Esta investigación tiene como objetivo abordar las limitaciones típicas en los experimentos basados en el comportamiento al permitir que los animales vivan en establos enriquecidos. El objetivo es facilitar las pruebas y el entrenamiento conductual autoiniciados, y demostrar cómo ese enfoque puede generar datos individualizados válidos, incluidas las variables dependientes posteriores al accidente cerebrovascular, tanto típicas como novedosas. Existen varios desafíos para los investigadores que realizan experimentos conductuales, incluido el tiempo dedicado al entrenamiento conductual y la minimización de cualquier posible confusión asociada con el manejo humano de roedores y la privación de alimentos, ejercicio e interacción social.
Con suerte, los hallazgos de este protocolo muestran la utilidad de buscar enfoques automatizados, libres de humanos y/o ecológicamente enriquecidos para recopilar datos de comportamiento. Esperamos que esto anime a otros investigadores a utilizar métodos de alto rendimiento para explorar nuevas variables y una serie de paradigmas experimentales. Para comenzar, obtenga un torniquete preensamblado para una rata u ORT.
Conecte una identificación de radiofrecuencia, o lector RFID, al ORT y luego fije la antena RFID al tubo ORT. Coloque las ORT entre el aparato conductual y la jaula de la colonia. Instale el sistema RFID para leer los animales a medida que pasan a través de la ORT.
Introduce una cohorte de ratas del mismo tamaño en la jaula de la colonia. Entrena a la rata para que entre regularmente en el aparato conductual a través de la ORT. A continuación, introduzca el mango de la encuesta en el aparato de alcance experto.
En el programa Arduino, para ajustar la manija de tracción a la sensibilidad más alta, vaya a la RAT. H y defina el umbral de fuerza necesario para iniciar una extracción. Retraiga la palanca diariamente de 0,25 a 0,5 milímetros hasta alcanzar una posición final de uno a 1,25 centímetros fuera de la cámara.
Inicie un programa de entrenamiento de percentiles para aumentar progresivamente las fuerzas de tracción necesarias para activar el mango. Una vez que la rata alcance de manera confiable el rango de criterio final de 120 gramos de tirones, retire el programa de entrenamiento de percentiles y fije el criterio para la activación del mango en 120 gramos. Recupere la rata inducida por un accidente cerebrovascular en una jaula tradicional durante tres a siete días.
Después de la recuperación, regrese la rata a la jaula de la colonia con la ORT conectada al aparato de alcance experto. Complete las pruebas de comportamiento con requisitos de tracción de 120 gramos hasta que se recopilen datos suficientes para evaluar los déficits posteriores al accidente cerebrovascular. En las evaluaciones de alcance experto, se observaron variaciones significativas en la tasa de éxito, la fuerza media por tirón y los tirones por ataque de ratas después de la inducción de un accidente cerebrovascular.
El golpe no afectó a los inicios de la sesión. Las mujeres iniciaron consistentemente más sesiones que los hombres, sin cambios en la tasa después del accidente cerebrovascular. En contraste, la mayoría de las ratas exhibieron una mayor duración de la cámara, posiblemente debido a la reducción de las tasas de éxito de los combates.
El accidente cerebrovascular afectó el patrón circadiano de las distribuciones de las sesiones a lo largo del día tanto en hombres como en mujeres. Antes del derrame cerebral, los animales se dedicaban a la tarea principalmente al principio del ciclo de luz y en las hembras justo antes del inicio del ciclo de oscuridad. Después del derrame cerebral, tanto los machos como las hembras cambiaron hacia un aumento gradual de la participación a lo largo del ciclo de luz.
En la actualidad, la investigación traslacional del ictus utiliza varios ensayos de comportamiento cruciales, pero la mayoría requiere pruebas intensivas en mano de obra e individuales, así como entrenamiento ocasional con animales. Además, las variables de auto-iniciación rara vez se capturan, ya que los ensayos presentan predominantemente sesiones y tareas de experimentación o iniciadas. En comparación con los enfoques típicos de entrenamiento y pruebas conductuales, este protocolo ofrece varias ventajas.
Aborda los factores de confusión asociados con el manejo humano, reduce el trabajo diario de los investigadores, permite varias fuentes de enriquecimiento e incluso proporciona medidas novedosas de variables circadianas y de iniciación.
