The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos&#8224;.

Declaración de Ética: Los animales son tratados y atendidos de acuerdo a las directrices del Comité para la Investigación y Cuestiones Éticas de la IASP 11. El protocolo ha sido aprobado por el Comité Ético institucional. 1. Los sujetos <ol><li> Usar ratas macho Sprague-Dawley (250-300 g a la llegada). </li><li> Casa ratas en jaulas de fondo sólido en una habitación de colonias con una humedad del 40-60% y una temperatura ambiente de 21 ± 1 ° C. </li><li> Hacer agua y comida disponible en libitum. </li><li> Mantenga ratas bajo un ciclo inverso 12:12 h oscuridad / luz (luces a las 20 h). </li></ol> 2. Cirugía <ol><li> Por rata, preparar dos piezas de ligadura intestino crómico (5-0) de aproximadamente 6 cm de largo y colocarlos en una solución salina estéril para evitar la desecación y convertirse rígido y quebradizo. </li><li> Anestesiar al animal con pentobarbital (60 mg / kg, ip) y tratar con atropina (0,1 mg / kg, ip). Vigilar el nivel de anestesia mediante la extensión de una pierna y Pinching la banda de piel entre los dedos de los pies con una uña para asegurar se aplica la presión adecuada. Asegúrese de que el animal no flexione su extremidad. Si es necesario, administrar pentobarbital adicional. </li><li> Afeitar la cabeza de la rata para que una incisión en la línea media del cuero cabelludo puede ser de aproximadamente 25 mm con distancias iguales anterior y posterior al centro de los ojos. </li><li> Fijar la cabeza de la rata en un marco estereotáxico o de otra manera fijar la cabeza de la rata. Coloque la rata en un cojín de calefacción para mantener la temperatura corporal. </li><li> Aplicar pomada oftálmica en ambos ojos para evitar daños por secado. </li><li> Frote el área de la cabeza rapada con alcohol, luego betadine. </li><li> Hacer una incisión en la línea media del cuero cabelludo, dejando al descubierto el cráneo y el hueso nasal. </li><li> Utilice un microscopio quirúrgico para realizar los pasos 02.09 a 02.16. </li><li> Diseccionar el borde de la órbita libre, formado por el maxilar, frontal, lagrimal y los huesos cigomáticos, utilizando un hisopo con punta de algodón y un par de pinzas Dumont. Utilice el hisopo para loak con sangre de un posible sangrado. </li><li> Para dar acceso a los iones, desviar suavemente el contenido orbitales con un hisopo de algodón precisión, teniendo cuidado de no estirar demasiado el nervio etmoidal anterior que cruza superior a la de iones. Diseccionar el ion libre del tejido conectivo circundante, utilizando un hisopo con punta de algodón precisión y un par de pinzas Dumont utilizando un movimiento propague. Utilice el hisopo para absorber la sangre de una posible hemorragia. </li><li> Para realizar una ligadura, empujar un extremo de una sola pieza de intestino crómico a la baja a lo largo del hueso frontal, medial a la de iones y avanzar unos pocos milímetros paralelo e inferior a la de iones. La ligadura ahora se mantiene en su lugar entre los iones y el hueso frontal. </li><li> Deslice la punta de unos 45 grados en ángulo pinzas Dumont en el marco del ION para colocarlo en las proximidades de la ligadura. Retraer con suavidad el ion lateralmente para revelar la ligadura y la punta de la pinza. Agarre la ligadura con las pinzas y retirar la pinza lateralmente por debajo de la de iones. </li&gt; <li> Tire de la ligadura de la cavidad orbital hasta que ambos extremos de la ligadura son más o menos equidistante de ion. </li><li> Haga un &quot;nudo corredizo&quot; de los dos extremos de la ligadura para permitir un control perfecto sobre el grado de constricción y deslice el nudo contra el ion. Deslizar el nudo más para constreñir el ion de modo que el diámetro del nervio se reduce en una cantidad apenas perceptible. Hacer un nudo normal, en la parte superior del nudo corredizo de modo que la cantidad de constricción permanece constante (es decir, para evitar que el nudo se deslice hendidura). </li><li> Corte las ligaduras de dejar aproximadamente 2 mm de los extremos libres del nudo. </li><li> Repita el mismo procedimiento (pasos 2,11-2,15) para hacer una segunda ligadura de 2 mm de distancia de la primera. </li><li> Para cirugía simulada, realice los pasos 02.02 a 02.10. </li><li> Cierre de la incisión del cuero cabelludo utilizando suturas de poliéster (4-0) y permita que la rata se recupere en una almohadilla caliente. No dejar al animal sin vigilancia hasta que se haya recuperado contras suficientesciousness mantener decúbito esternal y no devolver el animal a la compañía de otros animales hasta que esté totalmente recuperado. </li><li> Para evitar efectos analgésicos preventivos contra el desarrollo del dolor neuropático, no administrar la analgesia para el dolor post-quirúrgico. </li></ol> 3. Procedimiento de la Prueba de Comportamiento <ol><li> Permitir que las ratas se aclimaten durante al menos 8 días a las condiciones de la vivienda antes de la prueba pre-operatorio. </li><li> Habituarse ratas en el procedimiento de la prueba al menos una vez al día durante tres días antes de la prueba pre-operatorio. </li><li> Pruebas de Conducta en una habitación oscura con luz proporcionada por una W bombilla roja 60 suspendió 1 m por encima del centro de la zona de pruebas iluminando el centro, pero dejando la circunferencia tenue y el resto de la habitación oscura. </li><li> Asegúrese de que hay suficiente ruido de fondo para disminuir la interferencia de estimulación auditiva repentina. Si es necesario, proporcionar ruido blanco. </li><li> Observación de la cara comportamiento aseo <ol><li> TRANSPORTE una sola rata de la colonia a la sala de ensayo en una jaula de plástico cubierta sin ropa de cama. Nota: Idealmente, esto debería ser un viaje corto con estímulos externos mínimos. </li><li> Coloque la rata en una jaula de plástico transparente cubierta sin ropa de cama (LxAnxAl: 24 cm x 14 cm x 17 cm) con un espejo de nuevo frente a una cámara de vídeo. </li><li> Realice una grabación de 10 min de la conducta del animal. Durante la grabación, asegúrese de que el experimentador no está presente en la sala de ensayo. </li><li> Limpie la jaula de observación antes de colocar el siguiente animal. </li><li> Asegúrese de que el comportamiento registrado es analizada por un experimentador que es ciego a la condición experimental de la rata. </li><li> Haga un registro de cada episodio cara aseo durante la grabación de 10 minutos. Nota: el aseo de la cara se define como patrones de movimiento en el que las patas delanteras se ponen en contacto con las áreas faciales. </li><li> Hacer una distinción entre dos tipos de comportamiento ante el aseo. Si una secuencia es ni precedida ni seguida porcuerpo de aseo (es decir, la preparación de un área del cuerpo que no sea la cara), categorizar el episodio como aislado cara aseo. Si el aseo corporal se realiza inmediatamente antes o después de la cara aseo, clasificar el episodio como la cara de aseo durante el aseo corporal. </li><li> Determinar el número de episodios de la cara de aseo. <ol><li> Clasificar un período de tiempo entre las acciones de cara aseo que no exceda de 4 segundos como un espacio intra-episodio (es decir, una pausa entre las acciones de cara aseo dentro de un solo episodio). </li><li> Clasificar un período de tiempo entre la cara acciones de aseo que supera 4 seg como un espacio interinstitucional episodio (es decir, una interrupción total de las acciones de cara aseo entre dos episodios). </li></ol></li></ol></li><li> La estimulación mecánica de pruebas <ol><li> Ratas de transporte en grupos de hasta 6 animales de la colonia a la sala de ensayo en una jaula cubierta con ropa de cama. Asegúrese de que este es un viaje corto con estímulos externos mínimos. </li><li> Coloca elratas individualmente en jaulas de plástico transparentes con ropa de cama (LxAnxAl: 24 cm x 14 cm x 17 cm) con una tapa con bisagras de manera que se pueden abrir y cerrar fácilmente. </li><li> Utilice una serie graduada de cinco pelos de von Frey. Nota: La fuerza requerida para doblar los pelos es 0,015 g, 0,127 g, 0,217 g, 0,745 g y 2,150 g. </li><li> Habituarse a las ratas a la jaula de observación y movimientos que alcanzan para 10 min. Cada 30 segundos, abra la tapa y toque suavemente la pared de la jaula con una varilla de plástico. </li><li> Cuando el animal se encuentra en un no / estado locomoción sniffing (es decir, con cuatro patas colocadas en el suelo, sin moverse ni la congelación, pero exhibiendo olfateando comportamiento), aplicar la primera pelo von Frey en el territorio de iones cerca del centro de la almohadilla vibrissal , en la piel que rodea el hairy vibrisas mystacial. </li><li> Puntuación de la respuesta del animal a la estimulación de pertenecer a una de las siguientes categorías de respuesta 4. <ol><li> Clasificar una completa falta de respuestamarcó el 0. </li><li> Clasificar una detección estímulo (es decir, la rata se vuelve la cabeza hacia el objeto estimulante y el objeto de estímulo se explora a continuación) como marcador 1. </li><li> Categorizar una reacción de abstinencia (es decir., La rata gira la cabeza lentamente o tira de él hacia atrás rápidamente cuando se aplica la estimulación, a veces una sola cara limpie ipsilateral a la zona estimulada se produce) como puntuación de 2. </li><li> Clasificar un / respuesta de ataque de escape (es decir., La rata evita el contacto adicional con el objeto de estímulo, ya sea de forma pasiva al mover su cuerpo lejos del objeto estimular a asumir una posición en cuclillas contra la pared de la jaula, o activamente atacando el objeto de estímulo, lo que hace morder y agarrar movimientos) como marcador 3. </li><li> Clasificar cara asimétrica aseo (es decir, la rata muestra una serie ininterrumpida de al menos tres golpes cara lavado dirigidos hacia el área facial estimulado) como marcador 4. </li><li> Dentro de cada animal, aplique Stimuli en un orden ascendente de intensidad. Después de una intensidad del estímulo se ha aplicado a un lado, que se aplican al otro lado antes de pasar a la siguiente intensidad del estímulo. Aleatorizar el orden en que se estimulan los lados ipsilateral y contralateral. Tenga en cuenta que el animal debe estar en un no / estado locomoción oler antes de cada estímulo. </li></ol></li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clinical+picture+of+neuropathic+pain.">The clinical picture of neuropathic pain.</a> Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+a+multidimensional+burden+for+patients.">Neuropathic pain a multidimensional burden for patients.</a> Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+SF+36+and+Nottingham+Health+Profile+in+patients+with+chronic+neuropathic+pain.">Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain.</a> Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).</li><li>Vos, B. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+two+types+of+behavioral+variables+of+non+evoked+facial+pain+after+chronic+constriction+injury+to+the+rat+infraorbital+nerve.">Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve.</a> Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).</li><li>Deseure, K., Adriaensen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonevoked+facial+pain+in+rats+following+infraorbital+nerve+injury+a+parametric+analysis.">Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis.</a> Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).</li><li>Deseure, K., Hans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+study+of+non+evoked+orofacial+pain+following+different+types+of+infraorbital+nerve+injury+in+rats.">Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats.</a> Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).</li><li>Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+administration+of+the+5+hydroxytryptamine1A+agonist+(3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl)+-amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone+(F+13640)+attenuates+allodynia+like+behavior+in+a+rat+model+of+trigeminal+neuropathic+pain.">Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain.</a> J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).</li><li>Zimmerman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+Guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16, 109-110 (1983).</li><li>Mogil, J. S., Crager, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+should+we+be+measuring+in+behavioral+studies+of+chronic+pain+in+animals.">What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals.</a> Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).</li><li>Backonja, M. M., Stacey, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+symptoms+relative+to+overall+pain+rating.">Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating.</a> J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).</li><li>Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+heat+hyperalgesia+in+an+experimental+trigeminal+neuropathy+in+rats.">Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats.</a> Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).</li><li>Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+bilateral+trigeminal+constriction+injury+using+an+operant+facial+pain+assay.">Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay.</a> Neuroscience. 224, 294-306 (2012).</li><li>Anderson, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+Operant+Orofacial+Pain+Assessment+Device+(OPAD)+to+Measure+Changes+in+Nociceptive+Behavior.">Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior.</a> J Vis Exp. (76), 50336 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

El aspecto más interesante del modelo de Ion-CCI es que proporciona una medida única de (neuropático) dolor espontáneo, no provocado. La mayoría de los estudios en animales de dolor neuropático, utilizando modelos de los nervios espinales, abordan exclusivamente comportamientos nocifensive (ej., Vocalización y respuestas de abstinencia), lo que refleja la hipersensibilidad a estímulos mecánicos o térmicos 12. Sin embargo, la queja clínica principal en los pacientes es el dolor continuo, no...

El daño a los nervios somatosensoriales más a menudo conduce a la pérdida de la sensibilidad. No se entiende muy bien por qué y cómo, en algunos casos, el daño del nervio periférico conduce a dolor crónico. Como resultado, las neuropatías dolorosas siguen siendo una condición difícil de tratar 1 y dar lugar a reducciones sustanciales de la calidad de vida de los pacientes 2-3. Los modelos animales son una herramienta importante para examinar la eficacia de los fármacos existentes y de nuevo desarrollo e identificar los mecanismos fisiopatológicos involucrados en el desarrollo y mantenimiento del dolor neuropático. Entre los principales retos para la investigación del dolor de traslación es identificar y medir el dolor espontáneo en los animales (es decir, fisiológicos, manifestaciones conductuales u otros que indican la presencia de dolor en los animales que no están siendo desafiados con sondaje estímulos que están agudamente superponen con la condición basal del sujeto ). El objetivo general de este procedimiento es inducir quirúrgicamente unlesión del nervio infraorbital en una rata que conduce al desarrollo de tanto espontánea y evocada comportamiento nocifensive que pueden utilizarse para estudiar los mecanismos implicados en el dolor neuropático trigeminal y su tratamiento. Dirigida, cara aislado aseo personal es una medida única de dolor neuropático espontáneo en ratas. Después de una lesión crónica constricción (CCI) del nervio infraorbitario (ION), las ratas muestran cambios en el comportamiento espontáneo y en respuesta a la estimulación táctil que son indicativos de dolor persistente y la alodinia mecánica 4. Después de Ion-CCI, las ratas muestran un aumento de la actividad y asimétrica aseo cara, es decir, con lavado de cara trazos dirigida principalmente al territorio de iones nervio lesionado. En contraste con la estimulación nociva de la cara (por ejemplo, la inyección de formalina) 5, no dolorosa alteraciones sensoriales (es decir, recorte vibrisas unilateral, bloqueo del nervio infraorbital anestésico, la aplicación de aceite mineral en vibriSSAE) no o sólo muy brevemente (es decir, los primeros minutos después del inicio) inducen un cambio significativo en la cara comportamiento de acicalamiento 6. Se concluyó que este acicalamiento anormal después de Ion-CCI es una manifestación conductual de sensaciones espontáneas, fuertemente aversivas en el territorio del nervio lesionado. Este comportamiento en ratas Ion-CCI tiene gran parecido con dolor espontáneo observado en los pacientes. Otros estudios han identificado una diferencia importante entre la cara comportamiento arreglo personal que forma parte de un comportamiento de aseo corporal más general (es decir, &quot;cara de aseo durante cuerpo grooming&quot;), que sigue siendo en gran parte no afectada por Ion-CCI, y la cara nocifensive aseo que no es ni precedido ni seguido de aseo corporal (es decir, &quot;aislado cara grooming&quot;), que se incrementó significativamente después de Ion-CCI 7-9. Farmacológicamente, cara aseo durante el aseo corporal constituye una medida de control excelente para efectos no específicos de drogas ( <em&gt; por ejemplo, sedación) que pueden afectar la función motora. Los movimientos de las extremidades anteriores durante los dos tipos de cara aseo son exactamente los mismos. Después de Ion-CCI, las ratas también muestran cambios en respuesta a la estimulación táctil que son indicativos de la alodinia mecánica 4, 10. Durante la primera semana (s) después de Ion-CCI, las ratas ya no responden al tacto leve o moderada (es decir, von Frey ) estímulos. Esta respuesta menor es entonces bruscamente reemplazada por una hiperreactividad extrema por lo que incluso las intensidades de estímulo muy débiles provocan el comportamiento nocifensive. El inicio de la hiperreactividad puede variar entre las ratas, pero la mayoría de las ratas se han convertido en hyperresponsive después de tres a cuatro semanas después de la operación.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromic catgut</td>
			<td>Dynek&#160;</td>
			<td>CG504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nembutal&#160; (pentobarbital)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clippers for small animals - Favorita II</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic instrument</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment (Liposic)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic monitor system</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>PY8 50-7221-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton applicator</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision cotton swab</td>
			<td>Qosina</td>
			<td>10225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operation microscope</td>
			<td>Kaps</td>
			<td>SOM 62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11253-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors - blunt tips</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14574-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyester sutures - Mersilene (4-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>R871H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital video camera</td>
			<td>Sony</td>
			<td>HDR-CX330E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>58011</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic constriction injury of the rat's infraorbital nerve (ion-cci) to study trigeminal neuropathic pain

Los modelos animales son herramientas importantes para el estudio de la fisiopatología y farmacología del dolor neuropático. Este manuscrito describe los procedimientos quirúrgicos y de comportamiento para estudiar el dolor neuropático trigeminal en ratas. Para satisfacer la especificidad del trigémino síndromes de dolor neuropático, el nervio infraorbital (ION) se somete a una lesión de constricción crónica (CCI) sin apretar por ligación del nervio. Un enfoque intra-orbital se presenta aquí para exponer y ligar el ION en la cavidad orbital. Después de la ligadura de iones, las ratas presentan cambios en el comportamiento espontáneo y en respuesta a la estimulación von Frey pelo que son indicativos de dolor persistente y la alodinia mecánica. Dos fases se pueden definir en el desarrollo de los cambios de comportamiento. Durante la primera semana después de Ion-CCI (fase 1), las ratas muestran un aumento de la actividad y asimétrica aseo cara, es decir, con lavado de cara trazos dirigida principalmente al territorio de iones nervio lesionado. Se hace una distinción entre la cara grooming comportamiento que es parte de un comportamiento corporal aseo más general, que sigue siendo en gran parte no afectada por Ion-CCI, y la cara de aseo que ni está precedido ni seguido por el aseo corporal, que se incrementó significativamente después de Ion-CCI. Durante este período, se reduce la capacidad de respuesta a la estimulación mecánica del territorio de iones. Esta respuesta menor es reemplazado abruptamente por una hiperreactividad extrema cual intensidades de estímulo aún muy débiles provocan el comportamiento nocifensive (fase 2). Las similitudes fenomenológicas entre estas alteraciones del comportamiento y informado de signos de dolor facial (es decir, las respuestas a la estimulación nociva de la cara) sugieren la presencia de disestesia / parestesia y la alodinia mecánica en el territorio de iones se ligó.

Ratas Ion-CCI muestran un fuerte aumento postoperatorio en la cantidad de tiempo dedicado a la cara aislada aseo (Figura 1). Los picos de aumento al final de la primera semana después de la operación y luego disminuye durante las siguientes semanas. La mayoría de los estudios recientes han encontrado cara aseo que incrementarse significativamente durante un máximo de tres semanas. Cara comportamiento de aseo en ratas con operación simulada es más o menos afectada. Rata...

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Chronic Constriction Injury of the Rat&#039;s Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat&#8217;s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.

Lesión crónica constricción del nervio infraorbitario de la Rata (Ion-CCI) para el Estudio del trigémino Dolor Neuropático

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

chronic-constriction-injury-rat-s-infraorbital-nerve-ion-cci-to-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

19.2K vistas.  University of Antwerp. This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia. 

Video: Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of the population1,2. Symptoms include spontaneous (tingling, burning, electric-shock like) pain, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (pain resulting from normally non-painful stimuli) and hyperalgesia (an increased response to painful stimuli). The sensory symptoms are co-morbid with behavioural disabilities, such as insomnia and depression. To study chronic neuropathic pain several animal models mimicking peripheral nerve injury have been developed, one of the most widely used is Bennett and Xie's (1988) unilateral sciatic nerve chronic constriction injury (CCI)3 (Figure 1). Here we present a method for performing CCI and testing pain hypersensitivity.
CCI is performed under anaesthesia, with the sciatic nerve on one side exposed by making a skin incision, and cutting through the connective tissue between the gluteus superficialis and biceps femoris muscles. Four chromic gut ligatures are tied loosely around the sciatic nerve at 1 mm intervals, to just occlude but not arrest epineural blood flow. The wound is closed with sutures in the muscle and staples in the skin. The animal is then allowed to recover from surgery for 24 hrs before pain hypersensitivity testing begins.
For behavioural testing, rats are placed into the testing apparatus and are allowed to habituate to the testing procedure. The area tested is the mid-plantar surface of the hindpaw (Figure 2), which falls within the sciatic nerve distribution. Mechanical withdrawal threshold is assessed by mechanically stimulating both injured and uninjured hindpaws using an electronic dynamic plantar von Frey aesthesiometer or manual von Frey hairs4. The mechanical withdrawal threshold is the maximum pressure exerted (in grams) that triggers paw withdrawal. For measurement of thermal withdrawal latency, first described by Hargreaves et al (1988), the hindpaw is exposed to a beam of radiant heat through a transparent glass surface using a plantar analgesia meter5,6. The withdrawal latency to the heat stimulus is recorded as the time for paw withdrawal in both injured and uninjured hindpaws. Following CCI, mechanical withdrawal threshold, as well as thermal withdrawal latency in the injured paw are both significantly reduced, compared to baseline measurements and the uninjured paw (Figure 3). The CCI model of peripheral nerve injury combined with pain hypersensitivity testing provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to modify chronic neuropathic pain. In our laboratory, we utilise CCI alongside thermal and mechanical sensitivity of the hindpaws to investigate the role of neuro-immune interactions in the pathogenesis and treatment of neuropathic pain.

Due to the simplicity of surgery and the robust behavioural outcome, chronic constriction of the sciatic nerve is one of the pre-eminent animal models of neuropathic pain. Within 24 hrs following surgery, pain hypersensitivity is established and can be quantitatively measured using a von Frey aesthesiometer (mechanical test) and plantar analgesia meter (thermal test).

La constricción crónica del nervio ciático y pruebas de hipersensibilidad dolor en ratas

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

Investigación

Medicina

Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. It has been extensively used in various clinical settings. Based upon recent discoveries related to the systemic effects of voluntary breathing and intrinsic physiological interactions among systems during voluntary breathing, a new EStim protocol, Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim), has been developed to augment the effects of electrical stimulation. In BreEStim, a single-pulse electrical stimulus is triggered and delivered to the target area when the airflow rate of an isolated voluntary inspiration reaches the threshold. BreEStim integrates intrinsic physiological interactions that are activated during voluntary breathing and has demonstrated excellent clinical efficacy. Two representative applications of BreEStim are reported with detailed protocols: management of post-stroke finger flexor spasticity and neuropathic pain in spinal cord injury.

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

The purpose is to present a new method, breathing-control electrical stimulation (BreEStim) for management of neuropathic pain and spasticity.

Respiración controlada por la estimulación eléctrica (BreEStim) para el manejo del dolor neuropático y espasticidad

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

Las respuestas de la Vejiga Urinaria Distensión Evocados visceromotor como modelo para la vejiga Dolor en ratones

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in injured sensory neurons and along the entire nociceptive pathway within the central nervous system. It is usually chronic and challenging to treat. In order to study neuropathic pain and its treatments, different models have been developed in rodents. These models derive from known etiologies, thus reproducing peripheral nerve injuries, central injuries, and metabolic-, infectious- or chemotherapy-related neuropathies. Murine models of peripheral nerve injury often target the sciatic nerve which is easy to access and allows nociceptive tests on the hind paw. These models rely on a compression and/or a section. Here, the detailed surgery procedure for the &#34;cuff model&#34; of neuropathic pain in mice is described. In this model, a cuff of PE-20 polyethylene tubing of standardized length (2 mm) is unilaterally implanted around the main branch of the sciatic nerve. It induces a long-lasting mechanical allodynia, i.e., a nociceptive response to a normally non-nociceptive stimulus that can be evaluated by using von Frey filaments. Besides the detailed surgery and testing procedures, the interest of this model for the study of neuropathic pain mechanism, for the study of neuropathic pain sensory and anxiodepressive aspects, and for the study of neuropathic pain treatments are also discussed.

Neuropathic pain is a consequence of a lesion or disease affecting the somatosensory system. The &#8220;cuff model&#8221; of neuropathic pain in mice consists of the implantation of a polyethylene cuff around the main branch of the sciatic nerve. Mechanical allodynia is tested using von Frey filaments.

El nervio ciático esposar modelo de dolor neuropático en ratones

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and either cut or crush it to induce peripheral nerve injury. Advantages of this surgery are its simplicity, high reproducibility, and the lack of effect on vital functions or mobility from the subsequent facial paralysis, thus resulting in a relatively mild surgical outcome compared to other nerve injury models. A major advantage of using a cranial nerve injury model is that the motoneurons reside in a relatively homogenous population in the facial motor nucleus in the pons, simplifying the study of the motoneuron cell bodies. Because of the symmetrical nature of facial nerve innervation and the lack of crosstalk between the facial motor nuclei, the operation can be performed unilaterally with the unaxotomized side serving as a paired internal control. A variety of analyses can be performed postoperatively to assess the physiologic response, details of which are beyond the scope of this article. For example, recovery of muscle function can serve as a behavioral marker for reinnervation, or the motoneurons can be quantified to measure cell survival. Additionally, the motoneurons can be accurately captured using laser microdissection for molecular analysis. Because the facial nerve axotomy is minimally invasive and well tolerated, it can be utilized on a wide variety of genetically modified mice. Also, this surgery model can be used to analyze the effectiveness of peripheral nerve injury treatments. Facial nerve injury provides a means for investigating not only motoneurons, but also the responses of the central and peripheral glial microenvironment, immune system, and target musculature. The facial nerve injury model is a widely accepted peripheral nerve injury model that serves as a powerful tool for studying nerve injury and regeneration.

We present a surgical protocol detailing how to perform a cut or crush axotomy on the facial nerve in the mouse. The facial nerve axotomy can be employed to study the physiological response to nerve injury and test therapeutic techniques.

Axotomía nervio facial en ratones: un modelo para estudiar las motoneuronas respuesta a la lesión

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and ...

Subcutaneous Trigeminal Nerve Field Stimulation for Refractory Facial Pain

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. Neuromodulation techniques for chronic facial pain include deep brain stimulation and motor cortex stimulation, which are complex to perform. Subcutaneous nerve field stimulation is certified for chronic back pain and is the least invasive form of neuromodulation. We applied this technique to treat chronic and neuropathic trigeminal pain as an individual therapy concept. First, trial stimulation is performed. Subcutaneous leads are placed in the painful trigeminal dermatome under local anesthesia. The leads are connected to an external neurostimulator that applies constant stimulation. Patients undergo a 12 day outpatient trial to assess the effect of the stimulation. Electrodes are removed after the trial. If the patient reports pain reduction of at least 50% in intensity and/or attack frequency, a reduction in medication or increase in quality of life, permanent implantation is scheduled. New electrodes are implanted under general anesthesia and are subcutaneously tunneled to an infraclavicular internal pulse generator. Patients are able to turn stimulation on and off and to increase or decrease the stimulation amplitude as needed.
This technique represents a minimal invasive alternative to other more invasive means of neuromodulation for trigeminal pain such as motor cortex stimulation or deep brain stimulation.

Treating chronic or neuropathic facial pain can be challenging when medical or standard treatment fails. Subcutaneous nerve field stimulation is the least invasive form of neuromodulation and is used for chronic back pain. We applied this technology to treat chronic and neuropathic trigeminal facial pain.

Estimulación subcutánea del campo nervioso del trigémino para el dolor facial refractario

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. ...

Development of Recombinant Proteins to Treat Chronic Pain

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates for treating debilitating pain conditions due to their capacity to regulate aberrant neuro-immune interactions. However, physiologically they work in a network of various cytokines, and therefore their therapeutic effect may not be optimal when used as stand-alone drugs. To overcome this limitation, we developed a fusion protein of the anti-inflammatory cytokines IL4 and IL10. Here, we describe the methods for production and quality control of IL4-10 recombinant fusion protein and we test the effectiveness of the IL4-10 fusion protein to resolve pain in a mouse model of persistent inflammatory pain.

In this paper we provide details for the methods of production and quality control of an IL4-10 recombinant fusion protein. We also show how to test the effectiveness of this protein to resolve pain in a mouse model of inflammatory pain.

Desarrollo de proteínas recombinantes para el tratamiento de dolor crónico

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates ...

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. Chronic neuropathic pain results from lesions or diseases in the somatosensory system. To investigate potential therapies with reduced side effects, animal pain models are the gold standard in preclinical studies. Therefore, well-characterized and well-described models are crucial for the development and validation of innovative therapies. 
Partial ligation of the sciatic nerve (pSNL) is a procedure that induces chronic neuropathic pain in mice, characterized by mechanical and thermal hypersensitivity, ongoing pain, and changes in limb temperature, making this model a great fit to study neuropathic pain preclinically. pSNL is an advantageous model to study neuropathic pain as it reproduces many symptoms observed in humans with neuropathic pain. Furthermore, the surgical procedure is relatively fast and straightforward to perform. Unilateral pSNL of one limb allows for comparison between the ipsilateral and contralateral paws, as well as evaluation of central sensitization. 
To induce chronic neuropathic hypersensitivity, a 9-0 non-absorbable nylon thread is used to ligate the dorsal third of the sciatic nerve. This article describes the surgical procedure and characterizes the development of chronic neuropathic pain through multiple commonly used behavioral tests. As a plethora of innovative therapies are now being investigated to treat chronic pain, this article provides crucial concepts for standardization and an accurate description of surgeries required to induce neuropathic pain.

Partial sciatic nerve ligation induces long-lasting chronic neuropathic pain, characterized by exaggerated responses to thermal and mechanical stimuli. This mouse model of neuropathic pain is commonly used to study innovative therapies for pain management. This article describes in detail the surgical procedure to improve standardization and reproducibility.

Ligadura parcial del nervio ciático: un modelo de ratón de dolor neuropático crónico para estudiar el efecto antinociceptivo de nuevas terapias

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

Mejora de la terapia con FSN en el modelo de rata: minimización de las molestias y maximización de la eficiencia

Efficacy of Fu's Subcutaneous Needling on Sciatic Nerve Pain: Behavioral and Electrophysiological Changes in a Chronic Constriction Injury Rat Model

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the mechanisms of action are still not fully understood. During FSN treatment, the FSN needle is inserted and retained in the subcutaneous tissues for a long duration with a swaying movement. However, challenges arise from maintaining a posture while manipulating FSN in animal models (e.g., rats) for researchers. Uncomfortable treatment can lead to fear and resistance to FSN needles, increasing the risk of injury and may even affect research data. Anesthesia may also affect the study results too. Hence, there is a need for strategies in FSN therapy on animals that minimize injury during the intervention. This study employs a chronic constriction injury model in Sprague-Dawley rats to induce neuropathic pain. This model replicates the pain induced by nerve injury observed in humans through surgical constriction of a peripheral nerve, mimicking the compression or entrapment seen in conditions such as nerve compression syndromes and peripheral neuropathies. We introduce an appropriate manipulation for easily inserting an FSN needle into the subcutaneous layer of the animal&#39;s body, including needle insertion and direction, needle retention, and swaying movement. Minimizing the rat&#39;s discomfort prevents the rat from being tense, which causes the muscle to contract and hinder the entry of the needle and improves the study efficiency.

Autor destacado: Desvelando los efectos terapéuticos del tratamiento con FSN: uniendo la investigación y las aplicaciones clínicas en el dolor neuropático

We present a protocol for using Fu's subcutaneous needling in a chronic constriction injury model to induce sciatic nerve pain in rats.

Eficacia de la punción subcutánea de Fu en el dolor del nervio ciático: cambios conductuales y electrofisiológicos en un modelo de rata con lesión por constricción crónica

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the ...