microarray-analysis-for-saccharomyces-cerevisiae

Microarray Analysis for <em>Saccharomyces cerevisiae</em>

In this protocol, gene expression in yeast (Saccharomyces cerevisiae) is changed after exposure to oxidative stress induced by the addition of hydrogen ...

The University of Vermont

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&#x57FA;&#x56E0;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8111;&#x52A8;&#x8109;&#x540E;&#x76D0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x9AD8;&#x8840;&#x538B;&#x75C5;&#x53D7;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D27;&#x5F20;&#x7D20; II&#x3001; JunB&#x3001; &#x548C; CREB&#x3002;

Although changes in gene expression are necessary for arterial remodeling during hypertension, the genes altered and their mechanisms of regulation remain uncertain. The goal of this study was to identify cerebral artery genes altered by hypertension and define signaling pathways important in their regulation. Intact cerebral arteries from Dahl salt-sensitive normotensive and hypertensive high-salt (HS) rats were examined by immunostaining, revealing an increased phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) and expression of the proliferative marker Ki-67 in arteries from hypertensive animals. Arterial RNA analyzed by microarray and validated with RT-quantitative PCR revealed that jun family member junB and matricellular genes plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) and osteopontin (OPN) were significantly overexpressed in HS arteries. Fisher exact test and annotation-based gene subsets showed that genes upregulated by Jun and Ca(2+)/cAMP-response element-binding protein (CREB) were overrepresented. A model of cultured rat cerebrovascular smooth muscle cells was used to test the hypothesis that angiotensin II (ANG II), JunB, and CREB are important in the regulation of genes identified in the rat hypertension model. ANG II induced a transient induction of junB and a delayed induction of PAI-1 and OPN mRNA levels, which were reduced by ERK inhibition with U-0126. Silencing junB using small-interfering RNA reduced mRNA levels of OPN but not PAI-1. The silencing of CREB reduced PAI-1 induction by ANG II but enhanced the transcription of OPN. Together, these results suggest that salt-induced hypertensive disease promotes changes in matricellular genes that are stimulated by ANG II, regulated by ERK, and selectively regulated by JunB and CREB.

Genes overexpressed in cerebral arteries following salt-induced hypertensive disease are regulated by angiotensin II, JunB, and CREB.

Bien que les changements dans l&#39;expression des g&egrave;nes sont n&eacute;cessaires pour un remodelage art&eacute;riel au cours de l&#39;hypertension, les g&egrave;nes alt&eacute;r&eacute;s et leurs m&eacute;canismes de r&egrave;glement demeurent incertaines. L&#39;objectif de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;identifier les g&egrave;nes de l&#39;art&egrave;re c&eacute;r&eacute;brale alt&eacute;r&eacute;es par l&#39;hypertension art&eacute;rielle et de d&eacute;finir des voies de signalisation importantes dans leur r&egrave;glement. Les art&egrave;res c&eacute;r&eacute;brales intactes de Dahl sensibles au sel hypertendus et normotendus forte teneur en sel (HS) rats ont &eacute;t&eacute; examin&eacute;s par immunomarquage, r&eacute;v&eacute;lant une phosphorylation accrue d&#39;extracellulaire signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) et l&#39;expression du marqueur de prolif&eacute;ration Ki-67 dans les art&egrave;res des animaux hypertensifs. RNA art&eacute;riel analys&eacute;s par microarray et valid&eacute;s avec quantitative RT PCR a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que jun membre de la famille junB et prot&eacute;ines g&egrave;nes PAI-1 (PAI-1) et ost&eacute;opontine (OPN) &eacute;taient significativement surexprim&eacute;s dans les art&egrave;res de HS. Test exact de Fisher et de sous-ensembles ax&eacute;e sur l&#39;annotation de g&egrave;ne a montr&eacute; que les g&egrave;nes surexprim&eacute;s par Jun et Ca(2+)/cAMP-response element-binding protein (CREB) &eacute;taient surrepr&eacute;sent&eacute;s. Un mod&egrave;le de cellules des muscles lisses vasculaires c&eacute;r&eacute;braux cultiv&eacute;s de rat a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour tester l&#39;hypoth&egrave;se que l&#39;angiotensine II (ANG II), JunB, et CREB sont important dans la r&eacute;gulation des g&egrave;nes identifi&eacute;s dans le mod&egrave;le de l&#39;hypertension chez le rat. L&#39;ANG II a provoqu&eacute; une induction transitoire de junB et une induction retard&eacute;e de PAI-1 et les niveaux d&#39;ARNm de l&#39;OPN, qui ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duites par l&#39;inhibition de ERK avec U-0126. Silencieux junB &agrave; l&#39;aide de petits ARN-r&eacute;duit le taux d&#39;ARNm de l&#39;OPN mais pas de PAI-1. Le silence de CREB r&eacute;duit l&#39;induction de PAI-1 par l&#39;ANG II mais am&eacute;lior&eacute; la transcription de l&#39;OPN. Ensemble, ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la maladie caus&eacute;e par le sel des hypertendus favorise des changements dans des g&egrave;nes de prot&eacute;ines qui sont stimul&eacute;es par l&#39;ANG II, r&eacute;glement&eacute;s par ERK et s&eacute;lectivement r&eacute;glement&eacute;es par JunB et CREB.

G&egrave;nes surexprim&eacute;s dans les art&egrave;res c&eacute;r&eacute;brales suite &agrave; la maladie caus&eacute;e par le sel des hypertendus sont r&eacute;glement&eacute;es par l&#39;angiotensine II, JunB et CREB.

Obwohl Ver&auml;nderungen in der Genexpression notwendig f&uuml;r arterielle Umbau w&auml;hrend der Hypertonie sind, bleiben die Gene ver&auml;ndert und ihre Mechanismen der Verordnung ungewiss. Ziel dieser Studie war es, Hirnarterie Gene ver&auml;ndert durch Bluthochdruck zu identifizieren und definieren Signalwege in ihrer Verordnung wichtig. Intakte Hirnarterien aus Dahl Salz-Sensitive normotensiven und Hypertensive hoch-Salz (HS) Ratten wurden von Paraffinschnitten, offenbart eine erh&ouml;hte Phosphorylierung der extrazellul&auml;re Signal-regulierte Kinase 1/2 (ERK1/2) und Ausdruck der proliferative Markierung Ki-67 in Arterien von Hypertensive Tieren untersucht. Arterielle RNA von Microarray analysiert und &uuml;berpr&uuml;ft mit RT-quantitative PCR ergab, dass jun Familienmitglied JunB und Matricellular Gene Plasminogen Aktivator Inhibitor-1 (PAI-1) und Osteopontin (OPN) deutlich in HS Arterien Pleuramesotheliom waren. Exakter Fisher-Test und Anmerkung-basierte gen Teilmengen zeigte, dass Gene herraufreguliert von Jun und Ca(2+)/Lager-Response Element-Binding Protein (CREB) &uuml;berrepr&auml;sentiert. Ein Modell der kultivierten Ratte zerebrovaskul&auml;re glatten Muskelzellen wurde verwendet, um die Hypothese, dass Angiotensin II (ANG II), JunB, testen und CREB sind wichtig bei der Regulierung der Gene in der Hypertonie-Rattenmodell identifiziert. ANG II induzierte eine transiente Induktion von JunB und eine verz&ouml;gerte Induktion von PAI-1 und OPN mRNA-Stufen, die durch Hemmung der ERK mit U-0126 reduziert wurden. JunB mit klein-Einmischung RNA Silencing reduziert mRNA-Niveaus OPN aber nicht PAI-1. Der Unterdr&uuml;ckung von CREB PAI-1-Induktion durch ANG II reduziert, aber die Transkription von OPN verbessert. Diesen Ergebnissen zufolge zusammen, Salz-induzierte Hypertensive Erkrankung f&ouml;rdert Ver&auml;nderungen in Matricellular Genen, die durch ANG II stimuliert, reguliert durch ERK und selektiv durch JunB und CREB geregelt sind.

Gene Pleuramesotheliom in Hirnarterien Anschluss an Salz-induzierte Hypertensive Krankheit werden durch Angiotensin II, JunB und CREB geregelt.

Anche se i cambiamenti nell&#39;espressione genica sono necessarie per rimodellamento arterioso durante l&#39;ipertensione, i geni alterati e loro meccanismi di regolamento restano incerte. L&#39;obiettivo di questo studio era di identificare geni arteria cerebrale alterate da ipertensione e definire percorsi di segnalazione importante nel loro regolamento. Arterie cerebrali intatte da Dahl salt-sensitive normotensive e ipertesi alta-sale (HS) ratti sono state esaminate da immunostaining, rivelando un&#39;espressione del marcatore proliferativo Ki-67 nelle arterie da animali ipertesi e aumentata fosforilazione della chinasi segnale-regolata extracellulare 1/2 (ERK1/2). Arteriosa RNA analizzati da microarray e convalidati con PCR RT-quantitativa ha rivelato che jun membro della famiglia DonBeo e matricellular geni plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) e osteopontina (OPN) erano significativamente overexpressed in arterie HS. Test esatto di Fisher e sottogruppi basati sull&#39;annotazione genica hanno dimostrato che geni sovraregolati da giu e Ca(2+)/cAMP-response element-binding protein (CREB) erano sovrarappresentati. Un modello delle cellule muscolari lisce cerebrovascolare rat colto &egrave; stato utilizzato per testare l&#39;ipotesi che angiotensina II (ANG II), DonBeo, e CREB sono importanti nella regolazione dei geni identificati nel modello di ratto ipertensione. ANG II indotta un&#39;induzione transitoria di DonBeo ed un&#39;induzione ritardata di PAI-1 e i livelli di mRNA OPN, che sono state ridotte da inibizione ERK con U-0126. Silenziamento DonBeo usando small-interfering RNA ha ridotto i livelli di mRNA di OPN ma non PAI-1. Il silenziamento di CREB ridotta induzione di PAI-1 da ANG II ma migliorata la trascrizione dell&#39;OPN. Insieme, questi risultati suggeriscono che la malattia indotta da sale ipertesi promuove cambiamenti nei geni matricellular che sono stimolati da ANG II, regolamentate da ERK e selettivamente regolamentate da DonBeo e CREB.

Geni overexpressed in arterie cerebrali seguito malattia indotta da sale ipertesi sono regolati da angiotensina II, DonBeo e CREB.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x52D5;&#x8108;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x6642;&#x306B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6539;&#x9020;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5909;&#x66F4;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x4E0D;&#x78BA;&#x304B;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x5927;&#x8133;&#x52D5;&#x8108;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;.&#x30C0;&#x30FC;&#x30EB;&#x98DF;&#x5869;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x6B63;&#x5E38;&#x8840;&#x5727;&#x8005;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x9AD8;&#x5869; (HS) &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x8133;&#x52D5;&#x8108;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1/2 &#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; (ERK1/2) &#x3068;&#x5F0F;&#x5897;&#x6B96;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; Ki 67 &#x52D5;&#x8108;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x52D5;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x3001;RT &#x91CF;&#x7684;&#x306A; PCR &#x3068;&#x691C;&#x8A3C;&#x306E;&#x52D5;&#x8108; RNA jun &#x5BB6;&#x65CF; junB &#x3068; matricellular &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; 1 (PAI-1) &#x3084;&#x30AA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DD;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3; (OPN) HS &#x52D5;&#x8108;&#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CE8;&#x91C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x6F64;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x4EA2;&#x9032;&#x3068; Ca(2+)/&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;-&#x5FDC;&#x7B54;&#x8981;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (CREB) &#x304C;&#x53CE;&#x76E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x305D;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3; II (ANG II) JunB&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;CREB &#x306F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ANG II junB &#x306E;&#x904E;&#x6E21;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x9045;&#x5EF6;&#x8A98;&#x5C0E; PAI-1 &#x3068; U-0126 ERK &#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F; OPN &#x306E; mRNA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C0F;&#x5E72;&#x6E09; RNA &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; junB &#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; OPN &#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;PAI-1 &#x306E; mRNA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CREB &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; PAI-1 &#x8A98;&#x5C0E; ANG II &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x3001;OPN &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x98DF;&#x5869;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; ANG II &#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;ERK &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066; JunB &#x3068; CREB &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B; matricellular &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8133;&#x8840;&#x7BA1;&#x98DF;&#x5869;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C5;&#x3001;&#x6B21;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3; II&#x3001;JunB&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; CREB &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xC911; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xBD88;&#xD655; &#xC2E4;&#xD55C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xACE0;&#xD608;&#xC555;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB300;&#xB1CC; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xD588;&#xB2E4;. Dahl &#xC18C;&#xAE08;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; normotensive &#xBC0F; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xB192;&#xC740; &#xC18C;&#xAE08; (HS) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB300;&#xB1CC; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC744; immunostaining, &#xC99D;&#xAC00; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2C8; 1/2&#xC758; (ERK1/2)&#xC640; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD45C;&#xC2DD; &#xAE30;-67 &#xC2DD; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. Microarray &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC591;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; PCR &#xB3D9;&#xB9E5; RNA 6 &#xC6D4; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; Junb&#xACFC; matricellular &#xC720;&#xC804;&#xC790; plasminogen activator &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;-1 (&#xD30C;&#xC774;-1) &#xBC0F; osteopontin (OPN) HS &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0; overexpressed &#xD06C;&#xAC8C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xD53C;&#xC154; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xC11D; &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; 6 &#xC6D4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC804;&#xC790; upregulated &#xBC0F; Ca(2+)/&#xCEA0;&#xD504;-&#xC751;&#xB2F5; &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CREB) overrepresented &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC950; &#xB1CC;&#xD608;&#xAD00; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; &#xADF8; angiotensin II (&#xC911;&#xC559; II), JunB, &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xACE0; CREB &#xC950; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC559; 2 &#xCC28; &#xC720;&#xB3C4; Junb&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD30C;&#xC774; 1&#xACFC; U-0126&#xC640; ERK &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; OPN mRNA &#xC218;&#xC900; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xB2E4;. JunB &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC785;&#xC744; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC758; OPN &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xD30C;&#xC774; 1 &#xAC10;&#xC18C;. CREB&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xC911;&#xC559; 2 &#xD30C;&#xC774; 1 &#xC720;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; OPN&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xAE08; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658; &#xC559; 2 &#xC138;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xADF9;, ERK, &#xADDC;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Junb&#xC640; CREB&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB418;&#xB294; matricellular &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xB300;&#xB1CC; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC5D0; overexpressed angiotensin II, JunB, CREB&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xC18C;&#xAE08; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;.

Aunque los cambios en la expresi&oacute;n g&eacute;nica son necesarios para el remodelado arterial durante la hipertensi&oacute;n, los genes alterados y sus mecanismos de regulaci&oacute;n siguen siendo inciertas. El objetivo de este estudio era identificar los genes de la arteria cerebral alterados por hipertensi&oacute;n y definir v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n importantes en la regulaci&oacute;n. Arterias cerebrales intactas de Dahl sensibles a la sal normotensas e hipertensas sal (HS) ratas fueron examinadas immunostaining, revelando una mayor fosforilaci&oacute;n de la quinasa regulada por se&ntilde;al extracelular 1/2 (ERK1/2) y la expresi&oacute;n del marcador proliferativo Ki-67 en arterias de animales hipertensos. RNA arterial analizados por microarrays y validado con PCR RT-cuantitativa revel&oacute; que jun familiar junB y matricellular genes plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) y osteopontina (OPN) significativamente se sobreexpresa en arterias HS. Prueba exacta de Fisher y subconjuntos de gene basadas en anotaci&oacute;n demostraron que alza de genes por Jun y prote&iacute;na de uni&oacute;n a elemento de Ca(2+)/campo-respuesta (CREB) fueron representados. Se utiliz&oacute; un modelo de c&eacute;lulas de rata culta cerebrovascular m&uacute;sculo liso para probar la hip&oacute;tesis angiotensina II (ANG II), JunB, y CREB son importantes en la regulaci&oacute;n de los genes identificados en el modelo de hipertensi&oacute;n de la rata. ANG II inducida por una inducci&oacute;n transitoria de junB y una inducci&oacute;n retardada de PAI-1 y los niveles de mRNA OPN, que fueron reducidos por la inhibici&oacute;n de ERK con U-0126. Silenciamiento junB usando RNA peque&ntilde;o de interferencias reducci&oacute;n en los niveles de mRNA de OPN pero no PAI-1. El silenciamiento de CREB reduce la inducci&oacute;n de PAI-1 por la ANG II pero hab&iacute;a mejorada la transcripci&oacute;n de OPN. Juntos, estos resultados sugieren que la enfermedad hipertensiva inducida por sal promueve cambios en los genes de matricellular que son estimulados por la ANG II, por ERK y selectivamente regulados por JunB y CREB.

Genes se sobreexpresa en arterias cerebrales despu&eacute;s de la enfermedad hipertensiva inducida por sal est&aacute;n regulados por la angiotensina II, JunB y CREB.

Metastasi ed invasione di cancro al seno comporta modifiche epiteliali e stromale. Il nostro obiettivo era di delineare lo stroma del ruolo cruciale gioca nella invasione confrontando transcriptomes tra le cellule stromale ed epiteliali nel tessuto normale e il cancro al seno invasivo.

Firme molecolari suggeriscono un ruolo importante per le cellule stromali nello sviluppo del cancro al seno invasivo.

&#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x30FB;&#x8EE2;&#x79FB;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3084;&#x9593;&#x8CEA;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x9593;&#x8CEA;&#x3092;&#x63CF;&#x5199;&#x3059;&#x308B;&#x4FB5;&#x653B;&#x4E2D;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x4FB5;&#x7565;&#x7684;&#x306A;&#x4E73;&#x764C;&#x306E;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306A;&#x3089;&#x3073;&#x306B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x518D;&#x751F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CD;&#x30C1;&#x30E3;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x6027;&#x4E73;&#x7BA1;&#x764C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC720; &#xBC29; &#xC554; &#xCE68;&#xACF5;&#xACFC; &#xC804;&#xC774; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC640; &#xC2E4;&#xC9C8; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC724;&#xACFD;&#xC744; &#xADF8;&#xB9AC; &#xB2E4; &#xCE68;&#xACF5;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xCE68; &#xC724; &#xC131; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; transcriptomes&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xBD84;&#xC790; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; stromal cells &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

Met&aacute;stasis e invasi&oacute;n de c&aacute;ncer de mama implica cambios epiteliales y estromales. Nuestro objetivo era delinear el estroma papel fundamental juega en invasi&oacute;n comparando transcriptomas entre c&eacute;lulas estromales y epiteliales en tejido normal y c&aacute;ncer de mama invasivo.

Firmas moleculares sugieren un papel importante para las c&eacute;lulas del estroma en el desarrollo de c&aacute;ncer de mama invasivo.

&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x4FB5;&#x88AD;&#x548C;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x95F4;&#x8D28;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83; transcriptomes &#x4E73;&#x817A;&#x6D78;&#x6DA6;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x53CA;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5728;&#x5165;&#x4FB5;&#x4E2D;&#x5212;&#x5B9A;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x57FA;&#x8D28;&#x53D1;&#x6325;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Breast cancer invasion and metastasis involves both epithelial and stromal changes. Our objective was to delineate the pivotal role stroma plays in invasion by comparing transcriptomes among stromal and epithelial cells in normal tissue and invasive breast cancer.

Molecular signatures suggest a major role for stromal cells in development of invasive breast cancer.

Invasion du cancer du sein et des m&eacute;tastases implique des changements tant &eacute;pith&eacute;liales et stromales. Notre objectif &eacute;tait de d&eacute;limiter le stroma du r&ocirc;le central joue dans invasion en comparant les transcriptomes parmi les cellules stromales et &eacute;pith&eacute;liales dans les tissus normaux et cancer du sein invasif.

Signatures mol&eacute;culaires sugg&egrave;rent un r&ocirc;le majeur pour les cellules du stroma dans le d&eacute;veloppement du cancer du sein invasif.

Brust-Krebs-Invasion und Metastasierung umfasst sowohl epitheliale und Stromale Ver&auml;nderungen. Unser Ziel war es, die entscheidende Rolle-Stroma abzugrenzen Invasion spielt, durch den Vergleich Transcriptomes unter stromal und epitheliale Zellen im normalen Gewebe und invasiven Brustkrebs.

Molekulare Signatur empfehlen eine wichtige Rolle f&uuml;r die stromal Zellen in der Entwicklung von invasiven Brustkrebs.

La mayor&iacute;a de los tumores, incluyendo melanoma, es fenot&iacute;picamente heterog&eacute;nea que contienen diferentes poblaciones celulares con expresi&oacute;n diferencial de los ant&iacute;genos superficiales de la c&eacute;lula como CD133/Prominin-1. Hemos utilizado para purificar subconjuntos celulares CD133(+) y CD133(-) de modelos de melanoma del rat&oacute;n para ARN total de alta calidad para aplicaciones posteriores como el perfil de expresi&oacute;n celular activado por fluorescencia clasificaci&oacute;n tecnolog&iacute;a (FACS). Aplicaci&oacute;n de esta estrategia puede llevar a una resoluci&oacute;n m&aacute;s alta de las transcripciones que son potencialmente importantes para la supervivencia y la funcionalidad de la poblaci&oacute;n de c&eacute;lulas de un c&aacute;ncer en relaci&oacute;n a otro. &Oacute;ptima extracci&oacute;n de ARN despu&eacute;s FACS es com&uacute;n y puede resultar en interpretaciones que impiden el dise&ntilde;o efectivo de nuevas terapias. Aqu&iacute;, describimos una serie de m&eacute;todos que han sido susceptibles al aislamiento de ARN total de alta calidad exitoso despu&eacute;s de fracciones de c&eacute;lulas de melanoma de rat&oacute;n de FACS de CD133(+) y CD133(-).

Aislamiento de ARN total de subconjuntos de melanoma del rat&oacute;n transg&eacute;nico con separaci&oacute;n celular activado por fluorescencia.

The majority of tumors, including melanoma, are phenotypically heterogeneous in that they contain various cell populations with differential expression of cell surface antigens such as CD133/Prominin-1. We have used fluorescence-activated cell sorting (FACS) technology to purify CD133(+) and CD133(-) cellular subsets from mouse melanoma models for high-quality total RNA practical for downstream applications such as expression profiling. Implementation of this strategy can lead to higher resolution of transcripts that are potentially important for the survival and functionality of one cancer cell population relative to another. Suboptimal extraction of RNA after FACS is common and can ultimately result in misinterpretations that impede the effective design of novel therapies. Here, we describe a number of methods that have been amenable to the successful isolation of high-quality total RNA after FACS of CD133(+) and CD133(-) mouse melanoma cell fractions.

Isolation of total RNA from transgenic mouse melanoma subsets using fluorescence-activated cell sorting.

&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6076;&#x6027;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#xFF0C;&#x591A;&#x6570;&#x8868;&#x5F02;&#x7C7B;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5305;&#x542B;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4E0E; CD133/Prominin-1 &#x7B49;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009; (FACS) &#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF;&#x603B; RNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x7B49;&#x4E0B;&#x6E38;&#x5E94;&#x7528;&#x5B9E;&#x9645;&#x51C0;&#x5316;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x6A21;&#x578B;&#x4ECE; CD133(+) &#x548C; CD133(-) &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6218;&#x7565;&#x7684;&#x5B9E;&#x65BD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#xFF0C;&#x662F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x8A8A;&#x672C;&#x548C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x764C;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6B21;&#x4F18;&#x63D0;&#x53D6;&#x7684; RNA &#x540E;&#x5916;&#x5730;&#x8D44;&#x4EA7;&#x7BA1;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x5171;&#x540C;&#x548C;&#x6700;&#x7EC8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x59A8;&#x788D;&#x6709;&#x6548;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x66F2;&#x89E3;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x51E0;&#x79CD;&#x5DF2;&#x9002;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x6210;&#x529F;&#x5206;&#x79BB;&#x51FA;&#x7684;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF;&#x603B; RNA &#x540E;&#x5916;&#x5730;&#x8D44;&#x4EA7;&#x7BA1;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684; CD133(+) &#x548C; CD133(-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x5B50;&#x96C6;&#x603B; RNA &#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;

La majorit&eacute; des tumeurs, y compris le m&eacute;lanome, sont ph&eacute;notypiquement h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne car ils contiennent diverses populations de cellules avec une expression diff&eacute;rentielle des antig&egrave;nes de surface cellulaire par exemple CD133/PROMININE-1. Nous avons utilis&eacute; la fluorescence-lanc&eacute;e de cellules tri technologie (FACS) pour purifier les sous-ensembles cellulaires CD133(+) et CD133(-) de mod&egrave;les de m&eacute;lanome de souris pour l&#39;ARN total de haute qualit&eacute; pour les applications en aval comme le profilage de l&#39;expression. Mise en &oelig;uvre de cette strat&eacute;gie peut mener &agrave; une r&eacute;solution plus &eacute;lev&eacute;e des transcriptions qui sont potentiellement importants pour la survie et les fonctionnalit&eacute;s de la population de cellules d&#39;un cancer par rapport aux autres. Sous-optimale extraction d&#39;ARN apr&egrave;s que FACS est courante et peut entra&icirc;ner en bout de ligne des fausses interpr&eacute;tations qui font obstacle &agrave; l&#39;efficacit&eacute; de la conception de nouvelles th&eacute;rapies. Nous d&eacute;crivons ici un certain nombre de m&eacute;thodes qui ont &eacute;t&eacute; soumis &agrave; la r&eacute;ussite de l&#39;isolement de l&#39;ARN total de haute qualit&eacute; apr&egrave;s FACS de CD133(+) et CD133(-) fractions de cellules de m&eacute;lanome de souris.

Isolement d&#39;ARN total de sous-ensembles de m&eacute;lanome de souris transg&eacute;niques &agrave; l&#39;aide de fluorescence-lanc&eacute;e de cellules tri.

Die meisten Tumoren, Melanom, darunter sind ph&auml;notypisch heterogene, insofern sie verschiedenen Zelle Bev&ouml;lkerungen mit differentiellen Expression der Zelle Oberfl&auml;che Antigene wie CD133/Prominin-1 enthalten. Wir haben Fluoreszenz aktivierte Zelle Sortieren (FACS) Technologie verwendet, um CD133(+) und CD133(-) zellul&auml;re Teilmengen von Melanom Mausmodelle f&uuml;r qualitativ hochwertige Gesamt RNA f&uuml;r downstream-Anwendungen wie Expression profiling praktisch zu reinigen. Umsetzung dieser Strategie kann zu h&ouml;herer Aufl&ouml;sung der Transkripte, die m&ouml;glicherweise wichtig f&uuml;r das &Uuml;berleben und Funktionalit&auml;t eine Krebs-Zellpopulation im Vergleich zu anderen f&uuml;hren. Suboptimale Extraktion von RNA nach FACS h&auml;ufig ist und kann letztlich dazu f&uuml;hren, Fehlinterpretationen, die das effektive Design neuartiger Therapien zu behindern. Hier beschreiben wir eine Reihe von Methoden, die geneigt sein, die erfolgreiche Isolierung hochwertige total RNA nach FACS von CD133(+) und CD133(-) Maus Melanom Zelle Br&uuml;che wurden.

Isolierung von Gesamt-RNA aus transgenen Maus Melanom Teilmengen mit Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung.

La maggior parte dei tumori, tra cui il melanoma, &egrave; fenotipicamente eterogenea in quanto contengono varie popolazioni di cellule con differenziale espressione degli antigeni superficiali quali CD133/Prominin-1. Abbiamo usato cella fluorescenza-attivato l&#39;ordinamento tecnologia (FACS) per purificare sottoinsiemi cellulare CD133(+) e CD133(-) da modelli murini melanoma per alta qualit&agrave; RNA totale pratico per applicazioni a valle come delineamento di espressione. Attuazione di questa strategia pu&ograve; condurre a pi&ugrave; alta risoluzione della trascrizioni che sono potenzialmente importanti per la sopravvivenza e la funzionalit&agrave; della popolazione cellulare uno cancro rispetto a altro. Non ottimale estrazione di RNA dopo FACS &egrave; comune e in ultima analisi pu&ograve; portare a interpretazioni errate che impediscono la progettazione efficacia di nuove terapie. Qui, descriviamo un certo numero di metodi che sono stati suscettibili all&#39;isolamento di RNA totale qualit&agrave; successo dopo frazioni di cella di melanoma mouse da FACS di CD133(+) e CD133(-).

Isolamento di RNA totale da sottoinsiemi di melanoma mouse transgenici mediante fluorescenza-attivato delle cellule l&#39;ordinamento.

&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3; CD133/&#x30D7;&#x30ED;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;-1 &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; CD133(+) &#x304A;&#x3088;&#x3073; CD133(-) &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7DCF; RNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BB;&#x30EB; (FACS) &#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x5B9F;&#x65BD;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684; 1 &#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;FACS &#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x8AA4;&#x89E3;&#x3067;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x7D50;&#x679C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5F8C;&#x306E; RNA &#x306E;&#x6E96;&#x6700;&#x9069;&#x62BD;&#x51FA;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E;&#x7DCF; RNA &#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306E;&#x5206;&#x96E2; FACS &#x306E; CD133(+) &#x3068; CD133(-) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x753B;&#x5F8C;&#x306B;&#x5F93;&#x9806;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x86CD;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7DCF; RNA &#x306E;&#x9694;&#x96E2;&#x3002;

&#xCC28;&#xB3D9; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0; CD133/Prominin-1 &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xB4F1; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; phenotypically &#xC774;&#xC885;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; CD133(+) &#xBC0F; CD133(-) &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD558;&#xC704; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xCD1D; RNA &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xD654; &#xD615;&#xAD11; &#xD65C;&#xC131; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; (FACS) &#xAE30;&#xC220; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC774; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xAD6C;&#xD604; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD55C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. FACS &#xC77C;&#xBC18;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; misinterpretations &#xC18C;&#xC124; &#xC694;&#xBC95;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6C4; RNA&#xC758; &#xCC28;&#xC120; &#xCD94;&#xCD9C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; FACS&#xC758; CD133(+) &#xBC0F; CD133(-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC218; &#xD6C4; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xACE0;&#xAE09; &#xCD1D; RNA &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xAD11;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC140; &#xC815;&#xB82C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xCD1D; RNA &#xACA9;&#xB9AC;.

&#x8DB3;&#x6708;&#x598A;&#x5A20;&#x65E9;&#x5728;&#x751F;&#x6D3B;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x4E00;&#x751F;&#x60A3;&#x4E73;&#x764C;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#x548C;&#x5F71;&#x54CD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6A21;&#x4EFF;&#x5728;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x8DB3;&#x6708;&#x598A;&#x5A20;&#x6216;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x96CC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x548C;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x77ED;&#x671F;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x6765;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;15 3 &#x5C81; mo postpubertal &#x5904;&#x5973; Lewis &#x5927;&#x9F20;&#x88AB;&#x968F;&#x673A;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E09;&#x7EC4;&#xFF1A; &#x63A7;&#x5236; (C)&#x3001; (P)&#x3001; &#x6000;&#x5B55;&#x6216;&#x6FC0;&#x7D20; (H)&#x3002;P &#x7EC4;&#x52A8;&#x7269;&#x672F;&#x540E;&#x8DB3;&#x6708;&#x598A;&#x5A20;&#xFF0C;&#x548C; H &#x7EC4;&#x52A8;&#x7269;&#x4E86;&#x76AE;&#x4E0B;&#x690D;&#x5165;&#x7845;&#x80F6;&#x80F6;&#x56CA; 21 &#x5929;&#x5145;&#x6EE1;&#x4E59;&#x7094;&#x96CC;&#x4E8C;&#x9187;&#x548C; megesterol &#x918B;&#x9178;&#x3002;C &#x548C; P &#x52A8;&#x7269;&#x88AB;&#x690D;&#x5165;&#x6DF1;&#x6C34;&#x80F6;&#x56CA;&#x3002;&#x5929; 21 &#x80F6;&#x56CA;&#x88AB;&#x79FB;&#x9664;&#xFF0C;&#x968F;&#x540E;&#x53EC;&#x5F00;&#x4E86; 49 &#x5929;&#x4E58;&#x65B9;&#x671F;&#x3001; &#x5B89;&#x4E50;&#x6B7B;&#x53CA;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x96C6;&#x5408;&#x3002;&#x5168;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x7528;&#x5927;&#x9F20;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E3A; 2302 &#x9635;&#x5217;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x7684;&#x3002;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; P &#x548C; H &#x6CBB;&#x7597;&#x8BF1;&#x53D1;&#x4E73;&#x817A;&#x4E73;&#x817A;&#x5B9E;&#x8D28;&#x548C;&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x4E0E;&#x57FA;&#x8D28;&#x5230;&#x5B9E;&#x8D28;&#x7684;&#x8F83;&#x9AD8;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; P &#x548C; H &#x6CBB;&#x7597;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BF9;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x5168;&#x7403;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;P &#x548C; H &#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E; C &#x6CBB;&#x7597;&#x901A;&#x5E38;&#x5411;&#x4E0A;&#x548C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x77E9;&#x9635; metallopeptidases (Mmp3&#xFF0C;8 &#x548C; 12&#xFF09;&#x3001; &#x66F4;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x4E73;&#x817A;&#x8868;&#x578B;&#x3001; &#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x3001; &#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7B7E;&#x540D;&#x3002;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x5168;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x540E;&#x6000;&#x5B55;&#x548C;&#x6FC0;&#x7D20;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x5171;&#x540C;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5BF9;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x4E73;&#x817A;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x57FA;&#x672C;&#x6000;&#x5B55;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

A full-term pregnancy early in life reduces lifetime risk of developing breast cancer, and the effect can be mimicked in rodents by full-term pregnancy or short-term treatment with exogenous estrogen and progesterone. To gain insight into the protective mechanism, 15 3-mo-old postpubertal virgin Lewis rats were randomly assigned to three groups: control (C), pregnancy (P), or hormone (H). The P group animals underwent a full-term pregnancy, and H group animals were implanted subcutaneously with silastic capsules filled with ethynyl estradiol and megesterol acetate for 21 days. C and P animals were implanted with sham capsules. On day 21 capsules were removed, which was followed by a 49-day involution period, euthanasia, and mammary tissue collection. Global gene expression was measured using Rat Genome 230.2 Arrays. Histological analysis revealed that P and H treatments induced sustained morphological changes in the mammary gland with significantly increased percentages of mammary parenchyma and stromal tissues and higher ratio of stroma to parenchyma. Transcriptome analysis showed that P and H treatments induced sustained global changes in gene expression in the mammary gland. Analysis of commonly up- and downregulated genes in P and H relative to C treatment showed increased expression of three matrix metallopeptidases (Mmp3, 8, and 12), more differentiated mammary phenotype, enhanced innate and adaptive immunity, and reduced cell proliferation and angiogenic signatures. The sustained morphological and global gene expression changes in mammary tissue after pregnancy and hormone treatment may function together to provide the protective effect against breast cancer.

Mammary gland morphological and gene expression changes underlying pregnancy protection of breast cancer tumorigenesis.

Une grossesse &agrave; terme au d&eacute;but de vie r&eacute;duit le risque de cancer du sein, et l&#39;effet peut &ecirc;tre imit&eacute; chez les rongeurs de grossesse &agrave; terme ou &agrave; court terme traitement exog&egrave;ne d&#39;oestrog&egrave;ne et de progest&eacute;rone. Pour mieux comprendre le m&eacute;canisme de protection, 15 3 mo-pub&egrave;res vierges Lewis rats d&#39;ont &eacute;t&eacute; assign&eacute;s au hasard &agrave; trois groupes : t&eacute;moin (T), grossesse (P) ou hormone (H). Les animaux du groupe P ont subi une grossesse &agrave; terme et animaux groupe H ont &eacute;t&eacute; implant&eacute;s par voie sous-cutan&eacute;e avec des capsules de silastic remplis &eacute;thynyl estradiol et megesterol ac&eacute;tate pendant 21 jours. Les animaux C et P ont &eacute;t&eacute; implant&eacute;s avec des capsules de trompe-l&#39;&oelig;il. Jour 21 capsules ont &eacute;t&eacute; retir&eacute;s, ce qui a &eacute;t&eacute; suivie d&#39;une p&eacute;riode de 49 jours involution, euthanasie et collection de tissu mammaire. L&#39;expression des g&egrave;nes global a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e &agrave; l&#39;aide de r&eacute;seaux de Rat du g&eacute;nome 230.2. L&#39;analyse histologique a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les traitements P et H provoqu&eacute; des changements morphologiques soutenues dans la glande mammaire avec une augmentation significative des pourcentages du parenchyme mammaire et tissus stromales et un ratio plus &eacute;lev&eacute; de stroma au parenchyme. Analyse du transcriptome indiquent que les traitements P et H induisant des changements globaux soutenues dans l&#39;expression des g&egrave;nes dans la glande mammaire. Analyse des g&egrave;nes g&eacute;n&eacute;ralement en amont et r&eacute;prim&eacute;s en P et H par rapport &agrave; C traitement ont montr&eacute; une expression accrue de trois metallopeptidases de matrice (Mmp3, 8 et 12), plus diff&eacute;renci&eacute;s ph&eacute;notype mammaire, am&eacute;lior&eacute; l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e et adaptative et r&eacute;duit les signatures angiog&eacute;nique et de prolif&eacute;ration cellulaire. Les changements d&#39;expression soutenue g&egrave;ne morphologiques et global dans le tissu mammaire apr&egrave;s que traitement de la grossesse et les hormones peut-&ecirc;tre fonctionner ensemble pour fournir l&#39;effet protecteur contre le cancer.

Morphologique de la glande mammaire et des modifications d&#39;expression g&eacute;nique qui sous-tendent la protection de la grossesse de la tumorigen&egrave;se du cancer du sein.

Eine endg&uuml;ltigen Schwangerschaft schon fr&uuml;h im Leben reduziert die Lebensdauer Risiko f&uuml;r die Entwicklung von Brustkrebs und der Effekt kann bei Nagern von endg&uuml;ltigen Schwangerschaft oder kurzfristige Behandlung mit exogenen &Ouml;strogen und Progesteron imitiert werden. Um Einblick in den Schutzmechanismus, 15 3-Mo-alte postpubertal Jungfrau Lewis-Ratten wurden randomisiert in drei Gruppen: Control (C), Schwangerschaft (P) oder Hormon (H). Tiere der P-Gruppe unterzog sich einer endg&uuml;ltigen Schwangerschaft und H Gruppe Tiere wurden mit Silastic-Kapseln gef&uuml;llt mit Ethynyl-&Ouml;stradiol und Megesterol-Acetat 21 Tage unter die Haut implantiert. C und P Tiere wurden mit Schein-Kapseln implantiert. Am Tag wurden 21 Kapseln entfernt, die folgte eine Involution 49-Tage Periode, Euthanasie und Milch-Gewebe Collection. Globalen Genexpression wurde mit Ratten Genom 230.2 Arrays gemessen. Histologische Analyse ergab, dass P &amp;amp; H Behandlungen nachhaltige morphologische Ver&auml;nderungen in der Brustdr&uuml;se mit deutlich erh&ouml;hter Anteil an Mamma Parenchym und stromal Gewebe und h&ouml;heres Verh&auml;ltnis Stroma zu Parenchym induziert. Transkriptom-Analyse zeigte, dass P &amp;amp; H Behandlungen nachhaltige globale Ver&auml;nderungen in der Genexpression in der Brustdr&uuml;se induziert. Analyse der h&auml;ufigsten up- und Downregulated Gene in P &amp;amp; H relativ C Behandlung zeigte erh&ouml;hte Expression von drei Matrix-Metallopeptidases (Mmp3, 8 und 12), mehr differenzierte Mamma Ph&auml;notyp, angeborenen und erworbenen Immunit&auml;t verbessert und reduziert Zelle Proliferation und angiogenen Signaturen. Die anhaltende morphologische und globale Gen Ausdruck &Auml;nderungen im Milch-Gewebe nach Schwangerschaft und Hormon-Behandlung zusammen funktionieren kann, um die sch&uuml;tzende Wirkung gegen Brustkrebs zu bieten.

Brustdr&uuml;se morphologische und Gen-Ausdruck-&Auml;nderungen, die Schwangerschaft Schutz der Brust Krebs Tumorentstehung.

Una gravidanza a termine presto nella vita riduce il rischio di corso della vita di sviluppare il cancro al seno, e l&#39;effetto pu&ograve; essere imitato nei roditori da gravidanza a termine o a breve termine trattamento con estrogeni esogeni e progesterone. Per guadagnare la comprensione del meccanismo protettivo, 15 3-mo-vecchio gli vergini Lewis ratti sono stati assegnati in modo casuale in tre gruppi: controllo (C), gravidanza (P) o ormone (H). Gli animali del gruppo P sub&igrave; una gravidanza a termine e gli animali del gruppo H sono stati impiantati per via sottocutanea con cannule capsule riempite con ethynyl estradiol e megesterol acetato per 21 giorni. Animali C e P sono stati impiantati con capsule di sham. Il giorno 21 capsule sono stati rimossi, che fu seguita da un periodo di 49 giorni di involuzione, eutanasia e raccolta di tessuto mammario. Espressione genica globale &egrave; stata misurata utilizzando Rat Genome 230.2 matrici. L&#39;analisi istologica ha rivelato che P e H trattamenti indotta da cambiamenti morfologici sostenute nella ghiandola mammaria con percentuali significativamente maggiore di parenchima mammario e tessuti stromali e pi&ugrave; alto rapporto di stroma al parenchima. Transcriptome analisi hanno mostrato che trattamenti P e H indotta sostenute globale cambiamenti nell&#39;espressione genica nella ghiandola mammaria. Analisi di geni comunemente up - e in H e P rispetto al trattamento C ha mostrato maggiore espressione di tre metallopeptidases di matrice (Mmp3, 8 e 12), pi&ugrave; differenziato fenotipo mammaria, migliorato l&#39;immunit&agrave; innata e adattiva e ridotto le firme di proliferazione e angiogenic cell. I cambiamenti di espressione genica morfologiche e globale sostenuta nel tessuto mammario dopo trattamento di gravidanza e ormone possa funzionare insieme per fornire l&#39;effetto protettivo contro il cancro al seno.

Ghiandola mammaria morfologica e cambiamenti di espressione genica sottostante protezione gravidanza della tumorigenesi di cancro al seno.

&#x6E80;&#x671F;&#x598A;&#x5A20;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x751F;&#x6D3B;&#x4E73;&#x623F;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x3092;&#x767A;&#x75C7;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x6DAF;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x6E80;&#x671F;&#x598A;&#x5A20;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x77ED;&#x671F;&#x6CBB;&#x7642;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B2;&#x30F3;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x307E;&#x306D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4FDD;&#x8B77;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3078;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;15 3 mo &#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9; postpubertal &#x51E6;&#x5973; Lewis &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B; 3 &#x3064;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;: &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; (C)&#x3001;&#x598A;&#x5A20; (P)&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3; (H)&#x3002;P &#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x6E80;&#x671F;&#x598A;&#x5A20;&#x8853;&#x3057;&#x3001;H &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x52D5;&#x7269;&#x30B7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF; &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB; &#x30A8;&#x30C1;&#x30CB;&#x30EB; &#x30A8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B8; &#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; megesterol &#x9162;&#x9178;&#x3067; 21 &#x65E5;&#x9593;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C &#x3068; P &#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30E3;&#x30E0;&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x79FB;&#x690D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F53;&#x65E5;&#x306F; 49 &#x65E5;&#x9000;&#x7E2E;&#x671F;&#x3001;&#x5B89;&#x697D;&#x6B7B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E73;&#x817A;&#x7D44;&#x7E54;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F; 21 &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x304C;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; 230.2 &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790; P &amp;amp; H &#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E73;&#x817A;&#x4E73;&#x817A;&#x306E;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x3068;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x5272;&#x5408;&#x3068;&#x67D4;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x9593;&#x8CEA;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6BD4;&#x7387;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790; P &amp;amp; H &#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E73;&#x817A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;.P &amp;amp; H C &#x6CBB;&#x7642;&#x57FA;&#x6E96;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068; downregulated &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; 3 &#x3064;&#x306E;&#x884C;&#x5217; metallopeptidases &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0; (Mmp3&#x3001;8&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 12) &#x3088;&#x308A;&#x4E73;&#x817A;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x598A;&#x5A20;&#x3068;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x4E73;&#x304C;&#x3093;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4E88;&#x9632;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x5F8C;&#x306E;&#x4E73;&#x817A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5909;&#x52D5;&#x3002;

&#x4E73;&#x817A;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x598A;&#x5A20;&#x4FDD;&#x8B77;&#x4E73;&#x623F;&#x764C;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC778;&#xC0DD; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE30;&#xAC04; &#xC784;&#xC2E0; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xD3C9;&#xC0DD; &#xC704;&#xD5D8; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE30;&#xAC04; &#xC784;&#xC2E0; &#xB610;&#xB294; &#xC678; &#xC778; &#xC131; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB85C;&#xAC90;&#xACFC; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xB2E8;&#xAE30; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xCE58;&#xB958;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;. &#xBCF4;&#xD638; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74;, 15 3 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xB41C; postpubertal &#xCC98;&#xB140; &#xB8E8;&#xC774;&#xC2A4; &#xC950; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;&#xB85C; &#xC138; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xD588;&#xB2E4;: &#xC81C;&#xC5B4; (C), &#xC784;&#xC2E0; (P), &#xB610;&#xB294; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; (H). P &#xADF8;&#xB8F9; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC218;&#xC220; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE30;&#xAC04; &#xC784;&#xC2E0; &#xD558; &#xACE0; H &#xADF8;&#xB8F9; &#xB3D9;&#xBB3C; subcutaneously 21 &#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; ethynyl estradiol &#xBC0F; megesterol &#xCD08; &#xC0B0; &#xAC00;&#xB4DD;&#xD55C; silastic &#xCEA1;&#xC290;&#xC744; &#xC774;&#xC2DD; &#xD588;&#xB2E4;. C P &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC00;&#xC9DC; &#xCEA1;&#xC290;&#xC744; &#xC774;&#xC2DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; 21 &#xCEA1;&#xC290;&#xC744; 49 &#xC77C; &#xD1F4; &#xD654; &#xAE30;&#xAC04;, &#xC548;&#xB77D;&#xC0AC;, &#xBC0F; &#xC720; &#xBC29; &#xC870;&#xC9C1; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC950; &#xAC8C;&#xB188; 230.2 &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; P&#xC640; H &#xCE58;&#xB8CC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC720;&#xC120; &#xC120; &#xC720; &#xBC29; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xACFC; &#xC2E4;&#xC9C8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBE44;&#xC728; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC758; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xBE44;&#xC728;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBCC0;&#xD654;. Transcriptome &#xBD84;&#xC11D; P&#xC640; H &#xCE58;&#xB8CC; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC720;&#xC120;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. P&#xC640; h C &#xCE58;&#xB8CC; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xB300;-&#xBC0F; downregulated &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; 3 &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metallopeptidases&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DD; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; (Mmp3, 8, &#xBC0F; 12), &#xB354; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC720; &#xBC29; &#xD615;, &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C;&#xACFC; &#xC801;&#xC751; &#xBA74;&#xC5ED; &#xAC15;&#xD654; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; angiogenic &#xC11C;&#xBA85;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC784;&#xC2E0;&#xACFC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD568;&#xAED8; &#xC791;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC720; &#xBC29; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xBCC0;&#xACBD;.

&#xC720;&#xC120; &#xC120; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; tumorigenesis&#xC758; &#xC784;&#xC2E0; &#xBCF4;&#xD638; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xBCC0;&#xACBD;.

Un embarazo de termino temprano en la vida reduce el riesgo de desarrollar c&aacute;ncer de mama, y el efecto puede ser imitado en roedores por el tratamiento a corto plazo con progesterona y estr&oacute;genos ex&oacute;genos o embarazo de termino. Para profundizar en el mecanismo protector, 15 mes-viejo 3 postpubertad Virgen Lewis ratas fueron asignadas aleatoriamente a tres grupos: control (C), embarazo (P) o (H) de la hormona. Los animales del Grupo P experimentaron un embarazo de termino y animales H fueron implantados por v&iacute;a subcut&aacute;nea con silastic c&aacute;psulas llenados con el acetato del estradiol y megesterol ethynyl durante 21 d&iacute;as. C y P animales fueron implantados con c&aacute;psulas de farsa. D&iacute;a 21 c&aacute;psulas fueron quitados, que fue seguido por un per&iacute;odo de 49 d&iacute;as involuci&oacute;n, la eutanasia y la colecci&oacute;n de tejido mamario. Expresi&oacute;n g&eacute;nica global se midi&oacute; con arreglos de discos 230.2 genoma de rata. El an&aacute;lisis histol&oacute;gico revel&oacute; que tratamientos de P &amp;amp; H hab&iacute;an inducida sostenidos cambios morfol&oacute;gicos en la gl&aacute;ndula mamaria con porcentajes significativamente mayores de par&eacute;nquima mamario y tejidos stromal y mayor relaci&oacute;n de estroma al par&eacute;nquima. An&aacute;lisis de transcriptoma demostr&oacute; que los tratamientos de P &amp;amp; H hab&iacute;an inducida sostenidos cambios globales en la expresi&oacute;n g&eacute;nica en la gl&aacute;ndula mamaria. An&aacute;lisis de genes com&uacute;nmente para arriba - y regulada en P y H en relaci&oacute;n con el tratamiento C mostr&oacute; incremento en la expresi&oacute;n de tres metallopeptidases de la matriz (Mmp3, 8 y 12), m&aacute;s distinguido fenotipo mamaria, mejora la inmunidad innata y adaptativa y reducido las firmas de proliferaci&oacute;n y angiog&eacute;nica celular. Los cambios de la expresi&oacute;n del gen morfol&oacute;gica y global sostenido en tejido mamario despu&eacute;s de tratamiento de embarazo y de la hormona puede funcionar juntos para proporcionar el efecto protector contra el c&aacute;ncer de mama.

Gl&aacute;ndula mamaria morfol&oacute;gica y cambios de la expresi&oacute;n del gene subyacente de la protecci&oacute;n del embarazo de la tumorig&eacute;nesis del c&aacute;ncer de mama.

Scott Tighe

Vermont Genetics Network

The University of Vermont

Microarray Analysis for Saccharomyces cerevisiae