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Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

One of the most powerful tools used to gain insight into complex developmental processes is the analysis of chimeric embryos. A chimera is defined as an ...

Fred Hutchinson Cancer Research Center - FHCRC

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Far3 &#x548C;&#x4E94;&#x4E2A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9632;&#x6B62;&#x8FC7;&#x65E9;&#x6062;&#x590D;&#x5728;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4FE1;&#x606F;&#x7D20;&#x902E;&#x6355;&#x3002;

In budding yeast, diffusible mating pheromones initiate a signaling pathway that culminates in several responses, including cell cycle arrest. Only a handful of genes required for the interface between pheromone response and the cell cycle have been identified, among them FAR1 and FAR3; of these, only FAR1 has been extensively characterized. In an effort to learn about the mechanism by which Far3 acts, we used the two-hybrid method to identify interacting proteins. We identified five previously uncharacterized open reading frames, dubbed FAR7, FAR8, FAR9, FAR10, and FAR11, that cause a far3-like pheromone arrest defect when disrupted. Using two-hybrid and coimmunoprecipitation analysis, we found that all six Far proteins interact with each other. Moreover, velocity sedimentation experiments suggest that Far3 and Far7 to Far11 form a complex. The phenotype of a sextuple far3far7-far11 mutant is no more severe than any single mutant. Thus, FAR3 and FAR7 to FAR11 all participate in the same pathway leading to G1 arrest. These mutants initially arrest in response to pheromone but resume budding after 10 h. Under these conditions, wild-type cells fail to resume budding even after several days whereas far1 mutant cells resume budding within 1 h. We conclude that the FAR3-dependent arrest pathway is functionally distinct from that which employs FAR1.

Far3 and five interacting proteins prevent premature recovery from pheromone arrest in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae.

Dans la levure de bi&egrave;re, les ph&eacute;romones diffusibles accouplements ouvrir une voie de signalisation qui culmine dans plusieurs r&eacute;ponses, notamment l&#39;arr&ecirc;t du cycle cellulaire. Seule une poign&eacute;e de g&egrave;nes n&eacute;cessaires &agrave; l&#39;interface entre la r&eacute;ponse de ph&eacute;romone et cycle cellulaire ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s, parmi lesquels FAR1 et FAR3 ; Parmi ceux-ci, seulement FAR1 a &eacute;t&eacute; largement caract&eacute;ris&eacute;e. Dans un effort pour en savoir plus sur le m&eacute;canisme par lequel des actes Far3, nous avons utilis&eacute; la m&eacute;thode de double-hybride pour identifier les prot&eacute;ines qui interagissent. Nous avons identifi&eacute; cinq cadres de lecture ouverts pr&eacute;c&eacute;demment non caract&eacute;ris&eacute;, surnomm&eacute;s FAR7, FAR8, FAR9, FAR10 et FAR11, qui provoquent un d&eacute;faut d&#39;arrestation de ph&eacute;romone ressemblant &agrave; des far3 lorsque perturb&eacute;s. &Agrave; l&#39;aide de deux-hybride et analyse de co-immunopr&eacute;cipitation, nous avons constat&eacute; que tous les six Far prot&eacute;ines interagissent entre eux. De plus, les exp&eacute;riences de s&eacute;dimentation vitesse sugg&egrave;rent que Far3 et Far7 &agrave; Far11 forment un complexe. Le ph&eacute;notype d&#39;un mutant sextuple far3far7-far11 n&#39;est pas plus grave que n&#39;importe quel seul mutant. Ainsi, FAR3 et FAR7 &agrave; FAR11 tous participeraient dans la m&ecirc;me voie menant &agrave; l&#39;arr&ecirc;t en G1. Ces mutants d&#39;abord arr&ecirc;tent en r&eacute;action &agrave; la ph&eacute;romone mais reprendre en herbe apr&egrave;s 10 h. Dans ces conditions, les cellules de type sauvage ne parviennent pas &agrave; reprendre en herbe m&ecirc;me apr&egrave;s plusieurs jours, alors que les cellules mutantes far1 reprendre en herbe moins d&#39;une heure. Nous concluons que la voie d&#39;arrestation FAR3-d&eacute;pendante est fonctionnellement distincte de celle qui emploie FAR1.

Far3 et cinq prot&eacute;ines qui interagissent pr&eacute;viennent la reprise pr&eacute;matur&eacute;e de l&#39;arrestation de ph&eacute;romone dans la levure Saccharomyces cerevisiae.

Far3 und f&#xFC;nf interagierende Proteine &#x200B;&#x200B;verhindern eine fr&#xFC;hzeitige Erholung von Pheromon-Arrest in der B&#xE4;ckerhefe Saccharomyces cerevisiae.

Nel lievito gemmante, diffusibile feromoni accoppiamento avviano una via di segnalazione che culmina in diverse risposte, tra cui arresto del ciclo cellulare. Solo una manciata di geni necessari per l&#39;interfaccia tra il feromone risposta e il ciclo cellulare sono stati identificati, tra i quali FAR1 e FAR3; di questi, solo FAR1 &egrave; stato estesamente caratterizzato. Nel tentativo di conoscere il meccanismo con cui agisce Far3, abbiamo utilizzato il metodo del due-ibrido per identificare le proteine interagenti. Abbiamo individuato cinque precedentemente atipici open reading frames, soprannominato FAR7, FAR8, FAR9, FAR10 e FAR11, che causano un difetto di arresto far3-come feromone quando perturbato. Utilizzando due ibridi e coimmunoprecipitation analisi, abbiamo trovato che sei lontano tutte le proteine interagiscono con a vicenda. Inoltre, esperimenti di velocit&agrave; sedimentazione suggeriscono che Far3 e Far7 di Far11 formano un complesso. Il fenotipo di un mutante sestupla far3far7-far11 &egrave; non pi&ugrave; grave di qualsiasi singolo mutante. Cos&igrave;, FAR3 e FAR7 a FAR11 tutti partecipare la stessa via che conduce all&#39;arresto G1. Questi mutanti inizialmente arrestano in risposta ai feromoni ma riprendere in erba dopo 10 h. In queste condizioni, selvaggio-tipo celle non riescono a riprendere in erba anche dopo diversi giorni, considerando che le cellule mutanti far1 riprendere in erba entro 1 h. Possiamo concludere che la via di arresto FAR3-dipendente &egrave; funzionalmente distinta da quello che impiega FAR1.

Far3 e cinque proteine interagenti prevenire precoce recupero dall&#39;arresto di feromone nel lievito gemmante Saccharomyces cerevisiae.

&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x62E1;&#x6563;&#x6027;&#x4EA4;&#x914D;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x505C;&#x6B62;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x7D76;&#x9802;&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3093;&#x306E;&#x4E00;&#x63E1;&#x308A;&#x306E;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9593;&#x3067; FAR1 &#x3068; FAR3;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x306E;&#x307F; FAR1 &#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Far3 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x884C;&#x70BA;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;far3 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x902E;&#x6355;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059; FAR8&#x3001;FAR9&#x3001;FAR10&#x3001;FAR7&#x3001;FAR11 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; 5 &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;Coimmunoprecipitation &#x89E3;&#x6790; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x6975;&#x6771;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x901F;&#x5EA6;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13; Far3 &#x3068; Far7 Far11 &#x306B;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D9;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A8;&#x30A4;&#x30C8; far3far7 far11 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;FAR3 &#x3068; FAR7 FAR11 &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306B; G1 &#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x5F53;&#x521D;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x902E;&#x6355;&#x304C;&#x51FA;&#x82BD;&#x5F8C; 10 h &#x3092;&#x518D;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5909;&#x7570;&#x7D30;&#x80DE; far1 1 h &#x4EE5;&#x5185;&#x65B0;&#x9032;&#x518D;&#x958B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x65B0;&#x9032;&#x306E;&#x6570;&#x65E5;&#x5F8C;&#x306B;&#x3082;&#x518D;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; FAR3 &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x902E;&#x6355;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x3089; FAR1 &#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Far3 &#x3068; 5 &#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30F3;&#x902E;&#x6355;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3002;

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; diffusible &#xC9DD;&#xC9D3;&#xAE30; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xC815; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC791;. &#xADF8;&#xB4E4; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xC18C;&#xC218;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xBC18;&#xC751;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD655;&#xC778; &#xD55C; FAR1 &#xBC0F; FAR3; &#xC774;&#xB4E4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0; far1&#xC740; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. Far3 &#xC791;&#xB3D9; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD559;&#xC2B5;&#xC744; &#xC704;&#xD574;, &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xB450; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 5 &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;, FAR7, FAR8, FAR9, FAR10, &#xBC0F; FAR11, &#xB354;&#xBE59; far3 &#xAC19;&#xC740; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xACB0;&#xD568; &#xC911;&#xB2E8; &#xB420; &#xB54C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2 &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC0F; coimmunoprecipitation &#xBD84;&#xC11D;, &#xBAA8;&#xB4E0; 6 &#xAC1C; &#xD30C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC11C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC18D;&#xB3C4; &#xCE68; &#xAC15; &#xC2E4;&#xD5D8; Far3 &#xBC0F; Far7 Far11 &#xD615;&#xC131; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC139;&#xD130; far3far7 far11 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, FAR3 &#xBC0F; FAR7 FAR11 &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAC8C; G1 &#xB9C8;&#xBE44;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC19;&#xC740; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCC98;&#xC74C; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; 10 h &#xD6C4; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xC7AC;&#xAC1C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140; far1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xC9C4; 1 &#xC2DC;&#xAC04; &#xC548;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xBA87; &#xC77C; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC2DC;&#xC791; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; FAR3 &#xC885;&#xC18D; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xD1B5;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; far1&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACB0;&#xB860; &#xC9C0;&#xC5C8;&#xB2E4;.

Far3 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD398;&#xB85C;&#xBAAC; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xAE30; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En levadura de florecimiento, feromonas de apareamiento difusibles inician una v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n que culmina en varias respuestas, incluyendo la detenci&oacute;n del ciclo celular. S&oacute;lo un pu&ntilde;ado de genes necesarios para la interfaz entre la respuesta de feromona y el ciclo celular han sido identificados, entre ellos FAR1 y FAR3; de &eacute;stos, s&oacute;lo FAR1 se ha caracterizado extensivamente. En un esfuerzo por conocer el mecanismo por el cual act&uacute;a Far3, se us&oacute; el m&eacute;todo de dos h&iacute;bridos para identificar prote&iacute;nas interactuantes. Se identificaron cinco marcos de lectura abierta previamente desacostumbrada, apodados FAR7, FAR8, FAR9, FAR10 y FAR11, que causan un defecto de la detenci&oacute;n de la feromona de far3-como cuando. Usando dos h&iacute;bridos y coimmunoprecipitation an&aacute;lisis, encontramos que todas las prote&iacute;nas del lejano seis interactuar&aacute;n entre s&iacute;. Por otra parte, velocidad sedimentaci&oacute;n experimentos sugieren que Far3 y Far7 a Far11 forman un complejo. El fenotipo de un mutante s&eacute;xtuple far3far7-far11 es no m&aacute;s severo que cualquier mutante solo. As&iacute;, FAR3 y FAR7 a todos FAR11 participaron en la misma v&iacute;a que conducen a la detenci&oacute;n de G1. Estos mutantes inicialmente arrestan en respuesta a feromonas pero reanudar la brotaci&oacute;n despu&eacute;s de 10 h. En estas condiciones, las c&eacute;lulas wild-type no retomar budding incluso despu&eacute;s de varios d&iacute;as, mientras que las c&eacute;lulas mutantes far1 reanudar florecimiento dentro de 1 h. Concluimos que la v&iacute;a de la detenci&oacute;n de FAR3-dependiente es funcionalmente distinta del que emplea FAR1.

Far3 y cinco prote&iacute;nas interactuantes previenen recuperaci&oacute;n prematura del arresto de feromona en la levadura Saccharomyces cerevisiae del florecimiento.

&#x5728;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;Cla4 &#x548C; Ste20&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A; p21 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;Ste20 &#x6216; Cla4 &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5206;&#x522B;&#x8D4B;&#x4E88;&#x4E0D;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22; Cla4&#x3001; &#x6211;&#x4EEC;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EBA;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x66FE;&#x662F; cla4 &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x5E94;&#x53D8;&#x7684;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x5B9A;&#x4E49; &gt; 60 &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;Ste20 &#x548C; Cla4 &#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x9000;&#x51FA;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA; PHO85&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x4E0E; CLA4 &#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x663E;&#x793A; Pcl1 &#x548C; Pcl2 &#x7684; Pho85 &#x8026;&#x5408; G(1) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6B64; Pho85 &#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C;&#x4E0E; Pcl1 &#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A; Pcl1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#xFF1A; Ncp1&#x3001; Hms1&#x3001; &#x548C;&#x65B0;&#x578B; ATPase &#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A; Epa1&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E; Pcl1 GST &#x62C9;&#x4E0B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x548C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E13;&#x95E8;&#x914D;&#x5408;&#x7269; Pcl1.Pho85 &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;NCP1&#x3001; HMS1 &#x548C; EPA1 &#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x4E0E; CLA4 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x50CF; Cla4&#x3001; Hms1&#x3001; Ncp1 &#x548C; Pho85 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x5F71;&#x54CD;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x9000;&#x51FA;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF0C;&#x4ECE; Cdc14&#xFF0C;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#xFF0C;&#x63A5;&#x540E;&#x9762;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x682A;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x590D;&#x6742;&#x7684; G(1) Pcl1.Pho85 &#x8C03;&#x8282;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x9000;&#x51FA;&#x673A;&#x68B0;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Pcl1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0; Cla4 &#x4E0E;&#x4E4B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x660E;&#x9000;&#x51FA;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x548C; G1 &#x8FDB;&#x5C55;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x3002;

In budding yeast, Cla4 and Ste20, two p21-activated kinases, contribute to numerous morphogenetic processes. Loss of Ste20 or Cla4 individually confers distinct phenotypes, implying that they regulate different processes. However, loss of both proteins is lethal, suggesting some functional overlap. To explore the role(s) of Cla4, we and others have sought mutations that are lethal in a cla4 Delta strain. These mutations define >60 genes. Recently, both Ste20 and Cla4 have been implicated in mitotic exit. Here, we identify a genetic interaction between PHO85, which encodes a cyclin-dependent kinase, and CLA4. We further show that the Pho85-coupled G(1) cyclins Pcl1 and Pcl2 contribute to this Pho85 role. We performed a two-hybrid screen with Pcl1. Three Pcl1-interacting proteins were identified: Ncp1, Hms1, and a novel ATPase dubbed Epa1. Each of these proteins interacts with Pcl1 in GST pull-down experiments and is specifically phosphorylated by Pcl1.Pho85 complexes. NCP1, HMS1, and EPA1 also genetically interact with CLA4. Like Cla4, the proteins Hms1, Ncp1, and Pho85 appear to affect mitotic exit, a conclusion that follows from the mislocalization of Cdc14, a key mitotic regulator, in strains lacking these proteins. We propose a model in which the G(1) Pcl1.Pho85 complex regulates mitotic exit machinery.

The identification of Pcl1-interacting proteins that genetically interact with Cla4 may indicate a link between G1 progression and mitotic exit.

Levure de bi&egrave;re, Cla4 et Ste20, deux kinases activ&eacute;es p21, contribuent &agrave; nombreux processus morphog&eacute;n&eacute;tiques. Perte de Ste20 ou Cla4 conf&egrave;re individuellement des ph&eacute;notypes distincts, ce qui implique qu&#39;ils r&eacute;gulent les processus diff&eacute;rents. Toutefois, la perte des deux prot&eacute;ines est l&eacute;tale, sugg&eacute;rant un chevauchement fonctionnel. Pour explorer les ou les r&ocirc;les de Cla4, nous et d&#39;autres ont cherch&eacute; des mutations l&eacute;tales chez une souche de Delta cla4. D&eacute;finissent ces mutations &amp;gt; 60 g&egrave;nes. R&eacute;cemment, Ste20 et Cla4 ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;es dans la sortie mitotique. Ici, nous identifions une interaction g&eacute;n&eacute;tique entre PHO85, qui code une kinase cycline-d&eacute;pendante et CLA4. Nous montrons que les cyclines de couplage Pho85 g (1) PGE1 et Pcl2 contribuent &agrave; ce r&ocirc;le de Pho85. Nous avons r&eacute;alis&eacute; un &eacute;cran de deux-hybride de PGE1. Trois prot&eacute;ines interagissant avec la PGE1 ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es : PCN1 Hms1 et une ATPase roman surnomm&eacute; Epa1. Chacune de ces prot&eacute;ines interagit avec la PGE1 dans les exp&eacute;riences de pull-down de GST et est sp&eacute;cifiquement phosphoryl&eacute;e par Pcl1.Pho85 complexes. PCN1 HMS1 et EPA1 aussi g&eacute;n&eacute;tiquement interagissent avec CLA4. Comme Cla4, les prot&eacute;ines Hms1, PCN1 et Pho85 semblent affecter la sortie mitotique, une conclusion qui d&eacute;coule de la niveau de Cdc14, un r&eacute;gulateur cl&eacute; mitotique, chez les souches sans ces prot&eacute;ines. Nous proposons un mod&egrave;le dont le complexe de Pcl1.Pho85 g (1) r&eacute;git la machinerie mitotique de sortie.

L&#39;identification des prot&eacute;ines interagissant avec la PGE1 g&eacute;n&eacute;tiquement interagissant avec Cla4 peut indiquer un lien entre le G1 progression mitotique sortie.

Die Identifizierung der PCL1-interagierende Proteine, die genetisch interagieren mit Cla4 kann darauf hindeuten, eine Verbindung zwischen G1 und mitotischen Progression Ausfahrt.

Nel lievito gemmante, Cla4 e Ste20, due chinasi p21-attivato, contribuiscono a numerosi processi morfogenetici. Perdita di Ste20 o Cla4 conferisce individualmente fenotipi distinti, implicando che regolano i processi differenti. Tuttavia, la perdita di entrambe le proteine &egrave; letale, suggerendo qualche sovrapposizione funzionale. Per esplorare i ruoli di Cla4, noi e gli altri hanno cercato le mutazioni che sono letali in un ceppo di Delta cla4. Queste mutazioni definiscono &amp;gt; 60 geni. Recentemente, sia Ste20 e Cla4 sono stati implicati in uscita mitotica. Qui, identifichiamo un&#39;interazione genetica tra PHO85, che codifica una chinasi ciclina-dipendente e CLA4. Ulteriormente, ci mostra che le cicline g (1) accoppiato Pho85 Pcl1 e Pcl2 contribuiscono a questo ruolo di Pho85. Abbiamo eseguito un schermo due-ibrido con Pcl1. Sono state identificate tre proteine interagenti Pcl1: Ncp1, Hms1 e un romanzo ATPasi soprannominato Epa1. Ognuna di queste proteine interagisce con Pcl1 in esperimenti di pull-down di GST e specificamente &egrave; fosforilata da complessi Pcl1.Pho85. NCP1, HMS1 ed EPA1 anche geneticamente interagire con CLA4. Come Cla4, le proteine Hms1, Ncp1 e Pho85 sembrano influenzare uscita mitotica, una conclusione che segue da mislocalization di Cdc14, un regolatore chiave mitotico, in ceppi privo di queste proteine. Vi proponiamo un modello in cui la Pcl1.Pho85 g (1) complesso regola uscita mitotica macchinari.

L&#39;identificazione di proteine interagenti Pcl1 che geneticamente interagire con Cla4 possa indicare un collegamento tra progressione G1 e mitotica uscire.

&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; Cla4 &#x3068; Ste20&#x3001;2 &#x3064;&#x306E; p21-&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x5730;&#x5F62;&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ste20 &#x307E;&#x305F;&#x306F; Cla4 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x5225;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x4ED8;&#x4E0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x306B;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;Cla4&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; cla4 &#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3067;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6C42;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x76EE; 60 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;Ste20 &#x3068; Cla4 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;PHO85 &#x3068; CLA4 &#x9593;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Pcl1 &#x3068; Pcl2 &#x306E; Pho85 &#x7D50;&#x5408; G(1) &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x3053;&#x306E; Pho85 &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3; Pcl1 &#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;3 Pcl1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF1A; Ncp1&#x3001;Hms1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5C0F;&#x8AAC; ATPase Epa1 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; Pcl1 &#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B; GST &#x30D7;&#x30EB;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B; Pcl1.Pho85 &#x932F;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;NCP1&#x3001;HMS1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; EPA1 CLA4 &#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3082;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3002;Cla4&#x3001;Hms1&#x3001;Ncp1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Pho85 &#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D42;&#x4E86;&#x3001;Cdc14&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30FC;&#x30C9;&#x304B;&#x3089;&#x6B21;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;G(1) Pcl1.Pho85 &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x7D42;&#x4E86;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x907A;&#x4F1D;&#x7684; Cla4 &#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71; Pcl1 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;G1 &#x306E;&#x524D;&#x9032;&#x306E;&#x9593;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x7D42;&#x4E86;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8;, Cla4 &#xBC0F; Ste20, &#xB450; p21 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; kinases &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. Ste20 &#xB610;&#xB294; cla4&#xB97C; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC870;&#xC808;&#xC744; &#xC554;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30; &#xC218; &#xC5EC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC740; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC911;&#xBCF5; &#xC81C;&#xC548; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD0D0;&#xD5D8; Cla4, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xB78C;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; cla4 &#xB378;&#xD0C0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBAA8;&#xC0C9;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC774; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC815;&#xC758; &amp;gt; 60 &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xCD5C;&#xADFC;, Ste20 &#xBC0F; Cla4 mitotic &#xCD9C;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; &#xD0A4;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; pho85&#xC640; CLA4 &#xC0AC;&#xC774; &#xC720;&#xC804; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; Pho85 &#xACB0;&#xD569; G(1) cyclins Pcl1 &#xBC0F; pcl2&#xC774; Pho85 &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; pcl1&#xC640; 2 &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC218;&#xD589;. 3 Pcl1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;: Ncp1, Hms1, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC18C;&#xC124; ATPase &#xBD88;&#xB9AC;&#xB294; Epa1. &#xAC01;&#xAC01;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; GST &#xD480; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; pcl1&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; Pcl1.Pho85 &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; phosphorylated &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. NCP1, HMS1, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; EPA1 &#xB610;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; cla4&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cla4, Hms1, Ncp1, &#xBC0F; Pho85 mitotic &#xCD9C;&#xAD6C;, Cdc14, &#xD0A4; mitotic &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, mislocalization&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC624;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC19;&#xC740; &#xC885;&#xC790;&#xAC00;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD80;&#xC871;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; G(1) Pcl1.Pho85 mitotic &#xCD9C;&#xAD6C; &#xAE30;&#xACC4;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cla4 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Pcl1 &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB9C1;&#xD06C; G1 &#xC9C4;&#xD589; &#xAC04;&#xC758; mitotic &#xC885;&#xB8CC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En levadura de florecimiento, Cla4 y Ste20, dos quinasas activadas p21, contribuyen a numerosos procesos morfogen&eacute;ticos. P&eacute;rdida de Ste20 o Cla4 individualmente confiere fenotipos distintos, lo que implica que regulan diferentes procesos. Sin embargo, la p&eacute;rdida de ambas prote&iacute;nas es letal, lo que sugiere cierta superposici&oacute;n funcional. Para explorar las funciones de Cla4, nosotros y otros han buscado mutaciones que son letales en una cepa de Delta cla4. Estas mutaciones definen &gt; 60 genes. Recientemente, tanto Ste20 como Cla4 han sido implicados en la salida mit&oacute;tica. Aqu&iacute;, identificamos una interacci&oacute;n gen&eacute;tica entre PHO85, que codifica una quinasa dependiente de ciclina y CLA4. Adem&aacute;s demostramos que el acoplamiento Pho85 g (1) las ciclinas Pcl1 y Pcl2 contribuyan a este papel de Pho85. Realizamos una pantalla de dos h&iacute;bridos con Pcl1. Se identificaron tres prote&iacute;nas de interacci&oacute;n Pcl1: Ncp1, Hms1 y una novela ATPasa denominado Epa1. Cada una de estas prote&iacute;nas interact&uacute;a con Pcl1 en experimentos de pull-down de GST y espec&iacute;ficamente es fosforilada por complejos Pcl1.Pho85. NCP1, HMS1 y EPA1 tambi&eacute;n gen&eacute;ticamente interactuan con CLA4. Como Cla4, las prote&iacute;nas Hms1, Ncp1 y Pho85 parecen afectar la salida mit&oacute;tica, una conclusi&oacute;n que se desprende el mislocalization de Cdc14, un regulador clave de la mitosis, en cepas que carecen estas prote&iacute;nas. Se propone un modelo en el que el complejo de Pcl1.Pho85 g (1) regula la salida mit&oacute;tica maquinaria.

La identificaci&oacute;n de prote&iacute;nas Pcl1-interacci&oacute;n que interaccionan gen&eacute;ticamente Cla4 puede indicar un v&iacute;nculo entre la progresi&oacute;n de G1 y mit&oacute;tico salir.

&#x8FB9;&#x754C;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x6216;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x5F62;&#x6210;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x540E;&#x8111;&#xFF0C;&#x8FB9;&#x754C;&#x5206;&#x9694;&#x5206;&#x5B50;&#x548C; neuroanatomically &#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; rhombomeres&#x3002;&#x79FB;&#x690D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7531;&#x672C;&#x5730;&#x6392;&#x5E8F;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x8282;&#x6BB5;&#x6027;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6B64;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x6392;&#x65A5;&#x8868;&#x793A;&#x5F17;&#x53D7;&#x4F53;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x3001; EphA4&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x793A;&#x5176; ephrinB &#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6A21;&#x578B; rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x6392;&#x65A5;&#x5F17; ephrin &#x4FE1;&#x53F7;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x6587;&#x5B66;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x5C1A;&#x672A;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D88;&#x9664; EphA4 &#x548C; ephrinB2a &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E0E;&#x53CD;&#x4E49; morpholinos (MO) &#x548C;&#x67E5;&#x627E; rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5728; EphA4MO &#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5F17; ephrin &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF; EphA4MO &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; EphA4 &#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F;&#x4ECE;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x7531;&#x5F17; ephrin &#x65A5;&#x529B;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76F8;&#x53CD;&#x5EFA;&#x8BAE; EphA4 &#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#x7684; rhombomeres &#x5185;&#x3002;&#x9274;&#x522B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; rhombomeres &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x77E5;&#x540D; EphA4 &#x4F9D;&#x8D56;&#x65A5;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E0E;&#x57FA;&#x7840; rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210; EphA4 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7C98;&#x9644;&#x5185; rhombomeres &#x6B64;&#x5904;&#x6240;&#x8FF0;&#x9A71;&#x52A8;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x5E8F;&#x5E76;&#x884C;&#x3002;

EphA4 &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x548C; rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;

The formation of boundaries between or within tissues is a fundamental aspect of animal development. In the developing vertebrate hindbrain, boundaries separate molecularly and neuroanatomically distinct segments called rhombomeres. Transplantation studies have suggested that rhombomere boundaries form by the local sorting out of cells with different segmental identities. This sorting-out process has been shown to involve repulsive interactions between cells expressing an Eph receptor tyrosine kinase, EphA4, and cells expressing its ephrinB ligands. Although a model for rhombomere-boundary formation based on repulsive Eph-ephrin signaling is well established in the literature, the predictions of this model have not been tested in loss-of-function experiments. Here, we eliminate EphA4 and ephrinB2a proteins in zebrafish with antisense morpholinos (MO) and find that rhombomere boundaries are disrupted in EphA4MO embryos, consistent with a requirement for Eph-ephrin signaling in boundary formation. However, in mosaic embryos, we observe that EphA4MO cells and EphA4-expressing cells sort from one another, an observation that is not predicted by the Eph-ephrin repulsion model but instead suggests that EphA4 promotes cell adhesion within the rhombomeres in which it is expressed. Differential cell adhesion is known to be an effective mechanism for cell sorting. We therefore propose that the well-known EphA4-dependent repulsion between rhombomeres operates in parallel with the EphA4-dependent adhesion within rhombomeres described here to drive the cell sorting that underlies rhombomere-boundary formation.

EphA4 is required for cell adhesion and rhombomere-boundary formation in the zebrafish.

La formation des fronti&#xE8;res entre ou dans les tissus est un aspect fondamental du d&#xE9;veloppement animal. Dans le cerveau post&#xE9;rieur des vert&#xE9;br&#xE9;s en d&#xE9;veloppement, les limites s&#xE9;parer mol&#xE9;culaire et des segments distincts neuroanatomically appel&#xE9; rhombom&#xE8;res. Des &#xE9;tudes de transplantation ont sugg&#xE9;r&#xE9; que les fronti&#xE8;res rhombom&#xE8;re former par le tri &#xE0; la source &#xE0; partir de cellules avec diff&#xE9;rentes identit&#xE9;s segmentaires. Ce processus de tri-out a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; impliquer des interactions r&#xE9;pulsives entre les cellules exprimant un r&#xE9;cepteur tyrosine kinase Eph, les EphA4 et les cellules exprimant ses ligands ephrinB. M&#xEA;me si un mod&#xE8;le pour rhombom&#xE8;re-fronti&#xE8;re de formation bas&#xE9; sur r&#xE9;pulsive Ep-&#xE9;phrine signalisation est bien &#xE9;tabli dans la litt&#xE9;rature, les pr&#xE9;dictions de ce mod&#xE8;le n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;s dans la perte de fonction des exp&#xE9;riences. Ici, nous &#xE9;liminons EphA4 et ephrinB2a prot&#xE9;ines chez le poisson z&#xE8;bre avec antisens morpholinos (MO) et de trouver que les fronti&#xE8;res sont perturb&#xE9;s dans rhombom&#xE8;re embryons EphA4MO, compatible avec une exigence pour Ep-&#xE9;phrine de signalisation dans la formation de la limite. Toutefois, dans les embryons de la mosa&#xEF;que, nous observons que les cellules EphA4MO et EphA4 exprimant trier les cellules les unes des autres, une observation qui n&#x26;#39;est pas pr&#xE9;dite par le mod&#xE8;le de r&#xE9;pulsion Ep-&#xE9;phrine, mais sugg&#xE8;re plut&#xF4;t que EphA4 favorise l&#x26;#39;adh&#xE9;rence des cellules &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur des rhombom&#xE8;res dans laquelle elle est exprim&#xE9;e . Adh&#xE9;sion cellulaire diff&#xE9;rentiel est connu pour &#xEA;tre un m&#xE9;canisme efficace pour le tri cellulaire. Nous proposons donc que le bien-connu EphA4-d&#xE9;pendante r&#xE9;pulsion entre rhombom&#xE8;res fonctionne en parall&#xE8;le avec l&#x26;#39;adh&#xE9;sion EphA4-charge au rhombom&#xE8;res d&#xE9;crites ici pour conduire le tri cellulaire qui sous-tend rhombom&#xE8;re-limite la formation.

EphA4 est requis pour l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire et rhombom&#xE8;re-fronti&#xE8;re Formation chez le poisson z&#xE8;bre

EphA4 f&#xFC;r Zelladh&#xE4;sion und-Rhombomer Abgrenzungsst&#xF6;rungen im Zebrafisch erforderlich.

La formazione dei confini tra o all&#39;interno dei tessuti &egrave; un aspetto fondamentale dello sviluppo animale. Nel hindbrain vertebrati in via di sviluppo, i confini separano molecolarmente e neuroanatomically distinti segmenti denominati rhombomeres. Trapianto studi hanno suggerito che formano i confini rhombomere tramite l&#39;ordinamento locale dalle cellule con diverse identit&agrave; segmentale. Questo processo di ordinamento-out &egrave; stato dimostrato a coinvolgere le interazioni repulsive tra le cellule che esprimono una recettore tirosina chinasi EF, EphA4 e le cellule che esprimono i suoi ligandi ephrinB. Anche se un modello per la formazione di confine rhombomere basato su ripugnante EF-efrina segnalazione &egrave; ben consolidata nella letteratura, le previsioni di questo modello non sono state testate in esperimenti di perdita di funzione. Qui, si eliminano le proteine EphA4 ed ephrinB2a in zebrafish con morpholinos antisenso (MO) e trova che i confini rhombomere sono interrotti in embrioni EphA4MO, coerenti con l&#39;esigenza per EF-efrina segnalazione nella formazione di contorno. Tuttavia, in embrioni di mosaico, osserviamo che EphA4MO e cellule che esprimono EphA4 ordinare uno da altro, un&#39;osservazione che non &egrave; previsto il modello di repulsione EF-efrina ma invece suggerisce che EphA4 favorisce l&#39;adesione delle cellule all&#39;interno di rhombomeres in cui &egrave; espressa. Adesione delle cellule differenziale &egrave; noto per essere un meccanismo efficace per l&#39;ordinamento delle cellule. Proponiamo pertanto che la ben nota repulsione EphA4-dipendente tra rhombomeres opera in parallelo con l&#39;adesione di EphA4-dipendente entro rhombomeres descritto qui per guidare l&#39;ordinamento delle cellule che sottende la formazione rhombomere-confine.

EphA4 &egrave; richiesto per la formazione rhombomere-limite e di adesione delle cellule in the zebrafish.

&#x7D44;&#x7E54;&#x9593;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5883;&#x754C;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x958B;&#x767A;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5F8C;&#x8133;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5883;&#x754C;&#x304C;rhombomeres&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;neuroanatomically&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x7BC0;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C40;&#x6240;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#xB7;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#xB7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;ephrinB&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;EphA4&#x306E;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x53CD;&#x767A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x53CD;&#x767A;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;-&#x30A8;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6587;&#x732E;&#x306B;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;morpholinos&#xFF08;MO&#xFF09;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;EphA4&#x306E;&#x3068;ephrinB2a&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x304C;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;-&#x30A8;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5883;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5408;&#x56F3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;EphA4MO&#x80DA;&#x3067;&#x7834;&#x58CA;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;EphA4MO&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;EphA4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;-&#x30A8;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x53CD;&#x767A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;EphA4&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;rhombomeres&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3002;&#x5DEE;&#x52D5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9078;&#x5225;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;rhombomeres&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;EphA4&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x53CD;&#x767A;&#x304C;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;rhombomeres&#x5185;&#x3067;EphA4&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x4E26;&#x5217;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

EphA4&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;Rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;

&#xACBD;&#xACC4; &#xAC04; &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xCE21;&#xBA74; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCC99;&#xCD94; hindbrain &#xACBD;&#xACC4; rhombomeres &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xB85C; neuroanatomically &#xBCC4;&#xAC1C; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC2DD; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; segmental id&#xC640; &#xC140;&#xC758; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC815;&#xB82C; &#xD558; &#xC5EC; rhombomere &#xACBD;&#xACC4; &#xC591;&#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC815;&#xB82C; &#xC544;&#xC6C3; &#xACFC;&#xC815; &#xD504; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C;, EphA4, &#xBC0F; ephrinB ligands&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xBC18;&#xBC1C; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Rhombomere &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xBB38;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD; &#xBD88;&#xCF8C; &#xD504; ephrin &#xC2E0;&#xD638;,&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC608;&#xCE21; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; zebrafish &#xC13C;&#xC2A4; morpholinos (&#xBAA8;)&#xC640; rhombomere &#xACBD;&#xACC4; EphA4MO &#xBC30;&#xC544; &#xD504; ephrin &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xAD6C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC911;&#xB2E8; &#xB418; &#xCC3E;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; Epha4&#xC640; ephrinB2a &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC81C;&#xAC70;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC11C;&#xB85C;, &#xD504; ephrin &#xBC18;&#xBC1C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB300;&#xC2E0; EphA4 &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; rhombomeres &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xC99D;&#xC9C4; &#xC81C;&#xC548; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0;&#xC11C; EphA4MO &#xC140;&#xACFC; &#xC140; Epha4&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xC815;&#xB82C; &#xAD00;&#xCC30;. &#xCC28;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB958;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; rhombomeres &#xC0AC;&#xC774; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; EphA4 &#xC885;&#xC18D; &#xBC18;&#xBC1C; rhombomere &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAE30;&#xBC18;&#xC774; &#xB418;&#xB294; rhombomeres &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB41C; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB0B4;&#xC758; EphA4 &#xC885;&#xC18D; &#xC811;&#xCC29;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC6B4;&#xC601; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

Epha4&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; rhombomere &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; zebrafish&#xC758; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La formaci&#xF3;n de los l&#xED;mites entre o dentro de los tejidos es un aspecto fundamental del desarrollo animal. En el cerebro posterior desarrollo de los vertebrados, los l&#xED;mites de separar molecularmente y segmentos distintos neuroanat&#xF3;micamente llama rhombomeres. Trasplante de estudios han sugerido que los l&#xED;mites rhombomere se forman por la clasificaci&#xF3;n de locales fuera de las c&#xE9;lulas con diferentes identidades segmentarias. Este proceso de clasificaci&#xF3;n de salida se ha demostrado que implican interacciones repulsivas entre las c&#xE9;lulas que expresan un receptor de la tirosina quinasa, Ef EphA4, y las c&#xE9;lulas que expresan sus ligandos ephrinB. A pesar de un modelo para la formaci&#xF3;n de rhombomere-l&#xED;mite basado en repulsiva Ef-ephrin se&#xF1;alizaci&#xF3;n est&#xE1; bien establecida en la literatura, las predicciones de este modelo no han sido probadas en experimentos de la p&#xE9;rdida de funci&#xF3;n. En este sentido, eliminar la EphA4 ephrinB2a y prote&#xED;nas en el pez cebra con el antisentido morfolinos (MO) y encontrar que los l&#xED;mites rhombomere se interrumpen en los embriones EphA4MO, en consonancia con la exigencia de Ef-ephrin de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en la formaci&#xF3;n de los l&#xED;mites. Sin embargo, en embriones de mosaico, se observa que EphA4MO c&#xE9;lulas y EphA4-expresi&#xF3;n de ordenar las c&#xE9;lulas entre s&#xED;, una observaci&#xF3;n que no est&#xE1; predicha por el modelo de repulsi&#xF3;n Ef-ephrin sino que sugiere que EphA4 promueve la adhesi&#xF3;n celular dentro de las rhombomeres en las que se expresa . Adhesi&#xF3;n diferencial celda es conocido por ser un mecanismo efectivo para la clasificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas. Por lo tanto, proponemos que el conocido EphA4 dependiente de la repulsi&#xF3;n entre rhombomeres opera en paralelo con la adhesi&#xF3;n EphA4-dependiente en rhombomeres descritos aqu&#xED; para impulsar la clasificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas que subyace rhombomere-l&#xED;mite de la formaci&#xF3;n.

EphA4 es requerida para la adhesi&#xF3;n celular y la formaci&#xF3;n rhombomere-frontera en el pez cebra

&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x540E;&#x8111;&#x88AB;&#x6682;&#x6001;&#x5206;&#x6210; 7 &#x4E0D;&#x540C; rhombomeres (r)&#x3002;&#x540E;&#x8111;&#x5206;&#x5272;&#x4E3A; neurulation&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5206;&#x53D1;&#x53CC;&#x8FB9;&#x4E2D;&#x5F62;&#x6210;&#x795E;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F81;&#x8DE8;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x53F8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x8FDB;&#x884C;&#x3002;&#x5F17;&#x53D7;&#x4F53;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176; EphA4 &#x548C;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A; Ephrin &#xFF08;&#x503A;&#x5238;&#xFF09; &#x914D;&#x4F53; EfnB2a&#xFF0C;&#x8865;&#x5145;&#x90E8;&#x5206;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x540E;&#x8111;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x7684;&#x662F; rhombomere &#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x663E;&#x793A; EphA4 &#x4FC3;&#x8FDB; r3 &#x548C; r5 &#x5185;, &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4F18;&#x60E0;&#x7C98;&#x9644;&#x5728; rhombomeres &#x5185;&#x7684;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8FB9;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; EfnB2a &#x540C;&#x6837;&#x9700;&#x8981;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x7684; r4 &#x548C; EphA4 &#x548C; EfnB2a &#x89C4;&#x8303;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5730;&#x5728;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5404;&#x81EA;&#x7684; rhombomeres &#x5185;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x5728;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x8DE8;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x7684;&#x540E;&#x8111;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9F99;&#x9AA8;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B; EfnB2a &#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6392;&#x5E8F;&#x548C;&#x6270;&#x4E71;&#x4E86;&#x540E;&#x8111;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x5982;&#x679C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E4B;&#x65F6;&#x6216;&#x4E4B;&#x524D;&#x795E;&#x7ECF;&#x9F99;&#x9AA8;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5176;&#x4E2D;&#x5F17;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x5916;&#x6C47;&#x57FA;&#x91D1;&#x503A;&#x5238;&#x7684; rhombomeres &#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EB2;&#x548C;&#x6027;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7EF4;&#x62A4;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x5F15;&#x8D77;&#x6DF7;&#x4E71;&#x7684;&#x786C;&#x9AA8; neurulation rhombomere &#x7EC4;&#x7EC7;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

EphA4 &#x548C; EfnB2a &#x901A;&#x8FC7;&#x72EC;&#x7ACB;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9F99;&#x9AA8;&#x63D2;&#x5C42;&#x4FDD;&#x6301; rhombomere &#x8FDE;&#x8D2F;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;

During vertebrate development, the hindbrain is transiently segmented into 7 distinct rhombomeres (r). Hindbrain segmentation takes place within the context of the complex morphogenesis required for neurulation, which in zebrafish involves a characteristic cross-midline division that distributes progenitor cells bilaterally in the forming neural tube. The Eph receptor tyrosine kinase EphA4 and the membrane-bound Ephrin (Efn) ligand EfnB2a, which are expressed in complementary segments in the early hindbrain, are required for rhombomere boundary formation. We showed previously that EphA4 promotes cell-cell affinity within r3 and r5, and proposed that preferential adhesion within rhombomeres contributes to boundary formation. Here we show that EfnB2a is similarly required in r4 for normal cell affinity and that EphA4 and EfnB2a regulate cell affinity independently within their respective rhombomeres. Live imaging of cell sorting in mosaic embryos shows that both proteins function during cross-midline cell divisions in the hindbrain neural keel. Consistent with this, mosaic EfnB2a over-expression causes widespread cell sorting and disrupts hindbrain organization, but only if induced at or before neural keel stage. We propose a model in which Eph and Efn-dependent cell affinity within rhombomeres serve to maintain rhombomere organization during the potentially disruptive process of teleost neurulation.

EphA4 and EfnB2a maintain rhombomere coherence by independently regulating intercalation of progenitor cells in the zebrafish neural keel.

Au cours du d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s, le cerveau post&#xE9;rieur est transitoirement segment&#xE9; en 7 rhombom&#xE8;res distinctes (r). La segmentation rhombenc&#xE9;phale a lieu dans le cadre de la morphogen&#xE8;se complexe n&#xE9;cessaire pour neurulation, qui consiste en poisson z&#xE8;bre une caract&#xE9;ristique de division transversale m&#xE9;diane qui distribue les cellules prog&#xE9;nitrices de fa&#xE7;on bilat&#xE9;rale dans le tube de formage neuronal. La kinase Eph r&#xE9;cepteur tyrosine EphA4 et la membrane-bound Ephrin (EFN) ligand EfnB2a, qui sont exprim&#xE9;es dans des segments compl&#xE9;mentaires dans le cerveau post&#xE9;rieur pr&#xE9;coce sont requis pour la formation de la limite rhombom&#xE8;re. Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que EphA4 favorise cellule-cellule d&#x26;#39;affinit&#xE9; au sein de R3 et R5, et a propos&#xE9; que l&#x26;#39;adh&#xE9;sion pr&#xE9;f&#xE9;rentielle au sein de rhombom&#xE8;res contribue &#xE0; la formation de fronti&#xE8;re. Ici, nous montrons que EfnB2a est m&#xEA;me n&#xE9;cessaire dans r4 pour l&#x26;#39;affinit&#xE9; des cellules normales et que EphA4 et EfnB2a r&#xE9;guler l&#x26;#39;affinit&#xE9; des cellules de fa&#xE7;on ind&#xE9;pendante dans leurs rhombom&#xE8;res respectifs. Vivez l&#x26;#39;imagerie de la cellule de tri des embryons mosa&#xEF;que montre que les deux prot&#xE9;ines fonctionnent cours des divisions cellulaires crois&#xE9;e la ligne m&#xE9;diane dans la quille rhombenc&#xE9;phale neurones. Conform&#xE9;ment &#xE0; cela, la mosa&#xEF;que EfnB2a surexpression provoque le tri cellulaire g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;e et perturbe l&#x26;#39;organisation du cerveau post&#xE9;rieur, mais seulement si induite au moment ou avant l&#x26;#39;&#xE9;tape de quille de neurones. Nous proposons un mod&#xE8;le dans lequel l&#x26;#39;affinit&#xE9; cellulaire Eph et Efn-charge au rhombom&#xE8;res servent &#xE0; maintenir l&#x26;#39;organisation rhombom&#xE8;re au cours du processus potentiellement perturbateur de la neurulation t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens.

EphA4 et EfnB2a maintenir la coh&#xE9;rence rhombom&#xE8;re par Ind&#xE9;pendamment de r&#xE9;gulation intercalation de cellules prog&#xE9;nitrices dans la quille Zebrafish Neural

W&auml;hrend der vertebrate Entwicklung ist das Hinterhirn vor&uuml;bergehend in 7 unterschiedlichen Rhombomeres (R) segmentiert. Hinterhirn Segmentierung erfolgt im Rahmen der komplexen Morphogenese f&uuml;r die Neuralplatte, geh&ouml;rt im Zebrafisch eine charakteristische Kreuz-Mittellinie-Division, die Vorl&auml;uferzellen bilateral in der Formung Neuralrohr verteilt. Die Eph-Rezeptor-Tyrosinkinase EphA4 fehlt und membrangebundener Ephrin (Efn) Liganden EfnB2a, die in erg&auml;nzende Bereiche in der fr&uuml;hen Hinterhirn angegeben sind, sind f&uuml;r RH2 Grenze Bildung erforderlich. Wir zeigten bereits, dass EphA4 fehlt f&ouml;rdert die Zell-Zell-Affinit&auml;t innerhalb r3 und r5 und vorgeschlagen, dass bevorrechtigte Haftung innerhalb Rhombomeres zur Grenze Bildung beitr&auml;gt. Hier zeigen wir, dass EfnB2a ebenso in r4 f&uuml;r normale Zellen Affinit&auml;t erforderlich ist und die EphA4 fehlt und EfnB2a Zelle Affinit&auml;t unabh&auml;ngig innerhalb ihrer jeweiligen Rhombomeres regulieren. Live Bildgebung der Zelle Sortieren in Mosaik-Embryonen zeigt, dass beide Proteine w&auml;hrend der Kreuz-Mittellinie Zellteilungen in der neuronalen Hinterhirn-Kiel-Funktion. Folgerichtig Mosaik EfnB2a &Uuml;berexpression f&uuml;hrt dazu, dass weit verbreitete Zellsortierung und st&ouml;rt Hinterhirn Organisation, aber nur, wenn bei oder vor neuronalen Kiel B&uuml;hne induziert. Wir schlagen ein Modell in dem Eph und Efn-abh&auml;ngige Zelle Affinit&auml;t innerhalb Rhombomeres RH2 Organisation w&auml;hrend der potenziell zerst&ouml;rerischen Prozess von teleost Neuralplatte Aufrechterhaltung dienen.

EphA4 fehlt und EfnB2a pflegen RH2 Koh&auml;renz unabh&auml;ngig regulieren Interkalation von Progenitorzellen bei der neuronalen Zebrafisch-Kiel.

Durante lo sviluppo di vertebrati, il hindbrain transitoriamente &egrave; segmentato in 7 distinti rhombomeres (r). Segmentazione hindbrain avviene all&#39;interno del contesto della morfogenesi complessi richiesti per neurulazione, che nello zebrafish comporta una divisione trasversale mediana caratteristica che distribuisce le cellule progenitrici bilateralmente in formatura tubo neurale. EF recettore tirosina chinasi EphA4 e il ligando efrina (Efn) associato a membrana EfnB2a, che sono espressi in segmenti complementari nell&#39;inizio del hindbrain, sono necessari per la formazione di confine rhombomere. Abbiamo dimostrato in precedenza che EphA4 promuove affinit&agrave; cellula-cellula all&#39;interno di r3 e r5 e proposto che preferenziale adesione entro rhombomeres contribuisce alla formazione di confine. Qui vi mostriamo che EfnB2a allo stesso modo &egrave; necessaria nella r4 per affinit&agrave; delle cellule normali e che EphA4 ed EfnB2a regolare affinit&agrave; cellula in modo indipendente all&#39;interno del loro rispettivo rhombomeres. Immagini live della cella Ordinamento negli embrioni di mosaico dimostra che entrambe le proteine funzionano durante le divisioni cellulari Croce-linea mediana nella chiglia neurale hindbrain. Coerentemente con questo, sovraespressione di mosaico EfnB2a provoca diffuso cella Ordinamento e sconvolge l&#39;organizzazione hindbrain, ma solo se indotto a o prima fase neurale chiglia. Vi proponiamo un modello in cui EF e AAPN-dipendente affinit&agrave; delle cellule all&#39;interno rhombomeres servono a mantenere l&#39;organizzazione rhombomere durante il processo potenzialmente dirompente di teleostei neurulazione.

EphA4 ed EfnB2a mantenere coerenza rhombomere regolando indipendentemente intercalazione di cellule progenitrici nella chiglia neurale zebrafish.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x306F;7&#x7570;&#x306A;&#x308B;rhombomeres&#xFF08;R&#xFF09;&#x306B;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x8133;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x5F62;&#x6210;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x306B;&#x4E21;&#x5074;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5206;&#x914D;&#x7279;&#x6027;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x6B63;&#x4E2D;&#x5206;&#x5272;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x795E;&#x7D4C;&#x80DA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;EphA4&#x306E;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5F8C;&#x8133;&#x3067;&#x88DC;&#x5B8C;&#x7684;&#x306A;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;EFN&#xFF09;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;EfnB2a&#x306F;&#x3001;rhombomere&#x5883;&#x754C;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;EphA4&#x306E;&#x306F;R3&#x304A;&#x3088;&#x3073;R5&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x3001;rhombomeres&#x5185;&#x3067;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x63A5;&#x7740;&#x304C;&#x5883;&#x754C;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;EfnB2a&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;R4&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;EphA4&#x306E;&#x3068;EfnB2a&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;rhombomeres&#x5185;&#x3067;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x80DA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9078;&#x5225;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x795E;&#x7D4C;&#x30AD;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x6642;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;EfnB2a&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9078;&#x5225;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x30AD;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x524D;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x307F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;rhombomeres&#x5185;&#x30A8;&#x30DA;&#x30BD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;EFN-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304C;&#x786C;&#x9AA8;&#x9B5A;&#x795E;&#x7D4C;&#x80DA;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x7834;&#x58CA;&#x7684;&#x306A;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;rhombomere&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

EphA4&#x306E;&#x3068;EfnB2a&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x795E;&#x7D4C;Keel&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;Rhombomere&#x30B3;&#x30D2;&#x30FC;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;

&#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xB294; hindbrain&#xC740; transiently 7 &#xAC00;&#xC9C0; rhombomeres (r)&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD560; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hindbrain &#xC138;&#xBD84;&#xD654; zebrafish&#xC758; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xC131; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xC591;&#xC790;&#xB97C; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC131; &#xAC04; &#xC911;&#xAC04; &#xBD80;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; neurulation&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; morphogenesis&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; EphA4 &#xBC0F; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Ephrin (Efn) &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; EfnB2a, &#xCD08;&#xAE30; hindbrain &#xBCF4;&#xC644; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; rhombomere &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; EphA4 r 3&#xC640; r5, &#xC140; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC99D;&#xC9C4; &#xC8FC;&#xBA70; &#xC81C;&#xC548; rhombomeres &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB300; &#xC811;&#xCC29; &#xACBD;&#xACC4; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Efnb2a&#xC744; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; r 4&#xC5D0; &#xC694;&#xAD6C; &#xB418; &#xACE0; EphA4 &#xBC0F; EfnB2a &#xC140; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAC01;&#xAC01; rhombomeres &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC808; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xB82C; &#xC140;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; hindbrain &#xC2E0;&#xACBD; &#xC6A9;&#xACE8;&#xC5D0; &#xAC04; &#xC911;&#xAC04; &#xC140; &#xBD84;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;, &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; EfnB2a over-expression &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xD558;&#xBA74; &#xACE0; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC6A9;&#xACE8; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC774;&#xC804;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB9CC; hindbrain &#xC870;&#xC9C1; &#xBC29;&#xD574;. &#xD504;&#xC640; Efn &#xC885;&#xC18D; rhombomeres &#xB0B4;&#xC758; &#xC140; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; teleost neurulation&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xAD34;&#xC801;&#xC778; &#xACFC;&#xC815; rhombomere &#xC870;&#xC9C1; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

EphA4 &#xBC0F; EfnB2a zebrafish &#xC2E0;&#xACBD; &#xC6A9;&#xACE8;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC724;&#xC744; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; rhombomere &#xC77C;&#xAD00;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Durante el desarrollo de los vertebrados, el cerebro posterior es de forma transitoria segmentado en distintas rhombomeres 7 (R). La segmentaci&#xF3;n del cerebro posterior se lleva a cabo en el contexto de la morfog&#xE9;nesis compleja necesaria para neurulaci&#xF3;n, que en el pez cebra implica una caracter&#xED;stica transversal de la l&#xED;nea media que distribuye la divisi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas progenitoras de forma bilateral en la formaci&#xF3;n del tubo neural. La tirosina quinasa del receptor Eph EphA4 y la membrana Ephrin (EFN) EfnB2a ligando, que se expresan en los segmentos complementarios en el cerebro posterior temprano, son necesarios para la formaci&#xF3;n de los l&#xED;mites rhombomere. Hemos demostrado anteriormente que EphA4 promueve la c&#xE9;lula-c&#xE9;lula afinidad dentro R3 y R5, y propuso que la adhesi&#xF3;n preferencial dentro de rhombomeres contribuye a la formaci&#xF3;n de l&#xED;mites. Aqu&#xED; nos muestran que EfnB2a Se exige tambi&#xE9;n en R4 para la afinidad de las c&#xE9;lulas normales y que EphA4 y EfnB2a regulan la afinidad de c&#xE9;lulas de forma independiente dentro de sus respectivos rhombomeres. Vivo de im&#xE1;genes de la clasificaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas en embriones de mosaico muestra que ambas prote&#xED;nas funcionan durante las divisiones celulares cruzada la l&#xED;nea media en la quilla rombenc&#xE9;falo neural. En consonancia con esto, el mosaico EfnB2a sobre-expresi&#xF3;n causa de c&#xE9;lulas de clasificaci&#xF3;n general y altera la organizaci&#xF3;n posterior del cerebro, pero s&#xF3;lo si se induce en o antes de la etapa de quilla neural. Proponemos un modelo en el que la afinidad Eph y efn dependiente de la c&#xE9;lula dentro de rhombomeres sirven para mantener la organizaci&#xF3;n rhombomere durante el proceso potencialmente perjudiciales de neurulaci&#xF3;n tele&#xF3;steos.

EphA4 y EfnB2a Mantener la coherencia rhombomere por la independencia de regulaci&#xF3;n intercalaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas progenitoras neuronales en la quilla de pez cebra

Hilary A. Kemp

HHMI and Division of Basic Sciences

Fred Hutchinson Cancer Research Center - FHCRC

Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

Hilary A. Kemp

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}HHMI and Division of Basic Sciences

Fred Hutchinson Cancer Research Center - FHCRC

Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

HHMI and Division of Basic Sciences