Estos protocolos son importantes para establecer la integridad y el funcionamiento normal del sistema autónomo para evaluar la funcionalidad autonómica del sistema nervioso y revelar trastornos vestibulares del sistema. Un funcionamiento vestibular o un déficit de coordinación motora pueden indicar daños al sistema autónomo. Estas técnicas pueden revelar la integridad del funcionamiento autónomo.
Las técnicas conductuales pueden ser susceptibles a las variedades introducidas por el experimentador. Recomendamos que el mismo investigador lleve a cabo las técnicas a lo largo del experimento y trate a cada roedor de forma idéntica. Para el análisis de movimiento vertical del ascensor, coloque hasta cuatro ratas de dos meses de edad de 200 a 250 gramos en una caja de plexiglás de 22,5 por 26 por 20 centímetros y cree de forma segura la caja.
Coloque la caja en la plataforma del elevador de un dispositivo de movimiento vertical del ascensor y encienda el dispositivo en el ajuste más bajo para la aclimatación. A continuación, establezca la amplitud en 22 centímetros hacia arriba y 22 centímetros hacia abajo de neutral e inicie el dispositivo con un período de ciclo inicial en 2.500 milisegundos durante cinco minutos, 2.000 milisegundos durante cinco minutos y 1.500 milisegundos durante cinco minutos. A continuación, establezca el dispositivo en 1.000 milisegundos durante dos horas antes de ralentizar el dispositivo en sentido inverso utilizando períodos de 1.500 milisegundos durante cinco minutos, 2.000 milisegundos durante cinco minutos y 2.500 milisegundos durante cinco minutos.
Para un procedimiento de rotación de la noria, coloque el contenedor de plexiglás en un banco de madera y coloque las ratas en el contenedor con el eje largo de sus cuerpos perpendicular a la barra de rotación horizontal de la noria. Después de cerrar la caja de forma segura, coloque un segundo conjunto de ratas con una masa similar en un segundo recipiente de plexiglás con el eje largo del cuerpo perpendicular a la barra de rotación horizontal en el segundo brazo del dispositivo de rotación de la noria. Después de cerrar la caja de forma segura, inicie la rotación de la noria en el sentido de las agujas del reloj a 16 grados por segundo al cuadrado para alcanzar una velocidad angular de 120 grados por segundo.
Cuando la noria haya alcanzado la velocidad máxima, comienza a desacelerar a 48 grados por segundo al cuadrado para alcanzar cero grados por segundo. Después de una pausa de un segundo, haga que el contenedor continúe girando en sentido contrario a las agujas del reloj a 16 grados por segundo al cuadrado para alcanzar una velocidad angular de 120 grados por segundo antes de desacelerarse a 48 grados segundo al cuadrado para alcanzar cero grados por segundo. A continuación, continúe con la rotación en sentido contrario a las agujas del reloj durante dos horas por sesión durante aproximadamente 720 rotaciones.
Para el entrenamiento de vigas de equilibrio, primero coloque dos taburetes de madera de 0,75 metros de altura en el campo experimental de aproximadamente 110 centímetros de distancia. Coloque una caja negra de plástico de 15 por 15 por ocho centímetros en la herramienta de acabado y coloque una estrecha viga de madera de 2,5 por 130 centímetros entre los dos taburetes dejando una distancia de 100 centímetros entre los bordes del taburete desde el taburete inicial hasta el taburete final. Coloque una lámpara en el taburete de arranque y encienda la lámpara.
A continuación, apague la luz de la habitación para que la habitación esté lo más oscura posible e introduzca la primera rata en el haz en la esquina iluminada. Si la rata no cruza su voluntad, pida suavemente al animal que cruce la viga. Después de tres días consecutivos de entrenamiento, coloque la rata entrenada en el taburete de inicio cerca de la luz e inicie inmediatamente un cronómetro.
La rata debe cruzar el haz de equilibrio rápidamente y entrar en la caja negra en el taburete final. Detenga el cronómetro tan pronto como la nariz del animal entre en la caja oscura del taburete final. Para el recuento de defecación después del tratamiento de movimiento, transfiera las ratas del recipiente de plexiglás a cajas individuales de campo abierto de 40 por 40 por 45 centímetros y cuente el número de perdigones de heces en la caja de plexiglás atribuida a cada roedor.
Para una prueba de comportamiento de campo abierto, utilice una cámara de video infrarroja para grabar a los animales durante tres minutos y utilice el material de archivo de vídeo resultante para determinar la distancia total recorrida para cada animal. Aquí, se muestran los resultados representativos del haz de equilibrio del tiempo necesario para atravesar el haz de equilibrio después de tres días consecutivos de entrenamiento. El movimiento vertical del elevador, los cambios en el movimiento vertical de Hertz y la rotación de la noria aumentaron significativamente la defecación.
Además, el movimiento vertical del ascensor, los cambios en el movimiento vertical de Hertz y la rotación de la noria disminuyeron significativamente la distancia de campo abierto recorrida. El entrenamiento del haz de equilibrio es crítico ya que las ratas deben estar motivadas y seguras al cruzar la viga. De lo contrario, su saldo no se medirá durante el período de evaluación.
Siguiendo los procedimientos conductuales, los efectos de diferentes fármacos de interés sobre el funcionamiento autónomo y la señalización celular se pueden evaluar utilizando estos ensayos de estimulación vestibular.
