Este es un protocolo estandarizado para el aneurisma aórtico abdominal inducido por elastasa, que mejoraría en gran medida la reproducibilidad y la consistencia de los estudios que utilizan este modelo. Esta técnica tiene una tasa de inducción consistente de aneurisma aórtico abdominal. También posee la ventaja de los bajos gastos y el corto tiempo de operación, lo que resultará en un mayor poder estadístico y la reproducibilidad.
Debe asegurarse de que se hayan eliminado los tejidos conectivos que cubren la aorta para que la elastasa tenga una mejor oportunidad de penetración, pero tenga cuidado de no dañar los vasos. Para comenzar, administre cinco miligramos por kilogramo de carprofeno por vía subcutánea, 30 minutos antes de la inducción de la anestesia. Pruebe el ratón anestesiado para detectar la falta de respuesta de pellizco del dedo del pie antes de la incisión en la piel.
Haga una incisión longitudinal de 2,5 centímetros en la piel, a lo largo de la línea media del abdomen medio e inferior. Tire suavemente del músculo subyacente y haga una incisión longitudinal de 2,5 centímetros a lo largo de la línea alba. Use aplicadores húmedos con punta de algodón para mover los intestinos y el estómago hacia el lado derecho del ratón y acceder a la cavidad abdominal.
Use fórceps para extraer suavemente el tejido conectivo que cubre la aorta abdominal y la vena cava inferior. Use fórceps para diseccionar suavemente la parte posterior de la aorta abdominal y la vena cava inferior de los músculos subyacentes. Coloque un trozo de franja guante de cuatro centímetros por cuatro milímetros a través de la parte posterior de la aorta abdominal y la vena cava inferior, y enderece la raya.
Coloque la raya aproximadamente a 0,5 centímetros de distancia de la arteria renal derecha. Por encima de la raya, coloque un trozo de almohadilla de algodón de tres centímetros por dos milímetros a través de la parte posterior de la aorta abdominal y la vena cava inferior. Luego, endereza la almohadilla de algodón.
Para incubar la elastasa, use una pipeta para dejar caer 30 microlitros de elastasa pancreática porcina sobre el segmento de la aorta por encima de la almohadilla de algodón. Envuelva la almohadilla de algodón y la raya alrededor de la aorta y la vena cava inferior. Enjuague un trozo de 10 centímetros por una gasa de 10 centímetros con solución salina estéril al 0,9% y colóquelo sobre el abdomen.
Después de 30 minutos, retire la raya y la almohadilla de algodón con fórceps. Irrigar la aorta y la cavidad abdominal con 500 microlitros de solución salina estéril al 0,9%. Use una gasa para absorber la solución salina restante.
Vuelva a aproximar las capas musculares con una sutura de monofilamento no absorbible 6-0. Luego, cierre la piel con tres a cuatro interrumpidos en 6-0 suturas de monofilamento no absorbibles. La tasa de incidencia de desarrollar un aneurisma aórtico abdominal en el día 14 postoperatorio fue del 91,7% para las hembras, mientras que la tasa de incidencia para los animales machos fue del 72,7%Entre los 19 animales en los que se desarrolló el aneurisma aórtico abdominal, se observó un aumento de 1,7 veces y 1,6 veces del diámetro máximo de la aorta abdominal, en hembras y machos respectivamente, en comparación con los controles no quirúrgicos.
Se muestran imágenes representativas de la aorta de grupos no quirúrgicos y quirúrgicos en un día 14 postoperatorio. Esta técnica sirvió como una herramienta potencial para ayudar a diseccionar la fisiopatología del triple A y ayudar al descubrimiento de nuevas dianas terapéuticas potenciales.
