Este sistema de técnicas mide la eficacia de los pesticidas contra los insectos vectores de enfermedades en el campo y proporciona una manera única de visualizar la eficacia utilizando mapas. Una ventaja clave de este sistema es que es un proceso uniforme que se puede aplicar y comparar en múltiples entornos con una gama de insectos objetivo. En el núcleo de este sistema está el uso de una serie de pequeñas jaulas con mosquitos centinelas criados en colonias estratégicamente dispuestos en hábitats naturales y expuestos a pesticidas.
Los patrones espaciales y temporales de eficacia de plaguicidas se derivan del porcentaje de mortalidad en jaulas centinela y luego se mapean y visualizan en un sistema de información geográfica. Para construir las jaulas centinelas adultas, primero utilice un cortador de disco rodante, borde recto y tabla de cortar para preparar dos cuadrados de malla de tul de cinco por cinco pulgadas por jaula centinela a partir de yardas de tul a granel y almacene los cuadrados de malla de tul en lotes de 50 en bolsas de plástico resellable de un cuarto de litro. A continuación, empuje los discos planos de cartón de los fondos de las nuevas tazas de helado de cartón de media pinta para crear cilindros abiertos de dos por tres pulgadas y retire los discos de cartón de dos tapas de taza de helado para crear un bisel abierto para cada extremo del cilindro.
A continuación, atrape un cuadrado de malla de tul debajo de un bisel para fijar la malla firmemente al cilindro. Para cada jaula centinela, sujete un cable de gancho y bucle a una banda de goma y fije la banda de goma alrededor del bisel con el cuadrado de malla. Embolsa las jaulas centinela en lotes de 50 con una bolsa separada que contiene 50 biseles y 50 cuadrados de malla de tul.
Cuando las jaulas centinela estén listas, sacuda cuidadosamente 80 mosquitos anestesiados de una cámara de anestesización de dióxido de carbono uniformemente a través de una hoja de papel blanca limpia de 11 1/2 por 17 pulgadas y ajuste un temporizador durante cuatro minutos. Usando un aspirador de pistola, seleccione y transfiera rápidamente lotes de 20 hembras adultas a jaulas centinela abiertas individuales. Coloque inmediatamente un cuadrado de malla de tul con un bisel sobre el extremo superior abierto del cilindro de la jaula, y empuje hacia abajo para completar el conjunto de la jaula centinela.
Los mosquitos pueden morir por estrés. Por lo tanto, para una evaluación precisa de la toxicidad de los pesticidas, es importante contar con personal suficientemente capacitado para producir y cargar rápidamente las jaulas centinela en los refrigeradores de almacenamiento para minimizar el estrés ambiental. Una vez que el tul esté en su lugar, gire la banda de goma para que quede a través de ambos extremos de malla de la jaula centinela con la corbata de cable de gancho y bucle colocada contra el lado del cilindro.
A continuación, apriete la mayoría de una solución de 10% sacar la sacar de una bola de algodón para que todavía esté húmeda, justo antes del punto de goteo libre, y coloque suavemente la bola de algodón debajo de la banda de goma contra la malla de tul en un lado de la jaula centinela para que sea fácilmente accesible para los mosquitos. Cuando todas las hembras hayan sido removidas, utilice un aspirador mecánico separado para recoger todos los mosquitos macho restantes para congelarse y cargue de 10 a 12 jaulas en cuatro a cinco capas en un refrigerador aislado de 48 cuartos por cada 45 a 50 jaulas centinela, compensando ligeramente cada capa para que las jaulas no cubran completamente la jaula de abajo para promover el flujo de aire. A continuación, cubra la capa superior con una bolsa de basura doblada de 13 galones y una toalla húmeda, y use cinta adhesiva para sujetar un pedazo de cartón doblado a la esquina frontal del labio superior del refrigerador para promover el intercambio de aire y evitar el sobrecalentamiento.
Para establecer la rejilla centinela y el área de control, diseñe una cuadrícula de ubicaciones para las jaulas centinela que capture variaciones en la distancia desde el pulverizador, la distancia a lo largo de la línea de pulverización, la vegetación y los obstáculos a la penetración de pulverización, y la altura por encima del suelo. Utilice un carrete de cinta de medición de 300 pies para marcar los intervalos convenientes desde el pulverizador y a lo largo de la línea de pulverización. Instale postes de montaje de jaula centinela en el suelo de acuerdo con el diseño de la rejilla con al menos 48 pulgadas del poste sobre el suelo y etiquete claramente cada polo con un código para su posición única con un marcador permanente.
Si el hábitat no proporciona naturalmente problemas de vegetación u obstáculos a la dispersión de la aspersión de pesticidas, considere colocar una caja de cartón de un pie cúbico en su lado con la parte superior abierta junto a cada poste de la jaula centinela para proporcionar una ubicación centinela adicional dentro de la refugia simulada. El flujo de aire a través de las cajas se puede ajustar perforando agujeros de 1/2 pulgada en uno o más lados, y cada caja también debe estar etiquetada con su código de posición único y en un marcador permanente. La longitud básica de la línea de pulverización debe coincidir con las dimensiones de la rejilla, aunque los puntos de inicio y parada deben establecerse mucho antes y después de la cuadrícula.
Agregue aproximadamente el 10% de la longitud básica de la línea de pulverización al principio y al final para aumentar la oportunidad de que toda la rejilla esté expuesta dados los cambios inevitables y las imperfecciones en los patrones de viento. Utilice la corbata de cable de gancho y bucle para colocar las jaulas centinela en los postes, haciendo que las bolas de algodón con solución de sacarosa al 10% todavía estén en su lugar debajo de las bandas de goma, y etiquete cada jaula con el código de ubicación del polo y la mortalidad previa al rociado de la jaula. Coloca las jaulas de las cajas a sus lados en las cajas para que ambos extremos de malla de tul sean perpendiculares al suelo, y etiqueten las jaulas de la caja de la misma manera.
Cuando todas las jaulas hayan sido etiquetadas y desplegadas tanto en las áreas de tratamiento como de control y todo el personal clave haya comunicado la preparación, haga que el operador de pulverización realice una comprobación final de la velocidad y dirección del viento e inicie la aplicación de pesticidas de pulverización aéreo, terrestre o portátil desde la línea de pulverización designada o la línea de pulverización alternativa según sea necesario. Es fundamental que los aplicadores experimentados ayuden a diseñar los ensayos de campo y tengan una gran conciencia de cualquier posible cambio meteorológico para garantizar que el área objetivo reciba una dosis adecuada de pesticida. Inmediatamente después del tiempo de retención después de la pulverización, registre la mortalidad post-spray de los mosquitos en cada jaula centinela con un marcador permanente a medida que se recoge.
Seis horas después del spray, use guantes de nitrilo desechables para recoger y observar las jaulas una por una de las bandejas de almacenamiento, llamando al código de ubicación único, los recuentos de mortalidad antes y después de la pulverización, y el recuento de mortalidad de seis horas de cada jaula para el registro de datos. Cuando se hayan registrado todos los datos posteriores a la pulverización, utilice un sistema de información geográfica para asignar todas las ubicaciones únicas de la jaula centinela a partir de los datos de código de cada jaula y cree cuatro columnas para la mortalidad corregida por Abbott para los cuatro períodos de tiempo de mortalidad en la tabla de atributos para estas ubicaciones. Cree una cobertura interpolada para la mortalidad para cada uno de los cuatro períodos de tiempo de mortalidad en todas las ubicaciones centinela únicas en el área de tratamiento, y agregue estas coberturas interpoladas al mapa utilizando una leyenda de color estirada en un espectro de azul a rojo y marcando las ubicaciones de la jaula centinela con etiquetas.
Mejore el mapa del área de tratamiento con una imagen de satélite subyacente y agregue los elementos de mapa adecuados, como una flecha norte, una barra de escala, una leyenda y un título. A continuación, añada inserciones de un gráfico meteorológico y una gráfica polar de rosa de viento separada para mostrar el viento, la velocidad del viento y la variabilidad prevalecientes a lo largo del período de pulverización, así como una rampa de color de mortalidad para que se pueda interpretar la cobertura de mortalidad interpolada y, a continuación, exporte una imagen de mapa terminada para cada superficie del período de tiempo de mortalidad. En esta serie representativa de aerosoles, el pulverizador de pesticidas de niebla térmica, el pesticida y el medio ambiente se mantuvieron constantes, variando sólo el diluyente de pesticidas, de modo que el agua, el diésel y el aceite mineral BVA13 se utilizaron como disolvente a su vez a través de los tres ensayos.
En particular, casi no se observó mortalidad cuando el pesticida se diluyó con BVA13, mientras que se observó una mortalidad de casi el 100% cuando el pesticida se diluyó en agua, con los efectos del diésel como diluyente que parece verse afectado por la ubicación geográfica de las jaulas centinelas. Cabe señalar que el diagrama de rosa de viento insertado para este experimento reveló un ángulo de viento que coincide perfectamente con el ángulo de la mortalidad espacial en la cuadrícula oeste, lo que indica que el camión de pulverización debería haber comenzado más hacia el este para que el pesticida tuviera la oportunidad de llegar a todas las jaulas centinela. Si los datos de mortalidad se consideran sólo en forma tabular, puede ser fácil perder esta debilidad en el diseño experimental y asignar una eficacia general más baja a ese equipo de aplicación de pesticidas sesgado por los valores de mortalidad cero de áreas no contactadas por el pesticida.
Para obtener los datos de mortalidad de la más alta calidad, tenga cuidado al almacenar y manipular las jaulas centinela antes y después del aerosol y asegurar de igual que las jaulas de las áreas de tratamiento y control estén igualmente expuestas al medio ambiente. Para las tablas de datos de buena calidad, es fundamental pegar cuidadosamente los datos para que la información correcta se alinee con los puntos correspondientes en las columnas correctamente etiquetadas, especialmente los datos para cada período de tiempo de mortalidad. Hemos demostrado este sistema utilizando mosquitos vectores adultos como centinelas, pero los mosquitos inmaduros también pueden ser colocados como centinelas en pequeñas tazas de plástico de 400 ml llenas de agua para recoger y evaluar sitios de larvas pulverizadas en una variedad de ambientes.
El sistema centinela y sexual no es una medida absoluta de eficacia, pero demuestra la capacidad de comparar la eficacia relativa de un pesticida en diferentes condiciones o de comparar diferentes pesticidas en las mismas condiciones.
