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Basic Principles for Purification Using Supercritical Fluid Chromatography - ADVERTISEMENT

Although supercritical fluid chromatography (SFC) is not a new technique, preparative SFC is becoming increasingly more popular with advances in ...

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&#x5BF9;&#x4FDD;&#x7559;&#x3001; &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x548C; MS &#x54CD;&#x5E94;&#x5728;&#x4EB2;&#x6C34;&#x4F5C;&#x7528;&#x8272;&#x8C31;&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x4E0E;&#x6D41;&#x52A8;&#x76F8;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

A comprehensive retention and selectivity characterization of several hydrophilic interaction chromatography (HILIC) stationary phases was performed with 28 test probes in order to study the influence of particle type, surface chemistry, and mobile-phase pH on chromatographic retention, selectivity, and MS response. Selectivity differences were compared for columns operated at both low and high pH, while ESI-MS was used to study the effects of mobile-phase pH on signal response. Additionally, acetone was explored as a potential alternative to ACN as the weak HILIC solvent. Moderate differences in selectivity were observed on the same column operated at different pH, mostly due to acidic compounds. In addition, the MS response increased when a high pH mobile phase was used, particularly for analytes that were ionized with negative ESI-MS. Even larger selectivity differences were observed for different stationary phases evaluated with the same mobile phase. Acetone was not a suitable replacement for ACN in routine HILIC separations due to differences in selectivity and MS response. Finally, the data from this study were used to establish guidelines for rapid HILIC method development of polar compounds, which is demonstrated with a mixture of histidine dipeptides and organophosphonate nerve agent metabolites.

Influence of stationary phase chemistry and mobile-phase composition on retention, selectivity, and MS response in hydrophilic interaction chromatography.

Une r&#xE9;tention compl&#xE8;te et la caract&#xE9;risation de la s&#xE9;lectivit&#xE9; chromatographie d&#x26;#39;interaction hydrophile plusieurs (HILIC) phases stationnaires a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e avec 28 sondes de test afin d&#x26;#39;&#xE9;tudier l&#x26;#39;influence du type de particules, la chimie de surface, et de phase mobile de pH sur la r&#xE9;tention chromatographique, la s&#xE9;lectivit&#xE9;, et la r&#xE9;ponse MS. Diff&#xE9;rences de s&#xE9;lectivit&#xE9; ont &#xE9;t&#xE9; compar&#xE9;s pour les colonnes fonctionnant &#xE0; la fois un pH faible et &#xE9;lev&#xE9;, tandis que ESI-MS a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour &#xE9;tudier les effets de phase mobile de pH sur la r&#xE9;ponse du signal. En outre, l&#x26;#39;ac&#xE9;tone a &#xE9;t&#xE9; explor&#xE9;e comme une alternative potentielle &#xE0; ACN en tant que solvant faible HILIC. Diff&#xE9;rences mod&#xE9;r&#xE9;es en mati&#xE8;re de s&#xE9;lectivit&#xE9; ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s sur la m&#xEA;me colonne exploit&#xE9; &#xE0; diff&#xE9;rents pH, la plupart du temps due &#xE0; des compos&#xE9;s acides. En outre, la r&#xE9;ponse MS augment&#xE9; lorsque le pH est &#xE9;lev&#xE9; phase mobile a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;, en particulier pour les analytes qui &#xE9;taient n&#xE9;gatifs ionis&#xE9; avec ESI-MS. Diff&#xE9;rences de s&#xE9;lectivit&#xE9; encore plus importantes ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es pour diff&#xE9;rentes phases stationnaires &#xE9;valu&#xE9;es avec la m&#xEA;me phase mobile. L&#x26;#39;ac&#xE9;tone n&#x26;#39;est pas un substitut appropri&#xE9; pour ACN en routine s&#xE9;parations HILIC en raison de diff&#xE9;rences dans la s&#xE9;lectivit&#xE9; et la r&#xE9;ponse MS. Enfin, les donn&#xE9;es de cette &#xE9;tude ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour &#xE9;tablir des lignes directrices pour le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;thodes rapides HILIC de compos&#xE9;s polaires, qui est d&#xE9;montr&#xE9; avec un m&#xE9;lange de dipeptides histidine et des m&#xE9;tabolites organophosphonates agents neurotoxiques.

Influence de la chimie en phase stationnaire et mobile-phase de composition sur le maintien, la s&#xE9;lectivit&#xE9;, et la r&#xE9;ponse de Mme de chromatographie d&#x26;#39;interaction hydrophile

Eine umfassende Aufbewahrungs- und Selektivit&auml;t Charakterisierung von mehreren hydrophil Interaktion Chromatographie (HILIC) station&auml;re Phasen wurde mit 28-Pr&uuml;fspitzen durchgef&uuml;hrt, um den Einfluss von Partikel-Typ, Oberfl&auml;chenchemie und mobil-pH pH-Wert auf Chromatographische Aufbewahrung, Selektivit&auml;t und MS Reaktionszeit zu studieren. Selektivit&auml;t Unterschiede wurden verglichen, f&uuml;r Spalten betrieben bei sowohl hohen als auch niedrigen pH-Wert, w&auml;hrend ESI-MS verwendet wurde, um die Auswirkungen von Handy-pH pH-Wert auf Signal Antwort zu studieren. Au&szlig;erdem wurde als m&ouml;gliche Alternative zu ACN als das schwache HILIC L&ouml;sungsmittel Aceton gepr&uuml;ft. Moderate Unterschiede in der Selektivit&auml;t wurden auf die gleiche Spalte auf unterschiedlichen pH, vor allem aufgrund der sauren Verbindungen betrieben beobachtet. Dar&uuml;ber hinaus erh&ouml;ht die MS Reaktionszeit bei eine hohen pH-Wert mobilen Phase, besonders f&uuml;r Analyten verwendet wurde, die mit negativen ESI-MS ionisiert wurden. Noch gr&ouml;&szlig;ere Selektivit&auml;t Unterschiede wurden f&uuml;r verschiedene station&auml;re Phasen ausgewertet mit der gleichen mobilen Phase beobachtet. Aceton war kein geeigneter Ersatz f&uuml;r ACN in Routine HILIC Trennungen aufgrund unterschiedlicher Selektivit&auml;t und MS Reaktionszeit. Schlie&szlig;lich wurden die Daten dieser Studie zur Festlegung von Leitlinien f&uuml;r HILIC Schnellmethode Entwicklung der polare Verbindungen, die mit einer Mischung aus Histidin Dipeptide und Organophosphonate Nerve Agent Metaboliten nachgewiesen wird.

Einfluss der station&auml;ren Phase Chemie und mobil-Phasen-Zusammensetzung auf Aufbewahrung, Selektivit&auml;t und MS Reaktionszeit in hydrophile Interaktion Chromatographie.

Una caratterizzazione completa ritenzione e selettivit&agrave; delle diverse fasi di cromatografia (HILIC) interazione idrofilo stazionaria &egrave; stata eseguita con 28 sonde di prova al fine di studiare l&#39;influenza del tipo di particella, chimica delle superfici e fase mobile pH sulla ritenzione di gascromatografiche, selettivit&agrave; e risposta MS. Differenze di selettivit&agrave; sono state confrontate per colonne operate a pH alto e basso, mentre ESI-MS &egrave; stato utilizzato per studiare gli effetti della fase mobile pH sulla risposta di segnale. Inoltre, acetone &egrave; stato esplorato come potenziale alternativa ad ACN come il solvente HILIC debole. Sono state osservate differenze moderate in selettivit&agrave; sulla stessa colonna operata a diversi pH, principalmente a causa di composti acidi. Inoltre, la risposta di MS aumentato quando &egrave; stata usata una fase mobile pH elevato, soprattutto per analiti che sono stati ionizzati con negativo ESI-MS. Per diverse fasi stazionarie valutate con la stessa fase mobile sono state osservate differenze di selettivit&agrave; ancora pi&ugrave; grande. Acetone non era un sostituto adeguato per ACN in routine HILIC separazioni a causa delle differenze nella risposta MS e selettivit&agrave;. Infine, i dati di questo studio sono stati utilizzati per stabilire linee guida per lo sviluppo di metodo HILIC rapida di composti polari, &egrave; dimostrato con una miscela di dipeptidi istidina e organophosphonate nervo agente metaboliti.

Influenza della composizione chimica e mobile-fase fase stazionaria sulla ritenzione, selettivit&agrave; e risposta MS in cromatografia di interazione idrofilo.

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&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E0A;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x76F8;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3001;&#x89AA;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306E;MS&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;

&#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HILIC) &#xACE0;&#xC815; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xC885;&#xD569;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC874; &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; 28 &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8; &#xBCF4;&#xC874;, &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;, MS &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC785;&#xC790; &#xC720;&#xD615;, &#xD45C;&#xBA74; &#xD654;&#xD559;, &#xBC0F; &#xC774;&#xB3D9; &#xC0C1; Ph&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC218;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xCC28;&#xC774; ESI MS&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC774;&#xB3D9; &#xC0C1; Ph&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC0F; &#xB192;&#xC740; &#xC0B0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xC601; &#xD558;&#xB294; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC544;&#xC138;&#xD1A4; &#xC57D;&#xD55C; HILIC &#xC6A9; &#xB9E4;&#xB85C; = &#xB274;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC548;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC0B0; &#xC131; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; Ph&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B4;&#xC601; &#xD558; &#xACE0; &#xAC19;&#xC740; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, MS &#xC751;&#xB2F5; &#xD2B9;&#xD788; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; ESI MS&#xC640; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xB41C; analytes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC0B0;&#xB3C4; &#xBAA8;&#xBC14;&#xC77C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC744; &#xB54C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xD070; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xCC28;&#xC774; &#xB2E4;&#xB978; &#xACE0;&#xC815; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAC19;&#xC740; &#xBAA8;&#xBC14;&#xC77C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC640; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xC138;&#xD1A4; &#xC77C;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; HILIC &#xBD84;&#xD310; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xBC0F; MS &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; ACN&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAD50;&#xCCB4; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCF8;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD788;&#xC2A4;&#xD2F0;&#xB518; dipeptides &#xBC0F; organophosphonate &#xC2E0;&#xACBD; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; metabolites&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85; &#xADF9; &#xC9C0; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBE60;&#xB978; HILIC &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xBCF4;&#xC874;, &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;, &#xCE5C;&#xC218;&#xC131; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; MS &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC774;&#xB3D9; &#xC0C1; &#xC870;&#xC131;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

Una retenci&#xF3;n integral y caracterizaci&#xF3;n selectividad de cromatograf&#xED;a de varios interacci&#xF3;n hidr&#xF3;fila (HILIC) fases estacionarias se realiz&#xF3; con 28 sondas de prueba con el fin de estudiar la influencia del tipo de part&#xED;cula, la qu&#xED;mica de superficie, y de fase m&#xF3;vil de pH sobre la retenci&#xF3;n cromatogr&#xE1;fica, selectividad, y la respuesta de MS. Las diferencias de selectividad se compararon para las columnas que trabajan a ambos valores de pH bajo y alto, mientras que ESI-MS se utiliz&#xF3; para estudiar los efectos de la fase m&#xF3;vil de pH en la respuesta de la se&#xF1;al. Adem&#xE1;s, la acetona fue explorada como una posible alternativa a la AIN que el disolvente HILIC d&#xE9;bil. Diferencias moderadas en la selectividad se observaron en la misma columna opera a diferentes pH, debido principalmente a los compuestos &#xE1;cidos. Adem&#xE1;s, la respuesta de MS aument&#xF3; cuando un pH alto fase m&#xF3;vil se utiliz&#xF3;, en particular para analitos que eran ionizada con negativo ESI-MS. Incluso m&#xE1;s grandes diferencias de selectividad se observaron para diferentes fases estacionarias evaluados con la misma fase m&#xF3;vil. La acetona no es un sustituto adecuado para ACN en la rutina de las separaciones HILIC debido a las diferencias en la selectividad y la respuesta de la EM. Por &#xFA;ltimo, los datos de este estudio fueron utilizados para establecer las directrices para el desarrollo r&#xE1;pido m&#xE9;todo de HILIC de compuestos polares, que se demuestra con una mezcla de dip&#xE9;ptidos histidina y metabolitos organofosfonato agente nervioso.

Influencia de la qu&#xED;mica en fase estacionaria y la fase m&#xF3;vil sobre la conservaci&#xF3;n de la composici&#xF3;n, la selectividad, y la respuesta de la EM en cromatograf&#xED;a de interacci&#xF3;n hidrof&#xED;lica

Damian Morrison

Chemistry Commercial Operations

Waters Corporation

Basic Principles for Purification Using Supercritical Fluid Chromatography - ADVERTISEMENT

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