Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using <em>In Utero</em> Electroporation

The ability to manipulate gene expression is the cornerstone of modern day experimental embryology, leading to the elucidation of multiple developmental ...

University of Calgary 

&#x4EBA;&#x7C7B; Y-chromosomal &#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x66FE;&#x88AB;&#x8003;&#x8651;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7236;&#x7CFB;&#x9057;&#x4F20;&#x9057;&#x4EA7;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x53F2;&#x3002;&#x8981;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8D77;&#x6E90;&#x4E0E;&#x798F;&#x5EFA;&#x6C49;&#x65CF;&#x79FB;&#x6C11;&#xFF0C;Y &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684; 13 &#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x6807;&#x8BB0;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x5C4F;&#x5E55;&#x798F;&#x5EFA;&#x6C49;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x6307;&#x51FA; M9G &#x6807;&#x8BB0;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6D41;&#x884C; (96 20%)&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x6F02;&#x79FB;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;M122C &#x9891;&#x7387;&#x53EA;&#x662F; 22.78%&#xFF0C;&#x548C; M45A &#x548C; M103T &#x662F;&#x9ED8;&#x8BA4;&#x3002;(H1&#x3001; H5&#x3001; H6/7/8&#xFF09; &#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x5355;&#x500D;&#x7FA4; r1b &#x9891;&#x7387;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x5355;&#x500D;&#x7FA4; r1b &#x6A21;&#x5F0F;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7956;&#x4F20;&#x7684;&#x548C;&#x4E34;&#x65F6;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;

&#x4E2D;&#x56FD;&#x798F;&#x5EFA;&#x97E9;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x65B0;&#x5355;&#x500D;&#x7FA4; r1b &#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

Human Y-chromosomal binary polymorphisms have been considered to preserve the paternal genetic legacy and provide evidence on human evolution and the genetic relationships among and demographic history of different populations. To reveal the genetic origin and immigration of the Fujian Han, 13 binary markers on the Y chromosome were used to screen Fujian Han by allele-specific polymerase chain reaction. The results indicated that the M9G marker was highly prevalent (96.20%), suggesting a significant genetic drift. In addition, M122C frequency was only 22.78%, and M45A and M103T were default. The distinctive haplogroup frequencies (H1, H5, and H6/7/8) imply that the haplogroup pattern is a relatively ancestral and interim type.

A new haplogroup pattern displayed in Fujian Han in China.

Polymorphismes du g&egrave;ne humain provenant binaire ont &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute; pour pr&eacute;server l&#39;h&eacute;ritage g&eacute;n&eacute;tique paternel et de fournir des preuves sur l&#39;&eacute;volution humaine et les liens g&eacute;n&eacute;tiques entre et histoire d&eacute;mographique des populations diff&eacute;rentes. Pour r&eacute;v&eacute;ler l&#39;origine g&eacute;n&eacute;tique et l&#39;immigration du Fujian Han, 13 marqueurs binaires sur le chromosome Y ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour cribler de Fujian Han par r&eacute;action en cha&icirc;ne de polym&eacute;rase de l&#39;all&egrave;le sp&eacute;cifique. Les r&eacute;sultats indiquent que le marqueur de M9G &eacute;tait tr&egrave;s r&eacute;pandu (96,20 %), sugg&eacute;rant une d&eacute;rive g&eacute;n&eacute;tique significative. En outre, M122C fr&eacute;quence n&#39;&eacute;tait que de 22,78 %, et M45A et M103T &eacute;taient par d&eacute;faut. Les fr&eacute;quences des haplogroupes distinctif (H1, H5 et H6/7/8) impliquent que le mod&egrave;le de l&#39;haplogroupe est un type relativement ancestral et provisoire.

Un nouveau motif d&#39;haplogroupe affich&eacute; dans Fujian Han en Chine.

Eine neue Haplogruppe Muster in Fujian in China Han angezeigt.

Polimorfismi binari del cromosoma y umani sono state considerate per conservare il patrimonio genetico paterno e fornire prove sull&#39;evoluzione umana e le relazioni genetiche tra e storia demografica delle popolazioni differenti. A rivelare l&#39;origine genetica e l&#39;immigrazione del Fujian Han, 13 binari marcatori sul cromosoma Y sono stati utilizzati per schermo Fujian Han da reazione a catena della polimerasi allele-specific. I risultati hanno indicato che il marcatore M9G era altamente prevalente (96.20%), suggerendo una significativa deriva genetica. Inoltre, M122C frequenza era solo 22.78% e M45A e M103T sono stati predefiniti. Le frequenze di aplogruppo distintivo (H1, H5 e H6/7/8) implicano che il modello aplogruppo &egrave; un tipo relativamente ad interim e ancestrale.

Un nuovo modello di aplogruppo visualizzato nel Fujian Han in Cina.

&#x7236;&#x65B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x907A;&#x7523;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x985E;&#x7E01;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x307F;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; y &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x30D0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x591A;&#x578B;&#x3068;&#x5225;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7D71;&#x8A08;&#x5B66;&#x306E;&#x6B74;&#x53F2;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x3068;&#x798F;&#x5EFA;&#x7701;&#x6F22;&#x65CF;&#x306E;&#x79FB;&#x6C11;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;Y &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x306E; 13 &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x798F;&#x5EFA;&#x7701;&#x6F22;&#x753B;&#x9762;&#x306B;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9023;&#x9396;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;M9G &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC; &#xFF08;96.20 &#xFF05;&#xFF09;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6D6E;&#x52D5;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6D41;&#x884C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;M122C &#x5468;&#x6CE2;&#x6570; 22.78 &#xFF05; &#x3060;&#x3051;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;M45A &#x3068; M103T &#x30C7;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30C8;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570; &#xFF08;H1&#x3001;H5&#x3001;H6/7/8) &#x306F;&#x3001;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5148;&#x7956;&#x3068;&#x4E2D;&#x9593;&#x578B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x56FD;&#x306E;&#x798F;&#x5EFA;&#x7701;&#x6F22;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30CF;&#x30D7;&#x30ED; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; Y-chromosomal &#xC774;&#xC9C4; polymorphisms &#xC544;&#xBC84;&#xC9C0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xC0B0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;&#xC640; &#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xACE0;&#xB824; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xACC4; &#xD559;&#xC801; &#xC5ED;&#xC0AC;. &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xAE30;&#xC6D0;&#xACFC; &#xBCF5; &#xAC74; &#xC131; &#xD55C; &#xC774;&#xBBFC; &#xACF5;&#xAC1C;, Y &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4;&#xC5D0; 13 &#xC774;&#xC9C4; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBCF5; &#xAC74; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xD2B9;&#xC815; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911; &#xD569; &#xC5F0;&#xC1C4; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC4F0;&#xC600;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; M9G &#xD45C;&#xC2DD; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC131;&#xD589; (96.20%), &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xB958;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;. &#xB610;&#xD55C;, M122C &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; 22.78%&#xB9CC; &#xC788;&#xC5C8;&#xACE0; M45A M103T &#xAE30;&#xBCF8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD558;&#xD50C;&#xB85C;&#xADF8;&#xB8F9; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (H1, H5, H6/7/8) &#xD558;&#xD50C;&#xB85C;&#xADF8;&#xB8F9; &#xD328;&#xD134; &#xC554;&#xC2DC;&#xB294; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC0C1;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xD0C0;&#xC785;.

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD558;&#xD50C;&#xB85C;&#xADF8;&#xB8F9; &#xD328;&#xD134; &#xC911;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5; &#xAC74; &#xC131; &#xD55C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Polimorfismos binarios y-cromos&oacute;mico humanos han sido consideradas para preservar el legado gen&eacute;tico paternal y aportar pruebas sobre la evoluci&oacute;n humana y las relaciones gen&eacute;ticas entre e historia demogr&aacute;fica de distintas poblaciones. Para revelar el origen gen&eacute;tico y la inmigraci&oacute;n de Fujian Han, 13 binarios marcadores en el cromosoma Y se utilizaron para pantalla de Fujian Han por reacci&oacute;n en cadena de polimerasa de alelo-espec&iacute;fica. Los resultados indicaron que el marcador de M9G altamente prevalente (96.20%), sugiriendo una deriva gen&eacute;tica significativa. Adem&aacute;s, M122C frecuencia fue s&oacute;lo 22,78%, y M45A y M103T fueron por defecto. Las frecuencias de haplogrupos distintivo (H1, H5 y H6/7/8) implican que el patr&oacute;n del haplogrupo es un tipo relativamente ancestral e intermedio.

Un nuevo patr&oacute;n de haplogrupo en Fujian Han en China.

&#x4F2F; cenocepacia &#x662F;&#x673A;&#x4F1A;&#x4E3B;&#x4E49;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E25;&#x91CD;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x56CA;&#x6027;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5316; (CF) &#x60A3;&#x8005;&#x3002;ET12 &#x6CBF;&#x88AD;&#x51FA;&#x73B0;&#x7279;&#x522B;&#x6076;&#x6BD2;&#x7684; CF &#xFF1B;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5176;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4E0E;&#x4E3B;&#x673A;&#x54CD;&#x5E94;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5E2E;&#x52A9;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86; B.cenocepacia &#x80FD;&#x591F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x540E; B.cenocepacia &#x5E94;&#x53D8; K56 2&#xFF0C;A549 &#x4EBA;&#x80BA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1; &#xFF1B;&#x4E19;&#x952D;&#x7898;&#x67D3;&#x8272;&#x548C; DNA &#x788E;&#x7247;&#x68C0;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x5F00;&#x59CB;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x7D20;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x975E; piliated &#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x79CD;&#xFF0C;K56 2 cblA::Tp &#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x662F;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; cbl &#x9739;&#x96F3;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BF1;&#x5BFC; A549 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9-8-7&#x3001;&#x3001;-3&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3002;&#x770B;&#x6765; B.cenocepacia cbl &#x9739;&#x96F3;&#xFF0C;&#x662F; ET12 &#x6CBF;&#x88AD;&#x7684;&#x4E00;&#x5927;&#x7279;&#x8272;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3; cbl &#x9739;&#x96F3; B.cenocepacia &#x611F;&#x67D3;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6F5C;&#x5728;&#x5A01;&#x80C1;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x6709;&#x673A;&#x4F53; CF &#x60A3;&#x8005;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;

&#x5728;&#x4E0E;&#x4F2F; cenocepacia &#x611F;&#x67D3;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x76AE;&#x5362;&#x4EC0;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Burkholderia cenocepacia is an opportunistic pathogen that can cause serious infections in cystic fibrosis (CF) patients. The ET12 lineage appears particularly virulent in CF; however, its pathogenesis is poorly understood and may be associated with host response. To help characterize this response, the ability of B. cenocepacia to induce cytotoxicity and apoptosis in an epithelial cell model was examined. Upon infection with B. cenocepacia strain K56-2, A549 human lung epithelial cells underwent significant cell death; propidium iodine staining and DNA fragmentation assays suggested apoptosis. Initiation of cell death was independent of the type III secretion system, biofilm formation, and secreted bacterial cytotoxins. However, the frequency of cell death was lower in cells infected with a non-piliated mutant, K56-2 cblA::Tp. Furthermore, purified cbl pili were found to directly induce cytotoxicity in A549 cells and activate caspase-9, -8, -7, and -3, the major cysteine proteinases involved in apoptosis. It appears that B. cenocepacia cbl pili, which are a distinctive feature of the ET12 lineage, act as an initiator of cytotoxicity and apoptosis. Understanding the role of cbl pili in the pathogenesis of B. cenocepacia infections offers the potential for decreasing the virulence of these potentially life-threatening organisms in CF patients.

Pilus-mediated epithelial cell death in response to infection with Burkholderia cenocepacia.

Burkholderia cenocepacia est un pathog&egrave;ne opportuniste qui peut causer des infections graves dans la mucoviscidose patients (FK). La lign&eacute;e ET12 appara&icirc;t particuli&egrave;rement virulente chez le CF ; Cependant, sa pathog&eacute;nie est mal compris et peut-&ecirc;tre &ecirc;tre associ&eacute; &agrave; la r&eacute;ponse de l&#39;h&ocirc;te. Afin de caract&eacute;riser cette r&eacute;ponse, la capacit&eacute; de b. cenocepacia pour induire la cytotoxicit&eacute; et l&#39;apoptose dans un mod&egrave;le de cellule &eacute;pith&eacute;liale a &eacute;t&eacute; examin&eacute;e. Apr&egrave;s infection avec la souche b. cenocepacia K56-2, les cellules &eacute;pith&eacute;liales pulmonaires humaines A549 a subi une mort cellulaire significative ; iode de propidium et dosages de fragmentation d&#39;ADN sugg&egrave;rent l&#39;apoptose. Initiation de mort cellulaire &eacute;tait ind&eacute;pendante du syst&egrave;me s&eacute;cr&eacute;tion de type III, la formation de biofilm et s&eacute;cr&eacute;t&eacute;es cytotoxines bact&eacute;riennes. Cependant, la fr&eacute;quence de la mort cellulaire &eacute;tait plus faible dans les cellules infect&eacute;es par un mutant non-Pili, cblA::Tp K56-2. En outre, cbl purifi&eacute;e pili trouv&eacute;es directement induire la cytotoxicit&eacute; dans les cellules A549 et activer la caspase-9, -8 -7 et -3, les prot&eacute;inases de la cyst&eacute;ine majeurs impliqu&eacute;s dans l&#39;apoptose. Il est &eacute;vident que b. cenocepacia cbl pili, qui sont une caract&eacute;ristique distinctive de la lign&eacute;e ET12, agissent comme initiateur de la cytotoxicit&eacute; et l&#39;apoptose. Comprendre le r&ocirc;le des pili de cbl dans la pathogen&egrave;se des infections &agrave; b. cenocepacia offre la possibilit&eacute; de diminuer la virulence de ces organismes potentiellement mortelles &agrave; des patients atteints de mucoviscidose.

Mort de pilus-n&eacute;goci&eacute;e des cellules &eacute;pith&eacute;liales en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;infection par Burkholderia cenocepacia.

Burkholderia Cenocepacia ist eine opportunistische Erreger, die schwere Infektionen bei zystischer Fibrose (CF) Patienten verursachen k&ouml;nnen. Die ET12 Linie erscheint in CF besonders virulent; jedoch Krankheitsentstehung ist oft missverstanden und m&ouml;glicherweise Wirtsantwort zugeordnet. Um zu helfen, diese Antwort zu charakterisieren, wurde die F&auml;higkeit von B. Cenocepacia zu Zytotoxizit&auml;t und Apoptosis ein Epithelialer Zellen-Modell untersucht. Nach Infektion mit B. Cenocepacia Belastung K56-2 unterzog A549 Lunge Epithelzellen erhebliche Zelltod; Propidium Jod F&auml;rbe- und DNA-Fragmentierung-Assays vorgeschlagen Apoptosis. Einleitung des Zelle Todes war unabh&auml;ngig von der Typ-III-Sekretionssystem, Biofilm-Bildung und sezernierte bakterielle Cytotoxins. Allerdings lagen die Frequenz des Zelle Todes in Zellen, die mit einem nicht-Piliated Mutant, K56-2 cblA::Tp infiziert. Dar&uuml;ber hinaus fanden sich direkt induzieren Zytotoxizit&auml;t in A549 Zellen und aktiviert Caspase-9, gereinigte Cbl Pili-8-7 und -3, die gro&szlig;en Cystein-Proteinasen Apoptose beteiligt. Es scheint, dass B. Cenocepacia Cbl Pili, die eine Besonderheit der Linie ET12, als Initiator der Zytotoxizit&auml;t und Apoptose zu handeln. Verst&auml;ndnis der Rolle der Cbl Pili in der Pathogenese von B. Cenocepacia Infektionen bietet das Potenzial f&uuml;r die Senkung der Virulenz dieser potenziell lebensbedrohliche Organismen bei CF-Patienten.

Pilus-vermittelte epitheliale Zellentod als Reaktion auf eine Infektion mit Burkholderia Cenocepacia.

Burkholderia mallei sono un patogeno opportunistico che pu&ograve; causare gravi infezioni in fibrosi cistica pazienti (CF). Il lignaggio ET12 appare particolarmente virulento in CF; Tuttavia, la patogenesi sono poco compreso e possono essere associati con risposta ospite. Per aiutare a caratterizzare questa risposta, &egrave; stata esaminata la capacit&agrave; di indurre citotossicit&agrave; e l&#39;apoptosi in un modello delle cellule epiteliali b. mallei. Dopo l&#39;infezione con b. mallei strain K56-2, nelle cellule epiteliali del polmone umano A549 ha subito morte cellulare significativo; propidium iodio colorazione e dosaggi di frammentazione del DNA, ha suggerito il apoptosis. Iniziazione della morte delle cellule &egrave; stato indipendente del sistema di secrezione di tipo III, formazione di biofilm e secrete citotossine batteriche. Tuttavia, la frequenza di morte cellulare era inferiore nelle cellule infettate con un mutante non-piliated, cblA::Tp K56-2. Inoltre, sono stati trovati cbl purificato pili direttamente indurre citotossicit&agrave; nelle cellule A549 e attivare il caspase-9, -8, -7 e -3, la cisteina principali proteinases coinvolti nell&#39;apoptosi. Sembra che b. mallei cbl pili, che sono una caratteristica distintiva del lignaggio ET12, agiscono come un iniziatore di citotossicit&agrave; e l&#39;apoptosi. Comprensione del ruolo della cbl pili nella patogenesi delle infezioni da b. mallei offre il potenziale per ridurre la virulenza di questi organismi potenzialmente letali nei pazienti CF.

Morte di pilus-mediata delle cellule epiteliali in risposta all&#39;infezione da Burkholderia mallei.

&#x30A4;&#x30CD;&#x306E;&#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7; (CF) &#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x56A2;&#x80DE;&#x6027;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x75C7;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x65E5;&#x548C;&#x898B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x3059;&#x3002;ET12 &#x7CFB;&#x7D71;&#x306F; CF &#x306E;&#x7279;&#x306B;&#x5287;&#x6BD2;&#x6027;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;B. &#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x80FD;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;B. &#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2;&#x3072;&#x305A;&#x307F; K56 2 &#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x3001;A549 &#x3072;&#x3068;&#x80BA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x65BD;&#x884C;&#x3057;&#x305F;;propidium &#x30E8;&#x30A6;&#x7D20;&#x67D3;&#x8272;&#x304A;&#x3088;&#x3073; DNA &#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x958B;&#x59CB; III &#x578B;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x7D30;&#x83CC;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306F;&#x975E;&#x6709;&#x7DDA;&#x6BDB;&#x83CC;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068; K56 2 cblA::Tp &#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x4F4E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6D44;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; cbl &#x30D4;&#x30EA; pili &#x76F4;&#x63A5; A549 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 9 &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;-8&#x3001;-7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;-3&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F; ET12 &#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x3001;B. &#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2; cbl &#x30D4;&#x30EA; pili &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Cbl &#x30D4;&#x30EA; pili B. &#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3053;&#x308C;&#x3089; CF &#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x547D;&#x3092;&#x8105;&#x304B;&#x3059;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7DDA;&#x6BDB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x611F;&#x67D3;&#x30A4;&#x30CD; &#x30BB;&#x30D1;&#x30B7;&#x30A2;&#x3068;&#x3067;&#x306F;&#x3002;

Burkholderia cenocepacia (CF) &#xD658;&#xC790; &#xB0AD; &#xC131; &#xC12C;&#xC720; &#xC99D;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. ET12 &#xB9AC;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4; CF;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC545;&#xC131; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; pathogenesis &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;, B. cenocepacia&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xB2A5;&#xB825; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. B. cenocepacia &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; K56 2&#xC640; &#xAC10;&#xC5FC; A549 &#xC778;&#xAC04; &#xD3D0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC220; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;; propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC774; &#xC9C0; &#xACE0; DNA &#xBD84;&#xC5F4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; apoptosis&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;, biofilm &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xBE44; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; cytotoxins &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC; K56-2 cblA::Tp piliated &#xBE44; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC815;&#xD654; cbl pili &#xC9C1;&#xC811; A549 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; caspase-9, &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;-8,-7,-3, apoptosis&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; proteinases. B. cenocepacia cbl pili ET12 &#xD608;&#xD1B5;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; apoptosis&#xC758; &#xCD08;&#xAE30;&#xC790; &#xD589;&#xC704;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. B. cenocepacia &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; pathogenesis&#xC758; cbl pili&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC774;&#xD574; CF &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xBA85;&#xC744; &#xC704;&#xD611; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB3C5;&#xC131; &#xAC10;&#xC18C; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Burkholderia cenocepacia&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; pilus &#xC911;&#xC7AC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;.

Burkholderia cenocepacia es un pat&oacute;geno oportunista que puede causar infecciones graves en la fibrosis qu&iacute;stica (CF) patients. El linaje ET12 aparece particularmente virulento en la FQ; sin embargo, su patogenesia es mal entendida y puede estar asociada con la respuesta del hu&eacute;sped. Para ayudar a caracterizar esta respuesta, se examin&oacute; la capacidad de B. cenocepacia inducir citotoxicidad y apoptosis en un modelo de c&eacute;lula epitelial. Sobre la infecci&oacute;n con la cepa B. cenocepacia K56-2, c&eacute;lulas epiteliales del pulm&oacute;n humano A549 experimentaron la muerte celular significativa; An&aacute;lisis de fragmentaci&oacute;n de ADN y tinci&oacute;n de yodo de propidio sugirieron apoptosis. Iniciaci&oacute;n de la muerte celular era independiente del sistema de secreci&oacute;n tipo III, formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas y secretadas citotoxinas bacterianas. Sin embargo, la frecuencia de la muerte celular fue menor en c&eacute;lulas infectadas con un mutante no-piliated, cblA::Tp K56-2. Adem&aacute;s, se encontraron cbl purificada pili directamente inducir citotoxicidad en c&eacute;lulas A549 y activar caspase-9, -8 y -7 -3, las Proteinasas de ciste&iacute;na principales implicados en la apoptosis. Parece que B. cenocepacia cbl pili, que es un rasgo distintivo del linaje ET12, actuar como un iniciador de citotoxicidad y apoptosis. Entender el papel de pili cbl en la patogenesia de infecciones B. cenocepacia ofrece el potencial para disminuir la virulencia de estos organismos potencialmente mortal en pacientes con FQ.

Fuqu Lu

Department of Medical Genetics,
Alberta Children’s Hospital Research Institute,
Hotchkiss Brain Institute,
Department of Medical Genetics, Alberta Children’s Hospital Research Institute, Hotchkiss Brain Institute

University of Calgary

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Fuqu Lu

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Medical Genetics,Alberta Children’s Hospital Research Institute,Hotchkiss Brain Institute,Department of Medical Genetics, Alberta Children’s Hospital Research Institute, Hotchkiss Brain Institute

University of Calgary

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Department of Medical Genetics,
Alberta Children’s Hospital Research Institute,
Hotchkiss Brain Institute,
Department of Medical Genetics, Alberta Children’s Hospital Research Institute, Hotchkiss Brain Institute