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Fabrication and Operation of an Oxygen Insert for Adherent Cellular Cultures 

Oxygen is a key modulator of many cellular pathways, but current devices permitting in vitro oxygen modulation fail to meet the needs of biomedical ...

University of Illinois

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Oxygen is a key modulator of many cellular pathways, but current devices permitting in vitro oxygen modulation fail to meet the needs of biomedical research. A microfabricated insert for multiwell plates has been developed to more effectively control the temporal and spatial oxygen concentration to better model physiological phenomena found in vivo. The platform consists of a polydimethylsiloxane insert that nests into a standard multiwell plate and serves as a passive microfluidic gas network with a gas-permeable membrane aimed to modulate oxygen delivery to adherent cells. Equilibration time is on the order of minutes and a wide variety of oxygen profiles can be attained based on the device design, such as the cyclic profile achieved in this study, and even oxygen gradients to mimic those found in vivo. The proper biological consequences of the device's oxygen delivery were confirmed in cellular models via a proliferation assay and western analysis of the upregulation of hypoxia inducible transcription factor-1alpha. These experiments serve as a demonstration for the platform as a viable tool to increase experimental throughput and permit novel experimental possibilities in any biomedical research lab.

Modulating temporal and spatial oxygenation over adherent cellular cultures.

L&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne est un modulateur cl&#xE9; de nombreuses voies de signalisation cellulaire, mais les dispositifs actuels permettant la modulation d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne in vitro ne parviennent pas &#xE0; r&#xE9;pondre aux besoins de la recherche biom&#xE9;dicale. Un insert microfabriqu&#xE9; pour plaques multipuits a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9; pour contr&#xF4;ler plus efficacement le temporel et la concentration en oxyg&#xE8;ne spatiale des ph&#xE9;nom&#xE8;nes physiologiques meilleur mod&#xE8;le trouv&#xE9; in vivo. La plate-forme se compose d&#x26;#39;un insert de polydim&#xE9;thylsiloxane qui fait son nid dans une plaque standard multi-puits et sert de r&#xE9;seau de gaz microfluidique passive avec une membrane perm&#xE9;able aux gaz destin&#xE9; &#xE0; moduler l&#x26;#39;apport d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne aux cellules adh&#xE9;rentes. Temps d&#x26;#39;&#xE9;quilibrage est de l&#x26;#39;ordre de quelques minutes et une grande vari&#xE9;t&#xE9; de profils d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne peut &#xEA;tre atteint sur la base de la conception du dispositif, tel que le profil cyclique atteint dans cette &#xE9;tude, et m&#xEA;me des gradients d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne pour imiter ceux trouv&#xE9;s in vivo. Les cons&#xE9;quences biologiques appropri&#xE9;es de l&#x26;#39;apport d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne de l&#x26;#39;appareil ont &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;s dans des mod&#xE8;les cellulaires par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;un test de prolif&#xE9;ration et de l&#x26;#39;analyse occidentale de la r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse de la transcription inductible hypoxie facteur-1alpha. Ces exp&#xE9;riences servent de d&#xE9;monstration pour la plate-forme comme un outil viable pour augmenter le d&#xE9;bit exp&#xE9;rimental et permettre de nouvelles possibilit&#xE9;s exp&#xE9;rimentales dans tout laboratoire de recherche biom&#xE9;dicale.

Modulant l&#x26;#39;oxyg&#xE9;nation temporelles et spatiales sur adh&#xE9;rents cultures cellulaires

Sauerstoff ist ein wichtiger Modulator von vielen zellularen Bahnen, aber aktuelle in-vitro-Sauerstoff-Modulation bei sch&ouml;nem Ger&auml;teausfall, die Bed&uuml;rfnisse der biomedizinischen Forschung. Ein Microfabricated Einsatz f&uuml;r multiwell Platten wurde effektiver steuern die zeitliche und r&auml;umliche Sauerstoffkonzentration auf bessere Modell physiologischen Erscheinungen gefunden in-vivo entwickelt. Die Plattform besteht aus einem Polydimethylsiloxan-Einsatz, dass Nester in einer standard multiwell Platte und dient als eine passive Microfluidic Netzwerk mit einer Gas-durchl&auml;ssigen Membran zielte darauf ab, die Sauerstoffversorgung adh&auml;rente Zellen modulieren gas. Auswuchten Zeit ist in der Gr&ouml;&szlig;enordnung von Minuten und eine Vielzahl von Sauerstoff-profile anhand der Ger&auml;t-Designs wie das zyklische Profil erreicht in dieser Studie, und sogar Sauerstoff Farbverl&auml;ufe imitieren die gefunden in-vivo erreicht werden kann. Richtigen biologischen Folgen der Sauerstoffversorgung des Ger&auml;ts wurden zellul&auml;re Modelle &uuml;ber eine Verbreitungs und westlichen Analyse der Hochregulation der Hypoxie-durch Induktion erh&auml;ltlichen Transkription Faktor-1alpha best&auml;tigt. Diese Experimente dienen als eine Demonstration f&uuml;r die Plattform als tragf&auml;hige Werkzeug zu experimentellen Durchsatz zu erh&ouml;hen und neue experimentelle M&ouml;glichkeiten in jedem biomedizinischen Forschungslabor zu erlauben.

Modulierende zeitliche und r&auml;umliche Sauerstoffversorgung &uuml;ber adh&auml;renten zellul&auml;ren Kulturen.

L&#39;ossigeno &egrave; un modulatore chiave di molti percorsi di cellulari, ma attuali dispositivi che consentono la modulazione di ossigeno in vitro non riescono a soddisfare le esigenze della ricerca biomedica. Un inserto microfabricated per piastre trasportatrici &egrave; stato sviluppato per controllare pi&ugrave; efficacemente la concentrazione di ossigeno spaziale e temporale per meglio fenomeni fisiologici modello trovato in vivo. La piattaforma &egrave; costituita da un inserto di polidimetilsilossano che nidifica in una piastra di vetrini standard e serve come un passivo microfluidica gas di rete con una membrana permeabile al gas finalizzata a modulare l&#39;erogazione di ossigeno alle cellule aderenti. Tempo di equilibramento &egrave; dell&#39;ordine di minuti e una vasta gamma di profili di ossigeno pu&ograve; essere raggiunta basato sul design di dispositivo, come ad esempio il profilo ciclico ottenuto in questo studio e anche i gradienti di ossigeno per imitare quelli che si trovano in vivo. La corrette conseguenze biologiche di consegna dell&#39;ossigeno del dispositivo sono state confermate in modelli cellulari attraverso un test di proliferazione e analisi occidentale della sovraregolazione di fattore di trascrizione inducibili ipossia-1alpha. Questi esperimenti servono come una dimostrazione per la piattaforma come uno strumento vitale per aumentare la velocit&agrave; effettiva sperimentale e romanzo sperimentale possibilit&agrave; di soggiorno in qualsiasi laboratorio di ricerca biomedica.

Modulante ossigenazione spaziale e temporale su colture cellulari aderenti.

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&#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xC0B0;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870;.

El ox&#xED;geno es un modulador clave de muchas v&#xED;as celulares, pero los dispositivos actuales que permiten la modulaci&#xF3;n de ox&#xED;geno in vitro no cumplen con las necesidades de la investigaci&#xF3;n biom&#xE9;dica. Un inserto microfabricated para placas multipocillo ha sido desarrollado para controlar m&#xE1;s eficazmente la concentraci&#xF3;n de ox&#xED;geno temporal y espacial de los fen&#xF3;menos fisiol&#xF3;gicos modelo mejor encontradas in vivo. La plataforma consta de un inserto de polidimetilsiloxano que los nidos en una placa est&#xE1;ndar multipocillos y sirve como una red de gas pasivo microfluidos con una membrana permeable al gas destinado para modular el suministro de ox&#xED;geno a las c&#xE9;lulas adherentes. El tiempo de equilibrado es del orden de minutos y una amplia variedad de perfiles de ox&#xED;geno puede alcanzarse basado en el dise&#xF1;o del dispositivo, tales como el perfil c&#xED;clico alcanzado en este estudio, e incluso gradientes de ox&#xED;geno para imitar los encontrados in vivo. Las consecuencias biol&#xF3;gicas propias de la entrega de ox&#xED;geno del dispositivo se han confirmado en modelos celulares a trav&#xE9;s de un ensayo de proliferaci&#xF3;n y el an&#xE1;lisis occidental de la regulaci&#xF3;n al alza de la transcripci&#xF3;n inducible por hipoxia 1 alfa del factor. Estos experimentos sirven como una demostraci&#xF3;n de la plataforma como una herramienta viable para aumentar el rendimiento experimental y permiten nuevas posibilidades de experimentaci&#xF3;n en cualquier laboratorio de investigaci&#xF3;n biom&#xE9;dica.

La oxigenaci&#xF3;n de modulaci&#xF3;n temporal y espacial m&#xE1;s adherentes cultivos celulares

Cnidocysts cnidarian &#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x79BB;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7531;&#x4E8E;&#x8FD0;&#x8F7D;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x4F20;&#x9012;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;Cnidocyst &#x53EF;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x53EF;&#x7A7F;&#x6234;&#x5F0F;&#x836F;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;Cnidocysts &#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x6709;&#x7535;&#x6C14;&#x3001; &#x673A;&#x68B0;&#x548C;&#x5316;&#x5B66;&#x9014;&#x5F84;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x653E;&#x7535;&#x3002;Cnidocysts &#x4ECE;&#x8461;&#x8404;&#x7259;&#x7537;&#x5B50; O&#39; &#x6218;&#x4E89;&#x6C34;&#x6BCD; (&#x5DE8;&#x578B;&#x9178;) &#x5206;&#x79BB;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x62E5;&#x6709;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x7EBF;&#x7A0B;&#x3001; &#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x901A;&#x8FC7;&#x786C;&#x9C7C;&#x9CDE;&#x7A7F;&#x523A;&#x548C;&#x591A;&#x5E74;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;

&#x7A7F;&#x523A;&#x529B;&#x5B66; cnidarian cnidocysts&#xFF1A; &#x81EA;&#x7136;&#x7684;&#x6267;&#x884C;&#x5668;&#x3002;

Cnidocysts isolated from cnidarian organisms are attractive as a drug-delivery platform due to their fast, efficient delivery of toxins. The cnidocyst could be utilized as the means to deliver therapeutics in a wearable drug-delivery patch. Cnidocysts have been previously shown to discharge upon stimulation via electrical, mechanical, and chemical pathways. Cnidocysts isolated from the Portuguese Man O' War jellyfish (Physalia physalis) are attractive for this purpose because they possess relatively long threads, are capable of puncturing through hard fish scales, and are stable for years.

Puncture mechanics of cnidarian cnidocysts: a natural actuator.

Cnidocystes isol&#xE9;s &#xE0; partir d&#x26;#39;organismes cnidaires sont attrayants en tant que plate-forme de distribution de m&#xE9;dicaments en raison de leur livraison rapide et efficace des toxines. Le cnidocyst pourrait &#xEA;tre utilis&#xE9; comme moyen de fournir des traitements dans un portable d&#x26;#39;administration de m&#xE9;dicaments patch. Cnidocystes ont &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment montr&#xE9; pour d&#xE9;charger lors de la stimulation par des voies &#xE9;lectriques, m&#xE9;caniques et chimiques. Cnidocystes isol&#xE9;s &#xE0; partir de l&#x26;#39;homme portugais O &#x26;#39;War m&#xE9;duses (Physalia physalis) sont attrayant &#xE0; cette fin parce qu&#x26;#39;ils poss&#xE8;dent les discussions relativement longues, sont capables de perforer &#xE0; travers des &#xE9;cailles de poisson durs, et sont stables depuis des ann&#xE9;es.

M&#xE9;canique ponction de cnidocystes cnidaire: un actionneur naturel

Nesselkapseln von Nesselzellen Organismen isoliert sind attraktiv als Drug Delivery Plattform durch ihre schnelle, effiziente Lieferung von Toxinen. Die Cnidocyst k&ouml;nnte genutzt werden, als Mittel zur Therapeutika in eine tragbare Drug Delivery-Patch zu liefern. Nesselkapseln wurden zuvor gezeigt, um auf Anregung &uuml;ber elektrischen, mechanischen und chemischen Wege abzuleiten. Nesselkapseln isoliert von der portugiesischen Man O&#39; War-Qualle (Physalia Physalis) sind attraktiv f&uuml;r diesen Zweck, da sie relativ lange F&auml;den besitzen, durch harte Fischschuppen durchl&ouml;cherte k&ouml;nnen und sind seit Jahren stabil.

Mechanik der Nesselzellen Nesselkapseln Punktion: eine nat&uuml;rliche Bet&auml;tiger.

Cnidocysts isolate da organismi Cnidaria sono attraenti come una piattaforma di consegna della droga a causa della loro consegna veloce, efficiente delle tossine. I cnidocyst potrebbero essere utilizzati come mezzo per fornire terapie in una patch indossabile di consegna della droga. Cnidocysts hanno dimostrato in precedenza di scarico dopo stimolazione tramite vie elettriche, meccaniche e chimiche. Cnidocysts isolato da Medusa portoghese Man o &#39; War (physalis Physalia physalis) sono attraenti per questo scopo perch&eacute; possiedono relativamente lunghe discussioni, sono in grado di perforare attraverso dure squame e sono stabili per anni.

Foratura meccanica di cnidocysts Cnidaria: un attuatore naturale.

&#x523A;&#x80DE;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Cnidocysts&#x306F;&#x6BD2;&#x7D20;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x914D;&#x4FE1;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x7269;&#x9001;&#x9054;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x3067;&#x3059;&#x3002; cnidocyst&#x306F;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A2;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x85AC;&#x7269;&#x9001;&#x9054;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Cnidocysts&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x653E;&#x96FB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EB;&#x30C8;&#x30AC;&#x30EB;&#x4EBA;O&#x6226;&#x4E89;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B2;&#xFF08;&#x30AB;&#x30C4;&#x30AA;&#x30CE;&#x30A8;&#x30DC;&#x30B7;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;Cnidocysts&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9577;&#x3044;&#x306E;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30CF;&#x30FC;&#x30C9;&#x9B5A;&#x306E;&#x9C57;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7A7F;&#x523A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5E74;&#x9593;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x523A;&#x80DE;&#x52D5;&#x7269;Cnidocysts&#x306E;&#x7A7F;&#x523A;&#x529B;&#x5B66;&#xFF1A;&#x30CA;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30EB;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;

Cnidocysts cnidarian &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC30;&#xB2EC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC804;&#xB2EC; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. Cnidocyst &#xD328;&#xCE58;&#xB97C; &#xCC29;&#xC6A9; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. Cnidocysts &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC804;&#xAE30;, &#xAE30;&#xACC4; &#xBC0F; &#xD654;&#xD559; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBC29;&#xC804; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xB974;&#xD22C;&#xAC08;&#xC5B4; &#xB0A8;&#xC790; &#xC624; &#xC804;&#xC7C1; &#xD574;&#xD30C;&#xB9AC; (Physalia physalis)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; Cnidocysts &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE34; &#xC2A4;&#xB808;&#xB4DC;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;, puncturing &#xD558;&#xB4DC; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xBE44;&#xB298;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xB144;&#xAC04;&#xC774; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xB9E4;&#xB825;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD391;&#xD06C; cnidarian cnidocysts&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;: &#xC790;&#xC5F0; &#xC561;&#xCD94;&#xC5D0;&#xC774;&#xD130;.

Cnidocysts aisladas de organismos cnidarian son atractivos como una plataforma de entrega de drogas debido a su entrega r&#xE1;pida y eficiente de las toxinas. El cnidocyst podr&#xED;a ser utilizado como el medio para entregar la terap&#xE9;utica en un port&#xE1;til de distribuci&#xF3;n del f&#xE1;rmaco del parche. Cnidocysts han demostrado previamente para cumplir con la estimulaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de v&#xED;as de conducci&#xF3;n el&#xE9;ctrica, mec&#xE1;nica y qu&#xED;mica. Cnidocysts aisladas a partir de la Segunda Guerra del hombre portugu&#xE9;s O &#x26;#39;medusas (Physalia physalis) son atractivos para este fin debido a que poseen temas relativamente largos, son capaces de perforar a trav&#xE9;s de escalas de peces duros, y son estables durante a&#xF1;os.

Mec&#xE1;nica de la puntura de Cnidocysts Cnidarios: un actuador Natural

&#x6C27;&#x6C14;&#x662F;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8DEF;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x4F46;&#x5141;&#x8BB8;&#x4F53;&#x5916;&#x6C27;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x8BBE;&#x5907;&#x4E0D;&#x80FD;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x8BB8;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x591A;&#x4E95;&#x683C;&#x5F0F;&#x7684;&#x8D85;&#x5FAE;&#x578B;&#x63D2;&#x5165;&#x5DF2;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E95;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x5168;&#x7403;&#x5B75;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x6C14;&#x4F53;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x5E73;&#x53F0;&#x7531;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7; (PDMS) &#x63D2;&#x5165;&#x5230;&#x6807;&#x51C6; multiwell &#x5DE2;&#x677F;&#x5E76;&#x7528;&#x4F5C;&#x6C14;&#x4F53;&#x6E17;&#x900F;&#x819C;&#x7684;&#x88AB;&#x52A8;&#x7F51;&#x7EDC;&#x65E8;&#x5728;&#x5411;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6C14;&#x4F53;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x521D;&#x6B65;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x63D2;&#x5165;&#x662F;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x63A7;&#x5236;&#x5728;&#x4E95;&#x7684;&#x5747;&#x8861;&#x65F6;&#x95F4;&#x5728;&#x51E0;&#x5206;&#x949F;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4F20;&#x7EDF;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5C0F;&#x65F6;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6C27;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8BBE;&#x5907;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7B49;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x7684;&#x6C27;&#x6C14;&#x6D53;&#x5EA6;&#x751A;&#x81F3;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x6765;&#x6A21;&#x4EFF;&#x90A3;&#x4E9B;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F53;&#x5185;&#x66F4;&#x591A;&#x4EFF;&#x751F;&#x8702;&#x7A9D;&#x6A21;&#x578B;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x6C27;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;

&#x591A;&#x4E95;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x677F;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C27;&#x6C14;&#x6D53;&#x5EA6;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x88C5;&#x7F6E;&#x3002;

Oxygen is a key modulator of many cellular pathways but current devices permitting in vitro oxygen modulation fail to meet the needs of many researchers. In this study, a microfabricated insert for multiwell formats has been developed to control the gas concentration of each well independent of the global incubator's condition. The platform consists of a polydimethylsiloxane (PDMS) insert that nests into a standard multiwell plate and serves as a passive network with a gas permeable membrane aimed to deliver gas to adherent cell cultures. Preliminary data demonstrate that the insert is effective in controlling the oxygen concentration at the cell surface inside a well with equilibration times in minutes rather than hours for conventional technologies. A wide variety of oxygen profiles can be attained based on the device design, such as the cyclic profile achieved in this study, and even gradients in local oxygen concentration to mimic those found in vivo for more biomimetic cellular models.

Device for the control of oxygen concentration in multiwell cell culture plates.

L&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne est un modulateur cl&#xE9; de nombreuses voies de signalisation cellulaire, mais les dispositifs actuels permettant la modulation d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne in vitro ne parviennent pas &#xE0; r&#xE9;pondre aux besoins de nombreux chercheurs. Dans cette &#xE9;tude, un insert microfabriqu&#xE9; pour multipuits formats a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9; pour contr&#xF4;ler la concentration de gaz de chaque puits ind&#xE9;pendante de l&#x26;#39;&#xE9;tat de l&#x26;#39;incubateur mondial. La plate-forme se compose d&#x26;#39;un polydim&#xE9;thylsiloxane (PDMS) insert qui fait son nid dans une plaque standard multi-puits et sert un r&#xE9;seau passif avec une membrane perm&#xE9;able au gaz destin&#xE9; &#xE0; livrer du gaz &#xE0; des cultures de cellules adh&#xE9;rentes. Les donn&#xE9;es pr&#xE9;liminaires montrent que l&#x26;#39;insert est efficace pour contr&#xF4;ler la concentration d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne &#xE0; la surface cellulaire dans un puits avec des temps d&#x26;#39;&#xE9;quilibrage en quelques minutes plut&#xF4;t qu&#x26;#39;en heures pour des technologies conventionnelles. Une grande vari&#xE9;t&#xE9; de profils d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne peut &#xEA;tre atteint sur la base de la conception du dispositif, tel que le profil cyclique atteint dans cette &#xE9;tude, et m&#xEA;me des gradients de concentration en oxyg&#xE8;ne locale d&#x26;#39;imiter ceux trouv&#xE9;s in vivo pour plus de mod&#xE8;les cellulaires biomim&#xE9;tiques.

Dispositif pour le contr&#xF4;le de la concentration d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne dans des plaques multipuits pour culture cellulaire

Sauerstoff ist ein wichtiger Modulator von vielen zellularen Bahnen aber aktuelle Ger&auml;te, die in-vitro-Sauerstoff-Modulation bei sch&ouml;nem nicht den Bed&uuml;rfnissen der viele Forscher. In dieser Studie wurde ein Microfabricated-Einsatz f&uuml;r multiwell-Formate entwickelt, um der Gaskonzentration von jeder gut unabh&auml;ngig von der globalen Inkubator Zustand zu kontrollieren. Die Plattform besteht aus einem Polydimethylsiloxan (PDMS) einf&uuml;gen, die Nester in einer Norm doppelreihig Teller und dient als ein passives Netzwerk mit einer Gas-durchl&auml;ssigen Membran adh&auml;rente Zellkulturen Gas liefern soll. Vorl&auml;ufige Daten zeigen, dass der Einsatz bei der Kontrolle der Sauerstoffkonzentration an der Zelloberfl&auml;che in einen Brunnen mit Gleichgewichtherstellung Zeiten in Minuten statt Stunden f&uuml;r konventionelle Technologien wirksam ist. Eine Vielzahl von Sauerstoff-Profilen kann erreicht werden, basierend auf das Ger&auml;tedesign, wie das zyklische Profil erreicht in dieser Studie, und sogar Farbverl&auml;ufe in lokalen Sauerstoffkonzentration zu denen gefunden in-vivo f&uuml;r weitere biomimetische zellul&auml;re Modelle zu imitieren.

Ger&auml;t zur Bek&auml;mpfung der Sauerstoffkonzentration in multiwell Zellplatten Kultur.

L&#39;ossigeno &egrave; un modulatore chiave di molti percorsi cellulare ma attuali dispositivi che consentono la modulazione di ossigeno in vitro non riescono a soddisfare le esigenze di molti ricercatori. In questo studio, un inserto microfabricated per formati trasportatrici &egrave; stato sviluppato per controllare la concentrazione del gas di ogni bene indipendente della condizione di incubatore globale. La piattaforma &egrave; costituita da un inserto di polidimetilsilossano (PDMS) che nidifica in un pozzetti standard piastra e serve come una rete passiva con una membrana permeabile a gas volti a fornire gas a colture di cellule aderenti. Dati preliminari dimostrano che l&#39;inserto &egrave; efficacia nel controllare la concentrazione di ossigeno alla superficie delle cellule all&#39;interno di un pozzo con tempi di equilibramento in minuti anzich&eacute; ore per tecnologie convenzionali. Una vasta gamma di profili di ossigeno pu&ograve; essere raggiunta basato sul design di dispositivo, come ad esempio il profilo ciclico ottenuto in questo studio e anche gradienti di concentrazione di ossigeno locale di imitare quelli che si trovano in vivo per i modelli di cellulare pi&ugrave; biomimetici.

Dispositivo per il controllo della concentrazione di ossigeno in piastre di coltura cellulare trasportatrici.

&#x9178;&#x7D20;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3067;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306E;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x6E80;&#x305F;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x52A0;&#x5DE5;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5404;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x306B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30AC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x5DE3;&#x304C;&#x63A5;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x30AC;&#x30B9;&#x3092;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x30AC;&#x30B9;&#x900F;&#x904E;&#x819C;&#x3068;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#xFF08;PDMS&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E88;&#x5099;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x633F;&#x5165;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x3088;&#x308A;&#x6570;&#x5206;&#x3067;&#x5E73;&#x8861;&#x5316;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9178;&#x7D20;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x591A;&#x7A2E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A21;&#x5023;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x74B0;&#x72B6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x306F;&#x52FE;&#x914D;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E2D;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x88C5;&#x7F6E;

&#xC0B0;&#xC18C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; &#xC0B0;&#xC18C; &#xBCC0;&#xC870; &#xC804;&#xB958; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC2E4;&#xD328; &#xB9CE;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xC694;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xAC8C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xFE59; &#xC0BD;&#xC785; multiwell &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xD130; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xAC01; &#xC798; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC758; &#xAC00;&#xC2A4; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xD45C;&#xC900; multiwell&#xC5D0; &#xB465;&#xC9C0; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC00;&#xC2A4; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xB3D9; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xBD80;&#xCC29; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; polydimethylsiloxane (PDMS) &#xC0BD;&#xC785;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xBE44; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0BD;&#xC785; &#xAE30;&#xC874; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xC624;&#xD788;&#xB824; &#xBD84;&#xC5D0; &#xD3C9;&#xD615; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC798; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801; &#xC784;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB354; biomimetic &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xBAA8;&#xBC29;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xC131; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB4F1; &#xC7A5;&#xCE58; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Multiwell &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xBC30;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A5;&#xCE58;.

El ox&#xED;geno es un modulador clave de muchas v&#xED;as celulares, pero los dispositivos actuales que permiten la modulaci&#xF3;n de ox&#xED;geno in vitro no cumplen con las necesidades de muchos investigadores. En este estudio, un inserto para microfabricated multipocillos formatos ha sido desarrollada para controlar la concentraci&#xF3;n de gas de cada pozo independiente de la condici&#xF3;n de la incubadora global. La plataforma consta de un polidimetilsiloxano (PDMS) de inserci&#xF3;n que los nidos en una placa est&#xE1;ndar multipocillos y sirve como una red pasiva con una membrana permeable al gas destinada a entregar el gas a cultivos de c&#xE9;lulas adherentes. Los datos preliminares demuestran que el inserto es eficaz para controlar la concentraci&#xF3;n de ox&#xED;geno en la superficie celular dentro de un pozo con tiempos de equilibrio en cuesti&#xF3;n de minutos en lugar de horas para las tecnolog&#xED;as convencionales. Una amplia variedad de perfiles de ox&#xED;geno puede alcanzarse basado en el dise&#xF1;o del dispositivo, tales como el perfil c&#xED;clico alcanzado en este estudio, y gradientes de concentraci&#xF3;n de ox&#xED;geno, incluso en la hora local de imitar las que se encuentran in vivo para modelos celulares m&#xE1;s biomim&#xE9;ticos.

Dispositivo para el control de la concentraci&#xF3;n de ox&#xED;geno en placas multipocillo para cultivo celular

&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x662F;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x548C;&#x4E0E;&#x7F3A;&#x6C27;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x535A;&#x4F0A;&#x767B;&#x5206;&#x5EAD;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x591A;&#x5B54;&#x819C;&#x6CD5;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x770B;&#x5230;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x5171;&#x540C;&#x57F9;&#x517B;&#x5668;&#x76BF;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4F53;&#x5916;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5165;&#x4FB5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x6613;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x7F3A;&#x6C27;&#x5206;&#x5EAD;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4EE5;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x6C27;&#x8303;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4E0D;&#x5E78;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x7CBE;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7CBE;&#x786E;&#x5730;&#x6A21;&#x62DF;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7406;&#x73B0;&#x8C61;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x8D85;&#x5FAE;&#x578B;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7; (PDMS) &#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x9002;&#x5E94;&#x535A;&#x4F0A;&#x767B;&#x5206;&#x5EAD;&#xFF0C;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5145;&#x6C27;&#x6761;&#x4EF6;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x8BBE;&#x5907; equilibrates &#x5230; 1%&#x6C27;&#x6C14;&#x5728;&#x7EA6; 20 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8868;&#x660E;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E24;&#x4E2A;&#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x548C;&#x95F4;&#x6B47;&#x7F3A;&#x6C27;&#x5236;&#x5EA6;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8C;&#x7532;&#x82EF; C &#x8584;&#x819C;&#x9540;&#x819C;&#x7528;&#x6765;&#x9632;&#x6B62;&#x7A7A;&#x6C14;&#x6E17;&#x900F;&#x8FDB;&#x5165;&#x6279;&#x91CF;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7;&#x548C;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4EA7;&#x91CF;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x5747;&#x8861;&#x500D;&#x548C;&#x7EC8;&#x70B9;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x4E19;&#x4E8C;&#x919B;-MD-231 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E73;&#x817A;&#x6D78;&#x6DA6;&#x6027;&#x764C;&#x884C;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x901A;&#x8FC7;&#x535A;&#x4F0A;&#x767B;&#x5206;&#x5EAD;&#x591A;&#x5B54;&#x819C;&#x6C27;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7F3A;&#x6C27;&#x7F16;&#x7801;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x7F3A;&#x6C27;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;0%&#x548C; 21%&#x6C27;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5FAA;&#x73AF;&#x95F4;&#x6B47;&#x6027;&#x4F4E;&#x6C27;&#x5236;&#x5EA6; (IH) &#x90A3;&#x6837; &#xFF08;0-21 %ih)&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; 5 21 %ih &#x5C55;&#x51FA;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x548C;&#x7F3A;&#x6C27;&#x3002;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x653E;&#x6620;&#x8BBE;&#x5907;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x6267;&#x884C;&#x767B;&#x5EAD;&#x4F53;&#x5916;&#x7F3A;&#x6C27;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x66F4;&#x5FEB;&#x5730;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x76EE;&#x524D;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

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Cell migration is a hallmark of cancer cell metastasis and is highly correlated with hypoxia in tumors. The Boyden chamber is a porous membrane-based migration platform that has seen a great deal of use for both in vitro migration and invasion assays due to its adaptability to common culture vessels and relative ease of use. The hypoxic chamber is a current tool that can be implemented to investigate the cellular response to oxygen paradigms. Unfortunately, this method lacks the spatial and temporal precision to accurately model a number of physiological phenomena. In this article, we present a newly developed microfabricated polydimethylsiloxane (PDMS) device that easily adapts to the Boyden chamber, and provides more control over the oxygenation conditions exposed to cells. The device equilibrates to 1% oxygen in about 20 min, thus demonstrating the capabilities of a system for researchers to establish both short-term continuous and intermittent hypoxia regimes. A Parylene-C thin-film coating was used to prevent ambient air penetration through the bulk PDMS and was found to yield improved equilibration times and end-point concentrations. MDA-MD-231 cells, an invasive breast cancer line, were used as a model cell type to demonstrate the effect of oxygen concentration on cell migration through the Boyden chamber porous membrane. Continuous hypoxia downregulated migration of cells relative to the normoxic control, as did an intermittent hypoxia regime (IH) cycling between 0% and 21% oxygen (0-21% IH). However, cells exposed to 5-21% IH exhibited increased migration compared to the other conditions, as well as relative to the normoxic control. The results presented here show the device can be utilized for experiments implementing the Boyden chamber for in vitro hypoxic studies, allowing experiments to be conducted faster and with more precision than currently possible.

Precise control over the oxygen conditions within the Boyden chamber using a microfabricated insert.

La migration cellulaire est une caract&#xE9;ristique de la m&#xE9;tastase des cellules du cancer et est fortement corr&#xE9;l&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;hypoxie dans les tumeurs. La chambre de Boyden est une plate-forme de migration membrane poreuse &#xE0; base qui a vu une grande partie de l&#x26;#39;utilisation &#xE0; la fois pour la migration in vitro et des essais d&#x26;#39;invasion en raison de son adaptabilit&#xE9; &#xE0; des r&#xE9;cipients de culture communes et la facilit&#xE9; relative d&#x26;#39;utilisation. La chambre hypoxique est un outil courant qui peut &#xEA;tre mis en &#x153;uvre pour &#xE9;tudier la r&#xE9;ponse cellulaire aux paradigmes d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne. Malheureusement, cette m&#xE9;thode n&#x26;#39;a pas la pr&#xE9;cision spatiale et temporelle pour mod&#xE9;liser avec pr&#xE9;cision un certain nombre de ph&#xE9;nom&#xE8;nes physiologiques. Dans cet article, nous pr&#xE9;sentons une nouvellement d&#xE9;velopp&#xE9; microfabriqu&#xE9; polydim&#xE9;thylsiloxane (PDMS) dispositif qui s&#x26;#39;adapte facilement &#xE0; la chambre de Boyden, et fournit plus de contr&#xF4;le sur les conditions d&#x26;#39;oxyg&#xE9;nation des cellules expos&#xE9;es &#xE0;. Le dispositif s&#x26;#39;&#xE9;quilibre &#xE0; 1% d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne dans environ 20 min, ce qui d&#xE9;montre les capacit&#xE9;s d&#x26;#39;un syst&#xE8;me pour les chercheurs d&#x26;#39;&#xE9;tablir les deux r&#xE9;gimes &#xE0; court terme l&#x26;#39;hypoxie intermittente et en continu. Un paryl&#xE8;ne-C de couches minces a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour emp&#xEA;cher la p&#xE9;n&#xE9;tration de l&#x26;#39;air ambiant &#xE0; travers la masse de PDMS et a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour donner des temps d&#x26;#39;&#xE9;quilibrage et l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de point final concentrations. MDA-MD-231 cellules, une ligne du sein invasif du cancer, ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s comme un type de cellule mod&#xE8;le pour d&#xE9;montrer l&#x26;#39;effet de la concentration en oxyg&#xE8;ne sur la migration des cellules &#xE0; travers la membrane poreuse chambre de Boyden. Continue la migration de cellules hypoxie r&#xE9;prim&#xE9;e par rapport au contr&#xF4;le normoxique, comme l&#x26;#39;a fait un r&#xE9;gime intermittent hypoxie (IH) &#xE0; v&#xE9;lo entre 0% et 21% d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne (0-21 IH%). Cependant, les cellules expos&#xE9;es &#xE0; IH 5-21% pr&#xE9;sentaient une migration accrue par rapport aux autres conditions, ainsi que par rapport au contr&#xF4;le normoxique. Les r&#xE9;sultats pr&#xE9;sent&#xE9;s ici montrent l&#x26;#39;appareil peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour des exp&#xE9;riences mise en &#x153;uvre de la chambre de Boyden pour des &#xE9;tudes in vitro hypoxiques, permettant de r&#xE9;aliser des exp&#xE9;rimentations plus rapidement et avec plus de pr&#xE9;cision que possible actuellement.

Un contr&#xF4;le pr&#xE9;cis sur les conditions d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne dans la chambre de Boyden utilisation d&#x26;#39;un insert microfabriqu&#xE9;

Zellmigration ist ein Markenzeichen der Zelle Krebsmetastase und ist stark mit Hypoxie in Tumoren korreliert. Boyden Kammer ist eine por&ouml;se Membran-basierten Migrations-Plattform, die ein hohes Ma&szlig; an Einsatz f&uuml;r beide in-vitro-Migration und Invasion Assays aufgrund seiner Anpassungsf&auml;higkeit an gemeinsamen Kulturgef&auml;&szlig;e und relative Benutzerfreundlichkeit gesehen hat. Die Hypoxie Kammer ist eine aktuelle Tool, die implementiert werden kann, um die zellul&auml;re Reaktion auf Sauerstoff Paradigmen zu untersuchen. Leider fehlt diese Methode die r&auml;umliche und zeitliche Genauigkeit um eine Reihe von physiologischen Ph&auml;nomene genau zu modellieren. In diesem Artikel pr&auml;sentieren wir ein neu entwickeltes Microfabricated Polydimethylsiloxan (PDMS)-Ger&auml;t, das einfach passt sich an die Boyden Kammer und bietet mehr Kontrolle &uuml;ber die Sauerstoffversorgung Bedingungen Zellen ausgesetzt. Das Ger&auml;t aufgezwungenen zu 1 % Sauerstoff in ca. 20 min, damit demonstrieren die F&auml;higkeiten eines Systems f&uuml;r die Forscher sowohl kurzfristige kontinuierliche und intermittierende Hypoxie-Regime herstellen. Parylene-C D&uuml;nnfilm-Beschichtung wurde verwendet, um das Eindringen von Luft durch den Gro&szlig;teil PDMS verhindert und wurde festgestellt, dass verbesserte Gleichgewichtherstellung Zeiten und Endpunkt Konzentrationen ergeben. MDA-MD-231-Zellen, eine invasive Brust-Krebs-Leitung, dienten als einen Modelltyp Zelle, um den Effekt der Sauerstoffkonzentration auf Zellmigration durch die Boyden Kammer por&ouml;se Membran zu demonstrieren. Kontinuierliche Hypoxie Downregulated Migration von Zellen im Verh&auml;ltnis zu den Normoxic zu steuern, wie eine intermittierende Hypoxie Regime (IH) Radfahren zwischen 0 % und 21 % Sauerstoff (0-21 % IH). Jedoch stellte Zellen ausgesetzt 5-21 % IH st&auml;rkere Migration im Vergleich zu anderen Bedingungen, sowie relativ zum Steuerelement Normoxic. Hier pr&auml;sentiert die Ergebnisse anzeigen, die das Ger&auml;t f&uuml;r Experimente, die Umsetzung der Boyden Kammer f&uuml;r in-vitro-Studien Hypoxie, die Versuche schneller durchgef&uuml;hrt werden und mit mehr Pr&auml;zision als derzeit m&ouml;glich genutzt werden kann.

Pr&auml;zise Kontrolle &uuml;ber die Sauerstoff-Bedingungen innerhalb der Boyden Kammer mit einen Microfabricated-Einsatz.

Migrazione cellulare &egrave; un segno distintivo di metastasi delle cellule di cancro ed &egrave; altamente correlato con ipossia nei tumori. La camera di Boyden &egrave; una piattaforma di migrazione basata su membrana porosa che ha visto una grande quantit&agrave; di uso per entrambi saggi in vitro di migrazione e invasione per la sua adattabilit&agrave; alle navi di cultura comune e la relativa facilit&agrave; d&#39;uso. La camera ipossica &egrave; uno strumento corrente che pu&ograve; essere implementato per indagare la risposta cellulare a paradigmi di ossigeno. Purtroppo, questo metodo manca la precisione spaziale e temporale per modellare con precisione una serie di fenomeni fisiologici. In questo articolo, vi presentiamo un dispositivo di nuova concezione microfabricated polidimetilsilossano (PDMS) che facilmente si adatta alla camera di Boyden e fornisce un controllo pi&ugrave; le condizioni di ossigenazione esposti alle cellule. Il dispositivo equilibra al 1% di ossigeno in circa 20 min, dimostrando cos&igrave; la capacit&agrave; di un sistema per i ricercatori di stabilire sia regimi di ipossia intermittente e continuo a breve termine. Un rivestimento di film sottile Parylene-C &egrave; stato usato per impedire la penetrazione di aria attraverso la massa PDMS e fu trovato a rendimento migliore equilibratura tempi e concentrazioni di punto finale. Cellule MDA-MD-231, una linea di cancro mammario invasivo, sono state utilizzate come un tipo di cellula modello per dimostrare l&#39;effetto della concentrazione di ossigeno sulla migrazione delle cellule attraverso la membrana porosa camera di Boyden. Migrazione downregolata continuo ipossia delle cellule rispetto al normossiche controllare, come ha fatto un regime di ipossia intermittente (IH) in bicicletta tra 0% e 21% di ossigeno (0-21% IH). Tuttavia, le cellule esposte a 5-21% IH esposto rispetto alle altre condizioni, come pure rispetto al controllo normossiche aumento della migrazione. I risultati presentati qui visualizza che il dispositivo pu&ograve; essere utilizzato per esperimenti di attuazione della camera di Boyden per studi in vitro ipossico, permettendo che gli esperimenti devono essere effettuati pi&ugrave; velocemente e con maggior precisione rispetto attualmente possibili.

Controllo preciso delle condizioni di ossigeno all&#39;interno della camera di Boyden utilizzando un inserto microfabricated.

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MDA-MD-231&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x6D78;&#x6F64;&#x6027;&#x4E73;&#x764C;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;Boyden&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x591A;&#x5B54;&#x8CEA;&#x819C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x904A;&#x8D70;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x9178;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6B63;&#x5E38;&#x9178;&#x7D20;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;0&#xFF05;&#x3068;21&#xFF05;&#x9178;&#x7D20;&#xFF08;0&#x304B;&#x3089;21&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;IH&#xFF09;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x65AD;&#x7D9A;&#x7684;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x75C7;&#x306E;&#x653F;&#x4F53;&#xFF08;IH&#xFF09;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x767E;&#x5206;&#x306E;5&#x304B;&#x3089;21&#x306B;&#x66DD;&#x9732;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IH&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x9178;&#x7D20;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3067;&#x304B;&#x3064;&#x8FC5;&#x901F;&#x306B;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;Boyden&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x5FAE;&#x7D30;&#x52A0;&#x5DE5;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30DC;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x5185;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;

&#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xACFC; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xC774;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00;. Boyden &#xCC54;&#xBC84; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xBAA8;&#xB450; &#xCCB4; &#xC678; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xACFC; &#xCE68;&#xACF5; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654; &#xC120;&#xBC15;&#xC5D0;&#xC758; &#xC801;&#xC751;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xC6A9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xC0C1;&#xB300; &#xBCF8; &#xB2E4;&#xACF5;&#xC131; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAE30;&#xBC18; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hypoxic &#xCC54;&#xBC84; &#xC0B0;&#xC18C; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xC751;&#xB2F5; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD604;&#xC7AC; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD88;&#xD589; &#xD558; &#xAC8C;&#xB3C4;,&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD604;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD558; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4; &#xBD80;&#xC871; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC27D;&#xAC8C; Boyden &#xCC54;&#xBC84;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC870;&#xAC74; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC8C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB41C; &#xB41C; &#xFE59; polydimethylsiloxane (PDMS) &#xC7A5;&#xCE58; &#xC18C;&#xAC1C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC790; &#xBAA8;&#xB450; &#xB2E8;&#xAE30; &#xC5F0;&#xC18D; &#xBC0F; &#xAC04;&#xD5D0; hypoxia &#xC815;&#xAD8C; &#xC218;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC57D; 20 &#xBD84;&#xC5D0; 1% &#xC0B0;&#xC18C;&#xB97C; &#xC7A5;&#xCE58; equilibrates. Parylene C &#xBC15;&#xB9C9; &#xCF54;&#xD305; &#xB300;&#xB7C9; PDMS &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xACF5;&#xAE30; &#xCE68;&#xD22C;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBC0F; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD3C9;&#xD615; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xB05D;&#xC810; &#xB18D;&#xB3C4;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. MDA-MD-231 &#xC140;, &#xCE68; &#xC724; &#xC131; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xC120; Boyden &#xCC54;&#xBC84; &#xB2E4;&#xACF5;&#xC131; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC18C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB378; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Normoxic &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC140;&#xC758; &#xC5F0;&#xC18D; hypoxia downregulated &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC81C;&#xC5B4;, &#xAC04;&#xD5D0;&#xC801;&#xC778; hypoxia &#xC815;&#xAD8C; (IH) 0%&#xC640; 21% &#xC0B0;&#xC18C; &#xC0AC;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xB9C1; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; (0-21 %ih). &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC140; 5 ~ 21 %ih &#xB178;&#xCD9C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; normoxic &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC7A5;&#xCE58; &#xAD6C;&#xD604; Boyden &#xCC54;&#xBC84; &#xBE68;&#xB9AC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; hypoxic &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD604;&#xC7AC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC815;&#xBC00; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC774;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xFE59; &#xC0BD;&#xC785;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Boyden &#xCC54;&#xBC84; &#xB0B4; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Migraci&#xF3;n celular es una caracter&#xED;stica de la met&#xE1;stasis del c&#xE1;ncer de c&#xE9;lulas y est&#xE1; altamente correlacionado con la hipoxia en los tumores. La c&#xE1;mara de Boyden es una membrana porosa plataforma basada en la migraci&#xF3;n que se ha visto una gran cantidad de uso, tanto para la migraci&#xF3;n in vitro y los ensayos de invasi&#xF3;n, debido a su adaptabilidad a los recipientes de cultivo comunes y la relativa facilidad de uso. La c&#xE1;mara hip&#xF3;xica es una herramienta actual que puede ser implementado para investigar la respuesta celular a los paradigmas de ox&#xED;geno. Desafortunadamente, este m&#xE9;todo carece de la precisi&#xF3;n espacial y temporal para modelar con precisi&#xF3;n una serie de fen&#xF3;menos fisiol&#xF3;gicos. En este art&#xED;culo se presenta un nuevo desarrollo microfabricated polidimetilsiloxano (PDMS), dispositivo que se adapta f&#xE1;cilmente a la c&#xE1;mara de Boyden, y proporciona un mayor control sobre las condiciones de oxigenaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas expuestas. El dispositivo se equilibra a un 1% de ox&#xED;geno en unos 20 minutos, lo que demuestra las capacidades de un sistema para que los investigadores a establecer dos reg&#xED;menes de hipoxia a corto plazo continuas e intermitentes. Un Parileno-C de pel&#xED;cula delgada de revestimiento se utiliza para prevenir la penetraci&#xF3;n del aire ambiente a trav&#xE9;s de la mayor parte de PDMS y se encontr&#xF3; que producen tiempos mejorados de equilibrado y concentraciones de punto final. MDA-MD-231, una l&#xED;nea de c&#xE9;lulas de c&#xE1;ncer de mama invasivo, se utilizaron como un tipo de c&#xE9;lula modelo para demostrar el efecto de la concentraci&#xF3;n de ox&#xED;geno en la migraci&#xF3;n celular a trav&#xE9;s de la membrana porosa c&#xE1;mara de Boyden. Continua la migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas de la hipoxia downregulated en relaci&#xF3;n con el control de normoxic, al igual que un r&#xE9;gimen intermitente de hipoxia (IH) en bicicleta entre el 0% y el 21% de ox&#xED;geno (0-21 IH%). Sin embargo, las c&#xE9;lulas expuestas a 5-21% IH exhibi&#xF3; aumento de la migraci&#xF3;n en comparaci&#xF3;n con las otras condiciones, as&#xED; como en relaci&#xF3;n con el control norm&#xF3;xico. Los resultados presentados aqu&#xED; muestran el dispositivo puede ser utilizado para los experimentos de la aplicaci&#xF3;n de la c&#xE1;mara de Boyden para estudios in vitro hip&#xF3;xicas, permitiendo experimentos para llevar a cabo m&#xE1;s r&#xE1;pidamente y con mayor precisi&#xF3;n que en la actualidad es posible.

Shawn Oppegard

Bioengineering

University of Illinois

Fabrication and Operation of an Oxygen Insert for Adherent Cellular Cultures