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A Genetic Screen to Isolate <em>Toxoplasma gondii</em> Host-cell Egress Mutants

The widespread, obligate intracellular, protozoan parasite Toxoplasma gondii causes opportunistic disease in immuno-compromised patients and causes birth ...

Boston College

&#x5C3D;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x8349;&#x7A3F;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6210;&#x672C;&#x7EE7;&#x7EED;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x7CBE;&#x70BC;&#x8BE5;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&quot;&#x5E8F;&#x5217;&#x6574;&#x7406;&quot;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4ECD;&#x7136;&#x5F88;&#x6602;&#x8D35;&#x3002;&#x8FD1;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x5B8C;&#x6210;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x662F;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5F15;&#x7528; &#xFF1B; &#x4E00;&#x5C0F;&#x5957;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x6210;&#x672C;&#x4E3A;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x81F3;&#x5C11;&#x53EF;&#x9884;&#x89C1;&#x7684;&#x5C06;&#x6765;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x4E2D;&#x7EA7;&#x804C;&#x79F0;&#x7684;&#x5DF2;&#x5B8C;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;&#x79F0;&#x4E3A;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7B49;&#x7EA7;&#x5B8C;&#x6210;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9488;&#x5BF9;&#x591A;&#x9C7C;&#x79CD;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x6B64;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;&#x4E0E;&#x5269;&#x4F59;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x548C;&#x9519;&#x8BEF;&#x5927;&#x591A;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x91CD;&#x590D;&#x5143;&#x7D20;&#xFF09; &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x5F88;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86; 99%&#x7684;&#x603B;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7B49;&#x7EA7;&#x5E8F;&#x5217;&#x6574;&#x7406;&#x9700;&#x8981;&#x5927;&#x7EA6; 40-fold &#x5C11;&#x8BD5;&#x5242;&#x548C;&#x5927;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x5C11;&#x4EBA;&#x5458;&#x7CBE;&#x529B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E8E;&#x65B0;&#x4E00;&#x4EE3;&#x7684;&#x8FD1;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x7F8E;&#x5B8C;&#x6210;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x5982;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x6574;&#x7406;&#x5E8F;&#x5217;&#x6765;&#x81EA;&#x5355;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; (BAC) &#x514B;&#x9686;&#x3001; &#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BBE;&#x60F3;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4F8B;&#x7A0B;&#x7CBE;&#x70BC;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x6C34;&#x5E73;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x9E1F;&#x67AA;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x7684;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7B49;&#x7EA7;&#x5E8F;&#x5217;&#x6574;&#x7406;&#x8868;&#x793A;&#x5E8F;&#x5217;&#x7EC6;&#x5316;&#x9014;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x5B9E;&#x9645;&#x548C;&#x53EF;&#x8D1F;&#x62C5;&#x5F97;&#x8D77;&#x7684;&#x9009;&#x9879;&#x3002;

&#x5B8C;&#x6210;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x9002;&#x5408;&#x4E2D;&#x7EA7;&#x804C;&#x79F0;&#x3002;

Although the cost of generating draft-quality genomic sequence continues to decline, refining that sequence by the process of "sequence finishing" remains expensive. Near-perfect finished sequence is an appropriate goal for the human genome and a small set of reference genomes; however, such a high-quality product cannot be cost-justified for large numbers of additional genomes, at least for the foreseeable future. Here we describe the generation and quality of an intermediate grade of finished genomic sequence (termed comparative-grade finished sequence), which is tailored for use in multispecies sequence comparisons. Our analyses indicate that this sequence is very high quality (with the residual gaps and errors mostly falling within repetitive elements) and reflects 99% of the total sequence. Importantly, comparative-grade sequence finishing requires approximately 40-fold less reagents and approximately 10-fold less personnel effort compared to the generation of near-perfect finished sequence, such as that produced for the human genome. Although applied here to finishing sequence derived from individual bacterial artificial chromosome (BAC) clones, one could envision establishing routines for refining sequences emanating from whole-genome shotgun sequencing projects to a similar quality level. Our experience to date demonstrates that comparative-grade sequence finishing represents a practical and affordable option for sequence refinement en route to comparative analyses.

An intermediate grade of finished genomic sequence suitable for comparative analyses.

Bien que le co&ucirc;t de production qualit&eacute; brouillon s&eacute;quence g&eacute;nomique continue de diminuer, cette s&eacute;quence de raffinage par le processus de &laquo; s&eacute;quence finition &raquo; reste ch&egrave;re. S&eacute;quence fini proche de la perfection est un objectif appropri&eacute; pour le g&eacute;nome humain et d&#39;un petit ensemble de g&eacute;nomes de r&eacute;f&eacute;rence ; Toutefois, un tel produit de qualit&eacute; ne peut se justifier financi&egrave;rement pour un grand nombre de g&eacute;nomes suppl&eacute;mentaires, au moins dans un avenir pr&eacute;visible. Nous d&eacute;crivons ici la production et la qualit&eacute; d&#39;un grade interm&eacute;diaire de s&eacute;quence g&eacute;nomique fini (appel&eacute;e s&eacute;quence finie comparative de qualit&eacute;), qui est adapt&eacute; pour une utilisation dans les comparaisons de s&eacute;quences plurisp&eacute;cifiques. Nos analyses indiquent que cette s&eacute;quence est de tr&egrave;s haute qualit&eacute; (avec les &eacute;carts r&eacute;siduels et erreurs relevant principalement des &eacute;l&eacute;ments r&eacute;p&eacute;titifs) et refl&egrave;te les 99 % de la s&eacute;quence totale. Ce qui est important, s&eacute;quence comparatif qualit&eacute; finition n&eacute;cessite environ 40 fois moins r&eacute;actifs et environ 10 fois moins personnel effort par rapport &agrave; la g&eacute;n&eacute;ration de s&eacute;quence de finis presque parfait, comme celle produite pour le g&eacute;nome humain. Bien qu&#39;appliqu&eacute; ici &agrave; finition s&eacute;quence provenant de clones individuels de chromosomes artificiels bact&eacute;riens (BAC), on pourrait imaginer &eacute;tablir des routines pour le raffinage des s&eacute;quences d&eacute;coulant des projets de s&eacute;quen&ccedil;age whole-genome shotgun &agrave; un niveau de qualit&eacute; similaire. Notre exp&eacute;rience &agrave; ce jour montre que la s&eacute;quence de comparatif qualit&eacute; finition repr&eacute;sente une option pratique et abordable pour l&#39;affinement de s&eacute;quence en cours de route aux analyses comparatives.

Un grade interm&eacute;diaire de s&eacute;quence g&eacute;nomique fini convenant &agrave; des analyses comparatives.

Eine Zwischenschicht Goldgehalt von fertigen genomische Sequenz geeignet f&#xFC;r vergleichende Analysen.

Anche se il costo di generazione sequenza genomica qualit&agrave; bozza continua a diminuire, quella sequenza di raffinazione mediante il processo di &quot;sequenza di finitura&quot; rimane costoso. Sequenza finita quasi perfetto &egrave; un obiettivo adatto per il genoma umano e un piccolo set di genomi di riferimento; Tuttavia, un prodotto di alta qualit&agrave; pu&ograve; essere costo giustificato per un gran numero di altri genomi, almeno per il prossimo futuro. Qui descriviamo la generazione e la qualit&agrave; di un grado intermedio di sequenza genomica finito (definito sequenza finito comparativo-grade), che &egrave; su misura per l&#39;uso nei confronti di sequenza multispecifica. Le nostre analisi indicano che questa sequenza &egrave; molto alta qualit&agrave; (con il residue lacune ed errori rientrano per lo pi&ugrave; elementi ripetitivi) e riflette il 99% della sequenza totale. Soprattutto, sequenza comparativa-grado di finitura richiede circa 40-fold meno reattivi e circa 10 volte meno personale sforzo rispetto alla generazione della sequenza finita quasi perfetto, come che ha prodotto per il genoma umano. Anche se applicato qui a finitura sequenza derivata da cloni di singoli batterica artificial chromosome (BAC), uno poteva immaginare che istituisce le routine per la raffinazione sequenze provenienti da progetti di sequenziamento del genoma intero fucile ad un simile livello di qualit&agrave;. La nostra esperienza fino ad oggi dimostra che comparativo-grade sequenza finitura rappresenta un&#39;opzione pratica e conveniente per la raffinatezza della sequenza in rotta per analisi comparative.

Un grado intermedio di sequenza genomica finito adatto per analisi comparative.

&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E0B;&#x66F8;&#x304D;&#x54C1;&#x8CEA; genomic &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x7D9A;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x300C;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x4ED5;&#x4E0A;&#x3052;&#x300D;&#x7CBE;&#x932C;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5B8C;&#x74A7;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x5B8C;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x9806;&#x5E8F;&#x306F;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3068;&#x53C2;&#x7167;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3059;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x4E88;&#x898B;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x6B63;&#x5F53;&#x5316;&#x591A;&#x6570;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x7B49;&#x7D1A; &#xFF08;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7D42;&#x4E86;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x3001;&#x5B8C;&#x6210;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3068;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA; &#xFF08;&#x3068;&#x6B8B;&#x7559;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x5927;&#x62B5;&#x843D;&#x4E0B;&#x53CD;&#x5FA9;&#x8981;&#x7D20;&#x5185;&#x306E;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#xFF09; &#x3068; 99 &#xFF05; &#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;&#x4ED5;&#x4E0A;&#x3052;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D04; 40-fold &#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x8A66;&#x85AC;&#x751F;&#x7523;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x5B8C;&#x74A7;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x5B8C;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7D04; 10 &#x500D;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x4EBA;&#x54E1;&#x52B4;&#x529B;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x306F;&#x9069;&#x7528;&#x304C;&#x4ED5;&#x4E0A;&#x3052;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; &#xFF08;BAC &#x306E;&#xFF09; &#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3001;1 &#x3064;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5168;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x6563;&#x5F3E;&#x9283;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x767A;&#x305B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x7528;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x60F3;&#x50CF;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306B;&#x65E5;&#x4ED8;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x4ED5;&#x4E0A;&#x3052;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D5E;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x9014;&#x4E2D;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x3067;&#x624B;&#x9803;&#x306A;&#x4FA1;&#x683C;&#x30AA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x7B49;&#x7D1A;&#x306E;&#x5B8C;&#x6210;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xCD08;&#xC548; &#xD488;&#xC9C8; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC131; &#xBE44;&#xC6A9;&#xC774; &#xACC4;&#xC18D; &#xAC10;&#xC18C;, &#xBE44;&#xB85D; &#xBE44;&#xC2FC; &#xB0A8;&#xC544; &quot;&#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB9C8;&#xBB34;&#xB9AC;&quot; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xC815;&#xC81C;. &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC644;&#xC131; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188;&#xACFC; &#xCC38;&#xC870; &#xAC8C;&#xB188;; &#xC791;&#xC740; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xC81C;&#xD488; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD94;&#xAC00; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD070; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xBE44;&#xC6A9; &#xC815;&#xB82C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC608;&#xCE21; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xB300;&#xC640;&#xB294; multispecies &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB9DE;&#xCDA4;&#xD615; &#xC644;&#xC131; &#xB41C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; (&#xB418; &#xB098; &#xBE44;&#xAD50; &#xAE09; &#xC644;&#xB8CC; &#xC21C;&#xC11C;)&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xB4F1;&#xAE09;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC774;&#xC774; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; (&#xC794;&#xC5EC; &#xBE48;&#xD2C8;&#xACFC; &#xC624;&#xB958;&#xAC00; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; &#xC694;&#xC18C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294;)&#xC640; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; 99%&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xBE44;&#xAD50; &#xAE09; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB9C8;&#xBB34;&#xB9AC; &#xD544;&#xC694; &#xC2DC; &#xC57D; 40-fold &#xC801;&#xC740; &#xC57D; &#xACE0; &#xC57D; &#xC0AC;&#xC9C4; &#xC801;&#xC740; &#xC9C1;&#xC6D0; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC644;&#xC131; &#xB418;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC138;&#xADE0; &#xC778;&#xACF5; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; (BAC) &#xD074;&#xB860;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB9C8;&#xBB34;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;, &#xD558;&#xB098; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD488;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC8C;&#xB188; &#xC0F7;&#xAC74; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9D1;&#xC911;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC815;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xB8E8;&#xD2F4;&#xC744; &#xC218;&#xB9BD; &#xC0C1;&#xC0C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0A0;&#xC9DC;&#xB97C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACBD;&#xD5D8; &#xBE44;&#xAD50; &#xAE09; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB9C8;&#xBB34;&#xB9AC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC218;&#xC815; &#xB3C4;&#xC911; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC800;&#xB834; &#xD55C; &#xC635;&#xC158;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC644;&#xC131; &#xB41C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xB4F1;&#xAE09;.

Aunque el costo de generar secuencia gen&oacute;mica de borradores sigue disminuyendo, esa secuencia de refinaci&oacute;n por el proceso de &quot;secuencia acabado&quot; sigue siendo caro. Secuencia acabado casi perfecto es un objetivo apropiado para el genoma humano y un peque&ntilde;o conjunto de genomas de referencia; sin embargo, un producto de tan alta calidad puede justificar los costos de un gran n&uacute;mero de genomas adicionales, al menos en el futuro previsible. Aqu&iacute; describimos la generaci&oacute;n y la calidad de un grado intermedio de secuencia gen&oacute;mica acabado (denominada secuencia final comparativo grado), que se adapta para el uso en las comparaciones de la secuencia multiespec&iacute;fico. Nuestros an&aacute;lisis indican que esta secuencia es de muy alta calidad (con las lagunas residuales y errores en su mayor&iacute;a pertenecientes a elementos repetitivos) y refleja el 99% de la secuencia total. Lo importante, grado comparativo secuencia acabado requiere aproximadamente 40-fold menos reactivos y aproximadamente 10 veces menos personal esfuerzo en comparaci&oacute;n con la generaci&oacute;n de la secuencia acabado casi perfecto, como por ejemplo que producen para el genoma humano. Aunque aplicado aqu&iacute; a acabado secuencia derivados de clones individuales cromosoma artificial bacteriano (BAC), uno podr&iacute;a prever establecer rutinas para el refino de secuencias procedentes de proyectos de secuenciaci&oacute;n de genoma completo de escopeta a un nivel de calidad similar. Nuestra experiencia hasta la fecha demuestra que grado comparativo secuencia acabado representa una opci&oacute;n pr&aacute;ctica y asequible para el refinamiento de la secuencia en el camino a Analisis comparativo.

Un grado intermedio de secuencia gen&oacute;mica acabado adecuado para an&aacute;lisis comparativos.

Apicomplexan &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x9AD8;&#x8D1F;&#x62C5;&#x6574;&#x4E2A;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x4E16;&#x754C;&#xFF0C;&#x5374;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x5F97;&#x5F88;&#x5C11;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x62E5;&#x6709;&#x8BB8;&#x591A;&#x771F;&#x6838;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5F88;&#x591A;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#xFF0C;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x7279;&#x5F81;&#x8FD8;&#x6F14;&#x793A;&#x4E86;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5E76;&#x62E5;&#x6709;&#x975E;&#x540C;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684; AT &#x5BCC;&#x57FA;&#x56E0;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6BD2;&#x529B;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6D89;&#x53CA;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7BA1;&#x63A7;&#x7684;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7A00;&#x5C11;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x627F;&#x8BA4;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x76D1;&#x7BA1;&#x56FE;&#x6848;&#x6709;&#x60F3;&#x53CD;&#x6620;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5143;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6269;&#x5927;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x548C;&#x91CD;&#x4F30;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x7279;&#x522B;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x548C;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x63A7;&#x5236;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x3002;

&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x3002;

Infection with the apicomplexan parasite Plasmodium falciparum is associated with a high burden of morbidity and mortality across the developing world, yet the mechanisms of transcriptional control in this organism are poorly understood. While P. falciparum possesses many of the characteristics common to eukaryotic transcription, including much of the canonical machinery, it also demonstrates unique patterns of gene expression and possesses unusually AT-rich intergenic sequences. Importantly, several biological processes that are critical to parasite virulence involve highly regulated patterns of gene expression and silencing. The relative scarcity of transcription-associated proteins and specific cis-regulatory motifs recognized in the P. falciparum genome have been thought to reflect a reduced role for transcription factors in transcriptional control in these parasites. New approaches and technologies, however, have led to the discovery of many more of these elements, including an expanded family of DNA-binding proteins, and a re-assessment of this hypothesis is required. We review the current understanding of transcriptional control in P. falciparum, specifically highlighting promoter-driven and epigenetic mechanisms involved in the control of transcription initiation.

Transcriptional control and gene silencing in Plasmodium falciparum.

L&#39;infection par le parasite Plasmodium falciparum d&#39;APICOMPLEXES est associ&eacute;e &agrave; une forte charge de morbidit&eacute; et de mortalit&eacute; dans les pays en d&eacute;veloppement, mais les m&eacute;canismes de contr&ocirc;le transcriptionnel chez cet organisme sont mal connus. Tandis que P. falciparum poss&egrave;de beaucoup de caract&eacute;ristiques communes &agrave; la transcription eucaryotes, y compris une grande partie de la machinerie canonique, il montre des mod&egrave;les uniques de l&#39;expression g&eacute;nique et poss&egrave;de inhabituellement s&eacute;quences interg&eacute;niques AT-riche. Ce qui est important, plusieurs processus biologiques qui sont essentielles &agrave; la virulence du parasite impliquent fortement r&eacute;glement&eacute;s profils d&#39;expression g&eacute;nique et faire taire. La relative raret&eacute; des prot&eacute;ines associ&eacute;es &agrave; la transcription et des motifs de cis-r&eacute;glementation sp&eacute;cifiques reconnus dans le g&eacute;nome P. falciparum ont &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute;s pour tenir compte d&#39;un r&eacute;duction du r&ocirc;le de facteurs de transcription dans le contr&ocirc;le transcriptionnel de ces parasites. Nouvelles approches et technologies, cependant, ont conduit &agrave; la d&eacute;couverte de beaucoup d&#39;autres de ces &eacute;l&eacute;ments, y compris une famille &eacute;largie des prot&eacute;ines de liaison &agrave; l&#39;ADN, et une r&eacute;&eacute;valuation de cette hypoth&egrave;se est n&eacute;cessaire. Nous passons en revue les connaissances actuelles de contr&ocirc;le transcriptionnel de P. falciparum, sp&eacute;cifiquement mise en &eacute;vidence des m&eacute;canismes &eacute;pig&eacute;n&eacute;tiques et ax&eacute;e sur le promoteur impliqu&eacute;s dans la r&eacute;gulation de l&#39;initiation de la transcription.

Contr&ocirc;le transcriptionnel et silen&ccedil;age g&eacute;nique de Plasmodium falciparum.

Infektion mit den Apicomplexan Parasiten Plasmodium Falciparum ist verbunden mit einer hohen Belastung von Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t in den Entwicklungsl&auml;ndern, doch die transkriptionelle Kontrollmechanismen in diesem Organismus sind oft missverstanden. W&auml;hrend p. Falciparum viele Merkmale, die eukaryotischen Transkription besitzt, einschlie&szlig;lich viel von den kanonischen Maschinen, au&szlig;erdem zeigt einzigartige Muster der Genexpression und besitzt ungew&ouml;hnlich AT-reiche intergenetischer Sequenzen. Wichtig ist, beinhalten mehrere biologische Prozesse, die entscheidend zu Parasiten Virulenz sind stark regulierten Muster der Genexpression und zum Schweigen brachte. Die relative Knappheit der Transkription-assoziierte Proteine und spezifische Cis-regulatorische Motive, die in das Genom von p. Falciparum erkannt haben gedacht, um eine geringere Rolle f&uuml;r Transkriptionsfaktoren transkriptionelle Kontrolle in dieser Parasiten zu reflektieren. Neue Ans&auml;tze und Technologien, jedoch f&uuml;hrten zu der Entdeckung von vielen mehr dieser Elemente, einschlie&szlig;lich einer erweiterten Familie der DNA-bindenen Proteine, und eine erneute Bewertung dieser Hypothese ist erforderlich. Wir &uuml;berpr&uuml;fen das aktuelle Verst&auml;ndnis &uuml;ber transkriptionelle Control in p. Falciparum, speziell hervorheben Projekttr&auml;ger-getrieben und epigenetische Mechanismen haben, die Kontrolle &uuml;ber die Transkription Einleitung.

Transkriptionelle Kontrolle und gen-silencing in Plasmodium Falciparum.

L&#39;infezione con il parassita Plasmodium falciparum Apicomplexa &egrave; associato un elevato onere di morbilit&agrave; e mortalit&agrave; in tutto il mondo in via di sviluppo, ma i meccanismi di controllo trascrizionale di questo organismo sono capiti male. Mentre p. falciparum possiede molte caratteristiche comuni alla trascrizione eucariotica, compresa gran parte dei macchinari canonico, inoltre dimostra unico pattern di espressione genica e possiede insolitamente sequenze intergenic AT-rich. Importante, diversi processi biologici che sono fondamentali per la virulenza del parassita coinvolgono altamente regolamentato pattern di espressione genica e del silenzio. La relativa scarsit&agrave; di trascrizione-associated proteins e specifici motivi cis-normativi riconosciuti nel genoma del p. falciparum sono stati pensato per riflettere un ruolo ridotto per fattori di trascrizione nel controllo trascrizionale in questi parassiti. Nuovi approcci e tecnologie, tuttavia, hanno portato alla scoperta di molti altri di questi elementi, tra cui un&#39;estesa famiglia di DNA-binding proteins, e una rivalutazione di questa ipotesi &egrave; richiesta. Passiamo in rassegna la comprensione attuale di controllo trascrizionale di p. falciparum, evidenziando in particolare meccanismi epigenetici e promotore-driven coinvolti nel controllo di iniziazione della trascrizione.

Controllo trascrizionale e silenziamento genico in Plasmodium falciparum.

Apicomplexan &#x539F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x56FD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7F79;&#x60A3;&#x7387;&#x3068;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x3053;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x898F;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x307E;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x901A;&#x5E38; AT-&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x6240;&#x6709;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x53B3;&#x3057;&#x304F;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x3068; p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3067;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5E0C;&#x5C11;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x601D;&#x3063;&#x305F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3084;&#x6280;&#x8853;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x62E1;&#x5927;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306E;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x99C6;&#x52D5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x7279;&#x306B;&#x5F37;&#x8ABF; p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x3067;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Apicomplexan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Plasmodium falciparum &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xB960;&#xACFC; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xBD80;&#xB2F4;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB3C4;&#xC0C1;&#xAD6D;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC544;&#xC9C1;&#xC774; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;. P. falciparum &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC815;&#xC2DD; &#xAE30;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xC0AC; &#xACF5;&#xD1B5; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB610;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC720; &#xBCF4;&#xD1B5; AT &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; intergenic &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xAC00; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC0AC; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC815; cis &#xADDC;&#xC815; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; P. falciparum &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xBD80;&#xC871;&#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xAE30;&#xC220;&#xC744;,, DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; &#xAC00;&#xC871;&#xC744; &#xBE44;&#xB86F; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xC774;&#xB048; &#xACE0;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788; &#xC804;&#xC0AC; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBAA8;&#xD130; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xBC0F; epigenetic &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; P. falciparum transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xACFC; Plasmodium falciparum&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Infecci&oacute;n con el par&aacute;sito apicomplejo Plasmodium falciparum se asocia con una alta carga de morbilidad y mortalidad en todo el mundo en desarrollo, sin embargo, los mecanismos de control transcripcional en este organismo se entienden mal. Mientras que p. falciparum posee muchas de las caracter&iacute;sticas comunes a la transcripci&oacute;n eucariota, incluyendo gran parte de la maquinaria can&oacute;nica, tambi&eacute;n muestra patrones &uacute;nicos de la expresi&oacute;n g&eacute;nica y posee inusualmente secuencias interg&eacute;nicas AT-ricos. Lo importante, varios procesos biol&oacute;gicos que son esenciales para la virulencia del par&aacute;sito implican altamente regulados patrones de expresi&oacute;n g&eacute;nica y silenciamiento. La relativa escasez de prote&iacute;nas asociadas a la transcripci&oacute;n y motivos cis-reguladores espec&iacute;ficos reconocidos en el genoma de p. falciparum han sido pensados para reflejar una reducci&oacute;n del papel de los factores de transcripci&oacute;n en el control transcripcional en estos par&aacute;sitos. Nuevos enfoques y tecnolog&iacute;as, sin embargo, han conducido al descubrimiento de muchos m&aacute;s de estos elementos, incluyendo una familia ampliada de prote&iacute;nas de uni&oacute;n al ADN, y se requiere una reevaluaci&oacute;n de esta hip&oacute;tesis. Repasamos la comprensi&oacute;n actual de control transcripcional en p. falciparum, destacando especialmente basadas en promotor y epigen&eacute;ticos mecanismos implicados en el control de la iniciaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n.

Control transcripcional y silenciamiento g&eacute;nico en Plasmodium falciparum.

&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x662F;&#x5176;&#x4E2D;&#x6700;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7269;&#x79CD;&#x4F20;&#x67D3;&#x7ED9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x682A;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x66F2;&#x76EE;&#x4E2D;&#x5207;&#x6362;&#x4E3A;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5404;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x5165;&#x4FB5;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x7F51;&#x7EC7;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x6837; (RBL) &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458;&#x90FD;&#x5047;&#x5B9A;&#x80FD;&#x591F;&#x53D1;&#x6325;&#x6838;&#x5FC3;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x786E;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53;-&#x53D7;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; PfRh2b &#x548C; PfRh2a &#x7684; W2mef&#xFF0C;&#x662F;&#x4E25;&#x91CD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x5165;&#x4FB5;&#xFF0C;&#x548C; PfRh2b &#x914D;&#x4F53;&#x662F;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x6B64;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x80CC;&#x666F;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5E94;&#x53D8;&#x7684;&#x9776;&#x5411;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;&#x50CF;&#x7236;&#x6BCD;&#x884C;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x5C11; PfRh2a &#x6216; PfR2b &#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5207;&#x6362;&#x5230;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5F00;&#x5173;&#x7684;&#x7EBF;&#x6761;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6548;&#x7387;&#x964D;&#x4F4E;&#x5165;&#x4FB5;&#x5230;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728;&#x5165;&#x4FB5;&#x901A;&#x8FC7;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; PfRh2b &#x548C; PfRh2a &#x6697;&#x793A;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x627E;&#x5230;&#x4E00;&#x79CD;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#x727A;&#x7272; PfRh2a PfRh2b &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x7531;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x9057;&#x4F20;&#x80CC;&#x666F;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;-&#x53D7;&#x4F53;&#x7528;&#x6CD5;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x534F;&#x8C03;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; PfRh2a&#xFF0C;PfRh2b &#x4E00;&#x8D77;&#x8C03;&#x89E3;&#x6709;&#x6548;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;

&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x4FB5;&#x5165;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80F6;&#x86CB;&#x767D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x534F;&#x540C;&#x6027;&#x3002;

Plasmodium falciparum is the most virulent of the Plasmodium species infective to humans. Different P. falciparum strains vary in their dependence on erythrocyte receptors for invasion and their ability to switch in their utilization of different receptor repertoires. Members of the reticulocyte-binding protein-like (RBL) family of invasion ligands are postulated to play a central role in defining ligand-receptor interactions, known as invasion pathways. Here we report the targeted gene disruption of PfRh2b and PfRh2a in W2mef, a parasite strain that is heavily dependent on sialic-acid receptors for invasion, and show that the PfRh2b ligand is functional in this parasite background. Like the parental line, parasites lacking either PfRh2a or PfR2b can switch to a sialic acid-independent invasion pathway. However, both of the switched lines exhibit a reduced efficiency for invasion into sialic acid-depleted cells, suggesting a role for both PfRh2b and PfRh2a in invasion via sialic acid-independent receptors. We also find a strong selective pressure for the reconstitution of PfRh2b expression at the expense of PfRh2a. Our results reveal the importance of genetic background in ligand-receptor usage by P. falciparum parasites, and suggest that the co-ordinate expression of PfRh2a, PfRh2b together mediate efficient sialic acid-independent erythrocyte invasion.

Cooperativity between Plasmodium falciparum adhesive proteins for invasion into erythrocytes.

Plasmodium falciparum est le plus virulent de l&#39;esp&egrave;ce Plasmodium infectieux pour l&#39;homme. Souches diff&eacute;rentes de P. falciparum varient dans leur d&eacute;pendance sur les r&eacute;cepteurs &eacute;rythrocytaires invasion et leur capacit&eacute; &agrave; passer dans leur utilisation des r&eacute;pertoires de r&eacute;cepteurs diff&eacute;rents. Membres de la famille de (RBL) comme prot&eacute;ine r&eacute;ticulocytes-liaison des ligands de l&#39;invasion sont postul&eacute;s &agrave; jouer un r&ocirc;le central dans la d&eacute;finition des interactions ligand-r&eacute;cepteur, connues comme voies d&#39;invasion. Nous rapportons ici l&#39;interruption du g&egrave;ne cibl&eacute; de PfRh2b et de PfRh2a en W2mef, une souche du parasite qui est fortement tributaire de l&#39;acide sialique r&eacute;cepteurs pour l&#39;invasion et montrent que le ligand PfRh2b fonctionne en arri&egrave;re-plan de ce parasite. Comme la lign&eacute;e parentale, parasites, sans PfRh2a ni PfR2b peuvent basculer vers une voie ind&eacute;pendante de l&#39;acide sialique invasion. Toutefois, les deux lignes commut&eacute;es pr&eacute;sentent une efficacit&eacute; r&eacute;duite pour l&#39;invasion dans les cellules pauvre en acide sialique, sugg&eacute;rant un r&ocirc;le pour les PfRh2b et les PfRh2a dans invasion via des r&eacute;cepteurs de l&#39;acide sialique ind&eacute;pendant. On trouve aussi une forte pression s&eacute;lective pour la reconstitution de l&#39;expression de PfRh2b au d&eacute;triment de la PfRh2a. Nos r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent l&#39;importance du patrimoine g&eacute;n&eacute;tique dans l&#39;utilisation de ligand-r&eacute;cepteur par des parasites P. falciparum et sugg&egrave;rent que l&#39;expression de coordonner des PfRh2a, PfRh2b m&eacute;diateur ensemble invasion efficace ind&eacute;pendant de l&#39;acide sialique &eacute;rythrocytaire.

Coop&eacute;rativit&eacute; entre prot&eacute;ines adh&eacute;sives de Plasmodium falciparum &agrave; l&#39;invasion dans les &eacute;rythrocytes.

Plasmodium Falciparum ist die b&ouml;sartigste der Plasmodium-Arten f&uuml;r den Menschen infekti&ouml;s. Verschiedene p. Falciparum Belastungen variieren in ihrer Abh&auml;ngigkeit von Erythrozyten-Rezeptoren f&uuml;r die Invasion und ihre F&auml;higkeit, in ihrer Auslastung der unterschiedlichen Rezeptor-Repertoire zu wechseln. Reticulocyte-verbindliches Protein-wie (RBL) Familienmitglieder Einmarsch Liganden sind, spielen eine zentrale Rolle bei der Definition von Ligand-Rezeptor-Interaktionen, bekannt als Einmarsch Bahnen postuliert. Hier berichten wir die gezielte gen-Unterbrechung der PfRh2b und PfRh2a in W2mef, ein Parasit-Stamm, der ist stark abh&auml;ngig von sialic-S&auml;ure-Rezeptoren f&uuml;r die Invasion und geht hervor, dass die PfRh2b-Ligand funktional in diesem Parasit-Hintergrund. Wie die Elternlinie k&ouml;nnen Parasiten fehlt entweder PfRh2a oder PfR2b Sialins&auml;ure-unabh&auml;ngige Einmarsch Weg wechseln. Allerdings zeigen die beiden geschalteten Zeilen eine geringere Effizienz f&uuml;r das Eindringen in Sialins&auml;ure-abgereichertem Zellen, schl&auml;gt eine Rolle f&uuml;r PfRh2b und PfRh2a Invasion &uuml;ber Sialins&auml;ure-unabh&auml;ngige Rezeptoren. Wir finden auch einen starken selektiven Druck die Neubildung der PfRh2b Ausdruck auf Kosten der PfRh2a. Unsere Ergebnisse zeigen die Bedeutung der genetischen Hintergrund in Ligand-Rezeptor-Nutzung durch p. Falciparum Parasiten, und schlagen vor, da&szlig; koordinieren Ausdruck PfRh2a, PfRh2b gemeinsam effiziente Sialins&auml;ure-unabh&auml;ngige Erythrozyten Einmarsch vermitteln.

Kooperation zwischen Plasmodium Falciparum anhaftenden Proteinen f&uuml;r das Eindringen in Erythrozyten.

Plasmodium falciparum &egrave; il pi&ugrave; virulento delle specie di Plasmodium infettivi per l&#39;uomo. Ceppi di p. falciparum differenti variano in dipendenza dai loro recettori degli eritrociti per invasione e la loro capacit&agrave; di passare nel loro utilizzo di repertori diversi recettori. Membri della famiglia dei reticolociti-binding proteina-come (RBL) di ligandi di invasione sono postulati di giocare un ruolo centrale nella definizione delle interazioni ligando-recettore, note come vie di invasione. Qui riportiamo la rottura mirata del gene di PfRh2b e PfRh2a in W2mef, un ceppo di parassita che &egrave; fortemente dipendente da acido sialico recettori per l&#39;invasione e dimostrano che il ligando PfRh2b &egrave; funzionale a questo sfondo parassita. Come la linea parentale, parassiti carente o PfRh2a o PfR2b possono passare a un percorso indipendente dall&#39;acido sialico invasione. Tuttavia, entrambe le linee commutate presentano una ridotta efficienza per invasione in cellule acido sialico-esaurito, suggerendo un ruolo sia per PfRh2b e PfRh2a in invasione tramite i recettori acido sialico-indipendente. Troviamo anche una forte pressione selettiva per la ricostituzione dell&#39;espressione PfRh2b a scapito di PfRh2a. I nostri risultati suggeriscono che l&#39;espressione coordinata di PfRh2a, PfRh2b mediare insieme invasione efficiente acido sialico-indipendente degli eritrociti e rivelano l&#39;importanza del background genetico nell&#39;utilizzo di ligando-recettore da p. falciparum parassiti.

Cooperativit&agrave; tra proteine adesive di Plasmodium falciparum per invasione in eritrociti.

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x539F;&#x866B;&#x7A2E;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x306A;&#x308B; p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x4FB5;&#x7565;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x7528;&#x3067;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DB2;&#x72B6;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x69D8; (RBL) &#x5BB6;&#x65CF;&#x4FB5;&#x7565;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;ligand &#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PfRh2b &#x3068; PfRh2a &#x3067; W2mef&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x4FB5;&#x653B;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306E; PfRh2b &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3053;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF; &#x30B0;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7834;&#x58CA;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x89AA;&#x306E;&#x884C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; PfRh2a &#x307E;&#x305F;&#x306F; PfR2b &#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x6B20;&#x304F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3078;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x884C;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x67AF;&#x6E07;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306E; PfRh2b &#x3068; PfRh2a &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x72EC;&#x7ACB;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6D78;&#x6F64;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6E1B;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3082; PfRh2b &#x5F0F; PfRh2a &#x3092;&#x72A0;&#x7272;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x5727;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#x306E; ligand &#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x4F7F;&#x7528;&#x91CF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x8ABF;&#x6574;&#x5F0F; PfRh2a&#x3001;PfRh2b &#x304C;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x72EC;&#x7ACB;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x4FB5;&#x5165;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3002;

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3078;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306E;&#x5354;&#x540C;&#x6027;&#x3002;

Plasmodium falciparum&#xC740; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC5FC; Plasmodium &#xC885;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778;. P. falciparum &#xB2E4;&#xB978; &#xBCC0;&#xC885; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xCE68;&#xC785;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC94;&#xC720;&#xB7FD;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xB960;&#xC5D0; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC885;&#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE68;&#xACF5; ligands&#xC758; reticulocyte &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC19;&#xC740; (RBL) &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC740; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;, &#xCE68;&#xC785; &#xACBD;&#xB85C; &#xB77C;&#xACE0; &#xC815;&#xC758;&#xC5D0; &#xC911;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; postulated. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PfRh2b &#xBC0F; PfRh2a W2mef, PfRh2b &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xB294;&#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBC31;&#xADF8;&#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xACF5;&#xC5F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE68;&#xACF5;, sialic &#xC0B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7A5;&#xC560; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xC120; &#xCC98;&#xB7FC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; PfRh2a &#xB610;&#xB294; PfR2b &#xBD80;&#xC871; sialic &#xC0B0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xCE68;&#xC785; &#xACBD;&#xB85C; &#xC804;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xB77C;&#xC778; sialic &#xC0B0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCE68;&#xB7B5;&#xC5D0; PfRh2b &#xBC0F; Pfrh2a&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; sialic &#xC0B0; &#xACE0;&#xAC08; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xCE68;&#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; PfRh2a &#xB300;&#xC2E0; PfRh2b &#xC2DD;&#xC758; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; P. falciparum &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;-&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xBC30;&#xACBD;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; PfRh2a, Pfrh2b&#xC758; &#xACF5;&#xB3D9; &#xC2DD; &#xD568;&#xAED8; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; sialic &#xC0B0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xCE68;&#xACF5; &#xC911;&#xC7AC;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Plasmodium falciparum &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xCE68;&#xC785;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC811;&#xCC29; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774; cooperativity.

Plasmodium falciparum es el m&aacute;s virulento de las especies de plasmodios contagiosa a los seres humanos. Las cepas de p. falciparum diferentes var&iacute;an en su dependencia de los receptores del eritrocito para la invasi&oacute;n y su capacidad para cambiar en su utilizaci&oacute;n de repertorios diferentes receptores. Miembros de la familia de (RBL) protein&aacute;ceo reticulocitos Uni&oacute;n de ligandos de invasi&oacute;n se postulan para jugar un papel central en la definici&oacute;n de interacci&oacute;n ligando-receptor, conocido como caminos de invasi&oacute;n. Aqu&iacute; divulgamos la alteraci&oacute;n de genes espec&iacute;ficos de PfRh2b y PfRh2a en W2mef, una variedad de par&aacute;sitos que es fuertemente dependiente de &aacute;cidos si&aacute;licos receptores para la invasi&oacute;n y mostrar que el ligando PfRh2b es funcional en el fondo de este par&aacute;sito. Como la l&iacute;nea parental, par&aacute;sitos que carecen de PfRh2a o PfR2b pueden cambiar a un camino independiente de &aacute;cido si&aacute;lico invasi&oacute;n. Sin embargo, tanto de las l&iacute;neas conmutadas presentan una eficacia reducida de invasi&oacute;n en las c&eacute;lulas de &aacute;cido si&aacute;lico-agotado, sugiriendo un papel para PfRh2b y PfRh2a en invasi&oacute;n a trav&eacute;s de receptores de &aacute;cido si&aacute;lico independiente. Tambi&eacute;n encontramos una fuerte presi&oacute;n selectiva para la reconstituci&oacute;n de la expresi&oacute;n de PfRh2b a costa de PfRh2a. Nuestros resultados muestran la importancia del fondo gen&eacute;tico en uso ligando-receptor por p. falciparum par&aacute;sitos y sugieren que la expresi&oacute;n coordinada de PfRh2a, PfRh2b juntos mediar invasi&oacute;n eficiente de &aacute;cido si&aacute;lico independiente de eritrocito.

Cooperatividad entre prote&iacute;nas adhesivas de Plasmodium falciparum por invasi&oacute;n en eritrocitos.

Come loro ospiti umani, parassiti di Plasmodium falciparum si basano sul sistema ubiquitina-proteasoma per la sopravvivenza. Abbiamo identificato in precedenza PfUCHL3, un enzima deubiquitinating, e qui ci caratterizzano la sua attivit&agrave; e cambiamenti nell&#39;architettura del sito attivo dell&#39;associazione di ubiquitin. Troviamo forti prove che PfUCHL3 &egrave; essenziale per la sopravvivenza del parassita. Le strutture di cristallo di entrambi PfUCHL3 da solo e nel complesso con il substrato suicida di ubiquitin-based UbVME suggerire un ciclo di crossover sito attivo piuttosto rigida che probabilmente svolge un ruolo nel limitare la dimensione di ubiquitin addotto substrati. Simulazioni di dinamica molecolare delle strutture e un modello del complesso PfUCHL3-PfNedd8 ha permesso l&#39;identificazione delle interazioni chiave condivise dell&#39;ubiquitina e PfNedd8 con PfUCHL3, spiegando la specificit&agrave; di questo enzima. Distinte differenze osservate in associazione di ubiquitin tra PfUCHL3 e il suo omologo umano rendono probabile che il parassita DUB pu&ograve; essere mirato selettivamente, lasciando inalterato l&#39;enzima umano.

Studi strutturali e caratterizzazione del Plasmodium falciparum ubiquitina e Nedd8 idrolasi UCHL3.

&#x50CF;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#xFF0C;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x5BC4;&#x751F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684; PfUCHL3&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD; deubiquitinating &#x7684;&#x9176;&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6CDB;&#x7D20;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E; PfUCHL3 &#x662F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; PfUCHL3 &#x548C; UbVME &#x5EFA;&#x8BAE;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BF9;&#x9650;&#x5236;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x800C;&#x662F;&#x521A;&#x6027;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4EA4;&#x53C9;&#x5FAA;&#x73AF;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6CDB;&#x7D20;&#x7684;&#x81EA;&#x6740;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#x3002;PfUCHL3 PfNedd8 &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x53CA;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x5141;&#x8BB8;&#x5171;&#x4EAB;&#x5BC6;&#x94A5;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x548C; PfNedd8 &#x4E0E; PfUCHL3&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x53CC;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3002;&#x6CDB;&#x7D20; PfUCHL3 &#x548C;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x660E;&#x663E;&#x5DEE;&#x522B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x53EF;&#x80FD;&#x540C;&#x65F6;&#x79BB;&#x5F00;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x9176;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x9488;&#x5BF9;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x914D;&#x97F3;&#x3002;

&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6CDB;&#x7D20;&#x548C;&#x6C34;&#x89E3;&#x9176; Nedd8 UCHL3 &#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x53CA;&#x7ED3;&#x6784;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Like their human hosts, Plasmodium falciparum parasites rely on the ubiquitin-proteasome system for survival. We previously identified PfUCHL3, a deubiquitinating enzyme, and here we characterize its activity and changes in active site architecture upon binding to ubiquitin. We find strong evidence that PfUCHL3 is essential to parasite survival. The crystal structures of both PfUCHL3 alone and in complex with the ubiquitin-based suicide substrate UbVME suggest a rather rigid active site crossover loop that likely plays a role in restricting the size of ubiquitin adduct substrates. Molecular dynamics simulations of the structures and a model of the PfUCHL3-PfNedd8 complex allowed the identification of shared key interactions of ubiquitin and PfNedd8 with PfUCHL3, explaining the dual specificity of this enzyme. Distinct differences observed in ubiquitin binding between PfUCHL3 and its human counterpart make it likely that the parasitic DUB can be selectively targeted while leaving the human enzyme unaffected.

Characterization and structural studies of the Plasmodium falciparum ubiquitin and Nedd8 hydrolase UCHL3.

Comme leurs h&#xF4;tes humains, parasites Plasmodium falciparum compter sur le syst&#xE8;me ubiquitine-prot&#xE9;asome pour la survie. Nous avons pr&#xE9;c&#xE9;demment identifi&#xE9; PfUCHL3, une enzyme d&#xE9;subiquitination, et ici nous caract&#xE9;riser son activit&#xE9; et des changements dans l&#x26;#39;architecture du site actif lors de la liaison &#xE0; l&#x26;#39;ubiquitine. Nous trouvons des preuves solides que PfUCHL3 est essentielle pour la survie du parasite. Les structures cristallines de deux PfUCHL3 seule et en complexe avec l&#x26;#39;ubiquitine UbVME bas&#xE9; sur le suicide substrat sugg&#xE8;rent une assez rigide boucle active crois&#xE9; site qui joue probablement un r&#xF4;le dans la restriction de la taille des substrats adduits ubiquitine. Simulations de dynamique mol&#xE9;culaire des structures et un mod&#xE8;le du complexe PfUCHL3-PfNedd8 permis l&#x26;#39;identification de communes des interactions cl&#xE9;s de l&#x26;#39;ubiquitine et PfNedd8 avec PfUCHL3, expliquant la double sp&#xE9;cificit&#xE9; de cette enzyme. Des diff&#xE9;rences marqu&#xE9;es observ&#xE9;es dans la liaison entre l&#x26;#39;ubiquitine PfUCHL3 et son homologue humain, il est probable que le DUB parasite peut &#xEA;tre s&#xE9;lectivement cibl&#xE9;e, tout en laissant l&#x26;#39;enzyme humaine affect&#xE9;e.

Caract&#xE9;risation et &#xE9;tudes structurales du Plasmodium Falciparum Ubiquitine et Nedd8 Hydrolase UCHL3

Vertrauen wie ihre menschlichen Wirte Plasmodium Falciparum Parasiten auf das Ubiquitin-Proteasom-System f&uuml;r das &Uuml;berleben. Wir zuvor identifizierten PfUCHL3, ein Deubiquitinating Enzym, und hier wir charakterisieren seine Aktivit&auml;ten und &Auml;nderungen in der aktiven Site-Architektur auf Bindung an Ubiquitin. Wir suchen starke Beweise, dass PfUCHL3 Parasiten &Uuml;berleben wesentlich ist. Die Kristallstrukturen von beiden PfUCHL3 allein und im Komplex mit der Ubiquitin-basierte Selbstmord-Substrat UbVME vorschlagen, eine eher starre aktive Website-Frequenzweiche-Schleife, die wahrscheinlich spielt eine Rolle beschr&auml;nken der Gr&ouml;&szlig;e des Ubiquitin-Addukt-Substraten. Molekulardynamik-Simulationen der Strukturen und ein Modell des PfUCHL3-PfNedd8-komplexes erlaubt die Identifikation von freigegebenen Schl&uuml;ssel Interaktionen von Ubiquitin und PfNedd8 mit PfUCHL3, erkl&auml;ren die duale Spezifit&auml;t dieses Enzyms. Deutliche Unterschiede im Ubiquitin-Bindung zwischen PfUCHL3 und das menschliche Gegenst&uuml;ck beobachtet machen es wahrscheinlich, dass die parasit&auml;re DUB selektiv ausgerichtet werden, kann wobei das menschliche Enzym unber&uuml;hrt.

Charakterisierung und strukturelle Studien des Plasmodium Falciparum Ubiquitin und Nedd8 Hydrolase UCHL3.

&#x305D;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306F;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3; - &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7CFB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x8131;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;PfUCHL3&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x3073;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PfUCHL3&#x304C;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3092;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;PfUCHL3&#x5358;&#x72EC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x81EA;&#x6BBA;&#x57FA;&#x8CEA;UbVME&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x4ED8;&#x52A0;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x5805;&#x3044;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#xB7;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;PfUCHL3-PfNedd8&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;PfUCHL3&#x3068;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;PfNedd8&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PfUCHL3&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x304C;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x5BC4;&#x751F;DUB&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#xFF08;Plasmodium falciparum&#xFF09;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;NEDD8&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;UCHL3&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7814;&#x7A76;

&#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xCC98;&#xB7FC; Plasmodium falciparum &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;-&#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; PfUCHL3, deubiquitinating &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; PfUCHL3 &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD06C;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xD0C8; &#xD63C;&#xC790; &#xB450; PfUCHL3 &#xBC0F; UbVME &#xC81C;&#xC548; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC18C; &#xACBD;&#xC9C1; &#xB41C; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xB8E8;&#xD504; adduct &#xAE30;&#xD310; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAE30;&#xBC18; &#xC790;&#xC0B4; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;. &#xBD84;&#xC790; &#xB3D9;&#xC5ED;&#xD559; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; PfUCHL3 PfNedd8 &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xACFC; PfUCHL3&#xC640; Pfnedd8&#xC758; &#xACF5;&#xC720; &#xD0A4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758;&#xC774; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC774;&#xC911; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Pfuchl3&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB300;&#xC751; &#xC0AC;&#xC774; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4; &#xAE30;&#xC0DD; DUB &#xC778;&#xAC04; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xB5A0;&#xB098;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774;.

Plasmodium falciparum &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xACFC; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; Nedd8 uchl3&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870; &#xC5F0;&#xAD6C;.

Al igual que sus hu&#xE9;spedes humanos, los par&#xE1;sitos Plasmodium falciparum se basan en el sistema ubiquitina-proteasoma para la supervivencia. Hemos identificado previamente PfUCHL3, una enzima deubiquitinating, y aqu&#xED; podemos caracterizar su actividad y cambios en la arquitectura del sitio activo al unirse a la ubiquitina. Encontramos evidencia de que PfUCHL3 es esencial para la supervivencia del par&#xE1;sito. Las estructuras cristalinas de ambos PfUCHL3 solo y en el complejo con el UbVME suicidio ubiquitina-sustrato a base de sugerir un bastante r&#xED;gida bucle activo cruce sitio que probablemente desempe&#xF1;a un papel en la limitaci&#xF3;n del tama&#xF1;o de sustratos aducto ubiquitina. Simulaciones de din&#xE1;mica molecular de las estructuras y un modelo del complejo PfUCHL3-PfNedd8 permiti&#xF3; la identificaci&#xF3;n de las interacciones fundamentales compartidos de la ubiquitina y PfNedd8 con PfUCHL3, explicando la doble especificidad de esta enzima. Claras diferencias observadas en la uni&#xF3;n entre la ubiquitina PfUCHL3 y su contraparte humana, es probable que el par&#xE1;sito se puede DUB selectivamente, dejando la enzima humana afectada.

Caracterizaci&#xF3;n y Estudios Estructurales de la ubiquitina Plasmodium falciparum y NEDD8 hidrolasa UCHL3

&#x62BD;&#x8C61;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x53D6;&#x51B3;&#x9AD8;&#x6548;&#x4FB5;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x914D;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x9176;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x4E0E;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7F51;&#x7EC7;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269; &#xFF08;PfRhs&#xFF09; &#x6839;&#x5C16;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x521B; merozoites &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x90FD;&#x5047;&#x5B9A;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C; ectodomains&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; paralogs &#x7684; variant &#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x503C;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F7F;&#x7528;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;PfRh &#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;PfRh2a &#x548C; PfRh2b&#xFF0C;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E3A; 2700 N &#x7AEF;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x53EA;&#x5728; C &#x7EC8;&#x7AEF; 500 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x3001; &#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x57DF;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#xFF0C;PfRh2b &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x660E;&#x786E;&#x754C;&#x5B9A;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84; PfRh2a &#x65F6;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x6216;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x3002;&#x6620;&#x5C04;&#x7F16;&#x7801;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x533A;&#x57DF;&#x663E;&#x793A;&#x8089;&#x640F;&#x6218;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E0E; PfRh2a &#x548C; PfRh2b recombinogenic &#x6848;&#x53D1;&#x73B0;&#x573A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x521B;&#x9020;&#x53EF;&#x884C;&#x7684; PfRh2a/2b &#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x8981;&#x627E;&#x51FA;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x5229;&#x7528;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x9274;&#x522B;&#x80FD;&#x529B;&#x6240;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x7684; PfRh2a &#x548C; PfRh2b&#x3001; &#x4E0D;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x6216;&#x8DE8;&#x819C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x759F;&#x75BE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x914D;&#x4F53;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&quot;&#x4E24;&#x4E2A;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x88C2;&#x6B96;&#x5B50;&#x5165;&#x4FB5;&#x914D;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x4E2D;&#x66F4;&#x6539;&#x51B3;&#x5B9A;&quot;

Abstract The pathogenesis of Plasmodium falciparum depends on efficient invasion into host erythrocytes. Parasite ligands encoded by multigene families interact with erythrocyte receptors. P. falciparum reticulocyte binding protein homologues (PfRhs) are expressed at the apical surface of invasive merozoites and have divergent ectodomains that are postulated to bind different erythrocyte receptors. Variant expression of these paralogs results in the use of alternative invasion pathways. Two PfRh proteins, PfRh2a and PfRh2b, are identical for 2700 N-terminal amino acids and differ only in a C-terminal 500 amino acid region, which includes a unique ectodomain, transmembrane domain, and cytoplasmic domain. Despite their similarity, PfRh2b is required for a well-defined invasion pathway while PfRh2a is not required or sufficient for this pathway. Mapping the genomic region encoding these proteins revealed a recombinogenic locus with PfRh2a and PfRh2b in a head-to-head orientation. We have generated viable PfRh2a/2b chimeric parasites to identify the regions required for alternative invasion pathway utilization. We find that the differential ability to use these pathways is conferred by the cytoplasmic domains of PfRh2a and PfRh2b, not the ectodomain or transmembrane regions. Our results highlight the importance of the cytoplasmic domain for functional diversification of a major adhesive ligand family in malaria parasites.

"Functional Diversification between Two Related Plasmodium falciparum Merozoite Invasion Ligands is Determined by Changes in the Cytoplasmic Domain"

R&eacute;sum&eacute; de la pathogen&egrave;se de Plasmodium falciparum d&eacute;pend d&#39;invasion efficace dans les &eacute;rythrocytes de l&#39;h&ocirc;te. Ligands parasite cod&eacute;es par familles multig&eacute;niques interagissent avec les r&eacute;cepteurs de l&#39;&eacute;rythrocyte. P. falciparum r&eacute;ticulocytes liaison prot&eacute;ines homologues (PfRhs) sont exprim&eacute;s &agrave; la surface apicale des m&eacute;rozo&iuml;tes envahissantes et ont des glycoprot&eacute;ines divergentes qui sont postul&eacute;s pour lier les r&eacute;cepteurs diff&eacute;rents &eacute;rythrocytaire. Expression variant de ces paralogues entra&icirc;ne l&#39;utilisation des voies d&#39;invasion alternatifs. Deux prot&eacute;ines PfRh, PfRh2a et PfRh2b, sont identiques pour 2700 acides amin&eacute;s N-terminaux et ne diff&egrave;rent que par une r&eacute;gion de 500 acides amin&eacute;s C-terminaux, qui comprend un domaine transmembranaire et ectodomaine unique, domaine cytoplasmique. Malgr&eacute; leur similitude, PfRh2b est requis pour une voie d&#39;invasion bien d&eacute;finies, tandis que PfRh2a n&#39;est pas n&eacute;cessaire ou suffisante pour cette voie. Cartographie de la r&eacute;gion g&eacute;nomique codant ces prot&eacute;ines ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; un locus recombinog&eacute;nique avec PfRh2a et PfRh2b dans une orientation en t&ecirc;te-&agrave;-t&ecirc;te. Nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des parasites chim&eacute;riques viables de PfRh2a/2 b pour identifier les r&eacute;gions requises pour l&#39;utilisation de voie alternative d&#39;invasion. Nous trouvons que la capacit&eacute; diff&eacute;rentielle d&#39;utiliser ces voies est conf&eacute;r&eacute;e par les domaines cytoplasmiques des PfRh2a et PfRh2b, pas ectodomaine ou r&eacute;gions transmembranaires. Nos r&eacute;sultats mettent en &eacute;vidence l&#39;importance du domaine cytoplasmique de diversification fonctionnelle d&#39;une famille de ligand adh&eacute;sif majeur chez les parasites du paludisme.

&laquo; Diversification fonctionnelle entre falciparum de Plasmodium connexes deux m&eacute;rozo&iuml;te Invasion Ligands est d&eacute;termin&eacute;e par des changements dans le domaine cytoplasmique &raquo;

Abstract die Pathogenese von Plasmodium Falciparum h&auml;ngt effiziente Invasion in Host-Erythrozyten. Parasit-Liganden durch multigene Familien kodiert interagieren mit Erythrozyten-Rezeptoren. P. Falciparum Reticulocyte verbindliches Protein Homologen (PfRhs) werden an der apikalen Oberfl&auml;che des invasiven Merozoiten ausgedr&uuml;ckt und haben unterschiedliche Ectodomains, die postulierte sind verschiedene Erythrozyten-Rezeptoren binden. Variant-Ausdruck dieser Paralogs f&uuml;hrt die Verwendung von alternativen Einmarsch Wege. Zwei PfRh Proteine, PfRh2a und PfRh2b, sind identisch f&uuml;r 2700 N-terminalen Aminos&auml;uren und unterscheiden sich nur in einer C-terminalen 500 Aminos&auml;ure Region, umfasst eine einzigartige APPs&alpha;, Transmembranegebiet und zytoplasmatischen Dom&auml;ne. Trotz ihrer &Auml;hnlichkeit ist PfRh2b f&uuml;r einen klar definierten Invasion Weg erforderlich, w&auml;hrend PfRh2a nicht erforderlich oder ausreichend f&uuml;r diese Option ist. Zuordnung der genomischen Region Codierung dieser Proteine ergab ein Recombinogenic Ort mit PfRh2a und PfRh2b in einem sportlichen Ausrichtung. Wir haben lebensf&auml;hige PfRh2a/2b Chim&auml;re Parasiten um die Regionen erforderlich f&uuml;r alternative Einmarsch Stoffwechselweg Auslastung generiert. Wir finden, dass die differenzielle F&auml;higkeit, diese Pfade verwenden durch die zytoplasmatischen Dom&auml;nen der PfRh2a und PfRh2b, nicht APPs&alpha; oder Transmembran Regionen verliehen wird. Unsere Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung der zytoplasmatischen Dom&auml;ne f&uuml;r funktionale Diversifizierung einer gro&szlig;en Klebstoff Ligand-Familie in Malaria-Parasiten.

&quot;Funktionelle Diversifizierung zwischen zwei verwandte Plasmodium Falciparum Merozoite Invasion Liganden wird durch &Auml;nderungen in der zytoplasmatischen Dom&auml;ne bestimmt&quot;

Astratto la patogenesi del Plasmodium falciparum dipende dall&#39;efficiente invasione in eritrociti di host. Ligandi parassita codificati da famiglie multigene interagiscono con i recettori degli eritrociti. Omologhi (PfRhs) di proteina della associazione del reticulocyte p. falciparum sono espressi sulla superficie apicale di merozoiti invasive e hanno ectodomains divergenti che sono postulati di legare i recettori differenti degli eritrociti. Variante espressione di questi risultati paralogs nell&#39;uso di percorsi alternativi di invasione. Due proteine PfRh, PfRh2a e PfRh2b, sono identiche per 2700 gli aminoacidi N-terminale e differiscono solo in un&#39;area di 500 amminoacido C-terminale, che comprende un unico ectodomain, dominio transmembrana e dominio citoplasmatico. Nonostante la loro somiglianza, PfRh2b &egrave; necessaria per un percorso ben definito invasione mentre PfRh2a non &egrave; necessaria o sufficiente per questo percorso. Mappatura della regione genomica che codificano per queste proteine hanno rivelato un locus recombinogenic con PfRh2a e PfRh2b in un orientamento testa a testa. Noi abbiamo generato vitali PfRh2a/2b chimerici parassiti per identificare le regioni necessarie per l&#39;utilizzo del percorso alternativo invasione. Troviamo che la capacit&agrave; differenziale di utilizzare questi percorsi &egrave; conferita ai domini citoplasmatici di PfRh2a e PfRh2b, non il ectodomain o regioni transmembrane. I nostri risultati evidenziano l&#39;importanza del dominio citoplasmatico per diversificazione funzionale di una famiglia importante ligando adesivo in parassiti della malaria.

&quot;Diversificazione funzionale tra due correlate Plasmodium falciparum Merozoite Invasion Ligands &egrave; determinata dai cambiamenti nel dominio citoplasmatico&quot;

&#x62BD;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3078;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x4FB5;&#x5165;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x91CD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x65CF;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7DB2;&#x72B6;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (PfRhs) &#x306F;&#x3001;&#x4FB5;&#x8972;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9802;&#x7AEF;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x7D50;&#x3073;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x767A;&#x6563;&#x306E; ectodomains &#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x5F0F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PfRh2a &#x3068; PfRh2b &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E; PfRh &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x540C;&#x4E00; 2700 &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3068;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x5916;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x307F;&#x3001;C &#x672B;&#x7AEF; 500 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PfRh2a &#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x9808;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;PfRh2b &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;PfRh2a &#x3068; PfRh2b &#x3068; recombinogenic &#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x3092;&#x982D;&#x306B;&#x982D;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; PfRh2a/2 b &#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5DEE;&#x52D5;&#x6A5F;&#x80FD; PfRh2a &#x3068; PfRh2b&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x5916;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x63A5;&#x7740;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x300C;2 &#x3064;&#x95A2;&#x9023;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x4FB5;&#x7565;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x9593;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x300D;

&#xCD94;&#xC0C1; Plasmodium falciparum pathogenesis &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xCE68;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; ligands multigene &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. P. falciparum reticulocyte &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; homologues (PfRhs) &#xCE68;&#xB7B5; merozoites&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; postulated &#xBD84;&#xAE30; ectodomains &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; paralogs&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xC744; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE68;&#xB7B5; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2700&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; PfRh &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, PfRh2a &#xBC0F; PfRh2b, &#xB3D9;&#xC77C; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; ectodomain, &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; 500 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xB2E4;. Pfrh2a&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xAC70;&#xB098;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; Pfrh2b&#xB294; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xCE68;&#xB7B5; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xAC8C;&#xB188; &#xC601;&#xC5ED; &#xB9E4;&#xD551; &#xBA38;&#xB9AC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; Pfrh2a&#xC640; PfRh2b recombinogenic &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE68;&#xB7B5; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC774;&#xC6A9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; PfRh2a/2b chimeric &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB2A5; PfRh2a PfRh2b, &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; ectodomain &#xB610;&#xB294; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

&quot;&#xB450; &#xAD00;&#xB828; Plasmodium falciparum Merozoite &#xCE68;&#xACF5; Ligands &#xC0AC;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xC591;&#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;&quot;

Resumen la patogenesia de Plasmodium falciparum depende de invasi&oacute;n eficiente en eritrocitos de anfitri&oacute;n. Ligandos de par&aacute;sito codificadas por familias multig&eacute;nicas interact&uacute;an con receptores de eritrocito. Hom&oacute;logos de prote&iacute;na de enlace de p. falciparum reticulocitos (PfRhs) se expresan en la superficie apical de merozo&iacute;tos invasivos y tienen ectodomains divergentes que se postulan para enlazar receptores diferentes de eritrocito. Expresi&oacute;n variable de estos resultados paralogs en el uso de v&iacute;as alternativas de la invasi&oacute;n. Dos prote&iacute;nas de PfRh, PfRh2a y PfRh2b, son id&eacute;nticas para 2700 amino&aacute;cidos del N-terminal y difieren s&oacute;lo en una regi&oacute;n de 500 amino&aacute;cidos del c-terminal, que incluye un &uacute;nico ectodominio, dominio transmembrana y dominio citopl&aacute;smico. A pesar de su semejanza, PfRh2b se requiere para un camino bien definido de la invasi&oacute;n, mientras que PfRh2a no es necesaria ni suficiente para esta v&iacute;a. Cartograf&iacute;a de la regi&oacute;n gen&oacute;mica codificaci&oacute;n estas prote&iacute;nas revel&oacute; un locus de recombinogenic con PfRh2a y PfRh2b en una orientaci&oacute;n cara a cara. Hemos generado viables PfRh2a/2b quim&eacute;ricas par&aacute;sitos para identificar las regiones necesarias para la utilizaci&oacute;n de la v&iacute;a de invasi&oacute;n alternativo. Encontramos que la capacidad diferencial para utilizar estas v&iacute;as es conferida por los dominios citoplasm&aacute;ticos de PfRh2a y PfRh2b, no la ectodominio o regiones transmembrana. Los resultados destacan la importancia del dominio citopl&aacute;smico para la diversificaci&oacute;n funcional de una familia importante ligando adhesivo en par&aacute;sitos de la malaria.

&quot;La diversificaci&oacute;n funcional entre dos relacionados con Plasmodium falciparum merozoito invasi&oacute;n ligandos se determina por cambios en el dominio citopl&aacute;smico&quot;

&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6709;&#x6548;&#x4FB5;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x914D;&#x4F53;&#x7531;&#x591A;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7F16;&#x7801;&#x4E0E;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7F51;&#x7EC7;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269; &#xFF08;PfRhs&#xFF09; &#x6839;&#x5C16;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x521B; merozoites &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x90FD;&#x5047;&#x5B9A;&#x8981;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C; ectodomains&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; paralogues &#x7684; variant &#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x503C;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F7F;&#x7528;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;PfRh &#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;PfRh2a &#x548C; PfRh2b&#xFF0C;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x4E3A; 2700 N &#x7AEF;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x53EA;&#x5728; C &#x7EC8;&#x7AEF; 500 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x3001; &#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x57DF;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#xFF0C;PfRh2b &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x660E;&#x786E;&#x754C;&#x5B9A;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84; PfRh2a &#x65F6;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x6216;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x3002;&#x6620;&#x5C04;&#x7F16;&#x7801;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x533A;&#x57DF;&#x663E;&#x793A;&#x8089;&#x640F;&#x6218;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E0E; PfRh2a &#x548C; PfRh2b recombinogenic &#x6848;&#x53D1;&#x73B0;&#x573A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x521B;&#x9020;&#x53EF;&#x884C;&#x7684; PfRh2a/2b &#x5D4C;&#x5408;&#x4F53;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x8981;&#x627E;&#x51FA;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5165;&#x4FB5;&#x9014;&#x5F84;&#x5229;&#x7528;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8DEF;&#x5F84;&#x7684;&#x9274;&#x522B;&#x80FD;&#x529B;&#x6240;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x7684; PfRh2a &#x548C; PfRh2b&#x3001; &#x4E0D;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x6216;&#x8DE8;&#x819C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x759F;&#x75BE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x914D;&#x4F53;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x4E4B;&#x95F4;&#x914D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x76F8;&#x5173;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x88C2;&#x6B96;&#x5B50;&#x5165;&#x4FB5;&#x4F53;&#x662F;&#x7531;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;

The pathogenesis of Plasmodium falciparum depends on efficient invasion into host erythrocytes. Parasite ligands encoded by multi-gene families interact with erythrocyte receptors. P. falciparum reticulocyte binding protein homologues (PfRhs) are expressed at the apical surface of invasive merozoites and have divergent ectodomains that are postulated to bind different erythrocyte receptors. Variant expression of these paralogues results in the use of alternative invasion pathways. Two PfRh proteins, PfRh2a and PfRh2b, are identical for 2700 N-terminal amino acids and differ only in a C-terminal 500 amino acid region, which includes a unique ectodomain, transmembrane domain and cytoplasmic domain. Despite their similarity, PfRh2b is required for a well-defined invasion pathway while PfRh2a is not required or sufficient for this pathway. Mapping the genomic region encoding these proteins revealed a recombinogenic locus with PfRh2a and PfRh2b in a head-to-head orientation. We have generated viable PfRh2a/2b chimeric parasites to identify the regions required for alternative invasion pathway utilization. We find that the differential ability to use these pathways is conferred by the cytoplasmic domains of PfRh2a and PfRh2b, not the ectodomain or transmembrane regions. Our results highlight the importance of the cytoplasmic domain for functional diversification of a major adhesive ligand family in malaria parasites.

Functional diversification between two related Plasmodium falciparum merozoite invasion ligands is determined by changes in the cytoplasmic domain.

La pathogen&egrave;se de Plasmodium falciparum d&eacute;pend invasion efficace dans les &eacute;rythrocytes de l&#39;h&ocirc;te. Ligands parasite cod&eacute;es par des familles multig&eacute;niques interagissent avec les r&eacute;cepteurs de l&#39;&eacute;rythrocyte. P. falciparum r&eacute;ticulocytes liaison prot&eacute;ines homologues (PfRhs) sont exprim&eacute;s &agrave; la surface apicale des m&eacute;rozo&iuml;tes envahissantes et ont des glycoprot&eacute;ines divergentes qui sont postul&eacute;s pour lier les r&eacute;cepteurs diff&eacute;rents &eacute;rythrocytaire. Expression variant de ces paralogues entra&icirc;ne l&#39;utilisation des voies d&#39;invasion alternatifs. Deux prot&eacute;ines PfRh, PfRh2a et PfRh2b, sont identiques pour 2700 acides amin&eacute;s N-terminaux et ne varier que dans une r&eacute;gion de 500 acides amin&eacute;s C-terminaux, qui comprend un unique ectodomaine, domaine transmembranaire et un domaine cytoplasmique. Malgr&eacute; leur similitude, PfRh2b est requis pour une voie d&#39;invasion bien d&eacute;finies, tandis que PfRh2a n&#39;est pas n&eacute;cessaire ou suffisante pour cette voie. Cartographie de la r&eacute;gion g&eacute;nomique codant ces prot&eacute;ines ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; un locus recombinog&eacute;nique avec PfRh2a et PfRh2b dans une orientation en t&ecirc;te-&agrave;-t&ecirc;te. Nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des parasites chim&eacute;riques viables de PfRh2a/2 b pour identifier les r&eacute;gions requises pour l&#39;utilisation de voie alternative d&#39;invasion. Nous trouvons que la capacit&eacute; diff&eacute;rentielle d&#39;utiliser ces voies est conf&eacute;r&eacute;e par les domaines cytoplasmiques des PfRh2a et PfRh2b, pas ectodomaine ou r&eacute;gions transmembranaires. Nos r&eacute;sultats mettent en &eacute;vidence l&#39;importance du domaine cytoplasmique de diversification fonctionnelle d&#39;une famille de ligand adh&eacute;sif majeur chez les parasites du paludisme.

Diversification fonctionnelle entre deux Plasmodium falciparum m&eacute;rozo&iuml;te invasion ligands apparent&eacute;s est d&eacute;termin&eacute;e par des changements dans le domaine cytoplasmique.

Die Pathogenese von Plasmodium Falciparum h&auml;ngt effiziente Invasion in Host-Erythrozyten. Parasit-Liganden durch Familien zwischen zahlreichen Genen kodiert interagieren mit Erythrozyten-Rezeptoren. P. Falciparum Reticulocyte verbindliches Protein Homologen (PfRhs) werden an der apikalen Oberfl&auml;che des invasiven Merozoiten ausgedr&uuml;ckt und haben unterschiedliche Ectodomains, die postulierte sind verschiedene Erythrozyten-Rezeptoren binden. Variant-Ausdruck dieser Paralogues f&uuml;hrt die Verwendung von alternativen Einmarsch Wege. Zwei PfRh Proteine, PfRh2a und PfRh2b, sind identisch f&uuml;r 2700 N-terminalen Aminos&auml;uren und unterscheiden sich nur in einer C-terminalen 500 Aminos&auml;ure Region, umfasst eine einzigartige APPs&alpha;, Transmembranegebiet und zytoplasmatischen Dom&auml;ne. Trotz ihrer &Auml;hnlichkeit ist PfRh2b f&uuml;r einen klar definierten Invasion Weg erforderlich, w&auml;hrend PfRh2a nicht erforderlich oder ausreichend f&uuml;r diese Option ist. Zuordnung der genomischen Region Codierung dieser Proteine ergab ein Recombinogenic Ort mit PfRh2a und PfRh2b in einem sportlichen Ausrichtung. Wir haben lebensf&auml;hige PfRh2a/2b Chim&auml;re Parasiten um die Regionen erforderlich f&uuml;r alternative Einmarsch Stoffwechselweg Auslastung generiert. Wir finden, dass die differenzielle F&auml;higkeit, diese Pfade verwenden durch die zytoplasmatischen Dom&auml;nen der PfRh2a und PfRh2b, nicht APPs&alpha; oder Transmembran Regionen verliehen wird. Unsere Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung der zytoplasmatischen Dom&auml;ne f&uuml;r funktionale Diversifizierung einer gro&szlig;en Klebstoff Ligand-Familie in Malaria-Parasiten.

Funktionale Diversifizierung zwischen zwei verwandte Plasmodium Falciparum Merozoite Einmarsch Liganden wird durch &Auml;nderungen in der zytoplasmatischen Dom&auml;ne bestimmt.

La patogenesi del Plasmodium falciparum dipende dall&#39;invasione efficiente in eritrociti di host. Ligandi parassita codificati da famiglie multi-gene interagiscano con i recettori degli eritrociti. Omologhi (PfRhs) di proteina della associazione del reticulocyte p. falciparum sono espressi sulla superficie apicale di merozoiti invasive e hanno ectodomains divergenti che sono postulati di legare i recettori differenti degli eritrociti. Variante espressione di questi risultati paralogues nell&#39;uso di percorsi alternativi di invasione. Due proteine PfRh, PfRh2a e PfRh2b, sono identiche per 2700 gli aminoacidi N-terminale e differiscono solo in un&#39;area di 500 amminoacido C-terminale, che comprende un unico ectodomain, dominio transmembrana e dominio citoplasmatico. Nonostante la loro somiglianza, PfRh2b &egrave; necessaria per un percorso ben definito invasione mentre PfRh2a non &egrave; necessaria o sufficiente per questo percorso. Mappatura della regione genomica che codificano per queste proteine hanno rivelato un locus recombinogenic con PfRh2a e PfRh2b in un orientamento testa a testa. Noi abbiamo generato vitali PfRh2a/2b chimerici parassiti per identificare le regioni necessarie per l&#39;utilizzo del percorso alternativo invasione. Troviamo che la capacit&agrave; differenziale di utilizzare questi percorsi &egrave; conferita ai domini citoplasmatici di PfRh2a e PfRh2b, non il ectodomain o regioni transmembrane. I nostri risultati evidenziano l&#39;importanza del dominio citoplasmatico per diversificazione funzionale di una famiglia importante ligando adesivo in parassiti della malaria.

Diversificazione funzionale tra due relativi ligandi merozoite invasione Plasmodium falciparum &egrave; determinata dai cambiamenti nel dominio citoplasmatico.

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3078;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x4FB5;&#x7565;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x7DB2;&#x72B6;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (PfRhs) &#x306F;&#x3001;&#x4FB5;&#x8972;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x9802;&#x7AEF;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x7D50;&#x3073;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x767A;&#x6563;&#x306E; ectodomains &#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x5F0F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; paralogues &#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PfRh2a &#x3068; PfRh2b &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E; PfRh &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x540C;&#x4E00; 2700 &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3068;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x5916;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x307F;&#x3001;C &#x672B;&#x7AEF; 500 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PfRh2a &#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x9808;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;PfRh2b &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;PfRh2a &#x3068; PfRh2b &#x3068; recombinogenic &#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x3092;&#x982D;&#x306B;&#x982D;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE3;&#x66FF;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A; PfRh2a/2 b &#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5DEE;&#x52D5;&#x6A5F;&#x80FD; PfRh2a &#x3068; PfRh2b&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x5916;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x63A5;&#x7740;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

2 &#x3064;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x4FB5;&#x7565;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x9593;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Plasmodium falciparum pathogenesis &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xCE68;&#xB7B5;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Multi-gene &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; ligands &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. P. falciparum reticulocyte &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; homologues (PfRhs) &#xCE68;&#xB7B5; merozoites&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; postulated &#xBD84;&#xAE30; ectodomains &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; paralogues&#xC758; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xC744; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE68;&#xB7B5; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2700&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; PfRh &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, PfRh2a &#xBC0F; PfRh2b, &#xB3D9;&#xC77C; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; ectodomain, &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC601;&#xC5ED; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; 500 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xB2E4;. Pfrh2a&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xAC70;&#xB098;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; Pfrh2b&#xB294; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xCE68;&#xB7B5; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xAC8C;&#xB188; &#xC601;&#xC5ED; &#xB9E4;&#xD551; &#xBA38;&#xB9AC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; Pfrh2a&#xC640; PfRh2b recombinogenic &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB300;&#xCCB4; &#xCE68;&#xB7B5; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC774;&#xC6A9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; PfRh2a/2b chimeric &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB2A5; PfRh2a PfRh2b, &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; ectodomain &#xB610;&#xB294; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218; &#xC5EC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

&#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; Plasmodium falciparum merozoite &#xCE68;&#xACF5; ligands &#xC0AC;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xC591;&#xD654; &#xBCC0;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La patogenesia de Plasmodium falciparum depende de invasi&oacute;n eficiente en eritrocitos de anfitri&oacute;n. Ligandos de par&aacute;sito codificadas por familias multi-genes interact&uacute;an con receptores de eritrocito. Hom&oacute;logos de prote&iacute;na de enlace de p. falciparum reticulocitos (PfRhs) se expresan en la superficie apical de merozo&iacute;tos invasivos y tienen ectodomains divergentes que se postulan para enlazar receptores diferentes de eritrocito. Expresi&oacute;n variable de estos resultados defendieron en el uso de v&iacute;as alternativas de la invasi&oacute;n. Dos prote&iacute;nas de PfRh, PfRh2a y PfRh2b, son id&eacute;nticas para 2700 amino&aacute;cidos del N-terminal y difieren s&oacute;lo en una regi&oacute;n de 500 amino&aacute;cidos del c-terminal, que incluye una &uacute;nica ectodominio, dominio transmembrana y un dominio citopl&aacute;smico. A pesar de su semejanza, PfRh2b se requiere para un camino bien definido de la invasi&oacute;n, mientras que PfRh2a no es necesaria ni suficiente para esta v&iacute;a. Cartograf&iacute;a de la regi&oacute;n gen&oacute;mica codificaci&oacute;n estas prote&iacute;nas revel&oacute; un locus de recombinogenic con PfRh2a y PfRh2b en una orientaci&oacute;n cara a cara. Hemos generado viables PfRh2a/2b quim&eacute;ricas par&aacute;sitos para identificar las regiones necesarias para la utilizaci&oacute;n de la v&iacute;a de invasi&oacute;n alternativo. Encontramos que la capacidad diferencial para utilizar estas v&iacute;as es conferida por los dominios citoplasm&aacute;ticos de PfRh2a y PfRh2b, no la ectodominio o regiones transmembrana. Los resultados destacan la importancia del dominio citopl&aacute;smico para la diversificaci&oacute;n funcional de una familia importante ligando adhesivo en par&aacute;sitos de la malaria.

Diversificaci&oacute;n funcional entre dos relacionados con Plasmodium falciparum merozoito invasi&oacute;n ligandos se determina por cambios en el dominio citopl&aacute;smico.

&#x759F;&#x539F;&#x866B; RhopH &#x590D;&#x6742;&#x662F;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x6297;&#x539F;&#x590D;&#x6742;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x57FA;-RhopH1/&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#xFF0C;RhopH2 &#x548C; RhopH3-&#x4F4D;&#x4E8E;&#x68D2;&#x72B6;&#x4F53;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684;&#x521B;&#x88C2;&#x6B96;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B; RhopH1/&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#x7531;&#x4E94;&#x4E2A;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7C7B;&#x4F3C; paralogous &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3.1 &#x548C; 3.2&#x3001; &#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#x76F8;&#x4E92;&#x5B8C;&#x5168;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x514B;&#x9686;&#x4ECE; 3.2 &#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#x5207;&#x6362;&#x5230;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3.1 paralogue&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28; immunoprecitation &#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x4EFB;&#x4E00;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3 paralogue &#x5F02;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684;&#x6D53;&#x7F29;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x6270;&#x4E71;&#x7684;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3.2 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x836F;&#x7269;&#x5361;&#x5E26;&#x63D2;&#x5165;&#x5230;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x5C0F;&#x7EC4; 3.2 &#x8F68;&#x8FF9;&#x88AB;&#x8F7B;&#x6613;&#x6C89;&#x5BC2;&#x5728;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x548C;&#x5E8F;&#x5217;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6B64;&#x836F;&#x7269;&#x5361;&#x5E26;&#x7684;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3.1 &#x8F68;&#x8FF9;&#x4E0E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x836F;&#x7269;&#x9009;&#x62E9;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5168;&#x957F;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3.1 &#x6216; 3.2 &#x8A8A;&#x672C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4; 3 null &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x8868;&#x660E;&#x91CD;&#x5927;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x589E;&#x6B96;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9057;&#x4F20;&#x8BC1;&#x636E;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x7684;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x514D;&#x75AB;&#x9003;&#x9038;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x4E32;&#x8054; RhopH1/&#x8054;&#x5408;&#x6267;&#x6CD5;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The Plasmodium RhopH complex is a high molecular weight antigenic complex consisting of three subunits - RhopH1/clag, RhopH2 and RhopH3 - located in the rhoptry secretory organelles of the invasive merozoite. In Plasmodium falciparum RhopH1/clag is encoded by one of five clag genes. Two highly similar paralogous genes, clag 3.1 and clag 3.2, are mutually exclusively expressed. Here we show clonal switching from the clag 3.2 to the clag 3.1 paralogue in vitro. Chromatin immunoprecitation studies suggest that silencing of either clag 3 paralogue is associated with the enrichment of specific histone modifications associated with heterochromatin. We were able to disrupt the clag 3.2 gene, with a drug cassette inserted into the clag 3.2 locus being readily silenced in a position-dependent and sequence-independent manner. Activation of this drug cassette by drug selection results in parasites with the clag 3.1 locus silenced and lack full-length clag 3.1 or 3.2 transcripts. These clag 3-null parasites demonstrate a significant growth inhibition compared with wild-type parasites, providing the first genetic evidence for a role for these proteins in efficient parasite proliferation. Epigenetic regulation of these chromosomally proximal members of a multigene family provides a mechanism for both immune evasion and functional diversification.

Functional analysis of epigenetic regulation of tandem RhopH1/clag genes reveals a role in Plasmodium falciparum growth.

Le complexe de Plasmodium RhopH est un poids mol&eacute;culaire &eacute;lev&eacute; antig&eacute;nique complexe compos&eacute; de trois sous-unit&eacute;s - RhopH1/clag, RhopH2 et RhopH3 - situ&eacute; dans les organites s&eacute;cr&eacute;trices de rhoptry du m&eacute;rozo&iuml;te envahissante. De Plasmodium falciparum RhopH1/clag est cod&eacute; par l&#39;un des cinq g&egrave;nes clag. Deux g&egrave;nes paralogues tr&egrave;s similaires, clag 3.1 et 3.2, de clag sont mutuellement exclusivement exprim&eacute;s. Nous d&eacute;montrons clonales passant le clag 3.2 &agrave; la paralogue clag 3.1 in vitro. La chromatine immunoprecitation &eacute;tudes sugg&egrave;rent que silencing of soit clag paralogue 3 est li&eacute;e &agrave; l&#39;enrichissement des modifications d&#39;histone sp&eacute;cifique associ&eacute;e &agrave; l&#39;h&eacute;t&eacute;rochromatine. Nous avons r&eacute;ussi &agrave; perturber le g&egrave;ne clag 3.2, avec un m&eacute;dicament cassette ins&eacute;r&eacute;e dans le clag 3,2 locus &eacute;tant facilement r&eacute;duits au silence de mani&egrave;re position-d&eacute;pendants et ind&eacute;pendants de s&eacute;quence. L&#39;activation de cette cassette de drogue par les r&eacute;sultats de s&eacute;lection de drogue chez les parasites avec le locus clag 3.1 r&eacute;duits au silence et n&#39;ont pas pleine longueur clag 3.1 ou 3.2 transcriptions. Ces parasites de 3 null clag d&eacute;montrent une inhibition de la croissance significative par rapport aux parasites de type sauvage, fournissant la premi&egrave;re preuve g&eacute;n&eacute;tique joue un r&ocirc;le de ces prot&eacute;ines dans la prolif&eacute;ration de parasites efficace. R&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique de la ces sur le plan chromosomique proximales membres d&#39;une famille multig&eacute;nique fournit un m&eacute;canisme pour &eacute;vasion immunitaire et diversification fonctionnelle.

Analyse fonctionnelle de la r&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique des g&egrave;nes RhopH1/clag tandem r&eacute;v&egrave;le un r&ocirc;le dans la croissance de Plasmodium falciparum.

Der Plasmodium-RhopH-Komplex ist ein Hochmolekulares Antigen Komplex bestehend aus drei Untereinheiten - RhopH1/Clag, RhopH2 und RhopH3 - g&uuml;nstig in der Rhoptry sekretorischen Organellen der invasiven Merozoite. In Plasmodium Falciparum ist einer der f&uuml;nf Clag Gene RhopH1/Clag kodiert. Zwei sehr &auml;hnliche paralogen Gene, Clag 3.1 und 3.2, Clag werden sich gegenseitig ausschlie&szlig;lich ausgedr&uuml;ckt. Hier zeigen wir klonalen Wechsel von Clag 3.2 auf der in-vitro-Clag 3.1 Paralogue. Chromatin Immunoprecitation Studien deuten darauf hin, dass zum Schweigen der beiden Clag 3 Paralogue Bereicherung der spezifische Histon-Modifikationen, die zugeordnete Heterochromatin zugeordnet ist. Konnten wir das Clag 3.2-gen zu st&ouml;ren, mit einem Medikament Kassette eingelegt in die Clag 3.2 Locus wird bereitwillig wegabh&auml;ngigen und Sequenz-unabh&auml;ngigen Weise zum Schweigen gebracht. Aktivierung von dieser Droge-Kassette durch Drogen Auswahlergebnisse in Parasiten mit der Clag 3.1-Locus zum Schweigen gebracht und in Clag 3.1 oder 3.2 Abschriften fehlt. Diese Clag 3-Null Parasiten zeigen eine deutliche Zuw&auml;chse-Hemmung im Vergleich zu Wildtyp-Parasiten, die Bereitstellung des ersten genetischen Beweis f&uuml;r eine Rolle f&uuml;r diese Proteine in effiziente Parasiten Verbreitung. Epigenetischen Verordnung dieser bei proximalen Mitglieder einer multigene Familie bietet einen Mechanismus zum immun ausweichen und funktionale Diversifizierung.

Funktionale Analyse der epigenetischen Verordnung Tandem RhopH1/Clag Gene zeigt bei Plasmodium Falciparum Wachstum eine Rolle.

Il complesso di Plasmodium RhopH &egrave; un alto peso molecolare antigenico complesso costituito da tre subunit&agrave; - RhopH1/clag, RhopH2 e RhopH3 - si trova nella rhoptry organuli secretori del merozoite invasiva. Nel Plasmodium falciparum RhopH1/clag &egrave; codificato da uno dei cinque geni clag. Due geni paralogous altamente simili, clag 3.1 e 3.2, clag reciprocamente esclusiva sono espressi. Qui vi mostriamo clonale di commutazione da clag 3.2 per il clag 3.1 paralogue in vitro. Cromatina immunoprecitation studi suggeriscono che tacere di entrambi clag paralogue 3 &egrave; associato con l&#39;arricchimento delle modifiche dell&#39;istone specifici associati con eterocromatina. Siamo stati in grado di distruggere il gene clag 3.2, con un farmaco cassetta inserito il clag locus 3.2 essere prontamente messo a tacere in maniera indipendente dalla sequenza e dipendente dalla posizione. Attivazione di questa cassetta di droga dai risultati selezione droga in parassiti con il locus clag 3.1 tacere e mancanza full-length clag 3.1 o 3.2 trascrizioni. Questi parassiti 3-null clag dimostrano un&#39;inibizione significativa crescita rispetto al wild-type parassiti, fornendo la prima prova genetica per un ruolo di queste proteine nella proliferazione del parassita efficiente. Regolazione epigenetica di questi membri di una famiglia di multigene cromosomicamente prossimali fornisce un meccanismo per evasione immune e la diversificazione funzionale.

Analisi funzionale di regolazione epigenetica di geni RhopH1/clag tandem rivelano un ruolo nella crescita di Plasmodium falciparum.

&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B; RhopH &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; 3 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; - RhopH1/&#x78E8;&#x304B;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B; RhopH2 &#x3068; RhopH3 - &#x4FB5;&#x8972;&#x306E;&#x30E1;&#x30ED;&#x30BE;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; rhoptry &#x5206;&#x6CCC;&#x5668;&#x5B98;&#x5185;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B; RhopH1/&#x78E8;&#x304B; 5 &#x78E8;&#x304B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044; paralogous &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;&#x78E8;&#x304B; 3.1 &#x3068;&#x78E8;&#x304B; 3.2&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x78E8;&#x304B; 3.2 &#x304B;&#x3089;&#x306E; in vitro &#x306E;&#x78E8;&#x304B; 3.1 paralogue &#x306B;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; immunoprecitation &#x7814;&#x7A76;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x78E8;&#x304B;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; 3 paralogue &#x6FC3;&#x7E2E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6301;&#x3064;&#x85AC;&#x5264;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x633F;&#x5165;&#x306B;&#x78E8;&#x304B;&#x3001;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3055;&#x308C;&#x3066; 3.2 &#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x3001;&#x78E8;&#x304B; 3.2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x85AC;&#x5264;&#x9078;&#x5B9A;&#x7D50;&#x679C;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x78E8;&#x304B; 3.1 &#x8ECC;&#x8DE1;&#x3067;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x78E8;&#x304B; 3.1 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 3.2 &#x6210;&#x7E3E;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x78E8;&#x304B; 3 null &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x751F;&#x80B2;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x91CD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x65CF;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x514D;&#x75AB;&#x56DE;&#x907F;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0; RhopH1/&#x78E8;&#x304B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Plasmodium RhopH &#xB2E8;&#xC9C0;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xB7C9; antigenic &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD558;&#xC704; &#xB2E8;&#xC704;-RhopH1/clag&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; RhopH2 &#xBC0F; RhopH3-&#xCE68;&#xB7B5; merozoite&#xC758; rhoptry &#xBD84; organelles&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;. Plasmodium falciparum RhopH1/clag 5 clag &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; paralogous &#xC720;&#xC804;&#xC790;, clag 3.1&#xACFC; 3.2, clag&#xB294; &#xC0C1;&#xD638; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD074;&#xB860; &#xCCB4; &#xC678; clag 3.1 paralogue clag 3.2&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD658;. Chromatin immunoprecitation &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC911; clag&#xC758; &#xC785;&#xC744; 3 paralogue&#xB294;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815; &#xAD00;&#xB828; &#xC12C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB41C; &#xB18D;&#xCD95; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Clag 3.2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC911;&#xB2E8; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9C8;&#xC57D; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xC0BD;&#xC785; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; clag 3.2 &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC744; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB418; &#xACE0;. Clag 3.1 &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC640; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC120;&#xD0DD; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xC57D;&#xBB3C; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; clag 3.1 &#xB610;&#xB294; 3.2 &#xC131;&#xC801;&#xD45C; &#xBD80;&#xC871;. Clag 3-null &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; chromosomally &#xADFC; multigene &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; epigenetic &#xADDC;&#xC81C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD68C;&#xD53C;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C1;&#xB82C; &#xC2DD; RhopH1/clag &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; epigenetic &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; Plasmodium falciparum &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

El complejo de Plasmodium RhopH es un alto peso molecular antig&eacute;nico compleja compuesta por tres subunidades - RhopH1/clag, RhopH2 y RhopH3 - situado en los organelos secretores de rhoptry de la invasora merozoito. En Plasmodium falciparum RhopH1/clag est&aacute; codificada por uno de cinco genes clag. Dos genes par&aacute;logo muy similares, clag 3.1 y 3.2, de clag se expresan mutuamente exclusiva. A continuaci&oacute;n os mostramos clonales de conmutaci&oacute;n del clag 3.2 para el clag 3.1 paralogue in vitro. Cromatina immunoprecitation estudios sugieren que silenciar o clag 3 paralogue se asocia con el enriquecimiento de modificaciones de las histonas espec&iacute;ficos asociados con heterocromatina. Hemos sido capaces de interrumpir el gen clag 3.2, con una droga cassette hab&iacute;a insertado en el clag 3.2 locus f&aacute;cilmente ser acalladas en forma posici&oacute;n dependiente e independiente de la secuencia. Activaci&oacute;n de este cassette de drogas por resultados de selecci&oacute;n de drogas en los par&aacute;sitos con el lugar geom&eacute;trico del clag 3.1 silenciado y carecen de cuerpo entero clag 3.1 o 3.2 transcripciones. Estos par&aacute;sitos de 3 nulos clag demuestran una inhibici&oacute;n significativa del crecimiento en comparaci&oacute;n con par&aacute;sitos de tipo salvaje, proporcionando la primera evidencia gen&eacute;tica para un papel de estas prote&iacute;nas en la proliferaci&oacute;n del par&aacute;sito eficiente. Regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica de estos miembros cromos&oacute;mico proximales de una familia multig&eacute;nica proporciona un mecanismo para evasi&oacute;n inmune y diversificaci&oacute;n funcional.

An&aacute;lisis funcional de la regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica de genes de RhopH1/clag t&aacute;ndem revela un papel en el crecimiento de Plasmodium falciparum.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x699C;&#x5355; 644442 &#x7684; aminoindole &#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x699C;&#x5355; 644442 &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x5728;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#x7684;&#x535A;&#x5927;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E93;&#x548C;&#x54C8;&#x4F5B;&#x5927;&#x5B66;&#x533B;&#x5B66;&#x9662;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x96C6;&#x5408;&#x6295;&#x8BC9;-L ~ 70,000 &#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x547D;&#x4E2D;&#x3002;&#x699C;&#x5355;-644442 &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F3A;&#x6548;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4F53;&#x5916;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B; (50%&#x6291;&#x5236;&#x6D53;&#x5EA6; [IC&#x2085;&#x2080;s] 200 &#x5230; 285 nM&#xFF09; &#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x4F53;&#x5185;&#x7597;&#x6548;? &#x5F7C;&#x5F97;&#x65AF; 4 &#x5929;&#x6291;&#x5236;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6539;&#x7F16;&#x7248;&#x672C; &gt; 99%&#x4E0E;&#x4F53;&#x80B2;&#x4F2F;&#x6C0F; (W.&#x5F7C;&#x5F97;&#x65AF;&#xFF0C;Ann.Trop.&#x533B;&#x5B66; Parasitol.69:155-171&#x3001; 1975&#x5E74;)&#x3002;&#x699C;&#x5355; 644442 &#x6210;&#x4E3A;&#x7126;&#x70B9;&#x7684;&#x836F;&#x7528;&#x5316;&#x5B66;&#x4F18;&#x5316; &#xFF1B;321 &#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x4E86;&#xFF0C;&#x548C;&#x5BF9;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x4F53;&#x5916;&#x836F;&#x6548;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x5438;&#x6536;&#x3001; &#x5206;&#x5E03;&#x3001; &#x4EE3;&#x8C22;&#x3001; &#x6392;&#x6CC4; &#xFF08;ADME&#xFF09; &#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x5927;&#x7EA6; 30 IC&#x2085;&#x2080;s &#x5316;&#x5408;&#x7269; nM&#x3002;&#x94C5;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x699C;&#x5355;-668764&#xFF0C;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5728;&#x66F4;&#x591A;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x5355;&#x4E00;&#x5BF9;&#x6620;&#x4F53;&#x4E0E; 28 &#x5230; 65 IC&#x2085;&#x2080;s &#x5BF9;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x4F53;&#x5916; nM&#x3002;&#x5728;&#x4E3A;&#x671F; 4 &#x5929;&#x7684;&#x4F53;&#x80B2;&#x4F2F;&#x6C0F;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5F53;&#x5B83; 100 &#x6BEB;&#x514B;/&#x516C;&#x65A4;&#x4F53;&#x91CD;/&#x5929;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x5242;&#x91CF;&#x65F6;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4E0A;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x7B2C; 4 &#x5929;&#x4E0E;&#x53D7;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; recrudesced &#x7684;&#x7B2C; 9 &#x5929;&#x3002;&#x52A0;&#x836F;&#x5728; 200 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5343;&#x514B;/&#x5929;&#x4E00;&#x5929;&#x4E24;&#x6B21;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6CBB;&#x6108;&#x7684; 3/5 &#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x590D;&#x5408;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x540C;&#x79CD;&#x5F02;&#x4F53;&#x70B9;&#x5934; scid &#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x5BF9;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x8840;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x699C;&#x5355; 668764 &#x4E86;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x534A;&#x8870;&#x671F;&#x4E3A; 2.8 h &#x8840;&#x6D46;&#x69FD;&#x6C34;&#x5E73;&#x53CA; 41 ng/ml &#x7684;&#x65F6;&#x5B83;&#x5916;&#x52A0;&#x4E00;&#x5929;&#x4E24;&#x6B21;&#x53E3;&#x5934;&#x4E0A; 55 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5343;&#x514B;/&#x5929;&#x3002;&#x4E03;&#x5929;&#x5927;&#x9F20;&#x7684;&#x5B89;&#x5168;&#x6027;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x65E0;&#x660E;&#x663E;-&#x6709;&#x5BB3;&#x6548;&#x5E94;&#x6C34;&#x5E73; &#xFF08;NOAEL&#xFF09; &#x5728; 200 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5343;&#x514B;/&#x5929; &#xFF1B;&#x590D;&#x5408;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5728; Ames &#x5B9E;&#x9A8C;&#x3001; &#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x6291;&#x5236; hERG &#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6CA1;&#x6709;&#x70C8;&#x6027;&#x53CD;&#x5BF9;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5C0F;&#x7EC4;&#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x91C7;&#x7528;&#x5F02;&#x901F;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916; ADME &#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x9884;&#x6D4B;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6700;&#x4F4E;&#x6709;&#x6548;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x699C;&#x5355; 668764 3 &#x5929;&#x4E00;&#x6B21;&#x6BCF;&#x65E5;&#x7ED9;&#x836F;&#x65B9;&#x6848;&#x662F; 421 &#x6BEB;&#x514B;/&#x5929;/70 &#x516C;&#x65A4;&#xFF0C;&#x5C06;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5242;&#x91CF;&#x540E;&#x7EF4;&#x6301;&#x8840;&#x6D46;&#x69FD;&#x4E0A;&#x65B9;&#x5BF9;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x81F3;&#x5C11; 96 h IC&#x2089;&#x2080;&#x3002;&#x9884;&#x6D4B;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6CBB;&#x7597;&#x6307;&#x6570;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 3 &#x9636;&#x6BB5; NOAEL &#x5927;&#x9F20;&#x66B4;&#x9732;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x80FD;&#x9009;&#x62E9;&#x4E0E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; &gt; &#x4E8C;&#x6298;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x7236;&#x590D;&#x5408;&#xFF0C;&#x699C;&#x5355;-644442&#xFF0C;&#x8D85;&#x8FC7; 270 &#x5929;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x538B;&#x529B;&#x4E0B;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x70B9;&#x4F7F;&#x699C;&#x5355;-668764 &#x4E34;&#x5E8A;&#x524D;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x8005;&#x3002;

Aminoindoles &#x5177;&#x6709;&#x6297;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x70C8;&#x6027;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x652F;&#x67B6;&#x3002;

This study characterizes aminoindole molecules that are analogs of Genz-644442. Genz-644442 was identified as a hit in a screen of ~70,000 compounds in the Broad Institute's small-molecule library and the ICCB-L compound collection at Harvard Medical School. Genz-644442 is a potent inhibitor of Plasmodium falciparum in vitro (50% inhibitory concentrations [ICâ‚…â‚€s], 200 to 285 nM) and inhibits P. berghei in vivo with an efficacy of > 99% in an adapted version of Peters' 4-day suppressive test (W. Peters, Ann. Trop. Med. Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz-644442 became the focus of medicinal chemistry optimization; 321 analogs were synthesized and were tested for in vitro potency against P. falciparum and for in vitro absorption, distribution, metabolism, and excretion (ADME) properties. This yielded compounds with ICâ‚…â‚€s of approximately 30 nM. The lead compound, Genz-668764, has been characterized in more detail. It is a single enantiomer with ICâ‚…â‚€s of 28 to 65 nM against P. falciparum in vitro. In the 4-day P. berghei model, when it was dosed at 100 mg/kg of body weight/day, no parasites were detected on day 4 postinfection. However, parasites recrudesced by day 9. Dosing at 200 mg/kg/day twice a day resulted in cures of 3/5 animals. The compound had comparable activity against P. falciparum blood stages in a human-engrafted NOD-scid mouse model. Genz-668764 had a terminal half-life of 2.8 h and plasma trough levels of 41 ng/ml when it was dosed twice a day orally at 55 mg/kg/day. Seven-day rat safety studies showed a no-observable-adverse-effect level (NOAEL) at 200 mg/kg/day; the compound was not mutagenic in Ames tests, did not inhibit the hERG channel, and did not have potent activity against a broad panel of receptors and enzymes. Employing allometric scaling and using in vitro ADME data, the predicted human minimum efficacious dose of Genz-668764 in a 3-day once-daily dosing regimen was 421 mg/day/70 kg, which would maintain plasma trough levels above the ICâ‚‰â‚€ against P. falciparum for at least 96 h after the last dose. The predicted human therapeutic index was approximately 3, on the basis of the exposure in rats at the NOAEL. We were unable to select for parasites with >2-fold decreased sensitivity to the parent compound, Genz-644442, over 270 days of in vitro culture under drug pressure. These characteristics make Genz-668764 a good candidate for preclinical development.

Aminoindoles, a novel scaffold with potent activity against Plasmodium falciparum.

Cette &eacute;tude caract&eacute;rise les mol&eacute;cules aminoindole qui sont des analogues de Genz-644442. Genz-644442 a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; comme un coup dans un &eacute;cran de 70 000 ~ compos&eacute;s dans la biblioth&egrave;que de petit-mol&eacute;cule du Broad Institute et la collection compos&eacute;e de BICE-L &agrave; la Harvard Medical School. Genz-644442 est un puissant inhibiteur de Plasmodium falciparum in vitro (concentrations inhibitrices de 50 % [IC&#x2085;&#x2080;s], 200 &agrave; 285 nM) et inhibe la P. berghei in vivo avec une efficacit&eacute; de 99 &gt; % dans une version adapt&eacute;e de l&#39;essai suppressive 4 jours Peters (W. Peters, Ann trop med Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz-644442 est devenue le centre d&#39;optimisation de la chimie m&eacute;dicinale ; 321 analogues ont &eacute;t&eacute; synth&eacute;tis&eacute;s et ont &eacute;t&eacute; test&eacute;s pour l&#39;activit&eacute; in vitro contre P. falciparum et in vitro d&#39;absorption, distribution, m&eacute;tabolisme et excr&eacute;tion (ADME) Propri&eacute;t&eacute;s. Ceci a produit des compos&eacute;s avec IC&#x2085;&#x2080;s d&#39;environ 30 nM. Le principal compos&eacute;, Genz-668764, a &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;e plus en d&eacute;tail. C&#39;est un &eacute;nantiom&egrave;re simple avec IC&#x2085;&#x2080;s de 28 &agrave; 65 nM contre P. falciparum in vitro. Dans le mod&egrave;le 4 jours P. berghei, lorsqu&#39;il a &eacute;t&eacute; dos&eacute;e &agrave; 100 mg/kg de poids corporel/jour, aucun parasite ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s sur postinfection jour 4. Toutefois, les parasites recrudesced par jour 9. Dosage &agrave; 200 mg/kg/jour deux fois par jour a donn&eacute; lieu &agrave; des cures de 3/5 animaux. Le compos&eacute; a une activit&eacute; comparable contre P. falciparum stades de sang dans un mod&egrave;le de souris NOD-scid greff&eacute;e &agrave; l&#39;homme. Genz-668764 avait une demi-vie terminale de 2,8 h et plasma concentrations minimales de 41 ng/ml, lorsqu&#39;il &eacute;tait administr&eacute; deux fois par jour par voie orale &agrave; 55 mg/kg/jour. &Eacute;tudes de s&eacute;curit&eacute; de sept jours chez le rat ont montr&eacute; un niveau de no-observable-adverse-effect (NOAEL) &agrave; 200 mg/kg/jour ; le compos&eacute; n&#39;est pas r&eacute;v&eacute;l&eacute; mutag&egrave;ne lors des tests d&#39;Ames, n&#39;a pas inhib&eacute; le canal hERG et n&#39;avaient pas d&#39;activit&eacute; efficace contre un large panel d&#39;enzymes et r&eacute;cepteurs. Employant &eacute;chelle allom&eacute;trique et en utilisant les donn&eacute;es in vitro ADME, la pr&eacute;dite dose efficace minimale humaine de Genz-668764 &agrave; une posologie quotidienne de 3 jours a 421 mg/jour/70 kg, ce qui maintiendrait plasmatique creux au-dessus de la IC&#x2089;&#x2080; contre P. falciparum pendant au moins 96 h apr&egrave;s la derni&egrave;re dose. L&#39;indice pr&eacute;dite de la th&eacute;rapeutique humaine &eacute;tait environ 3, sur la base de l&#39;exposition chez les rats &agrave; la NOAEL. Nous n&#39;avons pu s&eacute;lectionner des parasites avec &gt; double sensibilit&eacute; diminu&eacute;e au parent compound, Genz-644442, plus de 270 jours de culture in vitro sous la pression de la drogue. Ces font caract&eacute;ristiques Genz-668764 un bon candidat pour le d&eacute;veloppement pr&eacute;clinique.

Aminoindoles, un roman &eacute;chafaudage avec une activit&eacute; puissante contre Plasmodium falciparum.

Diese Studie charakterisiert Aminoindole-Molek&uuml;le, die Entsprechungen Genz-644442 sind. Genz-644442 wurde als ein Hit in einem Bildschirm ~ 70.000 Verbindungen in der Broad Institutsbibliothek klein-Molek&uuml;l und die zusammengesetzte ICCB-L-Sammlung an der Harvard Medical School identifiziert. Genz-644442 ist ein potenter Inhibitor von Plasmodium Falciparum in-vitro (50 % hemmende Konzentrationen [IC&#x2085;&#x2080;s], 200-285 nM) und hemmt p. Berghei in-vivo mit einer Wirksamkeit von &gt; 99 % in einer angepassten Version von Peters 4-t&auml;gige unterdr&uuml;ckende Test (W. Peters, Ann Trop. Med. Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz-644442 wurde der Schwerpunkt der medizinischen Chemie-Optimierung; 321 Analoga wurden synthetisiert und getestet f&uuml;r in-vitro-Wirksamkeit gegen p. Falciparum und in-vitro-Resorption, Verteilung, Metabolismus und Ausscheidung (ADME) Eigenschaften. Dies ergab Verbindungen mit IC&#x2085;&#x2080;s von ca. 30 nM. Die F&uuml;hrung zusammengesetzte, Genz-668764, hat etwas ausf&uuml;hrlicher gekennzeichnet worden. Es ist ein einzelnes Enantiomer mit IC&#x2085;&#x2080;s von 28 bis 65 nM gegen p. Falciparum in-vitro. Wenn es bei 100 mg/kg K&ouml;rpergewicht/Tag, dosiert war, wurden keine Parasiten im Modell 4 Tage p. Berghei am 4. Tag Postinfection entdeckt. Jedoch recrudesced Parasiten von Tag 9. Dosierung bei 200 mg/kg/Tag zweimal t&auml;glich zu Kuren von 3/5 Tieren gef&uuml;hrt. Die Verbindung hatte vergleichbare Aktivit&auml;t gegen p. Falciparum Blut Phasen in einem Mensch-Abbau NOD-scid-Maus-Modell. Genz-668764 hatte eine terminal Halbwertszeit von 2,8 h und Plasma-Trog-Ebenen von 41 ng/ml wenn es, zweimal t&auml;glich oral zu 55 mg/kg dosiert war/Tag. Sieben-Tage-Ratte Sicherheitsstudien zeigten eine keine-Observable-adverse Effect Level (NOAEL) 200 mg/kg/Tag; die Verbindung war nicht mutagen in Ames-Tests, nicht hemmen den hERG-Kanal und hatten keine starke Aktivit&auml;t gegen ein breites Gremium von Rezeptoren und Enzymen. Einsatz von allometrische Skalierung sowie die Verwendung von in-vitro ADME-Daten, der vorhergesagte menschliche minimale wirksame Dosis von Genz-668764 in einer 3-Tages einmal t&auml;gliche Dosierung Regime wurde 421 mg/Tag/70 kg, die Trog-Plasmaspiegel oberhalb der IC&#x2089;&#x2080; gegen p. Falciparum f&uuml;r mindestens 96 Stunden nach der letzten Dosis weiterf&uuml;hren w&uuml;rde. Der vorhergesagten menschlichen therapeutischen Index war ungef&auml;hr 3, auf der Grundlage der Exposition bei Ratten bei der NOAEL-Wert. Wir waren keine Parasiten mit ausw&auml;hlen &gt; 2-fold verminderte Empfindlichkeit gegen&uuml;ber dem &uuml;bergeordneten compound, Genz-644442, &uuml;ber 270 Tage des in-vitro-Kultur unter dem Druck der Droge. Diese Merkmale machen Genz-668764 ein guter Kandidat f&uuml;r die pr&auml;klinische Entwicklung.

Aminoindoles, eine neuartige Ger&uuml;st mit potenten Aktivit&auml;t gegen Plasmodium Falciparum.

Questo studio caratterizza aminoindole molecole che sono analoghi di Genz-644442. Genz-644442 &egrave; stato identificato come un colpo in una schermata di ~ 70.000 composti in libreria piccolo-molecola del Broad Institute e l&#39;ICCB-L composto insieme alla Harvard Medical School. Genz-644442 &egrave; un potente inibitore del Plasmodium falciparum in vitro (50% concentrazioni inibitorie [IC&#x2085;&#x2080;s], 200 a 285 nM) e inibisce in vivo con un&#39;efficacia &amp;gt; 99% in una versione adattata del test soppressiva Peters&#39; 4 giorni p. berghei (W. Peters, Ann trop med Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz-644442 &egrave; diventato il fulcro della ottimizzazione chimica farmaceutica; 321 analoghi sono stati sintetizzati e sono stati testati per la potenza in vitro contro p. falciparum e per in vitro assorbimento, distribuzione, metabolismo ed escrezione (ADME) propriet&agrave;. Questo ha reso composti con IC&#x2085;&#x2080;s di circa 30 nM. Il lead compound, Genz-668764, &egrave; stata caratterizzata in modo pi&ugrave; dettagliato. &Egrave; un singolo enantiomero con IC&#x2085;&#x2080;s di 28 a 65 nM contro p. falciparum in vitro. Nel modello p. berghei 4 giorni, quando esso &egrave; stato dosato a 100 mg/kg di peso corporeo, senza parassiti sono stati rilevati su postinfection di giorno 4. Tuttavia, parassiti recrudesced dal giorno 9. Dosaggio a 200 mg/kg/giorno due volte al giorno ha portato cure di 3/5 animali. Il composto era paragonabile attivit&agrave; contro p. falciparum fasi di sangue in un modello di topo NOD-scid umani trapiantati. Genz-668764 aveva un&#39;emivita terminale di h 2,8 e plasma livelli trogolo di 41 ng/ml, quando esso &egrave; stato dosato due volte al giorno per via orale a 55 mg/kg/giorno. Sette giorni ratto sicurezza studi hanno mostrato un livello di non-osservabili effetti avversi (NOAEL) a 200 mg/kg/giorno; il composto non era mutageno nel test di Ames, non inibisce il canale hERG e non ha potente attivit&agrave; contro un ampio pannello di recettori ed enzimi. Impiegando allometriche scaling e utilizzando i dati in vitro ADME, il predetta umana efficacia dose minima di Genz-668764 in un regime di somministrazione una volta al giorno 3-giorno era 421 mg/giorno/70 kg, che vuoi mantenere livelli plasmatici di trogolo sopra il IC&#x2089;&#x2080; contro p. falciparum per almeno 96 ore dopo l&#39;ultima dose. Il predetto indice terapeutico umano era circa 3, sulla base dell&#39;esposizione nei ratti presso il NOAEL. Siamo stati in grado di selezionare per parassiti con &amp;gt; 2 volte diminuita sensibilit&agrave; al padre compound, Genz-644442, oltre 270 giorni di coltura in vitro sotto pressione di droga. Questi fanno le caratteristiche Genz-668764 un buon candidato per sviluppo preclinico.

Aminoindoles, un romanzo ponteggio con potente attivit&agrave; contro il Plasmodium falciparum.

&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53; Genz 644442 &#x306E;&#x3042;&#x308B; aminoindole &#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Genz 644442 ~ 70,000 &#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x30D6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3068; ICCB L &#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30CF;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30C9;&#x885B;&#x751F;&#x5B66;&#x6821;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x30D2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Genz 644442 &#x306F; in vitro &#x3067;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; &#xFF08;50% &#x963B;&#x5BB3;&#x6FC3;&#x5EA6; [IC&#x2085;&#x2080;s] 200 &#x306B; 285 nM) &#x3068;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30D4;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BA; 4 &#x65E5;&#x6291;&#x5236;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x76EE; 99 &#xFF05; &#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092; in vivo &#x3067;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B; &#xFF08;&#x30FB; w &#x30FB; &#x30D4;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BA;&#x3001;&#x30C1;&#x30C3;&#x7D20; Trop. Med. &#x5BBF;&#x4E3B;&#x3002; 69:155-171, 1975)&#x3002;Genz 644442 &#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30CA;&#x30EB;&#x30B1;&#x30DF;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;;321 &#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x5438;&#x53CE;&#x3001;&#x5206;&#x5E03;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6392;&#x6CC4; &#xFF08;ADME&#xFF09; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D04; 30 &#x306E; IC&#x2085;&#x2080;s &#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F; nM&#x3002;&#x925B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001;Genz 668764 &#x3044;&#x308B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x8A73;&#x3057;&#x304F;&#x3002;1 &#x3064;&#x306E;&#x30A8;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC; 28 &#x306B; 65 &#x306E; IC&#x2085;&#x2080;s &#x3067;&#x3042;&#x308B; in vitro &#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; nM&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x6642;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x306F; 100 mg/kg &#x4F53;&#x91CD;/&#x65E5;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x3060;&#x3063;&#x305F; 4 &#x65E5;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C; 4 &#x65E5;&#x76EE;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306F;&#x4E00;&#x65E5; 9 recrudesced&#x3002;200 Mg/kg &#x3092;&#x6295;&#x4E0E;/&#x65E5; 1 &#x65E5; 2 &#x56DE;&#x3067; 3/5 &#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5316;&#x5408;&#x7269; p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x8840;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5339;&#x6575;&#x6D3B;&#x6027;&#x4EBA;&#x9593;&#x306B;&#x3057;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3067; NOD scid &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3044;&#x305F;&#x3002;Genz 668764 2.8 h &#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; 41 ng/ml &#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x534A;&#x6E1B;&#x671F;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x6642;&#x306B;&#x305D;&#x308C; 2 &#x56DE; 1 &#x65E5; 55 mg/kg &#x3067;&#x7D4C;&#x53E3;&#x6295;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;/&#x65E5;&#x3002;7 &#x65E5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5B89;&#x5168;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x89B3;&#x6E2C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6709;&#x5BB3;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; (NOAEL) 200 mg/kg/&#x65E5;;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;&#x3001;Ames &#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F; hERG &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x5E83;&#x3044;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6210;&#x9577;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x306E; ADME &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x4E88;&#x6E2C;&#x4EBA;&#x9593;&#x6700;&#x5C0F;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x306E;&#x7DDA;&#x91CF; Genz 668764 3-1 &#x65E5; 1 &#x56DE;&#x6295;&#x4E0E;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F; 421 mg/&#x65E5;/&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x5F8C;&#x8840;&#x4E2D;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 96 h p. &#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; IC&#x2089;&#x2080; &#x306E;&#x4E0A;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046; 70 &#x30AD;&#x30ED;&#x3002;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x6CBB;&#x7642;&#x6307;&#x6570;&#x66B4;&#x9732;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x7121;&#x6BD2;&#x6027;&#x91CF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x7D04; 3 &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3068;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x76EE; 2 &#x500D;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x611F;&#x5EA6;&#x3001;&#x89AA;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3001;Genz 644442 270 &#x65E5;&#x9593;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x990A;&#x85AC;&#x5264;&#x5727;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F; Genz-668764 &#x524D;&#x81E8;&#x5E8A;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3088;&#x3044;&#x5019;&#x88DC;&#x3002;

Aminoindoles&#x3001;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x65B0;&#x898F;&#x8DB3;&#x5834;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xC0AC; Genz 644442&#xB294; aminoindole &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC9D5;. Genz 644442&#xB294; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC640; &#xD558;&#xBC84;&#xB4DC;&#xC758;&#xACFC; &#xB300;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; ICCB L &#xBCF5;&#xD569; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158; ~ 70000 &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD788;&#xD2B8;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Genz 644442&#xB294; Plasmodium falciparum &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; (50% &#xC5B5;&#xC81C; &#xB18D;&#xB3C4; [IC&#x2085;&#x2080;s] 200 285 nM)&#xACFC; &#xC5B5;&#xC81C; P. berghei &#xD53C;&#xD130; &#xC2A4; 4 &#xC77C; &#xC9C4;&#xC555; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC801;&#xC751; &#xBC84;&#xC804;&#xC5D0;&#xC11C; &amp;gt; 99%&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xACFC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; (W. &#xD53C;&#xD130; &#xC2A4;, Ann. Trop. &#xC911;&#xACAC; &#xAE30;&#xC5C5; Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz 644442&#xC758; &#xC57D; &#xD654;&#xD559; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;; &#xCD08;&#xC810;&#xC774; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; 321 &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4; &#xD569;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; P. falciparum&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD798; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD761;&#xC218;, &#xBD84;&#xD3EC;, &#xB300;&#xC0AC;, &#xBC0F; &#xBC30;&#xC124; (ADME) &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC57D; 30&#xC758; ic&#x2085;&#x2080;s&#xC640; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC774; &#xB098;&#xC654;&#xACE0;&#xC774; &#xB274; &#xBA55;&#xC2DC;&#xCF54;. &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;, Genz 668764 &#xB354; &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; 28-65&#xC758; ic&#x2085;&#x2080;s&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB2E8;&#xC77C; enantiomer P. falciparum &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB274; &#xBA55;&#xC2DC;&#xCF54;. 4 &#xC77C; P. berghei &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; 100mg/kg &#xBAB8; &#xBB34;&#xAC8C;/&#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; &#xC57D;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4; &#xC544;&#xB2C8; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD558;&#xB8E8; 4 &#xBC14;&#xB78C;&#xC9C1;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD558;&#xB8E8; 9 recrudesced. 200 M g/k g &#xC8FC;&#xC785;/&#xD558;&#xB8E8; &#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; &#xB450; &#xBC88; 3/5 &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACB0;&#xACFC;. &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xC778;&#xAC04; engrafted &#xB044; &#xB355; scid &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; P. falciparum &#xD608;&#xC561; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xAD50; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. Genz 668764 41 ng/ml&#xC758; 2.8 h &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC5EC; &#xBB3C; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xD558;&#xD504; &#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xAD6C;&#xB450;&#xB85C; 55 mg/kg&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; &#xB450; &#xBC88; &#xBCF5;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;/&#xC77C;. 7 &#xC77C;&#xAC04; &#xC950; &#xC548;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; no &#xB744;&#xB294;-&#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC218;&#xC900; (NOAEL) 200mg/kg&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;/&#xC77C;; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC740; Ames &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; hERG &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD328;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xACE0;&#xC6A9; allometric &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xCCB4; &#xC678; ADME &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; Genz 668764 3-&#xD558;&#xB8E8; &#xD55C; &#xBC88; &#xC77C;&#xC77C; &#xD22C;&#xC57D; &#xCC98;&#xBC29;&#xC5D0;&#xB294; 421 mg/day/70 k g, &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xD22C;&#xC5EC; &#xD6C4; 96 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC774;&#xC0C1; P. falciparum&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; IC&#x2089;&#x2080; &#xC704;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC5EC; &#xBB3C; &#xC218;&#xC900; &#xC720;&#xC9C0; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4;&#xB294; NOAEL&#xC5D0; &#xC950;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D; 3 &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &amp;gt; &#xBD80;&#xBAA8; 2-fold &#xAC10;&#xC18C; &#xAC10;&#xB3C4; &#xCEF4;&#xD30C;&#xC6B4;&#xB4DC;, Genz 644442 270 &#xC77C; &#xC774;&#xC0C1; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC555;&#xB825; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xBB38;&#xD654;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131; &#xD655;&#xC778; Genz-668764 &#xC804; &#xC784;&#xC0C1; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC790;.

Aminoindoles, Plasmodium falciparum&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC18C;&#xC124; &#xBE44; &#xACC4;.

Este estudio caracteriza por las mol&eacute;culas de aminoindole que son an&aacute;logos de Genz-644442. Genz-644442 fue identificado como un golpe en una pantalla de ~ 70.000 compuestos en la amplia biblioteca del Instituto mol&eacute;culas peque&ntilde;as y la colecci&oacute;n compuesta ICCB-L en la Harvard Medical School. Genz-644442 es un potente inhibidor de Plasmodium falciparum in vitro (concentraciones inhibitorias 50% [IC&#x2085;&#x2080;s], 200 a 285 nM) e inhibe p. berghei in vivo con una eficacia de &gt; 99% en una versi&oacute;n adaptada del ensayo represivo de Peters&#39; 4 d&iacute;as (W. Peters, Albis Trop. med Parasitol. 69:155-171, 1975). Genz-644442 se convirti&oacute; en el foco de la optimizaci&oacute;n de la qu&iacute;mica medicinal; 321 an&aacute;logos se sintetizaron y se analizaron para potencia in vitro contra p. falciparum y in vitro absorci&oacute;n, distribuci&oacute;n, metabolismo y excreci&oacute;n (ADME) propiedades. Esto produjo compuestos con IC&#x2085;&#x2080;s de aproximadamente 30 nM. El cable compuesto, Genz-668764, se ha caracterizado m&aacute;s detalladamente. Es un solo enanti&oacute;mero con IC&#x2085;&#x2080;s de 28 a 65 nM contra p. falciparum in vitro. En el modelo de 4 d&iacute;as p. berghei, cuando fue administrado a dosis de 100 mg/kg de peso corporal/d&iacute;a, no par&aacute;sitos fueron detectados en postinfection de d&iacute;a 4. Sin embargo, los par&aacute;sitos recrudesced por d&iacute;a 9. Dosis de 200 mg/kg/d&iacute;a dos veces al d&iacute;a result&oacute; en curaciones de animales 3/5. El compuesto ten&iacute;a actividad comparable contra p. falciparum fases en un modelo con ratones NOD-scid humanos-engrafted. Genz-668764 ten&iacute;a una vida media terminal de niveles de canal h 2,8 y plasma de 41 ng/ml cuando fue dosificada dos veces al d&iacute;a por v&iacute;a oral en 55 mg/kg/d&iacute;a. Siete d&iacute;as rata seguridad estudios demostraron un nivel no-observables efectos adversos (NOAEL) a 200 mg/kg/d&iacute;a; la masa no fue mutag&eacute;nica en las pruebas de Ames, no inhibir el canal hERG y no ten&iacute;a potente actividad contra un amplio panel de receptores y enzimas. Empleando la escala alom&eacute;trica y usando datos ADME in vitro, la predicha humana m&iacute;nima eficaz dosis de Genz-668764 en un r&eacute;gimen de dosis 3 d&iacute;as una vez al d&iacute;a fue 421 mg/d&iacute;a/70 kg, que mantendr&iacute;a niveles a trav&eacute;s del plasma por encima de la IC&#x2089;&#x2080; contra p. falciparum durante al menos 96 h despu&eacute;s de la &uacute;ltima dosis. El &iacute;ndice de terap&eacute;utico humano previsto fue de aproximadamente 3, sobre la base de la exposici&oacute;n en ratas en el NOAEL. Hemos podido seleccionar para los par&aacute;sitos con &gt; compuesto de doble sensibilidad disminuida al padre, Genz-644442, m&aacute;s de 270 d&iacute;as de cultivo in vitro bajo presi&oacute;n de la droga. Estos hacen caracter&iacute;sticas Genz-668764 un buen candidato para desarrollo precl&iacute;nico.

Aminoindoles, un andamio novela con potente actividad contra el Plasmodium falciparum.

&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x975E;&#x5E38;&#x5F3A;&#x5927;&#x548C;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6297;&#x759F;&#x836F;&#x7269;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; bc(1) &#x590D;&#x6742;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x7C7B;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#x76EE;&#x6807;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x62A5;&#x544A; tetracyclic benzothiazepines (BTZs) &#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x5185;&#x6784;&#x6548;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E0E;&#x4F4E; nanomolar &#x6D3B;&#x52A8;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x91C7;&#x7528;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5408;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x7C7B;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4FEE;&#x6539;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001; &#x751F;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x3001; &#x548C;&#x7535;&#x963B;&#x9009;&#x62E9;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; bc(1) &#x6D3B;&#x6027;&#x3001; &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x547C;&#x5438;&#x94FE;&#x548C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6297;&#x759F;&#x75BE;&#x836F;&#x7269;&#x751F;&#x7684;&#x6D77;&#x4EA7;&#x54C1;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5BF9;&#x5B83;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x524A;&#x5F31;&#x6B64;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6297;&#x759F;&#x75BE;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E; BTZ &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4FDD;&#x7559;&#x5BF9;&#x5B83;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x6297;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x5316;&#x5B66;&#x8BE5;&#x7C7B;&#x53EF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5907;&#x7528;&#x65B9;&#x6848;&#x5BF9;&#x5B83;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x7EC4;&#x5408;&#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684; tetracyclic benzothiazepines &#x4F5C;&#x4E3A;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20;&#x5DF4;&#x53C2; 1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;

Here we report the discovery of tetracyclic benzothiazepines (BTZs) as highly potent and selective antimalarials along with the identification of the Plasmodium falciparum cytochrome bc(1) complex as the primary functional target of this novel compound class. Investigation of the structure activity relationship within this previously unexplored chemical scaffold has yielded inhibitors with low nanomolar activity. A combined approach employing genetically modified parasites, biochemical profiling, and resistance selection validated inhibition of cytochrome bc(1) activity, an essential component of the parasite respiratory chain and target of the widely used antimalarial drug atovaquone, as the mode of action of this novel compound class. Resistance to atovaquone is eroding the efficacy of this widely used antimalarial drug. Intriguingly, BTZ-based inhibitors retain activity against atovaquone resistant parasites, suggesting this chemical class may provide an alternative to atovaquone in combination therapy.

Identification and validation of tetracyclic benzothiazepines as Plasmodium falciparum cytochrome bc1 inhibitors.

Nous rapportons ici la d&eacute;couverte de benzothiaz&eacute;pines t&eacute;tracycliques (BTZs) comme les antipalud&eacute;ens tr&egrave;s puissants et s&eacute;lectifs avec l&#39;identification de la Plasmodium falciparum du cytochrome non-maths complexes comme la principale cible fonctionnelle de cette nouvelle classe de compos&eacute;s. &Eacute;tude des relations structure activit&eacute; au sein de cet &eacute;chafaudage chimique pr&eacute;c&eacute;demment inexplor&eacute; a c&eacute;d&eacute; inhibiteurs avec nanomolaires faible activit&eacute;. Une approche combin&eacute;e utilisant g&eacute;n&eacute;tiquement modifi&eacute;s parasites, profilage biochimique et inhibition de s&eacute;lection valid&eacute;e de r&eacute;sistance de l&#39;activit&eacute; cytochrome non-maths, une composante essentielle de la cha&icirc;ne respiratoire de parasite et la cible de l&#39;atovaquone antipaludique largement utilis&eacute;, le mode d&#39;action de cette classe de compos&eacute;s nouvelle. R&eacute;sistance &agrave; l&#39;atovaquone sape l&#39;efficacit&eacute; de ce m&eacute;dicament antipaludique largement utilis&eacute;. Curieusement, inhibiteurs &agrave; base de BTZ conservent une activit&eacute; contre des parasites r&eacute;sistants atovaquone, sugg&eacute;rant que cette classe chimique peut fournir une alternative &agrave; l&#39;atovaquone en th&eacute;rapie combin&eacute;e.

Identification et validation de benzothiaz&eacute;pines t&eacute;tracycliques comme inhibiteurs de Plasmodium falciparum du cytochrome bc1.

Hier berichten wir &uuml;ber die Entdeckung von Tetrazyklisches Benzothiazepines (BTZs) als sehr potenter und selektiver Malariamittel sowie die Identifizierung von Plasmodium Falciparum Cytochrom bc(1) Komplex wie funktionale prim&auml;res Ziel dieser neuartigen Verbindungsklasse. Untersuchung von Struktur-Wirkungs-Beziehung innerhalb dieser zuvor unerforschte chemische Ger&uuml;st hat Inhibitoren mit niedrigen Nanomolar T&auml;tigkeit ergeben. Ein kombinierter Ansatz besch&auml;ftigt genetisch ver&auml;ndert Parasiten, biochemische Profilerstellung und Widerstand Auswahl validiert Hemmung der Cytochrom bc(1) Aktivit&auml;t, ein wesentlicher Bestandteil der Atmungskette Parasit und Ziel der weit verbreiteten gegen Malaria Medikament Atovaquon, als die Wirkungsweise dieser neuartigen Verbindungsklasse. Widerstand gegen Atovaquon ist die Wirksamkeit dieser weit verbreiteten gegen Malaria Droge untergr&auml;bt. Interessanterweise behalten BTZ-basierten Inhibitoren Aktivit&auml;t gegen Atovaquon resistente Parasiten, was darauf hindeutet, dass diese chemischen Klasse Alternative zu Atovaquon in Kombinationstherapie vorsehen.

Identifizierung und Validierung von Tetrazyklisches Benzothiazepines als Plasmodium Falciparum Cytochrom-bc1-Inhibitoren.

Qui riportiamo la scoperta di benzothiazepines tetraciclici (BTZs) come gli antimalarici altamente potenti e selettivi, insieme con l&#39;identificazione del Plasmodium falciparum citocromo bc(1) complesso come la primaria destinazione funzionale di questa classe di composta romanzo. Indagine del rapporto struttura attivit&agrave; all&#39;interno di questa impalcatura chimica precedentemente inesplorato ha fruttato inibitori con nanomolari bassa attivit&agrave;. Un approccio combinato che impiegano geneticamente modificati parassiti, analisi biochimiche e resistenza selezione convalidato inibizione dell&#39;attivit&agrave; di citocromo bc(1), una componente essenziale della catena respiratoria parassita e destinazione di atovaquone il farmaco antimalarico ampiamente usato, come la modalit&agrave; di azione di questa classe di composta romanzo. Resistenza all&#39;atovaquone &egrave; erodendo l&#39;efficacia di questo farmaco antimalarico ampiamente utilizzato. Intrigante, basata su BTZ inibitori attivi contro parassiti resistenti atovaquone, suggerendo che questa classe chimica pu&ograve; fornire un&#39;alternativa all&#39;atovaquone nella terapia di combinazione.

Identificazione e validazione di tetraciclici benzothiazepines come inibitori di Plasmodium falciparum citocromo bc1.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x6297;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x85AC;&#x306E; bc (1&#x3001;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;) &#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8B58;&#x5225;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x918D; benzothiazepines (BTZs) &#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x8E0F;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x8DB3;&#x5834;&#x5185;&#x69CB;&#x9020;&#x6D3B;&#x6027;&#x76F8;&#x95A2;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x4F4E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30E2;&#x30EB;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x8907;&#x5408;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; bc (1) &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x9078;&#x629E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x547C;&#x5438;&#x9396;&#x3068;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6297;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x85AC;&#x54AC;&#x307E;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3053;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3002;&#x54AC;&#x307E;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6297;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x85AC;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x4FB5;&#x98DF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Lrad &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E; BTZ &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x54AC;&#x307E;&#x4F75;&#x7528;&#x7642;&#x6CD5;&#x3067;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x54AC;&#x307E;&#x8010;&#x6027;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; bc1 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x918D; benzothiazepines &#x306E;&#x691C;&#x8A3C;&#x3002;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Plasmodium falciparum &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; bc(1)&#xC774; &#xC18C;&#xC124; &#xBCF5;&#xD569; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD568;&#xAED8; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC778; antimalarials&#xB85C; tetracyclic benzothiazepines (BTZs)&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xC804; &#xBBF8;&#xAC1C;&#xCC99;&#xB41C; &#xD654;&#xD559; &#xBE44; &#xACC4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC870; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;&#xC640; &#xB0AE;&#xC740; nanomolar &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xAD74;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0;. &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xC811;&#xADFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC774; &#xC18C;&#xC124; &#xBCF5;&#xD569; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9; &#xBAA8;&#xB4DC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;, &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC800;&#xD56D; &#xD655;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; bc(1) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC800;&#xD574;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xD638;&#xD761;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC778; &#xBC0F; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC57D; atovaquone&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC758; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC218;&#xC815;. Atovaquone&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC774; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC57D;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD30C;&#xAD34; &#xC774;&#xB2E4;. Intriguingly, BTZ &#xAE30;&#xBC18; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; atovaquone &#xB0B4;&#xC131; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC774; &#xD654;&#xD559; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xACB0;&#xD569; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; atovaquone&#xC5D0; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xACFC; Plasmodium falciparum &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; bc1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; tetracyclic benzothiazepines&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aqu&iacute; divulgamos el descubrimiento de tetrac&iacute;clico benzothiazepines (BTZs) como antimal&aacute;ricos altamente potentes y selectivos, junto con la identificaci&oacute;n de los Plasmodium falciparum citocromo bc(1) complejo como el principal objetivo funcional de esta nueva clase compuesto. Investigaci&oacute;n de la relaci&oacute;n de la actividad de estructura dentro de este andamio qu&iacute;mico previamente inexplorada ha rendido inhibidores con nanomolar baja actividad. Un enfoque combinado empleando gen&eacute;ticamente hab&iacute;a modificado par&aacute;sitos, perfiles bioqu&iacute;micos y resistencia selecci&oacute;n validado inhibici&oacute;n de la actividad de citocromo bc(1), un componente esencial de la cadena respiratoria del par&aacute;sito y el destino de la atovacuona antimal&aacute;ricos utilizados, como el modo de acci&oacute;n de esta nueva clase compuesta. Resistencia a la atovacuona est&aacute; erosionando la eficacia de este f&aacute;rmaco antimal&aacute;rico utilizado. Es fascinante, basadas en la BTZ inhibidores retienen actividad contra par&aacute;sitos resistentes de atovacuona, sugiriendo que esta clase de qu&iacute;mica puede proporcionar una alternativa a la atovacuona en terapia combinada.

Bradley I. Coleman

Department of Biology

Boston College

A Genetic Screen to Isolate Toxoplasma gondii Host-cell Egress Mutants

Bradley I. Coleman

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Boston College

A Genetic Screen to Isolate Toxoplasma gondii Host-cell Egress Mutants

Department of Biology