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Generation of Multivirus-specific T Cells to Prevent/treat Viral Infections after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplant

Viral infections cause morbidity and mortality in allogeneic hematopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients. We and others have successfully ...

Baylor College of Medicine

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&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5047;&#x7ED3;&#x6838;&#x83CC;&#x8F7D;&#x4F53;&#x75AB;&#x82D7;&#x540C;&#x65F6;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; CD4 &#x548C; CD8 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;

Yersinia pseudotuberculosis employs a type III secretion system for targeting of several virulence factors directly to the cytosol of eukaryotic cells. This protein translocation mechanism mediates the ability of Yersinia to resist phagocytosis and is required for sustained extracellular bacterial replication. In the present study, the Yersinia outer protein E (YopE) was used as a carrier molecule for type III-dependent secretion and translocation of listeriolysin O (LLO) from Listeria monocytogenes. In comparison to wild-type Yersinia, an attenuated Y. pseudotuberculosis yopK-null mutant strain hypertranslocates chimeric YopE/LLO into the cytosol of macrophages, resulting in enhanced major histocompatibility complex (MHC) class I-restricted antigen presentation of an LLO-derived CD8 T-cell epitope. Remarkably, T-cell activation assays also revealed a superior ability of translocated over secreted LLO to induce MHC class II-restricted antigen presentation. These in vitro observations were confirmed after immunization of mice with a single dose of the yopK-null mutant strain. Animals orally inoculated with recombinant Yersinia expressing translocated chimeric YopE/LLO revealed high numbers of gamma interferon-producing LLO-specific CD4 and CD8 T cells. For the first time, it is shown that cytosolic antigen display mediated by an extracellular bacterial carrier vaccine results in simultaneous CD4 and CD8 T-cell priming, conferring protection against an intracellular pathogen.

Attenuated Yersinia pseudotuberculosis carrier vaccine for simultaneous antigen-specific CD4 and CD8 T-cell induction.

Yersinia pseudotuberculosis emploie un syst&egrave;me de s&eacute;cr&eacute;tion de type III pour le ciblage de plusieurs facteurs de virulence directement dans le cytosol des cellules eucaryotes. Ce m&eacute;canisme de translocation des prot&eacute;ines intervient dans la capacit&eacute; des Yersinia &agrave; r&eacute;sister &agrave; la phagocytose et est requis pour la r&eacute;plication bact&eacute;rienne extracellulaire soutenue. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, la prot&eacute;ine ext&eacute;rieure de Yersinia E (YopE) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e comme une mol&eacute;cule porteuse de s&eacute;cr&eacute;tion de type III-d&eacute;pendante et la translocation de la list&eacute;riolysine O (LLO) de Listeria monocytogenes. En comparaison de Yersinia sauvage, un mutant d&#39;yopK null att&eacute;nu&eacute; Y. pseudotuberculosis souche hypertranslocates chim&eacute;rique YopE/LLO dans le cytosol des macrophages, ce qui a am&eacute;lior&eacute; major histocompatibility complexe (MHC) classe j&#39;ai restreint pr&eacute;sentation des antig&egrave;nes d&#39;un &eacute;pitope d&eacute;riv&eacute; de LLO CD8 T-cell. Remarquablement, tests d&#39;activation des lymphocytes T a &eacute;galement r&eacute;v&egrave;lent une capacit&eacute; sup&eacute;rieure de translocation sur LLO s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e pour induire le CMH de classe pr&eacute;sentation des antig&egrave;nes restreints II. Ces observations in vitro ont &eacute;t&eacute; confirm&eacute;es apr&egrave;s l&#39;immunisation de souris avec une dose unique de la souche mutante yopK null. Animaux par voie orale inocul&eacute; recombinant exprimant la translocation YopE/LLO chim&eacute;rique de Yersinia a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un nombre &eacute;lev&eacute; de cellules sp&eacute;cifiques LLO CD4 et CD8 T productrices d&#39;interf&eacute;ron gamma. Pour la premi&egrave;re fois, il est d&eacute;montr&eacute; qu&#39;affichage cytosolique antig&egrave;ne m&eacute;di&eacute;e par un transporteur bact&eacute;riennes extracellulaires vaccin provoque simultan&eacute;ment CD4 et CD8 T d&#39;amor&ccedil;age, qui conf&egrave;re une protection contre un pathog&egrave;ne intracellulaire.

Vaccin Yersinia pseudotuberculosis transporteur att&eacute;nu&eacute; pour induction simultan&eacute;e de CD4 et CD8 T antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques.

Abgeschw&#xE4;chte Yersinia pseudotuberculosis Tr&#xE4;ger Impfstoff zur gleichzeitigen Antigen-spezifischen CD4 und CD8-T-Zell-Induktion.

Pseudotuberculosis Yersinia impiega un sistema di secrezione di tipo III per il targeting dei diversi fattori di virulenza direttamente al cytosol delle cellule eucariotiche. Questo meccanismo di traslocazione di proteine &egrave; necessario per la replicazione batterica extracellulare sostenuta e media la capacit&agrave; di resistere alla fagocitosi Yersinia. Nel presente studio, la proteina esterna di Yersinia E (YopE) &egrave; stata usata come una molecola carrier per secrezione di tipo III-dipendente e la traslocazione del listeriolysin O (LLO) da Listeria monocytogenes. Rispetto al wild-type Yersinia, un attenuato mutante yopK null di Y. pseudotuberculosis strain hypertranslocates chimerico YopE/LLO nel cytosol dei macrofagi, con conseguente maggiore istocompatibilit&agrave; complesso (MHC) classe ho limitato l&#39;antigene presentazione di un epitopo derivato da LLO CD8 T-cell. Notevolmente, dosaggi di attivazione delle cellule T anche rivelato una capacit&agrave; superiore di traslocata su LLO secreta per indurre la classe MHC presentazione antigene II-limitato. Queste osservazioni in vitro sono state confermate dopo immunizzazione di topi con una singola dose del ceppo mutante yopK-null. Animali inoculati per via orale con ricombinante Yersinia esprimendo la traslocazione chimerico YopE/LLO ha rivelato un numero elevato di gamma interferone-LLO specifici CD4 e CD8 T cellule produttrici. Per la prima volta, si &egrave; mostrato che display antigene citosolico mediata da un risultati di vaccino extracellulare vettore batterica in simultanea CD4 e CD8 T-cell priming, che conferisce protezione contro un patogeno intracellulare.

Yersinia pseudotuberculosis vettore vaccino attenuato per simultanea induzione di CD4 e cellule delle CD8 T antigene-specifiche.

&#x4EEE;&#x6027;&#x7D50;&#x6838;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x900F;&#x904E;&#x6A5F;&#x69CB; Yersinia &#x8CAA;&#x98DF;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, Yersinia &#x5916;&#x5074;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; E (&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;) &#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x578B; III &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3; O (LLO) &#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8EE2;&#x6D41;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2;&#x83CC;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5F31;&#x6BD2; Y. &#x985E;&#x7D50;&#x7BC0;&#x75C7; yopK null &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3072;&#x305A;&#x307F; hypertranslocates &#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;/LLO &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x4E3B;&#x8981;&#x7D44;&#x7E54;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x8907;&#x5408; &#xFF08;MHC&#xFF09; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; - &#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A; LLO &#x6D3E;&#x751F; CD8 T &#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3001;T &#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3082;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x80FD;&#x529B;&#x306E; MHC &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x5236;&#x9650;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6CCC; LLO &#x4E0A;, &#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x89B3;&#x5BDF; yopK null &#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E;&#x5358;&#x56DE;&#x6295;&#x4E0E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x306B;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x8EE2;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30A2;&#x30A4;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;/LLO &#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; Yersinia &#x3092;&#x7D4C;&#x53E3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x52D5;&#x7269; &gamma; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x7523;&#x751F; LLO &#x56FA;&#x6709; CD4 &#x304A;&#x3088;&#x3073; CD8 T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6570;&#x5B57;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x30BE;&#x30EB;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x6297;&#x539F;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30A4;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x7D30;&#x83CC;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2; &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x679C;&#x540C;&#x6642;&#x306B; CD4 &#x304A;&#x3088;&#x3073; CD8 T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x540C;&#x6642;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684; CD4 &#x304A;&#x3088;&#x3073; CD8 T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A8;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30A2;&#x985E;&#x7D50;&#x7BC0;&#x75C7;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2; &#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5F31;&#x6BD2;&#x3002;

&#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; pseudotuberculosis &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; cytosol&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC138;&#xADE0; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC678;&#xBD80; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; E (YopE) &#xC720;&#xD615; III&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBD84; &#xBE44; &#xBC0F; Listeria monocytogenes&#xC5D0;&#xC11C; listeriolysin O (LLO)&#xC758; &#xC804; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xBD84;&#xC790;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC1E0; Y. pseudotuberculosis yopK null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; hypertranslocates chimeric YopE/LLO &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, cytosol&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; (MHC) &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xB098; &#xC81C;&#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; CD8 T &#xC138;&#xD3EC; LLO &#xD30C;&#xC0DD; epitope&#xC758; &#xAC15;&#xD654;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBE44; LLO &#xD1B5;&#xD574; translocated&#xC758; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678; &#xAD00;&#xCC30; yopK null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD22C;&#xC5EC; &#xC950;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD6C4; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAD6C;&#xB450;&#xB85C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; translocated chimeric YopE/LLO &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xAC10;&#xB9C8; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xC0DD;&#xC0B0; LLO &#xD2B9;&#xC815; c d 4&#xC640; CD8 T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC22B;&#xC790;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; c d 4&#xC640; CD8 T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C;, &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xBD80;&#xC5EC; cytosolic &#xD56D; &#xC6D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC138;&#xADE0; &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xB098;&#xC640; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAC10;&#xC1E0; &#xD398;&#xC2A4;&#xD2B8; pseudotuberculosis &#xCE90;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xC6D0; c d 4&#xC640; CD8 T &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC704;&#xD55C; &#xBC31;&#xC2E0;.

Yersinia pseudotuberculosis emplea un sistema de secreci&oacute;n tipo III para atacar varios factores de virulencia directamente en el citosol de las c&eacute;lulas eucariotas. Este mecanismo de desplazamiento de la prote&iacute;na interviene en la capacidad de resistir la fagocitosis de Yersinia y es necesaria para la replicaci&oacute;n bacteriana extracelular sostenida. En el presente estudio, se utiliz&oacute; la prote&iacute;na externa de Yersinia E (YopE) como mol&eacute;cula portadora de secreci&oacute;n tipo III-dependiente y translocaci&oacute;n de listeriolysin O (LLO) de Listeria monocytogenes. En comparaci&oacute;n con el salvaje-tipo Yersinia, un mutante de yopK-null atenuado Y. pseudotuberculosis cepa hypertranslocates quim&eacute;rico YopE/LLO en el citosol de los macr&oacute;fagos, dando por resultado mayor presentaci&oacute;n de histocompatibilidad compleja (MHC) clase ant&iacute;geno restringido de un epitopo derivado LLO CD8 T-cell. Notable, ensayos de activaci&oacute;n de c&eacute;lulas T tambi&eacute;n revelaron una capacidad superior de desplazado sobre secretada LLO para inducir MHC de clase presentaci&oacute;n antig&eacute;nica II-restringido. Estas observaciones in vitro confirmaron despu&eacute;s de la inmunizaci&oacute;n de ratones con una sola dosis de la cepa mutante yopK-null. Animales inoculados oralmente con recombinante Yersinia expresando translocado quim&eacute;rica YopE/LLO revelaron n&uacute;meros elevados de gamma interfer&oacute;n-LLO espec&iacute;fico CD4 y CD8 T c&eacute;lulas productoras. Por primera vez, se muestra que pantalla citos&oacute;lica ant&iacute;geno mediada por un resultado de vacuna de extracelular bacteriana portador en simult&aacute;neo CD4 y CD8 T-cell cebado, que confer&iacute;a protecci&oacute;n contra un pat&oacute;geno intracelular.

Vacuna atenuada Yersinia pseudotuberculosis portador contra simult&aacute;nea inducci&oacute;n de CD4 y CD8 T-cell antigen-specific.

(&#x5168;&#x90E8;) &#x6025;&#x6027;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7F3A;&#x9677;&#x4EE5;&#x524D;&#x7814;&#x7A76;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x5316;&#x7597;&#x6240;&#x81F4;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4E4B;&#x8DEF;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x76D1;&#x89C6;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x63D0;&#x9AD8;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x901A;&#x8FC7; CD95 &#x6B7B;&#x4EA1;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x5C0F;&#x5B66;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x524D;&#x4F53;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4ECE;&#x513F;&#x7AE5;&#x6446;&#x8131;&#x4F9D;&#x8D56;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x65B9;&#x5F0F; 2&#xFF1A; &#x6240;&#x6709;&#x4F11;&#x606F;&#x7206;&#x7834;&#x53D7;&#x6765;&#x81EA; CD95 &#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE;&#x7531;&#x4E8E;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F; CD40 &#x7ED3;&#x624E;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C; CD95 &#x4E0A;&#x8C03;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7206;&#x7834;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x50CF;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684; B &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x6301;&#x6297;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x6B64;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x62B5;&#x6297;&#x6D89;&#x53CA;&#x76F4;&#x63A5;&#x5728; CD95 &#x53D7;&#x4F53;&#x4E00;&#x7EA7;&#x4EE3;&#x7406;-8 &#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; c &#x7FFB;&#x8F6C;&#x77ED;&#x4E9A;&#x578B;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;CD40 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x671F;&#x95F4;&#x653E;&#x7EBF;&#x83CC;&#x916E;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x8FD9;&#x4E9B; c &#x7FFB;&#x8F6C;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x4E0A;&#x8C03;&#x548C;&#x89C9;&#x609F;&#x671D; CD95 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x77ED; c &#x7FFB;&#x8F6C;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x6291;&#x5236; CD95 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4E2D;&#x3001; &#x5C0F;&#x5B66;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5; CD40 &#x523A;&#x6FC0;&#x6240;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C3D;&#x7BA1; CD95 &#x7684;&#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

C &#x4E0A;&#x8C03;-&#x7FFB;&#x8F6C; + R CD40 &#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x5904;&#x4E8E;&#x521D;&#x7EA7;&#x524D;&#x4F53; B &#x6240;&#x6709;&#x5173;&#x8054; CD95 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Previous studies on apoptosis defects in acute lymphoblastic leukemia (ALL) have focused on chemotherapy-induced, primarily mitochondrial death pathways. Yet, immunologic surveillance mechanisms including sensitization to apoptotic signals mediated via the death receptor CD95 might contribute to leukemic control. Here, we show that primary B-cell precursor ALL cells from children escape from receptor-dependent cell death in 2 ways: Resting ALL blasts are protected from receptor-mediated apoptosis due to the absence of CD95 surface expression. However, even though CD40 ligation results in up-regulation of CD95, ALL blasts, unlike normal B cells, remain resistant to apoptosis. We show that this apoptosis resistance involves the selective up-regulation of the short isoforms of the caspase-8 inhibitor c-FLIP acting directly at the CD95 receptor level. Treatment with cycloheximide during CD40 activation prevents up-regulation of those c-FLIP isoforms and sensitizes ALL cells toward CD95-mediated apoptosis. We therefore propose that induction of the short c-FLIP isoforms inhibits the onset of CD95-induced apoptosis in primary CD40-stimulated ALL cells despite high CD95 expression.

Up-regulation of c-FLIPS+R upon CD40 stimulation is associated with inhibition of CD95-induced apoptosis in primary precursor B-ALL.

Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures sur les d&eacute;fauts de l&#39;apoptose dans la leuc&eacute;mie lymphoblastique aigu&euml; (LLA) ont mis l&#39;accent sur les voies de la mort induite par la chimioth&eacute;rapie, principalement mitochondriale. Pourtant, les m&eacute;canismes de surveillance immunologique dont la sensibilit&eacute; aux signaux apoptotic m&eacute;di&eacute;s par les r&eacute;cepteurs de mort CD95 pourraient contribuer au contr&ocirc;le leuc&eacute;mique. Ici, nous montrons que pr&eacute;curseur de B-cellule primaire toutes les cellules de l&#39;&eacute;vasion d&#39;enfants de mort cellulaire d&eacute;pendant du r&eacute;cepteur de 2 fa&ccedil;ons : au repos toutes les explosions sont prot&eacute;g&eacute;es contre l&#39;apoptose m&eacute;di&eacute;e par les r&eacute;cepteurs en raison de l&#39;absence d&#39;expression de surface CD95. Cependant, m&ecirc;me si la ligature CD40 aboutit &agrave; une r&eacute;gulation du CD95, toutes les explosions, contrairement aux cellules normales de B, demeurent r&eacute;sistantes &agrave; l&#39;apoptose. Nous montrons que cette r&eacute;sistance &agrave; l&#39;apoptose implique la r&eacute;gulation s&eacute;lective des isoformes de l&#39;inhibiteur de la caspase-8 c-FLIP agissant directement au niveau du r&eacute;cepteur de CD95 courts. Traitement avec le cycloheximide lors de l&#39;activation de CD40 emp&ecirc;che la r&eacute;gulation de ces isoformes c-FLIP et sensibilise toutes les cellules &agrave; l&#39;apoptose induite par le CD95. Nous proposons donc que l&#39;induction des isoformes c-FLIP courts inhibe l&#39;apparition de l&#39;apoptose induite par le CD95 du primaire CD40 stimul&eacute;e par toutes les cellules malgr&eacute; la forte expression de CD95.

R&eacute;gulation de c-FLIPS + R lors de la stimulation de CD40 est associ&eacute; &agrave; l&#39;inhibition de l&#39;apoptose induite par le CD95 dans principal pr&eacute;curseur B-ALL.

Fr&uuml;here Studien &uuml;ber Apoptosis M&auml;ngel in akute lymphoblastische Leuk&auml;mie (ALL) konzentrierten sich auf Chemotherapie-induzierter, in erster Linie mitochondriale Todesbahnen. Doch m&ouml;glicherweise immunologische &Uuml;berwachungsmechanismen, die Sensibilisierung f&uuml;r Apoptotic Signale vermittelt &uuml;ber den Tod-Rezeptor CD95 einschlie&szlig;lich zu leuk&auml;mischen Kontrolle beitragen. Hier zeigen wir die prim&auml;ren B-Zell-Vorl&auml;ufer alle Zellen von Kindern zu entfliehen-Rezeptor-abh&auml;ngige Zellentod auf 2 Arten: ruhen alle Blasten von Rezeptor-vermittelten Apoptose aufgrund des Fehlens von CD95 Oberfl&auml;che Ausdruck gesch&uuml;tzt sind. Obwohl CD40 Verbindung oben-Regulierung von CD95 ergibt, bleiben jedoch alle Blasten, im Gegensatz zu normalen B-Zellen, resistent gegen Apoptose. Wir zeigen, dass diese Apoptose-Resistenz die selektive bis-Verordnung von der kurzen Isoformen der Caspase-8-Inhibitor c-Flip Handeln direkt auf der CD95-Rezeptor-Ebene umfasst. Behandlung mit Cycloheximid w&auml;hrend der CD40 Aktivierung verhindert bis-Verordnung &uuml;ber die c-FLIP-Isoformen und sensibilisiert alle Zellen in Richtung CD95-vermittelter Apoptose. Deshalb schlagen wir vor, dass Induktion von der kurzen c-FLIP-Isoformen der Beginn des CD95-induzierten Apoptose in prim&auml;ren hemmt CD40-stimuliert alle Zellen trotz hoher CD95-Ausdruck.

Bis-Regelung der c-FLIPS + R auf CD40 Stimulierung ist mit Hemmung des CD95-induzierten Apoptose in prim&auml;ren Vorl&auml;ufer B-ALL.

Precedenti studi sui difetti di apoptosi nella leucemia linfoblastica acuta (ALL) si sono concentrati su percorsi di morte indotta dalla chemioterapia, principalmente mitocondriale. Ancora, i meccanismi di sorveglianza immunologica tra cui sensibilizzazione segnali apoptotici mediati attraverso il recettore di morte CD95 potrebbero contribuire al controllo leucemiche. Qui, vi mostriamo quello precursore B-cellula primaria tutte le celle da bambini fuga dalla morte delle cellule del recettore-dipendente in 2 modi: riposo tutti i blasti sono protette dall&#39;apoptosi mediata dal recettore per l&#39;assenza di espressione di superficie di CD95. Tuttavia, anche se CD40 legatura risultati in su-regolazione di CD95, tutti i colpi, a differenza delle normali cellule B, rimangono resistenti all&#39;apoptosi. Dimostriamo che questa resistenza apoptosi coinvolge il su-regolazione selettiva delle isoforme di breve dell&#39;inibitore della caspasi-8 c-FLIP agendo direttamente a livello del recettore CD95. Trattamento con Cicloesimide durante l&#39;attivazione CD40 impedisce l&#39;up-regolazione di tali isoforme c-FLIP e sensibilizza tutte le cellule verso l&#39;apoptosi mediata da CD95. Proponiamo pertanto che induzione di breve isoforme di c-FLIP inibisce l&#39;insorgenza di apoptosi indotta da CD95 primarie CD40-stimolato ALL cells nonostante alta espressione di CD95.

Up-regulation di c-Flip + R dopo stimolazione con CD40 &egrave; associato con inibizione dell&#39;apoptosi indotta da CD95 nel precursore primario B-ALL.

&#x6025;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x82BD;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (ALL) &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5148;&#x884C;&#x7814;&#x7A76;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x8A98;&#x767A;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6B7B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x6B7B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; CD95 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x92ED;&#x654F;&#x5316;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x76E3;&#x8996;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x306E; B &#x7D30;&#x80DE;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x8131;&#x51FA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; 2 &#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x793A;&#x3059;: &#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x7206;&#x767A; CD95 &#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;CD40 &#x7D50;&#x7D2E; CD95 &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38; B &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7206;&#x767A;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306B;&#x6B8B;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x62B5;&#x6297; CD95 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 8 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; c &#x30D5;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30DF;&#x30C9;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E2D; CD40 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x3089; c &#x30D5;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; CD95 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x77ED;&#x3044; c &#x30D5;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; CD95 &#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30FB;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; CD40 &#x523A;&#x6FC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AD8; CD95 &#x5F0F;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3002;

C &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;-&#x53CD;&#x8EE2; + R CD40 &#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3067;&#x3059; CD95 &#x8A98;&#x5C0E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x524D;&#x99C6; B-&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3002;

&#xAE09;&#xC131; &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (ALL)&#xC5D0; apoptosis &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD654;&#xD559;&#xC694;&#xBC95; &#xC720;&#xB3C4;, &#xC8FC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC8FD;&#xC74C; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, sensitization apoptotic &#xC2E0;&#xD638; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; CD95 &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB0B4;&#xBD84;&#xBE44;&#xD559; &#xAC10;&#xC2DC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; leukemic &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; B &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xC870; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC758;&#xC874; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; 2 &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C;: &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD734;&#xC2DD; &#xD3ED;&#xBC1C; CD95 &#xD45C;&#xBA74; &#xC2DD;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; apoptosis &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBE44;&#xB85D; CD40 &#xACB0; &#xCC30; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; cd95&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;, &#xC815;&#xC0C1; B &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD3ED;&#xBC1C; apoptosis&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; apoptosis &#xC800;&#xD56D; &#xD3EC;&#xD568; 8 caspase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; c-&#xD50C;&#xB9BD; CD95 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xC9E7;&#xC740; isoforms&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. CD40 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; cycloheximide &#xD568;&#xAED8; &#xCE58;&#xB8CC; c &#xD50C;&#xB9BD; isoforms &#xADF8;&#xC758; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; sensitizes CD95 &#xC911;&#xC7AC; apoptosis &#xD5A5;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC9E7;&#xC740; c &#xD50C;&#xB9BD; isoforms &#xC720;&#xB3C4; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC5D0;&#xC11C; CD95 &#xC720;&#xB3C4; apoptosis&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC81C;&#xC548; CD40 &#xC790;&#xADF9; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xB192;&#xC740; CD95 &#xC2DD;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;.

&#xC5C5;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; c-&#xC8FC; &#xC804;&#xC870; B &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; CD40 &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB118;&#xACBC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; + R&#xC740; CD95 &#xC720;&#xB3C4; apoptosis&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;.

Estudios previos en defectos de la apoptosis en la leucemia linfobl&aacute;stica aguda (ALL) se han centrado en caminos de la muerte inducida por la quimioterapia, principalmente mitocondrial. Sin embargo, mecanismos de vigilancia inmunol&oacute;gica, incluyendo sensibilizaci&oacute;n a las se&ntilde;ales de la apoptosis mediada por el receptor de muerte CD95 podr&iacute;an contribuir al control leuc&eacute;mica. A continuaci&oacute;n, os mostramos eso principal precursor de c&eacute;lulas B todas las c&eacute;lulas de ni&ntilde;os a escapar muerte celular dependiente del receptor de 2 maneras: r&aacute;fagas descansando todos est&aacute;n protegidas de la apoptosis mediada por receptor debido a la ausencia de expresi&oacute;n superficial de CD95. Sin embargo, aunque CD40 ligadura produce para arriba-regulaci&oacute;n de CD95, r&aacute;fagas de todos, a diferencia de las c&eacute;lulas B normales, son resistentes a la apoptosis. Demostramos que esta resistencia de apoptosis implica la para arriba-regulaci&oacute;n selectiva de las isoformas cortas del inhibidor de la caspasa-8 c-FLIP actuando directamente a nivel del receptor CD95. Tratamiento con cicloheximida durante la activaci&oacute;n de CD40 previene para arriba-regulaci&oacute;n de las isoformas de c-FLIP y sensibiliza las c&eacute;lulas hacia la apoptosis mediada por CD95. Por lo tanto, proponemos que la inducci&oacute;n de las isoformas de c de un tir&oacute;n cortas inhibe el inicio de la apoptosis inducida por CD95 en primaria todos CD40-estimulado las c&eacute;lulas a pesar de la elevada expresi&oacute;n de CD95.

Para arriba-regulaci&oacute;n de c-FLIPS + R sobre el est&iacute;mulo de CD40 se asocia con la inhibici&oacute;n de la apoptosis inducida por CD95 principal precursor B-ALL.

&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x5728;&#x5F02;&#x57FA;&#x56E0;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D; (&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;) &#x6536;&#x4EF6;&#x4EBA;&#x3002;&#x9884;&#x9632;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x8FD9;&#x4E9B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x5145;&#x6EE1;&#x7231;&#x6CFC;&#x65AF;&#x5766;-&#x5DF4;&#x5C14;&#x75C5;&#x6BD2; (EBV)&#x3001; &#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2; (CMV) &#x548C;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2; (Adv) &#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (Ctl)&#xFF0C;&#x6240;&#x793A;&#x6CE8;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C0F;&#x6570;&#x76EE;&#x6FC0;&#x589E;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x9F13;&#x821E;&#x7684;&#x6210;&#x679C;&#xFF0C;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x91C7;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x505A;&#x6CD5;&#x9700;&#x8981;&#x6750;&#x6599;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2; (EBV)&#x3001; &#x6602;&#x8D35;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5206;&#x7EA7;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x5236;&#x9020;&#x957F;&#x671F; &#xFF08;8-12 &#x5468;&#xFF09; &#x671F;&#x95F4;&#x53D7;&#x5230;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6709;&#x5185;&#x6297;&#x539F;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6297;&#x539F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7ADE;&#x4E89;&#x7EC6;&#x80DE; (Apc)&#xFF0C;&#x9650;&#x5236;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EE3;&#x7406;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x5BF9;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; EBV&#x3001; &#x6D45;&#x6EE9;&#xFF0C;&#x5E7F;&#x544A;&#x4ECE;&#x514D;&#x75AB;&#x663E;&#x6027;&#x548C; subdominant &#x75C5;&#x6BD2;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; DNA &#x8D28;&#x7C92;&#x4E0E;&#x63CF;&#x8FF0;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5373;&#x91C7;&#x7528; DNA &#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc) nucleofection&#x5728; 10 &#x5929;&#x5185;&#xFF0C;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86; multivirus &#x65E0;&#x529F; Ctl&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F; alloreactivity&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E; nucleofected DC &#x523A;&#x6FC0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7ED3;&#x5408;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; (&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma;&#xFF09; &#x6355;&#x83B7;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x751F;&#x4EA7;&#x51FA;&#x66F4;&#x5FEB;&#x901F; multivirus CTL &#x4EA7;&#x54C1;&#x6CBB;&#x7597;&#x6025;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; CTL &#x4EE3;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5E94;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x548C;&#x9002;&#x7528;&#x6027;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x3002;

Nucleofection &#x7684; Dc &#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x635F;&#x5BB3;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E; Multivirus &#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x9884;&#x9632;&#x6216;&#x6CBB;&#x7597;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

Viral infections cause morbidity and mortality in allogeneic hematopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients. To prevent and treat these, we have produced and infused cytotoxic T lymphocytes (CTLs) with specificity for Epstein-Barr virus (EBV), cytomegalovirus (CMV), and adenovirus (Adv), and shown that small numbers of infused cells proliferate in vivo and protect against all three viruses. Despite these encouraging results, broader implementation of this approach is limited by the need for infectious virus material (EBV), expensive production of clinical grade adenoviral vectors, and a prolonged (8-12 weeks) period of manufacture. There is also competition between virus-derived antigens within antigen-presenting cells (APCs), limiting extension to additional agents. We now describe an approach that uses DNA nucleofection of dendritic cells (DCs) with DNA plasmids that encode a range of immunodominant and subdominant viral antigens from CMV, EBV, BK, and Adv. Within 10 days, this methodology provides multivirus-reactive CTLs that lack alloreactivity. We further demonstrate that nucleofected DC stimulation can be combined with interferon-gamma (IFN-gamma) capture technology to produce even more rapid multivirus-CTL products for treatment of acute infection. These CTL generation procedures should increase the feasibility and applicability of T-cell therapy.

Nucleofection of DCs to generate Multivirus-specific T cells for prevention or treatment of viral infections in the immunocompromised host.

Les infections virales entra&#xEE;nent une morbidit&#xE9; et de mortalit&#xE9; dans une allogreffe de cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques (HSCT). Pour pr&#xE9;venir et traiter celles-ci, nous avons produit et infus&#xE9; lymphocytes T cytotoxiques (CTL) avec une sp&#xE9;cificit&#xE9; pour le virus d&#x26;#39;Epstein-Barr (EBV), le cytom&#xE9;galovirus (CMV), et l&#x26;#39;ad&#xE9;novirus (Adv), et montr&#xE9; que de petits nombres de cellules infus&#xE9;es prolif&#xE8;rent in vivo et de protection contre les trois virus. Malgr&#xE9; ces r&#xE9;sultats encourageants, plus large mise en &#x153;uvre de cette approche est limit&#xE9;e par le besoin de mat&#xE9;riel virus infectieux (EBV), la production co&#xFB;teuse de cliniques de qualit&#xE9; des vecteurs ad&#xE9;noviraux, et une p&#xE9;riode prolong&#xE9;e (8-12 semaines) p&#xE9;riode de fabrication. Il ya aussi la concurrence entre les d&#xE9;riv&#xE9;s de virus au sein des antig&#xE8;nes cellules pr&#xE9;sentatrices d&#x26;#39;antig&#xE8;ne (CPA), en limitant l&#x26;#39;extension aux agents suppl&#xE9;mentaires. Nous allons maintenant d&#xE9;crire une approche qui utilise nucl&#xE9;ofection ADN des cellules dendritiques (DC) avec des plasmides d&#x26;#39;ADN qui codent pour une gamme de sous-dominante et immunodominants antig&#xE8;nes viraux de CMV, EBV, BK, et Adv. Dans les 10 jours, cette m&#xE9;thode fournit multivirus-r&#xE9;actifs CTL qui n&#x26;#39;ont pas allor&#xE9;activit&#xE9;. Nous avons en outre d&#xE9;montrer que la stimulation nucleofected DC peut &#xEA;tre associ&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;interf&#xE9;ron-gamma (IFN-gamma) technologie de capture de produire encore plus rapides multivirus-CTL produits pour le traitement de l&#x26;#39;infection aigu&#xEB;. Ces proc&#xE9;dures de g&#xE9;n&#xE9;ration de CTL devrait accro&#xEE;tre la faisabilit&#xE9; et l&#x26;#39;applicabilit&#xE9; des T-th&#xE9;rapie cellulaire.

Nucl&#xE9;ofection des PED pour g&#xE9;n&#xE9;rer Multivirus cellules T sp&#xE9;cifiques pour la pr&#xE9;vention ou traitement des infections virales chez l&#x26;#39;h&#xF4;te immunod&#xE9;prim&#xE9;

Virale Infektionen verursachen Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t in allogene h&auml;matopoetische Stammzelltransplantation (HSCT) Empf&auml;nger. Um zu verhindern, und diese zu behandeln, haben wir produziert und cytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) mit Spezifit&auml;t f&uuml;r Epstein - Barr-Virus (EBV), Zytomegalie-Virus (CMV) und Adenoviren (Adv) infundiert und gezeigt, dass eine kleine Gruppe Infusion Zellen in-vivo vermehren und gegen alle drei Viren sch&uuml;tzen. Trotz dieser ermutigenden Ergebnissen ist breitere Umsetzung dieses Ansatzes begrenzt durch die Notwendigkeit einer ansteckenden Virus Material (EBV), teure Herstellung von klinischen Grad adenoviral Vektoren und einen l&auml;ngeren (8-12 Wochen) Zeitraum der Herstellung. Es gibt auch Wettbewerb zwischen den Virus-abgeleitet von Antigenen im Antigen-pr&auml;sentierende Zellen (APC), Begrenzung der Erweiterung f&uuml;r weitere Wirkstoffe. Wir beschreiben nun einen Ansatz, der verwendet DNA Nucleofection von dendritischen Zellen (DCs) mit DNA-Plasmide, die eine Reihe von viralen Antigenen immundominante und Subdominante von CMV, EBV, BK und Adv. codieren Innerhalb von 10 Tagen bietet diese Methodik Multivirus-reaktives CTLs, dass fehlende Alloreactivity. Weiter zeigen wir, dass Nucleofected DC Stimulation mit Interferon-Gamma (IFN-Gamma)-Capture-Technologie zur Herstellung noch schnellere Multivirus-CTL-Produkte f&uuml;r die Behandlung der akuten Infektion kombiniert werden kann. Diese CTL-Generierung-Verfahren sollte die Machbarkeit und Anwendbarkeit der T-Zell-Therapie erh&ouml;hen.

Nucleofection DCs Multivirus-spezifische T-Zellen zur Pr&auml;vention oder Behandlung von viralen Infektionen im immungeschw&auml;chten Wirt zu generieren.

Le infezioni virali causano morbilit&agrave; e mortalit&agrave; nel trapianto di cellule staminali emopoietiche allogeniche destinatari (HSCT). Per prevenire e curare questi, abbiamo prodotto e infuso di linfociti T citotossici (CTL) con specificit&agrave; per il virus di Epstein - Barr (EBV), citomegalovirus (CMV) e adenovirus (Adv) e dimostrato che un piccolo numero di cellule infuse proliferazione in vivo e protegge contro tutti i tre virus. Nonostante questi risultati incoraggianti, pi&ugrave; ampia attuazione di questo approccio &egrave; limitato dalla necessit&agrave; per un periodo prolungato (8-12 settimane) di fabbricazione materiale infettivo virus (EBV) e costosa produzione di vettori adenovirali grado clinico. C&#39;&egrave; anche la concorrenza tra gli antigeni derivati da virus all&#39;interno di presentanti l&#39;antigene cellule (APC), limitando l&#39;estensione agli agenti supplementari. Descriviamo ora un approccio che utilizza nucleofection del DNA delle cellule dendritiche (DCs) con plasmidi di DNA che codificano una serie di antigeni virali immunodominanti e sottodominante da CMV, EBV, BK e ADV. Entro 10 giorni, questa metodologia fornisce CTL multivirus-reattivo che alloreactivity mancanza. Noi dimostrare ulteriormente che nucleofected DC stimolazione pu&ograve; essere combinata con la tecnologia di acquisizione di interferone-gamma (IFN-gamma) per produrre prodotti di multivirus-CTL ancora pi&ugrave; rapidi per il trattamento dell&#39;infezione acuta. Queste procedure di generazione CTL dovrebbero aumentare la fattibilit&agrave; e l&#39;applicabilit&agrave; della terapia della T-cellula.

Nucleofection di DCs per generare cellule T Multivirus-specifico per la prevenzione o il trattamento di infezioni virali in pazienti immunocompromessi host.

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x7A2E;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#xFF08;HSCT&#xFF09;&#x306E;&#x53D7;&#x4FE1;&#x8005;&#x3067;&#x306E;&#x7F79;&#x60A3;&#x7387;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9632;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x751F;&#x7523;&#x3068;Epstein-Barr&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;EBV&#xFF09;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30AC;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;CMV&#xFF09;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;ADV&#xFF09;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x304C;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x304C;in vivo&#x3067;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;3&#x3064;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5B9F;&#x88C5;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6750;&#x6599;&#xFF08;EBV&#xFF09;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x3001;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x5EF6;&#x9577;&#xFF08;8-12&#x9031;&#x9593;&#xFF09;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;APC&#xFF09;&#x5185;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x3001;&#x9593;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x3082;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;CMV&#x3001;EBV&#x3001;BK&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x524D;&#x58F2;&#x304B;&#x3089;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x4E0B;&#x5C5E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;DNA&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;DNA&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#xFF08;DCS&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 10&#x65E5;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x306F;&#x540C;&#x7A2E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;multivirus&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;CTL&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x305D;&#x306E;nucleofected&#x76F4;&#x6D41;&#x523A;&#x6FC0;&#x304C;&#x6025;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;multivirus-CTL&#x88FD;&#x54C1;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x3080;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&#x3B3;&#xFF08;IFN-&#x3B3;&#xFF09;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;CTL&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x9069;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x514D;&#x75AB;&#x4E0D;&#x5168;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;Multivirus&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;DC&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC6D0;&#xC778; &#xBCD1; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; allogeneic &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; (HSCT) &#xBC1B;&#xB294; &#xC0AC;&#xB78C;. &#xBC29;&#xC9C0; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xACE0; &#xC5E1; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;-&#xBC14; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EBV), &#xC138;&#xD3EC; (CMV), &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (Adv)&#xC73C;&#xB85C; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; (Ctl)&#xB97C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558; &#xACE0;, &#xC0DD;&#xAE34;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC22B;&#xC790; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9; &#xC99D; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACE0;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xAD6C;&#xD604; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EBV) &#xC790;&#xB8CC;, &#xC784;&#xC0C1; &#xB4F1;&#xAE09; adenoviral &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xBE44;&#xC2FC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC81C;&#xC870; &#xAE30;&#xAC04;&#xC758; &#xC5F0;&#xC7A5;&#xB41C; (8-12 &#xC8FC;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD30C;&#xC0DD; &#xAC04;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; (Apc) &#xCD94;&#xAC00; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; CMV, EBV, &#xBCF4; &#xB9AC;, &#xBC0F; &#xBD80;.&#xC5D0;&#xC11C; immunodominant &#xBC0F; subdominant &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; DNA &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs)&#xC758; DNA nucleofection&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD; &#xC124;&#xBA85; 10 &#xC77C; &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xADF8; &#xBD80;&#xC871; alloreactivity multivirus &#xBC18;&#xC751;&#xC131; Ctl&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; nucleofected DC &#xC790;&#xADF9; &#xAE09;&#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xB354;&#xC6B1; &#xBE60;&#xB978; multivirus CTL &#xC81C;&#xD488;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&#xAC10;&#xB9C8; (IFN-&#xAC10;&#xB9C8;) &#xCEA1;&#xCC98; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xACB0;&#xD569;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; CTL &#xC0DD;&#xC131; &#xC808;&#xCC28; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131; &#xBC0F; T-&#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC801;&#xC6A9; &#xC99D;&#xAC00; &#xD55C;&#xB2E4;.

Dc Nucleofection-immunocompromised &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC608;&#xBC29; &#xB610;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Multivirus &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las infecciones virales causan morbilidad y mortalidad en el trasplante alog&#xE9;nico de c&#xE9;lulas madre hematopoy&#xE9;ticas (HSCT). Para prevenir y tratar estos, se han producido y se infunden los linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL) con especificidad para el virus Epstein-Barr (VEB), citomegalovirus (CMV) y adenovirus (ADV), y han demostrado que un peque&#xF1;o n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas infundidas proliferan en vivo y proteger contra los tres virus. A pesar de estos alentadores resultados, una implementaci&#xF3;n m&#xE1;s amplia de este enfoque est&#xE1; limitado por la necesidad de material de virus infeccioso (VEB), la producci&#xF3;n costosa de vectores adenovirales cl&#xED;nicos de calidad, y una prolongada (8-12 semanas) periodo de fabricaci&#xF3;n. Tambi&#xE9;n existe la competencia entre los derivados de virus ant&#xED;genos en las c&#xE9;lulas presentadoras de ant&#xED;geno (APC), lo que limita la extensi&#xF3;n a los agentes adicionales. Ahora describir un enfoque que utiliza nucleofection ADN de las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas (DC) con los pl&#xE1;smidos de ADN que codifican una serie de ant&#xED;genos v&#xED;ricos inmunodominantes y subdominantes de CMV, EBV, BK, y Adv. Dentro de 10 d&#xED;as, esta metodolog&#xED;a ofrece multivirus reactiva CTL que carecen de alorreactividad. Adem&#xE1;s, demuestran que la estimulaci&#xF3;n nucleofected DC puede ser combinado con interfer&#xF3;n-gamma (IFN-gamma) la tecnolog&#xED;a de captura para producir a&#xFA;n m&#xE1;s r&#xE1;pidos CTL multivirus-productos para el tratamiento de la infecci&#xF3;n aguda. Estos procedimientos de generaci&#xF3;n de CTL debe aumentar la viabilidad y aplicabilidad de las c&#xE9;lulas T terapia.

Nucleofection de pa&#xED;ses en desarrollo para generar Multivirus c&#xE9;lulas T espec&#xED;ficas para la prevenci&#xF3;n o el tratamiento de infecciones v&#xED;ricas en el hu&#xE9;sped inmunocomprometido

&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (Ctl) &#x7684;&#x8FC7;&#x7EE7;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5236;&#x9020;&#x88AB;&#x53D7;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x4E0E;&#x5927;&#x91CF;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x662F;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x548C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x53EA;&#x53D6;&#x5F97; 2 &#x5398;&#x7C73;&#x4E95;&#x5728;&#x54EA;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x6C14;&#x4F53;&#x4EA4;&#x6362;&#x3001; &#x517B;&#x5206;&#x53CA;&#x5E9F;&#x7269;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x5F00;&#x53D1;&#x6765;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#x5F80;&#x5F80;&#x662F;&#x590D;&#x6742;&#x3001; &#x6602;&#x8D35;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x603B;&#x662F;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E; CTL &#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; Ctl &#x8FDB;&#x884C; 7 &#x81F3; 10 &#x5206;&#x90E8; poststimulation&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5468;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x9884;&#x671F;&#x7684; CTL &#x6570;&#x5B57;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CD;&#x65B0;&#x521B;&#x5EFA;&#x6587;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x5728;&#x573A;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x5468;&#x4F4E;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;-&#x6211;&#x4EEC;&#x90FD;&#x80FD;&#x591F;&#x589E;&#x52A0; CTL &#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x8868;&#x578B;&#x6216;&#x51FD;&#x6570;&#x80FD;&#x6301;&#x7EED;&#x51E0;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;24 &#x4E95;&#x724C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x8FC7;&#x591A;&#xFF0C;&#x6587;&#x5316;&#x6240;&#x9700;&#x5A92;&#x4F53;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x65AD;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x5236;&#x9020;&#x6210;&#x672C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA1;&#x7B97;&#x65B0;&#x578B;&#x6C14;&#x4F53;&#x6E17;&#x900F;&#x6587;&#x5316;&#x8BBE;&#x5907; (G-&#x96F7;&#x514B;&#x65AF;&#xFF09; &#x5141;&#x8BB8;&#x6C14;&#x4F53;&#x4EA4;&#x6362;&#x53D1;&#x751F;&#x8C6A;&#x653E;&#xFF0C;&#x6309;&#x4E0A;&#x8FF0;&#x4ECB;&#x8D28;&#x7684;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x57FA;&#x5730;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x7845;&#x819C;&#x3002;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x652F;&#x6301;&#x6269;&#x5927;&#x7684; CTL&#xFF0C;&#x5B9E;&#x9645;&#x4E0A;&#x540C;&#x65F6;&#x51CF;&#x5C11;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x4EBA;&#x5458;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FBE; 20 &#x500D;&#x5730;&#x589E;&#x52A0;&#x7531;&#x8F93;&#x51FA;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6269;&#x589E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x5F20;&#x662F;&#x4E0D;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4F18;&#x5316;&#x540C;&#x65F6;&#x964D;&#x4F4E;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x6210;&#x672C;&#x7684; CTL &#x5236;&#x9020;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x589E;&#x52A0; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8F93;&#x51FA;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x6C14;&#x4F53;&#x6E17;&#x900F;&#x8FC5;&#x901F;&#x6269;&#x5C55; cultureware (G-Rex&#xFF09; &#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x524D;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x52A0;&#x901F;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;

The clinical manufacture of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) for adoptive immunotherapy is limited by the complexity and time required to produce large numbers with the desired function and specificity. The culture conditions required are rigorous, and in some cases only achieved in 2-cm wells in which cell growth is limited by gas exchange, nutrients, and waste accumulation. Bioreactors developed to overcome these issues tend to be complex, expensive, and not always conducive to CTL growth. We observed that antigen-specific CTLs undergo 7 to 10 divisions poststimulation. However, the expected CTL numbers were achieved only in the first week of culture. By recreating the culture conditions present during this first week-low frequency of antigen-specific T cells and high frequency of feeder cells-we were able to increase CTL expansion to expected levels that could be sustained for several weeks without affecting phenotype or function. However, the number of 24-well plates needed was excessive and cultures required frequent media changes, increasing complexity and manufacturing costs. Therefore, we evaluated novel gas-permeable culture devices (G-Rex) with a silicone membrane at the base allowing gas exchange to occur uninhibited by the depth of the medium above. This system effectively supports the expansion of CTL and actually increases output by up to 20-fold while decreasing the required technician time. Importantly, this amplified cell expansion is not because of more cell divisions but because of reduced cell death. This bioprocess optimization increased T-cell output while decreasing the complexity and cost of CTL manufacture, making cell therapy more accessible.

Accelerated production of antigen-specific T cells for preclinical and clinical applications using gas-permeable rapid expansion cultureware (G-Rex).

La fabrication clinique de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) pour une immunoth&#xE9;rapie adoptive est limit&#xE9;e par la complexit&#xE9; et le temps requis pour produire un grand nombre avec la fonction souhait&#xE9;e et la sp&#xE9;cificit&#xE9;. Les conditions de culture n&#xE9;cessaires sont rigoureux, et dans certains cas seulement obtenus en 2-cm puits dans lesquels la croissance des cellules est limit&#xE9;e par l&#x26;#39;&#xE9;change de gaz, les nutriments et l&#x26;#39;accumulation de d&#xE9;chets. Bior&#xE9;acteurs d&#xE9;velopp&#xE9;s pour surmonter ces probl&#xE8;mes ont tendance &#xE0; &#xEA;tre complexe, co&#xFB;teux, et pas toujours propice &#xE0; la croissance CTL. Nous avons observ&#xE9; que l&#x26;#39;antig&#xE8;ne des CTL sp&#xE9;cifiques de subir poststimulation 7 &#xE0; 10 divisions. Toutefois, les num&#xE9;ros de CTL attendus ont &#xE9;t&#xE9; atteints que dans la premi&#xE8;re semaine de la culture. En recr&#xE9;ant les conditions de culture pr&#xE9;sents lors de cette premi&#xE8;re semaine de basse fr&#xE9;quence de cellules T sp&#xE9;cifiques de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne et haute fr&#xE9;quence de desserte des cellules, nous &#xE9;tions en mesure d&#x26;#39;accro&#xEE;tre l&#x26;#39;expansion de CTL &#xE0; des niveaux attendus qui pourraient &#xEA;tre subies pendant plusieurs semaines sans affecter le ph&#xE9;notype ou la fonction. Toutefois, le nombre de plaques &#xE0; 24 puits n&#xE9;cessaires &#xE9;tait excessive et des cultures n&#xE9;cessaire de fr&#xE9;quents changements de m&#xE9;dias, ce qui augmente la complexit&#xE9; et les co&#xFB;ts de fabrication. Par cons&#xE9;quent, on &#xE9;valu&#xE9; nouveaux dispositifs de culture perm&#xE9;able aux gaz (G-Rex) avec une membrane de silicone &#xE0; la base permettant l&#x26;#39;&#xE9;change de gaz de se produire sans inhibition par la profondeur du milieu ci-dessus. Ce syst&#xE8;me soutient efficacement l&#x26;#39;expansion de CTL et augmente effectivement la production de pr&#xE8;s de 20 fois tout en diminuant le temps requis technicien. Surtout, cette expansion cellulaire amplifi&#xE9; n&#x26;#39;est pas parce que des divisions cellulaires plus mais &#xE0; cause de la mort cellulaire r&#xE9;duite. Cette optimisation des bioproc&#xE9;d&#xE9;s augment&#xE9; T-cellule de sortie tout en diminuant la complexit&#xE9; et le co&#xFB;t de fabrication CTL, ce qui rend la th&#xE9;rapie cellulaire plus accessible.

La production acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9;e de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne des cellules T sp&#xE9;cifiques pour les applications pr&#xE9;cliniques et cliniques utilisant le gaz perm&#xE9;able Cultureware expansion rapide (G-Rex)

Die klinische Herstellung von Antigen-spezifische zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) f&uuml;r Adoptive Immuntherapie eingeschr&auml;nkt durch die Komplexit&auml;t und der Zeitaufwand f&uuml;r die gro&szlig;e Zahlen mit der gew&uuml;nschten Funktion und Spezifit&auml;t ergeben. Die Kultur-Voraussetzungen sind strenge und in einigen F&auml;llen nur in 2-cm-Brunnen in welche Zelle erreicht wird Wachstum durch Gasaustausch, N&auml;hrstoffe und &uuml;berfl&uuml;ssige Anh&auml;ufung begrenzt. Bioreaktoren entwickelt, um diese Probleme zu &uuml;berwinden sind komplex, teuer und nicht immer f&ouml;rderlich f&uuml;r CTL-Wachstum. Wir beobachteten, dass Antigen-spezifischen CTLs 7 bis 10 Divisionen Poststimulation unterziehen. Die erwarteten CTL-Nummern wurden jedoch nur in der ersten Woche der Kultur erreicht. Durch Neuerstellung der Kultur Bedingungen darstellen, w&auml;hrend dieser ersten Woche-Niederfrequenz von Antigen-spezifische T-Zellen und hohe Frequenz der Feeder-Zellen-konnten wir CTL-Erweiterung zu erwartete Niveau zu erh&ouml;hen, die f&uuml;r mehrere Wochen aufrecht erhalten werden konnte ohne Ph&auml;notyp oder Funktion zu beeinflussen. Jedoch war die Zahl der 24-Well-Platten ben&ouml;tigt &uuml;berm&auml;&szlig;ige und Kulturen h&auml;ufig Medien &Auml;nderungen erforderlich, steigende Komplexit&auml;t und Fertigungskosten. Deshalb werteten wir neuartige Gas-durchl&auml;ssigen Kultur-Ger&auml;te (G-Rex) mit einer Silikon-Membran an der Basis, so dass Gasaustausch auftritt ungehemmt durch die Tiefe des Mediums oben. Dieses System effektiv unterst&uuml;tzt den Ausbau der CTL und tats&auml;chlich bessere Ergebnisse durch bis zu 20-fach beim Verringern der erforderlichen Techniker-Zeit. Wichtiger ist diese verst&auml;rkte Zelle Expansion nicht wegen weitere Zellteilungen aber wegen eingeschr&auml;nkter Zelltod. Diese Bioprozess-Optimierung erh&ouml;hte T-Zell-Ausgabe beim verringern die Komplexit&auml;t und die Kosten der CTL-Herstellung, Zelltherapie mehr zug&auml;nglich zu machen.

Beschleunigte Produktion von Antigen-spezifische T-Zellen f&uuml;r pr&auml;klinische und klinische Anwendungen mit Gas-durchl&auml;ssigen rasche Expansion Cultureware (G-Rex).

Clinica fabbricazione di citotossici linfociti T antigene-specifiche (CTL) per adoptive immunoterapia &egrave; limitata dalla complessit&agrave; e il tempo richiesto per produrre grandi numeri con la funzione desiderata e specificit&agrave;. Le condizioni di coltura richieste sono rigorose, e in alcuni casi raggiunti solo in pozzi di 2 cm nella quale cella crescita &egrave; limitata da scambio di gas, nutrienti e accumulo di rifiuti. Bioreattori sviluppate per superare questi problemi tendono ad essere complesso, costoso e non sempre favorevole alla crescita di CTL. Abbiamo osservato che l&#39;antigene-specifici CTL subiscono poststimulation 7 a 10 divisioni. Tuttavia, i numeri CTL attesi sono stati conseguiti solo nella prima settimana della cultura. Ricreando la cultura condizioni presenti durante questa prima settimana-bassa frequenza di cellule T antigene-specifiche e ad alta frequenza di cellule di alimentatore-siamo stati in grado di aumentare l&#39;espansione CTL ai livelli attesi che poteva essere sostenuta per diverse settimane senza influire sul fenotipo o funzione. Tuttavia, il numero di piastre 24 pozzetti necessari &egrave; stata eccessivo e culture necessarie modifiche frequenti media, aumentando la complessit&agrave; e i costi di produzione. Quindi, abbiamo valutato dispositivi romanzo cultura gas-permeabile (G-Rex) con una membrana in silicone alla base che consenta lo scambio di gas si verifichino disinibita dalla profondit&agrave; del mezzo di cui sopra. Questo sistema supporta efficacemente l&#39;espansione di CTL e in realt&agrave; aumenta l&#39;uscita di fino a 20 volte diminuendo il tempo tecnico richiesto. Questa espansione cellulare amplificato &egrave; importante, &egrave; non per ulteriori divisioni cellulari ma a causa di morte cellulare ridotto. Questa ottimizzazione bioprocess aumentato delle cellule T uscita diminuendo la complessit&agrave; e il costo di fabbricazione CTL, rendere pi&ugrave; accessibile la terapia cellulare.

Accelerata produzione di cellule T antigene-specifiche per le applicazioni di studi precliniche e cliniche mediante gas-permeabile rapida espansione cultureware (G-Rex).

&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x88FD;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x990A;&#x5B50;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6240;&#x671B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3067;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x6570;&#x5024;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x306F;&#x53B3;&#x683C;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3001;&#x6804;&#x990A;&#x7D20;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5EC3;&#x68C4;&#x7269;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;2cm&#x306E;&#x4E95;&#x6238;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x3001;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x3067;&#x3001;CTL&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x50BE;&#x5411;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;CTL&#x306F;&#x3001;7&#x304B;&#x3089;10&#x306E;&#x90E8;&#x9580;&#x306E;poststimulation&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;CTL&#x756A;&#x53F7;&#x306F;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x9031;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x9031;&#x306B;&#x4F4E;&#x5468;&#x6CE2;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x518D;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6570;&#x9031;&#x9593;&#x6301;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x671F;&#x5F85;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;CTL&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;24&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x904E;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x6587;&#x5316;&#x304C;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x88FD;&#x9020;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x983B;&#x7E41;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x8A18;&#x306E;&#x57F9;&#x5730;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x306B;&#x5236;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x819C;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x30AC;&#x30B9;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x88C5;&#x7F6E;&#xFF08;G-&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF09;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;CTL&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6280;&#x8853;&#x8005;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;20&#x500D;&#x306B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x51FA;&#x529B;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x305F;&#x3081;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; CTL&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B7;&#x30D6;&#x30EB;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x51FA;&#x529B;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

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&#xC785;&#xC591; immunotherapy&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; (Ctl)&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xC81C;&#xC870; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4; &#xC218;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xACFC; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBB38;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xACE0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC140;&#xC5D0; 2 cm &#xC6B0;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC;&#xC131; &#xC131;&#xC7A5; &#xAC00;&#xC2A4; &#xAD50;&#xD658;, &#xC601;&#xC591;&#xC18C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD3D0;&#xAE30;&#xBB3C; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bioreactors &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBE44;&#xC2F8;&#xACE0; &#xD56D;&#xC0C1; CTL &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xACF5;&#xD5CC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; Ctl 7 ~ 10 &#xC0AC;&#xB2E8; poststimulation &#xBC1B; &#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; CTL &#xC22B;&#xC790; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xCCAB; &#xC8FC;&#xB9CC;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC870;&#xAC74; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; T &#xC140;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC8FC; &#xB0AE;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xAC00; &#xACE0; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xD604;&#xC7AC; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xC7AC;&#xD604; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368;-CTL &#xD655;&#xC7A5; &#xD615; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xBA87; &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xB192;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, 24-&#xC798; &#xC811;&#xC2DC; &#xD544;&#xC694; &#xC218;&#xB294; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD55C; &#xACE0; &#xBB38;&#xD654; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC790;&#xC8FC; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xBCC0;&#xACBD;, &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xACFC; &#xC81C;&#xC870; &#xBE44;&#xC6A9;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC00;&#xC2A4; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xBB38;&#xD654; &#xC7A5;&#xCE58; (G-&#xB809;&#xC2A4;) &#xC704;&#xC758; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC758; &#xAE4A;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xB178;&#xACE8;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xAC00;&#xC2A4; &#xAD50;&#xD658;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xB9AC;&#xCF58; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; CTL&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC790; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCD5C;&#xB300; 20-fold&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD9C;&#xB825;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;,&#xC774; &#xC99D;&#xD3ED;&#xB41C; &#xC140; &#xD655;&#xC7A5;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C; &#xB54C;&#xBB38;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C;. &#xC774; bioprocess &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; CTL &#xC81C;&#xC870;, &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB354; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558;&#xB294; &#xBE44;&#xC6A9;&#xACFC; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; T-&#xC140; &#xCD9C;&#xB825;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00;.

&#xAC00;&#xC2A4; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD655;&#xC7A5; cultureware (G-&#xB809;&#xC2A4;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804; &#xC784;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C;.

La fabricaci&#xF3;n cl&#xED;nica de ant&#xED;genos espec&#xED;ficos de linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL) para la inmunoterapia adoptiva est&#xE1; limitada por la complejidad y el tiempo requerido para producir un gran n&#xFA;mero con la funci&#xF3;n deseada y la especificidad. Las condiciones de cultivo requeridas son rigurosos, y en algunos casos s&#xF3;lo alcanzados en 2-cm pocillos en los que se limita el crecimiento celular por el intercambio de gases, nutrientes, y la acumulaci&#xF3;n de residuos. Biorreactores desarrollados para superar estos problemas tienden a ser complejos, costosos y no siempre es propicio para el crecimiento de CTL. Hemos observado que los ant&#xED;genos espec&#xED;ficos de linfocitos T citot&#xF3;xicos someterse a posest&#xED;mulo de 7 a 10 divisiones. Sin embargo, los n&#xFA;meros de CTL se espera s&#xF3;lo se lograron en la primera semana de la cultura. Al recrear las condiciones de cultivo presentes en esta primera semana de baja frecuencia de c&#xE9;lulas T ant&#xED;geno-espec&#xED;ficos y de alta frecuencia de alimentaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas-hemos sido capaces de incrementar la expansi&#xF3;n de CTL a los niveles esperados que podr&#xED;an perdurar durante varias semanas, sin afectar el fenotipo o funci&#xF3;n. Sin embargo, el n&#xFA;mero de placas de 24 pocillos necesarios era excesiva y las culturas requieren cambios frecuentes de los medios de comunicaci&#xF3;n, el aumento de la complejidad y los costes de fabricaci&#xF3;n. Por lo tanto, se evaluaron nuevos permeables al gas dispositivos de cultivo (G-Rex) con una membrana de silicona en la base que permite el intercambio de gases que se produzca desinhibido por la profundidad del medio anterior. Este sistema respalda efectivamente la expansi&#xF3;n de los CTL y en realidad aumenta la producci&#xF3;n hasta en un 20 veces mientras que disminuye el tiempo t&#xE9;cnico requerido. Es importante destacar que esta expansi&#xF3;n de c&#xE9;lulas amplificadas no se debe a divisiones celulares m&#xE1;s pero a causa de la muerte celular reducida. Esta optimizaci&#xF3;n de bioprocesos aumento de c&#xE9;lulas T de salida, mientras que la disminuci&#xF3;n de la complejidad y el coste de fabricaci&#xF3;n de CTL, por lo que la terapia celular sea m&#xE1;s accesible.

La producci&#xF3;n acelerada de los ant&#xED;genos espec&#xED;ficos de c&#xE9;lulas T para aplicaciones precl&#xED;nicos y cl&#xED;nicos que utilizan gas permeable Cultureware expansi&#xF3;n r&#xE1;pida (G-REX)

Les patients atteints de lymphome de Hodgkin (HL) rechute apr&#xE8;s une transplantation de cellules souches h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques ont peu d&#x26;#39;options &#xE0; long terme gu&#xE9;rison. Nous avons montr&#xE9; que les lymphocytes T cytotoxiques infus&#xE9;s (CTL) ciblant virus d&#x26;#39;Epstein Barr (EBV)-prot&#xE9;ines d&#xE9;riv&#xE9;es induites r&#xE9;missions compl&#xE8;tes dans EBV (+) patients HL. Une limitation de cette approche est que jusqu&#x26;#39;&#xE0; 70% des tumeurs ont rechut&#xE9; HL sont EBV-n&#xE9;gatif. Pour ces patients, une alternative consiste &#xE0; cibler le cancer / testis antig&#xE8;ne MAGE-A4 pr&#xE9;sente dans les tumeurs EBV HL antig&#xE8;ne-n&#xE9;gatifs. En outre, la modification &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique par cliniquement disponibles agents de d&#xE9;m&#xE9;thylation peut am&#xE9;liorer MAGE-A4 expression dans les tumeurs auparavant MAGE-n&#xE9;gative.

Am&#xE9;liorer T-th&#xE9;rapie cellulaire pour les cas de rechute EBV-n&#xE9;gatif lymphome de Hodgkin en ciblant r&#xE9;gul&#xE9;s &#xE0; la hausse MAGE-A4

Patienten mit Hodgkin Lymphom (HL) schubf&ouml;rmig nach h&auml;matopoetischer Stammzelltransplantation haben Optionen f&uuml;r langfristige Heilung begrenzt. Wir haben gezeigt, das infundiert zytotoxische T-Zellen (CTL) gezielt Epstein-Barr-Virus (EBV)-abgeleiteten Proteine induziert komplette Remissionen bei EBV(+) HL-Patienten. Eine Einschr&auml;nkung dieses Ansatzes ist, dass bis zu 70 % der Patienten mit wiederkehrendem HL Tumoren EBV-negativ sind. F&uuml;r diese Patienten ist eine Alternative zum Ziel der Krebs/Hoden-Antigen MAGE-A4 im EBV-Antigen-negativen HL Tumoren vorhanden. Dar&uuml;ber hinaus kann epigenetische Modifikation von klinisch verf&uuml;gbaren demethylating Agents MAGE-A4-Ausdruck in zuvor MAGE-Negative Tumoren verbessern.

Durch gezielte herraufreguliert MAGE-A4 T-Zell-Therapie f&uuml;r r&uuml;ckf&auml;llige EBV-Negative Hodgkin-Lymphom zu verbessern.

I pazienti con linfoma (HL) di Hodgkin recidivante dopo trapianto di cellule staminali ematopoietiche hanno limitate opzioni di cura a lungo termine. Abbiamo dimostrato che infuso linfociti T cellule (CTL) targeting per il virus di Epstein Barr (EBV)-proteine derivate indotto remissioni complete nei pazienti EBV(+) HL. Una limitazione di questo approccio &egrave; che fino al 70% di recidiva HL tumori sono EBV-negativi. Per questi pazienti, un&#39;alternativa &egrave; a bersaglio l&#39;antigene cancro/testicolo MAGE-A4 presente nei tumori HL di EBV antigene-negativi. Inoltre, modificazione epigenetica da agenti demethylating clinicamente disponibili pu&ograve; migliorare MAGE-A4 espressione precedentemente tumori MAGE-negativo.

Miglioramento della terapia della T-cellula per recidiva linfoma di Hodgkin EBV-negativi designando sovraregolati MAGE-A4.

&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x306E;&#x518D;&#x767A;&#x30DB;&#x30B8;&#x30AD;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x60A3;&#x8005;&#xFF08;HL&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30D7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30A4;&#x30F3; - &#x30D0;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;EBV&#xFF09;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;EBV&#xFF08;+&#xFF09;HL&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x5BDB;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x518D;&#x767A;HL&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6700;&#x5927;70&#xFF05;&#x304C;EBV&#x9670;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x306F;&#x3001;EBV&#x6297;&#x539F;&#x9670;&#x6027;HL&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x764C;/&#x7CBE;&#x5DE3;&#x6297;&#x539F;MAGE-A4&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x8131;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;MAGE-&#x9670;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;MAGE-A4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x308B;MAGE-A4&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x518D;&#x767A;EBV&#x9670;&#x6027;&#x30DB;&#x30B8;&#x30AD;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;

&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624; (HL) &#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x540E;&#x590D;&#x53D1;&#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x957F;&#x671F;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x5341;&#x5206;&#x6709;&#x9650;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6CE8;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE; (CTL) &#x9488;&#x5BF9;&#x7231;&#x6CFC;&#x65AF;&#x5766;&#x5DF4;&#x5C14;&#x75C5;&#x6BD2; (EBV)-&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8BF1;&#x5BFC; EBV(+) HL &#x60A3;&#x8005;&#x5B8C;&#x6210;&#x5B66;&#x8D39;&#x51CF;&#x514D;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x662F;&#x4E0A;&#x5347;&#x5230; 70%&#x7684;&#x590D;&#x53D1; HL &#x80BF;&#x7624;&#x662F; EBV &#x9634;&#x6027;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x5411;&#x76EE;&#x6807;/&#x777E;&#x4E38;&#x764C;&#x6297;&#x539F;&#x6CD5;&#x5E08; A4 EBV &#x6297;&#x539F;&#x9634;&#x6027; HL &#x80BF;&#x7624;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x53EF;&#x7528;&#x5316;&#x5242;&#x5242;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x4FEE;&#x9970;&#x53EF;&#x4EE5;&#x589E;&#x5F3A;&#x6CD5;&#x5E08; A4 &#x4EE5;&#x524D;&#x6CD5;&#x5E08;&#x9634;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x6CD5;&#x5E08; A4 &#x4E0A;&#x8C03;&#x63D0;&#x9AD8; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x6CBB;&#x7597;&#x590D;&#x53D1;&#x6027; EBV &#x9634;&#x6027;&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x3002;

Patients with Hodgkin lymphoma (HL) relapsing after hematopoietic stem cell transplant have limited options for long-term cure. We have shown that infused cytotoxic T cells (CTL) targeting Epstein Barr virus (EBV)-derived proteins induced complete remissions in EBV(+) HL patients. A limitation of this approach is that up to 70% of relapsed HL tumors are EBV-negative. For these patients, an alternative is to target the cancer/testis antigen MAGE-A4 present in EBV antigen-negative HL tumors. Furthermore, epigenetic modification by clinically available demethylating agents can enhance MAGE-A4 expression in previously MAGE-negative tumors.

Improving T-cell therapy for relapsed EBV-negative Hodgkin lymphoma by targeting upregulated MAGE-A4.

Hodgkin &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; (HL) &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xB3CC;&#xC544;&#xAC00;&#xB294; &#xD658;&#xC790; &#xC7A5;&#xAE30; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC635;&#xC158;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5E1; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778; &#xBC14; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EBV)&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; T &#xC138;&#xD3EC; (CTL)&#xB97C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-&#xD30C;&#xC0DD;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; EBV(+) HL &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; remissions &#xC720;&#xBC1C;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xD55C;&#xACC4;&#xAC00;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD5C;&#xB300; relapsed HL&#xC758; 70%&#xB97C; &#xC885;&#xC591; EBV &#xC74C;&#xC218;&#xAC00;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD658;&#xC790;&#xB294; &#xB300;&#xC2E0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC554;/&#xACE0;&#xD658; &#xD56D; &#xC6D0; &#xB9C8;&#xC220;&#xC0AC; A4 EBV &#xD56D; &#xC6D0; &#xC74C; HL &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC784;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; demethylating &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; epigenetic &#xC218;&#xC815; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC220;&#xC0AC; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; MAGE a 4 &#xC2DD; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Upregulated &#xB9C8;&#xBC95;&#xC0AC;-a 4&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xC5EC; relapsed EBV &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; Hodgkin &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; T-&#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xAC1C;&#xC120;.

Los pacientes con linfoma de Hodgkin (LH) que recaen despu&#xE9;s de trasplante de c&#xE9;lulas madre hematopoy&#xE9;ticas tienen opciones limitadas para la curaci&#xF3;n a largo plazo. Hemos demostrado que la infusi&#xF3;n de linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL) dirigidos a virus de Epstein Barr (VEB)-derivados de las prote&#xED;nas inducidas remisiones completas en el VEB (+) pacientes de LH. Una limitaci&#xF3;n de este enfoque es que hasta un 70% de reca&#xED;das en tumores HL son VEB-negativo. Para estos pacientes, una alternativa es dirigirse al c&#xE1;ncer / test&#xED;culo ant&#xED;geno MAGE-A4 EBV negativos presentes en los tumores ant&#xED;geno-HL. Por otra parte, la modificaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica de los agentes demethylating cl&#xED;nicamente disponibles pueden mejorar MAGE-A4 expresi&#xF3;n en tumores previamente MAGE-negativo.

Mejora de la terapia de c&#xE9;lulas T de reca&#xED;da EBV negativos linfoma de Hodgkin apuntando Upregulated MAGE-A4

&#x867D;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x7231;&#x6CFC;&#x65AF;&#x5766;-&#x5DF4;&#x5C14;&#x75C5;&#x6BD2; (EBV)-&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE; (Ctl) &#x53EF;&#x4EE5;&#x6CBB;&#x7597; EBV &#x76F8;&#x5173;&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x548C;&#x975E;&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624; (HL/&#x975E;&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x80BF;&#x7624;&#x7684; 50%&#x4EE5;&#x4E0A;&#x662F; EBV &#x6D88;&#x6781;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#x5730;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x884C;&#xFF0C;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x975E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F; (TAAs) &#x4EBA;&#x7C7B; HL/NHL&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6CD5;&#x5E08;-A4&#x3001; &#x6ED1;&#x819C;&#x8089;&#x7624; X &#x6240;&#x8868;&#x793A;&#x7684; Ctl &#x8868;&#x8FBE;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624; (PRAME) &#x548C;&#x7EBD;&#x7EA6;-ESO-1 (SSX2)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x4E5D;&#x70B9;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x5065;&#x5EB7;&#x6350;&#x52A9;&#x56FD;&#x548C;&#x4E94;&#x4E2A;&#x516B;&#x4E2A;&#x7684;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BBA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F; (HLA) &#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x8FD9;&#x4E9B; Ctl&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5927;&#x4E9A;&#x9488;&#x5BF9; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x589E;&#xFF0C;&#x7531;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc) &#x4E0E;&#x523A;&#x6FC0;&#x8109;&#x51B2;&#x91CD;&#x53E0;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x9009;&#x4E0B;&#x4F18;&#x5316;&#x7684; Th1 &#x5206;&#x5316;&#x6297;&#x539F;&#x3001; prosurvival/&#x589E;&#x6B96;&#x548C; Treg &#x7EC6;&#x80DE;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x5E93;&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x884C;&#x7684; CD4(+) &#x548C; CD8(+)&#xFF0C;polycytokine &#x751F;&#x4EA7;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x9488;&#x5BF9;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x81EA;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6EB6;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0A;&#x6240;&#x9009;&#x7684; TAAs&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x4F17;&#x591A;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F02;&#x6027;&#x4F5C;&#x7269;&#x8F93;&#x6DB2;&#x53EF;&#x5EF6;&#x957F; CTL &#x7597;&#x6CD5;&#x5BF9;&#x6CBB;&#x7597;&#x751A;&#x81F3; EBV &#x8D1F;&#x9762; HL &#x548C;&#x975E;&#x970D;&#x5947;&#x91D1;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x3002;

&#x540C;&#x65F6;&#x9488;&#x5BF9;&#x591A;&#x4E2A;&#x80BF;&#x7624;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;&#x6CBB;&#x7597; EBV &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D1F;&#x9762;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7624;&#x3002;

Although immunotherapy with Epstein-Barr virus (EBV)-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) can treat EBV-associated Hodgkin and non-Hodgkin lymphoma (HL/NHL), more than 50% of such tumors are EBV negative. We now describe an approach that allows us to consistently generate, in a single line, CTLs that recognize a wide spectrum of nonviral tumor-associated antigens (TAAs) expressed by human HL/NHL, including Survivin, MAGE-A4, Synovial sarcoma X (SSX2), preferentially expressed antigen in melanoma (PRAME) and NY-ESO-1. We could generate these CTLs from nine of nine healthy donors and five of eight lymphoma patients, irrespective of human leukocyte antigen (HLA) type. We reactivated TAA-directed T cells ex vivo, by stimulation with dendritic cells (DCs) pulsed with overlapping peptide libraries spanning the chosen antigens in the presence of an optimized Th1-polarizing, prosurvival/proliferative and Treg inhibitory cytokine combination. The resultant lines of CD4(+) and CD8(+), polycytokine-producing T cells are directed against a multiplicity of epitopes expressed on the selected TAAs, with cytolytic activity against autologous tumor cells. Infusion of such multispecific monocultures may extend the benefits of CTL therapy to treatment even of EBV negative HL and NHL.

Cytotoxic T lymphocytes simultaneously targeting multiple tumor-associated antigens to treat EBV negative lymphoma.

Bien que l&#x26;#39;immunoth&#xE9;rapie par le virus Epstein-Barr virus (EBV)-lymphocytes T cytotoxiques sp&#xE9;cifiques (CTL) peut traiter associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;EBV de Hodgkin et les lymphomes non hodgkiniens (HL / LNH), plus de 50% de ces tumeurs sont EBV n&#xE9;gative. Nous allons maintenant d&#xE9;crire une approche qui nous permet de fa&#xE7;on constante, sur une seule ligne, CTL qui reconnaissent un large &#xE9;ventail de non-viraux antig&#xE8;nes associ&#xE9;s aux tumeurs (TAA) exprim&#xE9;s par les activit&#xE9;s humaines HL / LNH, y compris la survivine, MAGE-A4, le sarcome synovial X ( SSX2), pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement exprim&#xE9; l&#x26;#39;antig&#xE8;ne dans le m&#xE9;lanome (PRAME) et NY-ESO-1. Nous pourrions g&#xE9;n&#xE9;rer ces CTL de neuf de neuf donneurs sains et cinq des huit patients atteints de lymphome, ind&#xE9;pendamment de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne des leucocytes humains (HLA) de type. On r&#xE9;activ&#xE9; ANT-T dirig&#xE9;e cellules ex vivo, par stimulation avec des cellules dendritiques) puls&#xE9;es avec chevauchement des banques de peptides couvrant les antig&#xE8;nes choisis en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;une optimis&#xE9;e Th1-polarisant, combinaison cytokine prosurvival / prolif&#xE9;rative et Treg inhibitrice. Les lignes r&#xE9;sultantes de CD4 (+) et CD8 (+), polycytokine producteurs de cellules T sont dirig&#xE9;s contre une multiplicit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;pitopes exprim&#xE9;s sur les AVA s&#xE9;lectionn&#xE9;s, ayant une activit&#xE9; cytolytique contre des cellules tumorales autologues. Infusion de ces monocultures multisp&#xE9;cifiques peuvent &#xE9;tendre les avantages de la th&#xE9;rapie CTL &#xE0; un traitement, m&#xEA;me de l&#x26;#39;EBV n&#xE9;gative HL et NHL.

Les lymphocytes T cytotoxiques ciblant simultan&#xE9;ment des multiples antig&#xE8;nes associ&#xE9;s aux tumeurs EBV pour traiter lymphome n&#xE9;gatif

Obwohl Immuntherapie mit Epstein - Barr-Virus (EBV)-spezifische zytotoxische T-Lymphozyten (CTLs) k&ouml;nnen behandeln, EBV-assoziierter Hodgkin und non-Hodgkin-Lymphom (HL/NHL), mehr als 50 % dieser Tumoren sind EBV negativ. Wir beschreiben nun ein Konzept, das erlaubt uns, konsequent, in einer einzelnen Zeile Zertifikatsvertrauenslisten generieren, die ein breites Spektrum an nonviral Tumor-assoziierte Antigene (TAAs) durch menschliche HL/NHL, einschlie&szlig;lich Survivin, MAGE-A4, Synovialsarkom X ausgedr&uuml;ckt zu erkennen (SSX2), bevorzugt ausgedr&uuml;ckt Antigen in Melanom (PRAME) und NY-ESO-1. Wir k&ouml;nnten diese CTLs aus neun neun gesunde Spender und f&uuml;nf der acht Lymphom-Patienten, unabh&auml;ngig von human Leukocyte Antigen (HLA) Art generieren. Wir erneut unter der Regie von TAA T-Zellen ex Vivo, durch Stimulation mit dendritischen Zellen (DCs) gepulst mit &uuml;berlappenden Peptid Bibliotheken die gew&auml;hlten Antigene in Anwesenheit eines optimierten Th1-Polfilter, prosurvival/proliferative und Treg hemmende Zytokin Kombination aktiviert. Die resultierenden Linien von CD4(+) und CD8(+), Polycytokine-Herstellung von T-Zellen richten sich gegen eine Vielzahl von Epitopes auf die ausgew&auml;hlten TAAs mit Keiko Aktivit&auml;t gegen autologe Tumorzellen ausgedr&uuml;ckt. Infusion von solchen multispecific Monokulturen kann die Vorteile der CTL-Therapie zur Behandlung sogar der EBV negative HL und NHL verl&auml;ngern.

Cytotoxische T-Lymphozyten, die gleichzeitig f&uuml;r mehrere Tumor-assoziierte Antigene EBV zu behandeln negative Lymphom.

Anche se l&#39;immunoterapia con virus di Epstein - Barr (EBV)-specifici linfociti T citotossici (CTL) possono trattare EBV-associated Hodgkin e linfoma non-Hodgkin (NHL/HL), oltre il 50% di tali tumori sono EBV negativo. Descriviamo ora un approccio che ci permette di generare costantemente, in una sola riga, CTL che riconoscono un ampio spettro di antigeni virali di tumore-associati (TAA) espresso da HL/NHL umana, tra cui il sarcoma sinoviale Survivin, MAGE-A4, X (SSX2), preferenzialmente espressi dell&#39;antigene nel melanoma (Alberto) e NY-ESO-1. Noi potremmo generare queste CTL da nove di nove donatori sani e cinque degli otto pazienti di linfoma, a prescindere dal tipo di human leukocyte antigen (HLA). Abbiamo riattivato TAA-regia T cellule ex vivo, dalla stimolazione con le cellule dendritiche (DCs) pulsato con librerie di peptidi che abbracciano la scelti degli antigeni in presenza di un Th1-polarizzazione ottimizzato, prosurvival/proliferativa e Treg citochina inibitoria combinazione di sovrapposizione. Le conseguenti linee di CD4(+) e di cellule, cellule T che producono polycytokine sono diretti contro una molteplicit&agrave; di epitopi espressi su TAAs selezionati, con attivit&agrave; citolitica contro le cellule tumorali autologhe. Infusione di tali multispecific monocolture possa estendere i benefici della terapia CTL al trattamento anche di EBV negativo HL e NHL.

Linfociti T citotossici targeting simultaneamente pi&ugrave; antigeni tumore-associati per il trattamento di EBV negativo linfoma.

Epstein-Barr&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;EBV&#xFF09;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;EBV&#x95A2;&#x9023;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x3068;&#x975E;&#x30DB;&#x30B8;&#x30AD;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#xFF08;HL / NHL&#xFF09;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x306E;50&#xFF05;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x304C;EBV&#x9670;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x884C;&#x3067;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D3;&#x30F3;&#x3001;MAGE-A4&#x3001;&#x6ED1;&#x819C;&#x8089;&#x816B;X&#xFF08;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D2;&#x30C8;HL / NHL&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x975E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;&#xFF08;TAA&#xFF09;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;CTL&#x304C;SSX2&#xFF09;&#x3001;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30FC;&#x30DE;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#xFF08;PRAME&#xFF09;&#x53CA;&#x3073;NY-ESO-1&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x6297;&#x539F;&#xFF08;HLA&#xFF09;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;9&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;9&#x3068;8&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;5&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;CTL&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Th1&#x7D30;&#x80DE;&#x504F;&#x5149;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;/ prosurvival&#x3068;Treg&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x30B9;&#x30D1;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x3092;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x3057;&#x305F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;DC&#xFF09;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;TAA&#x4E3B;&#x5C0E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;ex vivo&#x3067;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;CD4&#x306E;&#x7DDA;&#xFF08;+&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;CD8&#xFF08;+&#xFF09;&#x306F;&#x3001;polycytokine-&#x7523;&#x751F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x591C;&#x9593;&#x4EE3;&#x7406;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x5411;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x591A;&#x91CD;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AB;&#x30EB;&#x30C1;&#x30E3;&#x30FC;&#x306E;&#x6CE8;&#x5165;&#x3067;&#x3082;EBV&#x9670;&#x6027;HL&#x3068;NHL&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;CTL&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;EBV&#x9670;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x816B;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;

&#xBE44;&#xB85D; &#xC5E1; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;-&#xBC14; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EBV)&#xC640; immunotherapy-Hodgkin EBV &#xAD00;&#xB828; &#xBC0F; &#xBE44; Hodgkin &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; (HL/NHL) &#xD2B9;&#xC815; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; (Ctl)&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC;&#xD560; &#xC218;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; 50%&#xB294; EBV &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xD55C; &#xC904;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HL/NHL, Survivin, &#xB9C8;&#xC220;&#xC0AC;-A4, &#xD65C; &#xC561; &#xC721; &#xC885; X&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xD604; nonviral &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0; (&#xB2E4;&#xC2DC;)&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; Ctl&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; &#xC0DD;&#xC131; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC811;&#xADFC; (SSX2) &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; (PRAME) &#xBC0F; &#xB274;&#xC695; &#xC18C;&#xC7AC; 1 &#xD56D; &#xC6D0; &#xD45C;&#xD604;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 9 9 &#xBA85;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC758; 5 &#xC778;&#xAC04; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xD56D; &#xC6D0; (HLA) &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; 8 &#xBA85;&#xC758; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Ctl&#xC744; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xC2DC; ex vivo, &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs)&#xC640; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; Th1 &#xD3B8;&#xAD11; &#xC874;&#xC7AC; &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; &#xD56D; &#xC6D0;, prosurvival/&#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; Treg &#xAE08;&#xC9C0; cytokine &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xD384;&#xC2A4; TAA &#xAC10;&#xB3C5; T&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC904; CD4(+)&#xC640; CD8(+)&#xC758; polycytokine &#xC0DD;&#xC0B0; T &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD5CC; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; cytolytic &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; epitopes &#xBCF5;&#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xB3C5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; multispecific monocultures&#xC758; &#xC8FC;&#xC785;&#xB3C4; EBV &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; HL&#xC640; NHL&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; CTL &#xCE58;&#xB8CC; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xD56D; &#xC6D0; EBV &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; cytotoxic T &#xC138;&#xD3EC; &#xB9BC;&#xD504; &#xC885; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778;.

A pesar de la inmunoterapia con virus de Epstein-Barr (VEB)-espec&#xED;fica de linfocitos T citot&#xF3;xicos (CTL) se puede tratar asociada al EBV de Hodgkin y linfoma no Hodgkin (LH / NHL), m&#xE1;s del 50% de estos tumores son VEB negativa. Ahora describir un enfoque que nos permite generar consistentemente, en una sola l&#xED;nea, CTL que reconocen una amplia gama de virales ant&#xED;genos asociados a tumores (TAA) expresadas por el ser humano HL / NHL, incluyendo Survivin, MAGE-A4, el sarcoma sinovial X ( SSX2), expresa preferentemente el ant&#xED;geno en el melanoma (PRAME) y NY-ESO-1. Podr&#xED;amos generar estos CTL desde las nueve de nueve donantes sanos y cinco de ocho pacientes con linfoma, con independencia del ant&#xED;geno leucocitario humano (HLA). Hemos reactivado TAA-dirigida c&#xE9;lulas T ex vivo, por estimulaci&#xF3;n con c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas (DCS) pulsadas con superposici&#xF3;n bibliotecas de p&#xE9;ptidos que abarcan los ant&#xED;genos seleccionados en presencia de un optimizado Th1 polarizante, combinaci&#xF3;n de citocinas prosurvival / proliferativa y TREG inhibitorio. Las l&#xED;neas resultantes de CD4 (+) y CD8 (+), produciendo polycytokine-c&#xE9;lulas T se dirigen contra una multiplicidad de ep&#xED;topes expresados &#x200B;&#x200B;en los AAT seleccionados, con actividad citol&#xED;tica contra c&#xE9;lulas tumorales aut&#xF3;logas. La infusi&#xF3;n de estos monocultivos multiespec&#xED;ficos pueden extender los beneficios de la terapia de CTL para el tratamiento incluso de EBV negativos HL y la NHL.

Al mismo tiempo los linfocitos T citot&#xF3;xicos como objetivo varios ant&#xED;genos asociados a tumores para tratar el linfoma EBV negativo

Die immunsuppressive Umgebung des fortgeschrittenen Tumoren ist das ma&szlig;gebliche Hindernis f&uuml;r die Wirksamkeit von immunstimulierendes und Impfstoff Ans&auml;tze. Hier berichten wir ein Konzept, ein Onkolytische Viren mit CD40-Ligand (CD40L) F&ouml;rderung der positive immunologische Reaktionen bei Patienten zu wappnen. Double gezielt Chim&auml;ren Adenovirus vom Projekttr&auml;ger hTERT kontrolliert und CD40L auszudr&uuml;cken (CGTG-401) wurde gebaut und 9 Patienten mit voran erweiterte feuerfeste solide Tumoren zu Therapiestandards behandelten Intratumorally waren. Keine ernsthaften Nebenwirkungen, was Patienten Krankenhausaufenthalt ist aufgetreten. M&auml;&szlig;ig oder kein Anstieg der neutralisierenden Antik&ouml;rper wurden gesehen, effektive Th1 immunologische Effekte vorschlagen. Eine Bewertung der Blutspiegel von Virus angegeben 17,5 % der Proben (n = 40) waren positiv auf niedrigem Niveau fr&uuml;h nach der Behandlung, aber nicht danach. Im Gegensatz dazu wurden hohe Konzentrationen von Virus, CD40L und RANTES lokal auf den Tumor dokumentiert. Peripheren mononukle&auml;ren Blutzellen wurden von IFN-g ELISPOT Analyse Andinduction der beiden survivin-spezifischen analysiert und Adenovirus-spezifische T-Zellen gesehen wurde. Anti-Tumor-T-Zell-Antworten wurden noch st&auml;rker ausgepr&auml;gt, wenn von intrazellul&auml;ren Cytokine F&auml;rbung nach Stimulation mit Tumor-Typ spezifischen Peptid Pools bewertet. Der auswertbaren Patienten 83 % 3 Monate Krankheitskontrolle ausgestellt und in beiden F&auml;llen, wo die Behandlung den Effekt fortgesetzt wurde, war f&uuml;r mindestens 8 Monate aufrechterhalten. Injizierte und nicht injiziert L&auml;sionen reagierte identisch. Diese Befunde unterst&uuml;tzen zusammen, weitere klinische Bewertung der CGTG-401. Stichw&ouml;rter: CD40-Ligand, Onkolytische Adenoviren, Immunantwort, Tumor-spezifischer Immunit&auml;t, Immuntherapie.

Onkolytische Immuntherapie der fortgeschrittenen soliden Tumoren mit einem CD40L auszudr&uuml;cken Repro Adenoviren: Beurteilung von Sicherheit und immunologische Reaktionen bei Patienten.

&#x665A;&#x671F;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x4E3B;&#x8981;&#x969C;&#x788D;&#x7597;&#x6548;&#x89C2;&#x5BDF;&#x514D;&#x75AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x6765;&#x6B66;&#x88C5; CD40 &#x914D;&#x4F53; (CD40L) &#x6765;&#x523A;&#x6FC0;&#x75C5;&#x4EBA;&#x6709;&#x76CA;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x6EB6;&#x7624;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53CC;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x578B;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x5D4C;&#x5408;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7531; hTERT &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE; CD40L (&#x56E2;&#x7ED3;-401&#xFF09; &#x5EFA;&#x6210;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5C55; 9 &#x60A3;&#x8005;&#x5148;&#x8FDB;&#x6807;&#x51C6;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x96BE;&#x6CBB;&#x6027;&#x5B9E;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x5728;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4F4F;&#x9662;&#x6CBB;&#x7597;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x4E0D;&#x826F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x770B;&#x5230;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6216;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x6CA1;&#x6709;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x6548; Th1 &#x514D;&#x75AB;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x6C34;&#x5E73;&#x8BC4;&#x4F30;&#x663E;&#x793A; 17.5%&#x7684;&#x6837;&#x672C; &#xFF08;n = 40) &#x5448;&#x9633;&#x6027;&#x4F4E;&#x4E00;&#x7EA7;&#x65E9;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5176;&#x540E;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; CD40L&#x3001; RANTES &#x672C;&#x5730;&#x8BB0;&#x5F55;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x7531;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; g ELISPOT &#x5206;&#x6790; andinduction &#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x751F;&#x5B58;&#x7D20;&#x5177;&#x4F53;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x5355;&#x4E2A;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7279;&#x5F02;&#x6709;&#x4EBA;&#x770B;&#x89C1;&#x3002;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7531;&#x80DE;&#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x67D3;&#x8272;&#x540E;&#x523A;&#x6FC0;&#x80BF;&#x7624;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x80BD;&#x6C60;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x66F4;&#x4E3A;&#x660E;&#x663E;&#x3002;&#x91CF;&#x5316;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4E2D;&#xFF0C;83%&#x5C55;&#x51FA; 3 &#x4E2A;&#x6708;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC;&#x7EE7;&#x7EED;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x6301;&#x7EED;&#x81F3;&#x5C11; 8 &#x4E2A;&#x6708;&#x3002;&#x6CE8;&#x5165;&#x548C;&#x975E;&#x6CE8;&#x5165;&#x75C5;&#x53D8;&#x53CD;&#x5E94;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x56E2;&#x7ED3; 401 &#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x5173;&#x952E;&#x5B57;: CD40 &#x914D;&#x4F53;&#x3001; &#x6EB6;&#x7624;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

&#x6EB6;&#x7624;&#x80BF;&#x7624;&#x514D;&#x75AB;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x5148;&#x8FDB;&#x56FA;&#x4F53;&#x4E0E; CD40L &#x8868;&#x793A;&#x590D;&#x5236;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF1A; &#x8BC4;&#x4F30;&#x5B89;&#x5168;&#x548C;&#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

The immunosuppressive environment of advanced tumors is a primary obstacle to the efficacy of immunostimulatory and vaccine approaches. Here we report an approach to arm an oncolytic virus with CD40 ligand (CD40L) to stimulate beneficial immunological responses in patients. A double targeted chimeric adenovirus controlled by the hTERT promoter and expressing CD40L (CGTG-401) was constructed and 9 patients with progressing advanced solid tumors refractory to standard therapies were treated intratumorally. No serious adverse events resulting in patient hospitalization occurred. Moderate or no increases in neutralizing antibodies were seen, suggesting effective Th1 immunological effects. An assessment of the blood levels of virus indicated 17.5% of the samples (n=40) were positive at a low level early after treatment, but not thereafter. In contrast, high levels of virus, CD40L and RANTES were documented locally at the tumor. Peripheral blood mononuclear cells were analyzed by IFN-g ELISPOT analysis andinduction of both survivin-specific and adenovirus-specific T cells was seen. Anti-tumor T cell responses were even more pronounced when assessed by intracellular cytokine staining after stimulation with tumor-type specific peptide pools. Of the evaluable patients, 83% displayed disease control at 3 months and in both cases where treatment was continued the effect was sustained for at least 8 months. Injected and non-injected lesions responded identically. Together, these findings support further clinical evaluation of CGTG-401. Keywords: CD40 ligand, oncolytic adenovirus, immune response, tumor-specific immunity, immunotherapy.

Oncolytic immunotherapy of advanced solid tumors with a CD40L expressing replicating adenovirus: assessment of safety and immunological responses in patients.

L&#x26;#39;environnement immunosuppresseur de tumeurs avanc&#xE9;es est un obstacle majeur &#xE0; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; des approches immunostimulantes et le vaccin. Nous rapportons ici une approche pour armer un virus oncolytique avec le CD40 ligand (CD40L) pour stimuler les r&#xE9;ponses immunitaires b&#xE9;n&#xE9;fiques chez les patients. Un double ad&#xE9;novirus chim&#xE9;rique cibl&#xE9;e contr&#xF4;l&#xE9;e par le promoteur de hTERT et exprimant CD40L (CGTG-401) a &#xE9;t&#xE9; construit et 9 patients atteints de tumeurs solides avanc&#xE9;es progresse r&#xE9;fractaire aux traitements standard ont &#xE9;t&#xE9; trait&#xE9;s par voie intratumorale. Aucun effet ind&#xE9;sirable grave r&#xE9;sultant de l&#x26;#39;hospitalisation du patient a eu lieu. Des augmentations mod&#xE9;r&#xE9;es ou pas d&#x26;#39;anticorps neutralisants ont &#xE9;t&#xE9; en vue, ce qui sugg&#xE8;re efficaces Th1 effets immunologiques. Une &#xE9;valuation des niveaux sanguins de virus a indiqu&#xE9; que 17,5% des &#xE9;chantillons (n &#x200B;&#x200B;= 40) &#xE9;taient positifs &#xE0; un niveau faible au d&#xE9;but apr&#xE8;s le traitement, mais pas par la suite. En revanche, les niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de virus, CD40L et RANTES ont &#xE9;t&#xE9; document&#xE9;s localement &#xE0; la tumeur. Cellules mononucl&#xE9;&#xE9;es du sang p&#xE9;riph&#xE9;rique ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s par l&#x26;#39;IFN-g andinduction analyse ELISPOT &#xE0; la fois de la survivine-sp&#xE9;cifique et ad&#xE9;novirus cellules T sp&#xE9;cifiques a &#xE9;t&#xE9; vu. R&#xE9;ponses anti-tumorales des lymphocytes T ont &#xE9;t&#xE9; encore plus prononc&#xE9;e lorsqu&#x26;#39;elle est &#xE9;valu&#xE9;e par coloration des cytokines intracellulaires apr&#xE8;s stimulation par la tumeur de type piscines peptidiques sp&#xE9;cifiques. Parmi les patients &#xE9;valuables, 83% affich&#xE9; lutte contre les maladies &#xE0; 3 mois et dans les deux cas o&#xF9; le traitement a &#xE9;t&#xE9; poursuivi l&#x26;#39;effet a &#xE9;t&#xE9; maintenue pendant au moins 8 mois. Inject&#xE9; et non-inject&#xE9;s l&#xE9;sions r&#xE9;pondu de mani&#xE8;re identique. Ensemble, ces r&#xE9;sultats confirment en outre une &#xE9;valuation clinique de la CGTG-401. Mots-cl&#xE9;s: CD40 ligand, ad&#xE9;novirus oncolytiques, la r&#xE9;ponse immunitaire, sp&#xE9;cifique &#xE0; la tumeur l&#x26;#39;immunit&#xE9;, l&#x26;#39;immunoth&#xE9;rapie.

Immunoth&#xE9;rapie oncolytique de tumeurs solides avanc&#xE9;es avec un CD40L Exprimant ad&#xE9;novirus r&#xE9;plicatif: &#xC9;valuation de la s&#xE9;curit&#xE9; et les r&#xE9;actions immunitaires chez les patients

L&#39;ambiente immunosoppressivo dei tumori avanzati &egrave; un ostacolo primario per l&#39;efficacia di approcci immunostimolante e vaccino. Qui riportiamo un approccio al braccio un virus oncolytic con CD40 ligand (CD40L) per stimolare risposte immunologiche benefiche nei pazienti. Un doppio mirati chimerico adenovirus controllato dal promotore hTERT ed esprimere CD40L (CGTG-401) &egrave; stato costruito e 9 pazienti con progressione avanzata tumori solidi refrattari alle terapie standard sono stati trattati intratumorally. Si &egrave; verificato nessun evento avverso serio con conseguente ospedalizzazione paziente. Moderata o non aumenta nel neutralizzare gli anticorpi sono stati visti, suggerendo efficaci effetti immunologici Th1. Una valutazione dei livelli di sangue del virus indicato 17,5% dei campioni (n = 40) erano positivi a basso livello all&#39;inizio dopo il trattamento, ma non successivamente. Al contrario, elevati livelli di virus, CD40L e RANTES sono stati documentati localmente presso il tumore. Cellule mononucleate del sangue periferico sono state analizzate da IFN-g ELISPOT analisi andinduction di entrambi specifici di survivina e cellule T specifiche dell&#39;adenovirus &egrave; stato visto. Le risposte anti-tumorale delle cellule T erano ancora pi&ugrave; pronunciate quando valutati da citochine intracellulari colorazione dopo stimolazione con piscine del peptide specifico tipo di tumore. Dei pazienti evaluable, 83% visualizzato disease control a 3 mesi e in entrambi i casi dove il trattamento &egrave; stato continuato l&#39;effetto fu sostenuta per almeno 8 mesi. Lesioni iniettate e non iniettato ha risposto in modo identico. Insieme, questi risultati supportano ulteriore valutazione clinica della CGTG-401. Parole chiavi: CD40 ligand, oncolytic adenovirus, risposta immunitaria, tumore-specifiche immunit&agrave;, immunoterapia.

Oncolytic immunoterapia dei tumori solidi avanzati con un CD40L esprimendo la replicazione dell&#39;adenovirus: valutazione della sicurezza e risposte immunologiche nei pazienti.

&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6291;&#x5236;&#x74B0;&#x5883;&#x304C;&#x514D;&#x75AB;&#x3068;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3078;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x969C;&#x5BB3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;CD40&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;CD40L&#xFF09;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x6B66;&#x88C5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; hTERT&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3001;CD40L&#xFF08;CGTG-401&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6A19;&#x7684;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x96E3;&#x6CBB;&#x6027;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x6027;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x304C;&#x9032;&#x884C;&#x3057;&#x305F;9&#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5185;&#x306B;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x91CD;&#x7BE4;&#x306A;&#x6709;&#x5BB3;&#x4E8B;&#x8C61;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x4E2D;&#x7B49;&#x5EA6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;no&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;Th1&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8840;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306F;&#xFF08;n = 40&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x65E9;&#x671F;&#x306B;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x967D;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;17.5&#xFF05;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;CD40L&#x304A;&#x3088;&#x3073;RANTES&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x5C40;&#x6240;&#x7684;&#x306B;&#x6587;&#x66F8;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x672B;&#x68A2;&#x8840;&#x5358;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D3;&#x30F3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;IFN-g&#x3092;ELISPOT&#x89E3;&#x6790;andinduction&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x816B;&#x760D;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x67D3;&#x8272;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6297;&#x816B;&#x760D;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x9855;&#x8457;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8A55;&#x4FA1;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;83&#xFF05;&#x304C;3&#x30F6;&#x6708;&#x3067;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x7D99;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;8&#x30F6;&#x6708;&#x9593;&#x6301;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6CE8;&#x5165;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x540C;&#x3058;&#x7B54;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;CGTG-401&#x306E;&#x66F4;&#x306A;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30FC;&#x30EF;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF1A;CD40&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3002;

&#x8907;&#x88FD;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;CD40L&#x3068;&#x9032;&#x884C;&#x6027;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x7642;&#x6CD5;&#xFF1A;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x5B89;&#x5168;&#x6027;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;

&#xACE0;&#xAE09; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD658;&#xACBD; immunostimulatory &#xBC31;&#xC2E0; &#xC811;&#xADFC;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;&#xC774; &#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD314; CD40 &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; (CD40L) &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; oncolytic &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354;&#xBE14; &#xD0C0;&#xAC9F; hTERT &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB418; &#xACE0; &#xD45C;&#xD604; CD40L chimeric &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CGTG-401)&#xB294; &#xB418; &#xACE0; &#xC9C4;&#xD589; 9 &#xD658;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; intratumorally &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0;&#xAE09; &#xB0B4; &#xD654;&#xBB3C; &#xC194;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC885;&#xC591; &#xD45C;&#xC900; &#xC694;&#xBC95;&#xC744;. &#xC544;&#xB2C8; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xBD80;&#xC791;&#xC6A9; &#xD658;&#xC790; &#xC785;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF4;&#xD1B5; &#xB610;&#xB294; &#xC544;&#xBB34; &#xC99D;&#xAC00; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC911;&#xD654;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; Th1 &#xBA74;&#xC5ED; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBCF8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD608; &#xC911; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; 17.5% (n = 40) &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xD6C4; &#xD558;&#xC9C0;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, CD40L RANTES&#xC758; &#xC0C1;&#xBD80; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB85C;&#xCEEC;&#xB85C; &#xBB38;&#xC11C;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9D0; &#xCD08; &#xD608;&#xC561; &#xB2E8; &#xC140; survivin &#xD2B9;&#xC815; IFN-g ELISPOT &#xBD84;&#xC11D; andinduction &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; cytokine &#xC885;&#xC591; &#xD615; &#xD2B9;&#xC815; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD480;&#xACFC; &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB354;&#xC6B1; &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC1C;&#xC74C; &#xD588;&#xB2E4;. Evaluable &#xD658;&#xC790;&#xC758; 83 %3 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBAA8;&#xB450; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACC4;&#xC18D; &#xD588;&#xB2E4; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; 8 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C0;&#xC18D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC785; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xC785; &#xBE44; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC18;&#xC751; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; CGTG-401&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xD3C9;&#xAC00; &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC6D0;. &#xD0A4;&#xC6CC;&#xB4DC;: CD40 &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;, oncolytic &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;, &#xC885;&#xC591; &#xAD00;&#xB828; &#xBA74;&#xC5ED;, immunotherapy.

&#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB294; CD40L &#xACE0;&#xAE09; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591;&#xC758; Oncolytic immunotherapy: &#xC548;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00;.

El medio ambiente inmunosupresor de los tumores avanzados es un obst&#xE1;culo fundamental para la eficacia de los enfoques inmunoestimulantes y vacunas. Aqu&#xED; se presenta un enfoque para armar un virus oncol&#xED;tico con el ligando de CD40 (CD40L) para estimular respuestas inmunol&#xF3;gicas beneficiosos en los pacientes. Un estudio doble adenovirus quim&#xE9;rico dirigido controlada por el promotor de hTERT y expresar CD40L (CGTG-401) fue construido y 9 pacientes con tumores s&#xF3;lidos avanzados progresando refractario a tratamiento convencional fueron tratados intratumoral. No hay eventos adversos graves que resultan en la hospitalizaci&#xF3;n del paciente se produjo. Incrementos moderados o no de los anticuerpos neutralizantes fueron vistos, lo que sugiere eficaces Th1 efectos inmunol&#xF3;gicos. Una evaluaci&#xF3;n de los niveles en sangre del virus indic&#xF3; 17,5% de las muestras (n = 40) fueron positivas en un nivel bajo temprano despu&#xE9;s del tratamiento, pero no despu&#xE9;s. En contraste, los altos niveles de virus, CD40L y RANTES se documentaron localmente en el tumor. Las c&#xE9;lulas mononucleares de sangre perif&#xE9;rica fueron analizados por el IFN-g andinduction ELISPOT an&#xE1;lisis tanto de la survivina espec&#xED;fica y adenovirus espec&#xED;fico de c&#xE9;lulas T fue visto. Lucha contra el tumor de c&#xE9;lulas T respuestas fueron a&#xFA;n m&#xE1;s pronunciada cuando se evalu&#xF3; mediante tinci&#xF3;n intracelular de citoquinas tras la estimulaci&#xF3;n con un tumor de tipo piscinas p&#xE9;ptidos espec&#xED;ficos. De los pacientes evaluables, el 83% se muestra el control de la enfermedad a los 3 meses y en ambos casos en los que se continu&#xF3; el tratamiento el efecto se mantuvo durante al menos 8 meses. De colada y no inyectables lesiones respondi&#xF3; de forma id&#xE9;ntica. En conjunto, estos resultados apoyan a&#xFA;n m&#xE1;s la evaluaci&#xF3;n cl&#xED;nica de la CGTG-401. Palabras clave: ligando de CD40, adenovirus oncol&#xED;ticos, respuesta inmune, el tumor de la inmunidad espec&#xED;fica, la inmunoterapia.

La inmunoterapia oncol&#xED;tica de tumores s&#xF3;lidos avanzados con un adenovirus que expresa CD40L Replicaci&#xF3;n: Evaluaci&#xF3;n de la seguridad y las respuestas inmunol&#xF3;gicas en los pacientes

Ulrike Gerdemann

Center for Cell and Gene Therapy

Baylor College of Medicine

Generation of Multivirus-specific T Cells to Prevent/treat Viral Infections after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplant

Ulrike Gerdemann

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Baylor College of Medicine

Generation of Multivirus-specific T Cells to Prevent/treat Viral Infections after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplant

Center for Cell and Gene Therapy