Este protocolo describe un método de examen de la jerarquía social en un modelo de rata. Todas las ratas realizan un complejo buceo para la tarea alimentaria en la que forman una jerarquía distinta de acuerdo con la voluntad de sumergirse bajo el agua y nadar para obtener un pellet de comida. Este método se utiliza para entender la toma de decisiones y la relación social entre animales altamente sociales en grupos pequeños.
Seleccione ratas macho sprague dawley adultas que pesen de 300 a 350 gramos. Proporcione comida para ratas y agua ad libitum. Realice todos los experimentos entre las 6:00 am y las 12:00 pm.
Mantener las ratas a temperatura ambiente de 22 grados centígrados con 12 horas de luz y 12 horas de ciclos oscuros. Una cronología del protocolo experimental. Seleccione aleatoriamente 120 ratas en uno de los tres grupos experimentales.
El grupo uno, N es igual a 60, se utilizará como grupo de control. El grupo dos, N es igual a 30, será inducido con depresión. El grupo tres, N es igual a 30, también será inducido con depresión y posteriormente será tratado con medicamentos antidepresivos.
Algunas pruebas de preferencia cruzada realizadas antes y después de la inducción del estrés crónico impredecible y después de buceo complejo para la tarea de alimentos. Los siguientes factores de estrés se introducen en orden aleatorio. Alojamiento en grupo colocando seis ratas por jaula durante 18 horas.
Colocación inclinada de la jaula durante tres horas 45 grados a lo largo del eje vertical. Privación de alimentos durante 18 horas. Depravación del agua durante 18 horas seguida de exposición inmediata a una botella de agua vacía.
Colocación suave de la jaula durante ocho horas que consiste en 300 mililitros de agua derramado en ropa de cama. Iluminación continua y ciclo oscuro claro inverso durante 48 horas a la semana y cinco minutos ambiente caliente a 40 grados Centígrados. Las ratas están expuestas a dos de los siete factores de estrés diarios en un orden aleatorio.
Uno durante el día, y el segundo por la noche durante cinco semanas secuenciales. Las ratas del grupo tres reciben tratamiento antidepresivo con hidroflorida de amicrom, antidepresivo tricíclico 20 miligramos por kilo por intraperitoneally una vez al día durante tres semanas. El grupo dos del grupo de control se administra 0,9% placebo salino por vía intraperitoneally una vez al día durante tres semanas al mismo volumen que el grupo de tratamiento antidepresivos.
Prepara aparatos y aclimata ratas. Conecte dos jaulas 50 en 50 en 50 centímetros a un acuario 130 en 35 en 50 centímetros a través de túneles. Coloque tubos con pellets de comida, un pellet de comida en cada tubo en un extremo del acuario.
Marque las seis ratas con marcador de diferentes colores al comienzo del experimento para permitir la identificación individual. En un momento dado, seis ratas participaron en los experimentos simultáneamente. Tres de ellos sirvieron como grupo de control uno y los otros tres eran del grupo depresivo dos, o depresivos después del tratamiento, grupo tres.
En el primer día del experimento, introducir cada grupo de ratas en aparatos experimentales sin agua durante tres horas de sesión. Devuelve a las ratas a la jaula estándar después de la sesión. Grabe en video ratas en el aparato continuamente durante la sesión de tres horas.
Repita estas sesiones durante los días dos y tres. En los días cuatro a 17, agregue agua progresivamente hasta alcanzar el nivel máximo de agua. El día 17 a 21, mantener el nivel máximo de agua.
Observe a las ratas buceando para acceder a los pellets. Registre los siguientes parámetros. Frecuencia de entradas en túnel, buceo para alimentos, alimentos obtenidos por ataque, alimentos obtenidos por transporte y tiempo pasado en jaulas separadas.
Durante el ciclo oscuro coloque las ratas en jaulas individuales en la misma habitación que la carcasa. Coloque una botella de 100 mililitros 1% de peso volumen solución de sacarosa en cada jaula durante 24 horas y permitir la adaptación. Retire las botellas y prive a las ratas de alimentos y agua durante 12 horas.
Coloque dos botellas, una que contenga 100 mililitros de solución de sacarosa, un volumen de peso del 1% y la otra 100 mililitros de agua del grifo en cada caso durante cuatro horas. Registre el volumen en mililitros de la solución de sacarosa consumida y agua y calcule su afinidad a la preferencia de sacarosa de la siguiente manera. La preferencia de sacarosa en porcentaje equivale al consumo de sacarosa en mililitros, dividido por el consumo de sacarosa y mililitros más el consumo de agua en mililitros.
Todo el tiempo 100% Cambios de peso corporal Una prueba Nova de una sola manera no mostró ninguna diferencia en los cambios en el peso corporal entre los grupos experimentales durante los 21 días del complejo buceo para la tarea de alimentos. De días a dos a 21, hubo cambios en el peso corporal para los tres grupos, p-value fue inferior a 0.01. Las ratas con síntomas depresivos eran más activas y agresivas que las ratas de control.
Las ratas inducidas con el comportamiento agresivo de la luz mostraron un aumento de las entradas en el túnel 130% más menos menos 3,7 p valor inferior a 0,01. Buceo para la comida 141% más menos siete, valor p menos de 0.01. Alimentos obtenidos por un maridaje, 168% más menos 12, valor p inferior a 0,01.
Tiempo pasado en jaulas separadas 123% más menos 7.9, valor p menos de 0.01, y alimentos obtenidos por ataque, 232% más menos 26, valor p menos de 0.01. En comparación con las ratas depresivas que recibieron tratamiento antidepresivo, 67% más menos 3.4, 54% más menos cinco, 53% más menos seis, 55% más menos 4.7, 44% más menos siete respectivamente. Las diferencias que las ratas indujeron con síntomas depresivos similares y ratas deprimidas tratadas con antidepresivos fueron estadísticamente mayores que las diferencias entre las ratas inducidas con síntomas depresivos similares y el grupo de control en los cinco parámetros del complejo buceo para pruebas alimentarias, p valor inferior a 0,05.
No hubo diferencia en el consumo de sacarosa al comienzo del experimento. Para el día 35 del experimento, el grupo de depresión valor p inferior a 0.01. Y el grupo de depresión tratado con terapia antidepresivos, p valor inferior a 0.01 tenía una preferencia de sacarosa significativamente menor porcentual que el grupo de control.
El día 62, las ratas inducidas con síntomas depresivos similares tuvieron un porcentaje menor en comparación con el control y el grupo de depresión tratado con tratamiento antidepresivo, p valorado en menos de 0,05.Conclusion. La compleja tarea de buceo para alimentos puede permitirnos evaluar la relación entre la amplia gama de enfermedades mentales y la organización social, así como estudiar la eficacia de la terapia y la disfunción social. Muchas gracias por su atención.
