188px;">931401</td>
			<td>get more info at vetequip.com</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:62px;width:251px;">Puralube Eye Ointment</td>
			<td style="width:164px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:188px;"></td>
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	</tbody>
</table>

echocardiographic assessment of the right heart in mice

Transgénicos y modelos tóxicos de la hipertensión arterial pulmonar (HAP) son ampliamente utilizados para estudiar la fisiopatología de la HAP y para investigar las posibles terapias. Dado el costo y el tiempo necesarios para la creación de modelos animales de la enfermedad, es fundamental que los investigadores tengan herramientas para evaluar con precisión la expresión fenotípica de la enfermedad. La disfunción ventricular derecha es la principal manifestación de la hipertensión pulmonar. La ecocardiografía es el pilar de la evaluación no invasiva de la función del ventrículo derecho en modelos de roedores y tiene la ventaja de definir de forma sencilla a los seres humanos en los que se utiliza la misma herramienta. Protocolos de ecocardiografía Publicado en modelos murinos de PAH son insuficientes. En este artículo, se describe un protocolo para evaluar la RV y la función vascular pulmonar en un modelo de ratón de la HAP con una mutación dominante negativa BMPRII, sin embargo, este protocolo es aplicable a cualquier enfermedad que afectan a la vasculatura pulmonar o cardiaca derecha. Nosotrosproporcionar una descripción detallada de la preparación de los animales, adquisición de imágenes y cálculo hemodinámico del volumen sistólico, el gasto cardíaco y una estimación de la presión arterial pulmonar.

Los principales objetivos de este protocolo son para cuantificar el tamaño y la función del VD, y para comprender el grado en que la vasculatura pulmonar está enfermo. La preparación adecuada de los equipos tanto en el ratón y la ecocardiografía es esencial para obtener resultados exactos y reproducibles. Los ratones deben tener su pecho depilado y las extremidades asegurado a la plataforma de imágenes con cinta adhesiva. Anestesia, en este caso de isoflurano, se administra a través de cono de la nariz. El trans...

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Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Este artículo proporciona un protocolo para la evaluación ecocardiográfica del tamaño ventricular derecha e hipertensión pulmonar en los ratones. Las aplicaciones incluyen la determinación del fenotipo y la evaluación de serie en modelos de ratón inducido por la toxina de la cardiomiopatía y la enfermedad vascular pulmonar transgénicos y.

Evaluación ecocardiográfica de la parte derecha del corazón en ratones

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

echocardiographic-assessment-of-the-right-heart-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

22.7K vistas.  Vanderbilt University Medical Center.  Este artículo proporciona un protocolo para la evaluación ecocardiográfica del tamaño ventricular derecha e hipertensión pulmonar en los ratones. Las aplicaciones incluyen la determinación del fenotipo y la evaluación de serie en modelos de ratón inducido por la toxina de la cardiomiopatía y la enfermedad vascular pulmonar transgénicos y. 

Video: Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Magnetic Resonance Derived Myocardial Strain Assessment Using Feature Tracking

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF. Current technologies for CMR are time consuming and difficult to implement in clinical practice. Feature tracking is a technology that can lead to more automization and robustness of quantitative analysis of medical images with less time consumption than comparable methods.
Methods: An automatic or manual input in a single phase serves as an initialization from which the system starts to track the displacement of individual patterns representing anatomical structures over time. The specialty of this method is that the images do not need to be manipulated in any way beforehand like e.g. tagging of CMR images.
Results: The method is very well suited for tracking muscular tissue and with this allowing quantitative elaboration of myocardium and also blood flow.
Conclusions: This new method offers a robust and time saving procedure to quantify myocardial tissue and blood with displacement, velocity and deformation parameters on regular sequences of CMR imaging. It therefore can be implemented in clinical practice.

An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that strain is a more sensitive and earlier marker for contractile dysfunction than the frequently used parameter EF.

Evaluación de Resonancia Magnética Derivado deformación miocárdica mediante función de seguimiento

Purpose: An accurate and practical method to measure parameters like strain in myocardial tissue is of great clinical value, since it has been shown, that ...

Investigación

Medicina

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Heterotópico cervical trasplante cardiaco en ratones

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Hipertensión pulmonar tromboembólica crónica y Evaluación de la función ventricular derecha en el Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

Evaluación de la cardíaco morfológica y funcional Los cambios en el modelo de ratón de la constricción de la aorta transversa por ecocardiográfico Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

Enfoques y Protocolos para la Integral ecocardiográficos Caracterización fenotípica en las valvulopatías en ratones

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

Medición ecocardiográfica de parámetros diastólicos ventriculares derecho en ratón

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Harvest of Endothelial Cells from the Balloon Tips of Swan-Ganz Catheters after Right Heart Catheterization

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further diagnose and manage PH, patients undergo repeated right heart catheterizations (RHC) wherein a Swan-Ganz catheter is advanced into a branch of the pulmonary artery and a balloon is inflated to wedge the catheter tip. This article illustrates a protocol whereby pulmonary artery endothelial cells (PAECs) may be harvested from the balloon tips of Swan-Ganz catheters after RHC, and purified with an anti- CD146 affinity column technique to purify putative PAECs. These cells might be used to provide an in situ snapshot of the biological state of the pulmonary vasculature endothelium to complement hemodynamic measurements obtained during RHC. Harvested and purified PAECs may be used for either cell culture or for subsequent analytical assays such as flow cytometery.

This protocol describes the removal and purification of pulmonary artery endothelial cells (PAECs) that adhere to the balloon tips of Swan-Ganz catheters while they are wedged in the pulmonary artery during right heart catheterization and remain adherent to the deflated balloon following removal from the patient's body.

Cosecha de las células endoteliales de las puntas del globo de catéteres de Swan-Ganz después de cateterismo cardíaco derecho

A variety of pathologies lead to pulmonary hypertension (PH), which is defined as a mean pulmonary artery pressure exceeding 25 mmHg at rest. To further ...

Assessment and Characterization of Hyaloid Vessels in Mice

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed regression of hyaloid vessels can be seen in diseases such as persistent hyperplastic primary vitreous (PHPV), leading to an obstructed light path and impaired visual function. Understanding the mechanisms underlying the hyaloid vessel regression may lead to new molecular insights into the vascular regression process and potential new ways to manage diseases with persistent hyaloid vessels. Here we describe the procedures for imaging hyaloid in live mice with optical coherence tomography (OCT) and fundus fluorescein angiography (FFA) and a detailed technical protocol of isolating and flat-mounting hyaloid ex vivo for quantitative analysis. Low-density lipoprotein receptor-related protein 5 (LRP5) knockout mice were used as an experimental model of persistent hyaloid vessels, to illustrate the techniques. Together, these techniques may facilitate a thorough assessment of hyaloid vessels as an experimental model of vascular regression and studies on the mechanism of persistent hyaloid vessels.

This protocol describes both in vivo and ex vivo methods to fully visualize and characterize hyaloid vessels, a model of vascular regression in mouse eyes, using optical coherence tomography and fundus fluorescein angiography for the live imaging and ex vivo isolation and subsequent flat mount of hyaloid for quantitative analysis.

Evaluación y caracterización de recipientes hialoides en ratones

In the eye, the embryonic hyaloid vessels nourish the developing lens and retina and regress when the retinal vessels develop. Persistent or failed ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Examen Ecocardiográfico Transtorácico en el Modelo Conejo

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

Evaluación hemodinámica invasiva para el sistema ventricular derecho y hipertensión arterial pulmonar inducida por hipoxia en ratones

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...