The use of SC1 (Pluripotin) to Support mESC Self-renewal in the Absence of LIF

Mouse embryonic stem (ES) cells are conventionally cultured with Leukemia Inhibitory Factor (LIF) to maintain self-renewal.1 However, LIF is expensive and ...

Stemgent

&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x6B63;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6CBB;&#x7597;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6027;&#x6076;&#x6027;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x3002;&#x836F;&#x4EE3;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x53CA;&#x6BD2;&#x7406;&#x5B66;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x652F;&#x6301;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5; (LC/MS) &#x9C81;&#x68D2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E86;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x3002;&#x6837;&#x54C1;&#x5236;&#x5907;&#x7684;&#x8131;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x7531;&#x589E;&#x52A0;&#x4E09;&#x5377;&#x4E59;&#x8148;&#x548C;&#x7532;&#x9187;&#x7528;&#x79BB;&#x5FC3;&#x6CD5;&#x9075;&#x5FAA;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5377;&#x3002;&#x6B21;&#x4E0A;&#x6E05;&#x6DB2;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x4F7F;&#x7528;&#x718A;&#x80C6;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5; (HPLC) &#x7CFB;&#x7EDF;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x8D1F;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x8D28;&#x8C31;&#x8BA1;&#x3002;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x548C;&#x5F02;&#x6784;&#x5185;&#x90E8;&#x6807;&#x51C6;&#x679C;&#x9178; Deprotonated &#x5206;&#x5B50;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4F7F;&#x7528;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x76D1;&#x6D4B;&#x5728; m/z 455&#x3002;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x6781;&#x9650;&#x662F; 0.5 pg (1.1 &#x8C03;&#x9891;) &#x6CE8;&#x5165;&#x5217; (50 pg/mL&#xFF0C;10 microL &#x6CE8;&#x5C04;&#x91CF;)&#xFF0C;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x6781;&#x9650;&#x662F; 2 pg (4.4 &#x8C03;&#x9891;&#x3001; 200 pg/mL&#x3001; 10 microL &#x6CE8;&#x5C04;&#x91CF;&#xFF09;&#x3002;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5728;-20 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F3;&#x5C11; 3 &#x5468;&#x3002;&#x5185;&#x5929;&#x548C; inter-day &#x7CFB;&#x6570;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F; &lt; &#x6216; = 6.4 &#x548C; &lt; &#x6216;&#x5206;&#x522B; = 9.0%&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x6790;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x5927;&#x9F20;&#x548C;&#x72D7;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x6210;&#x5C16;&#x523A;&#x7684;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x3001; &#x901A;&#x8FC7;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x5BF9;&#x8840;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8179;&#x8154;&#x6216;&#x9759;&#x8109;&#x836F;&#x540E;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x8868;&#x73B0;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5728; 15 &#x81F3; 25 microg/&#x6BEB;&#x5347;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x5927;&#x9F20;&#x6216;&#x72D7;&#x8840;&#x6D46;&#x3001; &#x6866;&#x6728;&#x9178; 99.99%&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8840;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; 5 microg/mL&#x3001; &#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x662F; &gt; &#x6216; = 99.97%&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;

&#x6866;&#x6728;&#x9178;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x5927;&#x9F20;&#x548C;&#x72D7;&#x7684;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;/&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Betulinic acid is under development as a therapeutic agent for the treatment of metastatic malignant melanoma. In support of pharmacokinetic and toxicological evaluations, a robust assay based on liquid chromatography/mass spectrometry (LC/MS) was developed for the quantitative analysis of betulinic acid. Sample preparation consisted of deproteinization of the plasma by the addition of three volumes of acetonitrile and one volume of methanol followed by centrifugation. Aliquots of the supernatant were analyzed using an isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) system coupled to a negative ion electrospray mass spectrometer. Deprotonated molecules of betulinic acid and the isomeric internal standard oleanolic acid were detected using selected ion monitoring at m/z 455. The limit of detection of betulinic acid was 0.5 pg (1.1 fM) injected on-column (50 pg/mL, 10 microL injection volume), and the limit of quantitation was 2 pg (4.4 fM, 200 pg/mL, 10 microL injection volume). Betulinic acid was stable in plasma samples at -20 degrees C for at least 3 weeks. The intra-day and inter-day coefficients of variation of the assay were < or =6.4 and < or =9.0%, respectively. The utility of the assay was demonstrated by analyzing betulinic acid spiked into mouse, rat and dog plasma, by determining the extent of binding of betulinic acid to plasma proteins, and by measuring betulinic acid in mouse and rat plasma following intraperitoneal or intravenous administration in vivo. At 15 and 25 microg/mL in mouse, rat or dog plasma, betulinic acid was 99.99% bound to serum proteins, and, at 5 microg/mL, betulinic acid was > or =99.97% bound.

Quantitative analysis of betulinic acid in mouse, rat and dog plasma using electrospray liquid chromatography/mass spectrometry.

L&#39;acide b&eacute;tulinique est en cours d&#39;&eacute;laboration comme agent th&eacute;rapeutique pour le traitement du m&eacute;lanome malin m&eacute;tastatique. &Agrave; l&#39;appui des &eacute;valuations pharmacocin&eacute;tiques et toxicologiques, un robuste bas&eacute; sur liquid chromatography/mass spectrometry (LC/MS) a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute; pour l&#39;analyse quantitative de l&#39;acide b&eacute;tulinique. Pr&eacute;paration de l&#39;&eacute;chantillon &eacute;tait compos&eacute; de d&eacute;prot&eacute;inisation du plasma par l&#39;ajout de trois volumes d&#39;ac&eacute;tonitrile et d&#39;un volume de m&eacute;thanol suivie par centrifugation. Aliquotes de surnageant ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es &agrave; l&#39;aide d&#39;un syst&egrave;me de chromatographie liquide &agrave; haute performance (HPLC) en phase invers&eacute;e isocratique coupl&eacute; &agrave; un spectrom&egrave;tre de masse electrospray ion n&eacute;gatif. Mol&eacute;cules de d&eacute;proton&eacute; d&#39;acide b&eacute;tulinique et l&#39;acide ol&eacute;anolique de standard interne isom&egrave;res ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s en utilisant la d&eacute;tection d&#39;ions s&eacute;lectionn&eacute;es &agrave; m/z 455. La limite de d&eacute;tection de l&#39;acide b&eacute;tulinique &eacute;tait 0,5 pg (1,1 fM) inject&eacute; sur colonne (50 pg/mL, 10 microL volume d&#39;injection) et la limite de quantification est pg 2 (4,4 fM, 200 pg/mL, 10 microL volume d&#39;injection). L&#39;acide b&eacute;tulinique &eacute;tait stable dans les &eacute;chantillons de plasma &agrave;-20 degr&eacute;s C pendant au moins 3 semaines. Les coefficients de variation du dosage intra-jour et inter-jours &eacute;taient &lt; ou = 6,4 et &lt; ou = 9,0 %, respectivement. L&#39;utilit&eacute; du test a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute;e par l&#39;analyse de l&#39;acide b&eacute;tulinique dop&eacute; dans le plasma de souris, rat et le chien, en d&eacute;terminant le degr&eacute; de liaison de l&#39;acide b&eacute;tulinique aux prot&eacute;ines plasmatiques et en mesurant l&#39;acide b&eacute;tulinique dans le plasma de souris et le rat apr&egrave;s administration intrap&eacute;riton&eacute;ale ou intraveineuse in vivo. &Agrave; 15 et 25 microg/mL chez la souris, rat ou chien plasma, l&#39;acide b&eacute;tulinique &eacute;tait 99,99 % li&eacute;e aux prot&eacute;ines s&eacute;riques, et, &agrave; 5 microg/mL, l&#39;acide b&eacute;tulinique &eacute;tait &gt; ou = limite de 99,97 %.

Dosage de l&#39;acide b&eacute;tulinique dans le plasma de souris, rat et le chien &agrave; l&#39;aide d&#39;electrospray liquid chromatography/mass spectrometry.

Quantitative Analyse von Betulins&#xE4;ure in Maus, Ratte und Hund Plasma mittels Elektrospray-Fl&#xFC;ssigchromatographie / Massenspektrometrie.

Acido betulinic &egrave; in fase di sviluppo come un agente terapeutico per il trattamento del melanoma maligno metastatico. A sostegno delle valutazioni farmacocinetiche e tossicologiche, un robusto saggio basato sul liquido cromatografia/spettrometria di massa (LC/MS) &egrave; stato sviluppato per l&#39;analisi quantitativa di acido betulinic. Preparazione del campione ha consistito di deproteinizzazione del plasma mediante l&#39;aggiunta di tre volumi di acetonitrile e un volume di metanolo seguita da centrifugazione. Aliquote del supernatante sono stati analizzati utilizzando un sistema di controfase cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) isocratica accoppiato ad uno spettrometro di massa electrospray ioni negativi. Deprotonato molecole di acido betulinic e l&#39;acido oleanolic standard interno isomerica sono stati rilevati utilizzando selezionato ion monitoring a 455 m/z. Il limite di rilevazione dell&#39;acido betulinic era 0,5 pg (fM 1,1) iniettato in colonna (50 pg/mL, volume di iniezione 10 microL), e il limite di quantificazione &egrave; stato 2 pg (4,4 fM, 200 pg/mL, volume di iniezione 10 microL). Acido betulinic era stabile in campioni di plasma a-20 gradi C per almeno 3 settimane. Coefficienti di variazione del dosaggio intra-day e inter-day erano &lt; o = 6.4 e &lt; o = 9,0%, rispettivamente. L&#39;utilit&agrave; del dosaggio &egrave; stata dimostrata analizzando acido betulinic a spillo nel topo, ratto e cane plasma, determinando la misura di associazione di acido betulinic alle proteine del plasma e misurando l&#39;acido betulinic nel topo e ratto plasma dopo la somministrazione per via endovenosa o intraperitoneale in vivo. A 15 e 25 microg/mL nel topo, ratto o cane al plasma, acido betulinic era 99,99% legato alle proteine del siero, e, a 5 microg/mL, acido betulinic era &amp;gt; o = 99,97% associata.

Analisi quantitativa di acido betulinic nel topo, ratto e cane plasma tramite electrospray liquido cromatografia/spettrometria di massa.

Betulinic &#x9178;&#x306F;&#x8EE2;&#x79FB;&#x60AA;&#x6027;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x85AC;&#x7269;&#x52D5;&#x614B;&#x30FB;&#x6BD2;&#x6027;&#x5B66;&#x7684;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;/&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790; (LC/MS) &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30ED;&#x30D0;&#x30B9;&#x30C8;&#x306A;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; betulinic &#x9178;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30CB; &#x30C8;&#x30EA;&#x30EB;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30E1;&#x30BF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x306E;&#x9664;&#x305F;&#x3093;&#x3071;&#x304F;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4E0A;&#x6F84;&#x307F;&#x306E;&#x56E0;&#x6570;&#x306B;&#x8CA0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x8A08;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30BD;&#x30AF;&#x30E9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x9006;&#x76F8;&#x9AD8;&#x901F;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (HPLC) &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x884C;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Betulinic &#x9178;&#x3068;&#x7570;&#x6027;&#x4F53;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x6A19;&#x6E96;&#x30AA;&#x30EC;&#x30A2;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x30E9;&#x30B8;&#x30AB;&#x30EB;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x5206;&#x5B50;&#x9078;&#x629E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; 455 m/z &#x76E3;&#x8996;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Betulinic &#x9178;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F; 0.5 pg &#x3060;&#x3063;&#x305F; (1.1 fM) &#x6CE8;&#x5165;&#x30AB;&#x30E9;&#x30E0; (50 pg/mL, 10 microL &#x6CE8;&#x5165;&#x91CF;) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4E0B;&#x9650;&#x306F; 2 pg (4.4 fM, 200 pg/mL, 10 microL &#x6CE8;&#x5165;&#x91CF;) &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Betulinic &#x9178;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 3 &#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;-20 &#x2103; &#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x65E5;&#x3068; inter-day &#x4FC2;&#x6570;&#x3042;&#x3063;&#x305F; &lt; &#x307E;&#x305F;&#x306F; = 6.4 &#x3068; &lt; &#x307E;&#x305F;&#x306F; = 9.0 &#xFF05;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x72AC;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x306B;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF; betulinic &#x9178;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3001;betulinic &#x9178;&#x8840;&#x6F3F;&#x86CB;&#x767D;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8179;&#x8154;&#x5185;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x6295;&#x4E0E;&#x306F; in vivo &#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E; betulinic &#x9178;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;15 &#x3068; 25 Microg/ml &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;, &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3084;&#x72AC;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;, betulinic &#x9178;&#x3067; 99.99% &#x8840;&#x6E05;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7E1B;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066; 5 Microg/ml &#x306B; betulinic &#x9178;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; = 99.97% &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x306E;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;/&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x72AC;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x306E; betulinic &#x9178;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Betulinic &#xC0B0; &#xC804;&#xC774;&#xC131; &#xC545;&#xC131; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC694;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC911;&#xC778;. Pharmacokinetic &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xC9C0;&#xC6D0; betulinic &#xC0B0;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;/&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; (LC/MS)&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC0D8;&#xD50C; &#xC900;&#xBE44; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; deproteinization &#xC774;&#xAE30;&#xC758; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBCFC;&#xB968; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xBA54;&#xD0C4;&#xC62C;&#xC758; &#xBCFC;&#xB968; &#xD558;&#xB098; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Aliquots&#xB294; &#xC0C1;&#xCF8C;&#xD55C;&#xC758; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xBD84;&#xBB34; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xAE30;&#xB97C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; isocratic &#xBC18;&#xC804; &#xC0C1; &#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HPLC) &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. Deprotonated &#xBD84;&#xC790; betulinic &#xC0B0;&#xACFC; &#xC774;&#xC131;&#xC9C8;&#xD575; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900; oleanolic &#xC0B0;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xB41C; &#xC774;&#xC628; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; 455 m/z&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Betulinic &#xC0B0;&#xC758; &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; 0.5 pg (1.1 fM)&#xC5D0; &#xC5F4; (50 pg/mL, 10 microL &#xC0AC;&#xCD9C; &#xBCFC;&#xB968;), &#xC8FC;&#xC785; &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; 2 &#xC138; (4.4 fM, 200 pg/mL, 10 microL &#xC0AC;&#xCD9C; &#xBCFC;&#xB968;). Betulinic &#xC0B0; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 3 &#xC8FC;-20&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xD3B8;&#xCC28; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD558;&#xB8E8;&#xC640; inter-day &#xACC4;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4; &lt; &#xB610;&#xB294; 6.4 = &#xBC0F; &lt; = 9.0% &#xAC01;&#xAC01; &#xB610;&#xB294;. Betulinic &#xC0B0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xC950;, &#xAC1C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xB85C; &#xC544;&#xAD70;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; betulinic &#xC0B0;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; intraperitoneal &#xB610;&#xB294; &#xC815; &#xB9E5; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC950; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; betulinic &#xC0B0;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. 15&#xACFC; 25 microg/mL &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xC950; &#xB098; &#xAC1C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;, betulinic &#xC0B0;&#xC5D0;&#xB294; 99.99%&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD608; &#xCCAD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; 5 microg/mL, betulinic &#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4; &amp;gt; = 99.97% &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xB610;&#xB294;.

&#xBD84;&#xBB34; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;/&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84; &#xAD11; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, &#xC950;, &#xAC1C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; betulinic &#xC0B0;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;.

El &aacute;cido betulinic se est&aacute; desarrollando como un agente terap&eacute;utico para el tratamiento de melanoma maligno metast&aacute;sico. En apoyo de las evaluaciones farmacocin&eacute;ticas y toxicol&oacute;gicas, se desarroll&oacute; un an&aacute;lisis robusto basado en cromatograf&iacute;a l&iacute;quida/espectrometr&iacute;a (LC/MS) para el an&aacute;lisis cuantitativo del &aacute;cido betulinic. Preparaci&oacute;n de la muestra consisti&oacute; de desproteinizaci&oacute;n del plasma mediante la adici&oacute;n de tres vol&uacute;menes de acetonitrilo y un volumen de metanol seguido por centrifugaci&oacute;n. Al&iacute;cuotas del sobrenadante se analizaron mediante un sistema de cromatograf&iacute;a l&iacute;quida de alto rendimiento de fase inversa (HPLC) isocr&aacute;tica acoplado a un espectr&oacute;metro de masas de iones negativos electrospray. Se detectaron Deprotonated mol&eacute;culas de &aacute;cido betulinic y el &aacute;cido olean&oacute;lico est&aacute;ndar interno isom&eacute;rica ion seleccionado bajo control en m/z 455. El l&iacute;mite de detecci&oacute;n del &aacute;cido betulinic fue 0,5 pg (1.1 fM) inyectado en columna (50 pg/mL, volumen de la inyecci&oacute;n de 10 microL), y el l&iacute;mite de cuantificaci&oacute;n era pg 2 (4,4 fM, 200 pg/mL, volumen de la inyecci&oacute;n de 10 microL). El &aacute;cido betulinic era estable en muestras de plasma a-20 grados C durante al menos 3 semanas. Intra-d&iacute;a e interd&iacute;a coeficientes de variaci&oacute;n del ensayo fueron &lt; o = 6.4 y &lt; o = 9,0%, respectivamente. La utilidad del ensayo fue demostrada mediante el an&aacute;lisis de muestras mezclado, rat&oacute;n, rata y perro plasma el &aacute;cido betulinic, determinando el grado de uni&oacute;n del &aacute;cido betulinic a las prote&iacute;nas plasm&aacute;ticas y midiendo el &aacute;cido betulinic en plasma de rata y rat&oacute;n despu&eacute;s de la administraci&oacute;n intraperitoneal o intravenosa en vivo. En 15 y 25 microg/mL en plasma de rata o perro, rat&oacute;n, &aacute;cido betulinic 99,99% estuvo limitado a las prote&iacute;nas del suero, y a 5 microg/mL, &aacute;cido betulinic era &gt; = limite de 99.97%.

An&aacute;lisis cuantitativo de &aacute;cido betulinic en rat&oacute;n, rata y perro mediante electrospray cromatograf&iacute;a l&iacute;quida/espectrometr&iacute;a de plasma.

&#x5728;&#x5F17;&#x91CC;&#x5FB7;&#x8D56;&#x5E0C;&#x7684;&#x5171;&#x6D4E;&#x5931;&#x8C03;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x4E09;&#x7F38; GAA/TTC DNA &#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; GAA/TTC DNA triplexes &#x7531; ph &#x503C;&#x6216;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F; (NMR) &#x548C;&#x9633;&#x6027;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x7531; H8&#x3001; H1&#x3001; H4&#x3001; 15N7&#x3001; 15N4 &#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5316;&#x5B66;&#x4F4D;&#x79FB;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; triplexes &#x548C;&#x53CC;&#x5DE5;&#x3002;&#x8FD9;&#x5957;&#x590D;&#x5F0F;&#x516C;&#x5BD3;&#x53EF;&#x5BDF;&#x7684;&#x6700;&#x4F4E; ph &#x503C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6574;&#x4F53;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x6570;&#x91CF;&#x7684; Hoogsteen C T &#x590D;&#x5408;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x51FD;&#x6570; G &#x78B1;&#x57FA;&#x3002;7.6 &#x7194;&#x5316; ph &#x503C; (pHm) &#x6709;&#x4EBA;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; (GAA) 2T4 (TTC) 2T4 (&#x94C1;&#x901A;) 2 &#x5230;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x6C83;&#x68EE;-&#x514B;&#x91CC;&#x514B;&#x53CC;&#x9762;&#x6253;&#x5370;&#x548C; T4 (&#x94C1;&#x901A;) 2 &#x60AC;&#x4E09;&#x7F38;&#x3002;(TTC) 6 &#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5728;&#x9178;&#x6027;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x4E09;&#x7F38;&#x548C;&#x5355;&#x94FE;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (GAA) 6 &#x590D;&#x5408;&#x51FD;&#x6570; &#xFF08;TTC&#xFF09; 6 &#x7F38;&#x68C0;&#x6D4B;&#x79BB;&#x5B50;&#x3002;&#x4E09;&#x91CD;&#x79BB;&#x5B50;&#x5728;&#x78B1;&#x6027; ph &#x503C;&#x5F7B;&#x5E95;&#x6D88;&#x5931;&#x4E86;&#x3002;&#x53CC;&#x9762;&#x6253;&#x5370;&#x5668;&#x548C;&#x5355;&#x4E1D;&#x5747;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x53EA;&#x5728;&#x4E2D;&#x6027;&#x548C;&#x78B1;&#x6027; pH &#x503C;&#x3002;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8F7B;&#x5FAE;&#x7684;&#x69FD;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x914D;&#x4F53; berenil&#xFF0C;netropsin&#xFF0C;&#x548C; distamycin &#x53CA;&#x63D2;&#x5C42;&#x914D;&#x4F53;&#x5416;&#x5576;&#x6A59;&#x7834;&#x574F; &#xFF08;TTC&#xFF09; 6&#x3002;(GAA) 6 &#x590D;&#x5408;&#x51FD;&#x6570; &#xFF08;TTC&#xFF09; 6 &#x7F38;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x548C;&#x8D28;&#x8C31;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x80FD;&#x51FD;&#x6570;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B5B;&#x9009;&#x7684;&#x7834;&#x574F;&#x7A33;&#x5B9A; GAA/TTC triplexes &#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x5546;&#x53D1;&#x73B0;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x4E00;&#x822C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027; DNA &#x548C; DNA &#x914D;&#x4F53;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

GAA/TTC DNA triplexes &#x4F7F;&#x7528;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x548C;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

The formation of a GAA/TTC DNA triplex has been implicated in Friedreich's ataxia. The destabilization of GAA/TTC DNA triplexes either by pH or by binding to appropriate ligands was analyzed by nuclear magnetic resonance (NMR) and positive-ion electrospray mass spectrometry. The triplexes and duplexes were identified by changes in the NMR chemical shifts of H8, H1, H4, 15N7, and 15N4. The lowest pH at which the duplex is detectable depends upon the overall stability and the relative number of Hoogsteen C composite function G to T composite function A basepairs. A melting pH (pHm) of 7.6 was observed for the destabilization of the (GAA)2T4(TTC)2T4(CTT)2 triplex to the corresponding Watson-Crick duplex and the T4(CTT)2 overhang. The mass spectrometric analyses of (TTC)6.(GAA)6 composite function(TTC)6 triplex detected ions due to both triplex and single-stranded oligonucleotides under acidic conditions. The triplex ions disappeared completely at alkaline pH. Duplex and single strands were detectable only at neutral and alkaline pH values. Mass spectrometric analyses also showed that minor groove-binding ligands berenil, netropsin, and distamycin and the intercalating ligand acridine orange destabilize the (TTC)6.(GAA)6 composite function (TTC)6 triplex. These NMR and mass spectrometric methods may function as screening assays for the discovery of agents that destabilize GAA/TTC triplexes and as general methods for the characterization of structure, dynamics, and stability of DNA and DNA-ligand complexes.

Analysis of GAA/TTC DNA triplexes using nuclear magnetic resonance and electrospray ionization mass spectrometry.

La formation d&#39;un triplex d&#39;ADN GAA/TTC a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e dans l&#39;ataxie de Friedreich. La d&eacute;stabilisation des triplex GAA/TTC ADN pH ou par liaison aux ligands appropri&eacute;s a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e par r&eacute;sonance magn&eacute;tique nucl&eacute;aire (RMN) et spectrom&eacute;trie de masse avec ionisation par &eacute;lectron&eacute;bulisation ions positifs. Les triplex et les duplex ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s par des changements dans les d&eacute;placements chimiques en RMN de H8 H1, H4, 15N7 et 15N4. Le pH le plus bas auquel le duplex est d&eacute;tectable d&eacute;pend de la stabilit&eacute; globale et le nombre relatif de Hoogsteen C fonction composite G &agrave; T fonction composite un PB. Un pH de fonte (pHm) de 7,6 a &eacute;t&eacute; observ&eacute; pour la d&eacute;stabilisation de la 2 t 4 (GAA) 2 t 4 (TTC) (CTT) 2 triplex pour le duplex de Watson-Crick correspondant et le surplomb de T4 (CTT) 2. Les analyses par spectrom&eacute;trie de masse de (TTC) 6.Ions de 6 fonction composite (TTC) 6 triplex d&eacute;tect&eacute; (GAA) en raison des oligonucl&eacute;otides triplex et simple brin dans des conditions acides. Les ions triple a disparu compl&egrave;tement &agrave; un pH alcalin. Duplex et simples brins ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s seulement &agrave; des pH neutres et alcalins. Les analyses par spectrom&eacute;trie de masse a &eacute;galement montrent que groove-liaison ligands berenil minor, n&eacute;tropsine et distamycine et l&#39;orange d&#39;acridine ligand intercalants d&eacute;stabilisent la 6 (TTC).(GAA) 6 fonction composite (TTC) 6 triplex. Ces RMN et les m&eacute;thodes de spectrom&eacute;trie de masse peuvent fonctionner comme d&eacute;pistage des dosages pour la d&eacute;couverte d&#39;agents qui d&eacute;stabilisent triplex GAA/TTC et m&eacute;thodes g&eacute;n&eacute;rales pour la caract&eacute;risation de la structure, la dynamique et la stabilit&eacute; des complexes ADN et ADN-ligand.

Analyse de triplex GAA/TTC ADN &agrave; l&#39;aide de la r&eacute;sonance magn&eacute;tique nucl&eacute;aire et spectrom&eacute;trie de masse avec ionisation par &eacute;lectron&eacute;bulisation.

Die Analyse der GAA / TTC DNA Triplexen Hilfe der magnetischen Kernresonanz und Elektrospray-Ionisation-Massenspektrometrie.

La formazione di un GAA/TTC DNA triplex &egrave; stata implicata nell&#39;atassia di Friedreich. La destabilizzazione di triplexes GAA/TTC DNA pH o dal legame con ligandi appropriati &egrave; stata analizzata da risonanza magnetica nucleare (NMR) e spettrometria di massa electrospray ioni positivi. Il triplexes e duplex sono stati identificati dai cambiamenti i cambiamenti chimici NMR di H8, H1, H4, 15N7 e 15N4. Il pH pi&ugrave; basso al quale &egrave; rilevabile il duplex dipende dalla stabilit&agrave; complessiva e il numero relativo di Hoogsteen C composito funzione G per funzione composito T un quanto. Un pH di fusione (pHm) di 7,6 &egrave; stato osservato per la destabilizzazione della (GAA) 2T4 2T4 (TTC) (CTT) 2 triplex per il duplex di Watson-Crick corrispondente e lo sbalzo di T4 (CTT) 2. Le analisi di spettrometrihe di massa di (TTC) 6.Ioni di 6 funzione composita (TTC) 6 triplex rilevato (GAA) a causa di oligonucleotidi triplex e single-stranded in condizioni acide. Gli ioni triplex &egrave; sparito completamente a pH alcalino. Duplex e singole ciocche erano rilevabili solo a pH alcalino e neutro. Analisi di spettrometrihe di massa ha anche mostrarono che minori groove-associazione ligandi berenil, netropsin e distamycin e l&#39;arancio di acridina ligando intercalante destabilizzare il 6 (TTC).(GAA) 6 funzione composita (TTC) 6 triplex. Questi metodi spettrometrihe di massa e NMR potrebbero funzionare come screening saggi per l&#39;individuazione degli agenti che destabilizzare triplexes GAA/TTC e metodi generali per la caratterizzazione della struttura, dinamica e stabilit&agrave; dei complessi DNA e DNA-ligando.

Analisi di triplexes GAA/TTC DNA mediante risonanza magnetica nucleare e spettrometria totale di ionizzazione electrospray.

&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D2;&#x5931;&#x8ABF;&#x75C7;&#x3067;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; GAA/TTC DNA &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GAA/TTC DNA &#x304A;&#x3057;&#x3083;&#x308C; pH &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4; (NMR) &#x3068;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x304A;&#x3057;&#x3083;&#x308C; duplexes H8&#x3001;H1&#x3001;H4&#x3001;15N7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 15N4 &#x306E; NMR &#x5316;&#x5B66;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x4E8C;&#x91CD;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6700;&#x3082;&#x4F4E;&#x3044; pH &#x306F;&#x3001;basepairs &#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068; Hoogsteen C &#x8907;&#x5408;&#x95A2;&#x6570; G T &#x8907;&#x5408;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x307E;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;7.6 &#x306E;&#x878D;&#x89E3;&#x306E; pH (&#x4EE5;&#x4E0B;&#x5168;&#x5947;&#x80CE;) &#xFF08;GAA&#xFF09; 2T4 &#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E; 2T4 &#xFF08;TTC&#xFF09; &#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F; &#xFF08;ctt &#x793E;&#xFF09; 2 &#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30EF;&#x30C8;&#x30BD;&#x30F3;-&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x4E8C;&#x91CD;&#x304A;&#x3088;&#x3073; T4 &#xFF08;ctt &#x793E;&#xFF09; 2 &#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; &#x30CF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x5206;&#x6790; (TTC) 6 &#x306E;&#x3002;&#xFF08;GAA&#xFF09; 6 &#x8907;&#x5408;&#x95A2;&#x6570; (TTC) 6 &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x691C;&#x51FA;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9178;&#x6027;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x4E09;&#x672C;&#x9396;&#x3068;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3002;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA; pH &#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x59FF;&#x3092;&#x6D88;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x91CD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x4E00;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306F;&#x4E2D;&#x6027;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x306E; pH &#x5024;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x691C;&#x51FA;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x307E;&#x305F; netropsin &#x3068; distamycin &#x3068;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; &#x30AA;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8; (TTC) 6 &#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A; groove &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50; berenil &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#xFF08;GAA&#xFF09; 6 &#x8907;&#x5408;&#x95A2;&#x6570; (TTC) 6 &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; nmr &#x6CD5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306F;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; GAA/TTC &#x304A;&#x3057;&#x3083;&#x308C;&#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x30FB;&#x52D5;&#x614B; DNA &#x30FB; DNA &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; GAA/TTC DNA &#x304A;&#x3057;&#x3083;&#x308C;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

&#xC0BC;&#xBC15;&#xC790; GAA/TTC DNA &#xD615;&#xC131; &#xD504;&#xB9AC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E4; &#xC870; &#xC99D;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4;. GAA/TTC DNA triplexes pH &#xB610;&#xB294; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; ligands &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBD88;&#xC548; &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; (NMR)&#xC640; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC628; &#xBD84;&#xBB34; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. Triplexes &#xBC0F; duplexes H8, H1, H4, 15N7, &#xBC0F; 15n4&#xC758; NMR &#xD654;&#xD559; &#xAD50;&#xB300;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC911;&#xC740; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xC0B0;&#xB3C4; basepairs &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xC0C1;&#xB300; &#xC218;&#xAC00; Hoogsteen C &#xBCF5;&#xD569; &#xD568;&#xC218; G T &#xD569;&#xC131; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. 7.6&#xC758; &#xB179;&#xB294; pH (pHm) (TTC) 2T4 (GAA) 2t4&#xC758; &#xBD88;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; (CTT) 2 &#xD2B8;&#xB9AC; &#xB300;&#xC751; &#xC653;&#xC2A8; &#xD06C;&#xB9AD; &#xB4C0;&#xD50C;&#xB809;&#xC2A4; &#xBC0F; T4 (CTT) 2 &#xAC78;&#xB9AC;&#xB2E4;. (TTC) 6&#xC758; &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D;.(GAA) &#xAC10;&#xC9C0; 6 &#xD569;&#xC131; &#xD568;&#xC218; (TTC) 6 &#xC0BC;&#xBC15;&#xC790; &#xC774;&#xC628; &#xC0B0; &#xC131; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; oligonucleotides &#xB54C;&#xBB38;. &#xC0BC;&#xBC15;&#xC790; &#xC774;&#xC628; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; Ph&#xC5D0;&#xC11C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC0AC;&#xB77C;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC911; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xC911;&#xC131; &#xBC0F; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; pH &#xAC12;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xC0AC;&#xC18C;&#xD55C; groove &#xBC14;&#xC778;&#xB529; ligands berenil netropsin, distamycin &#xBC0F; intercalating ligand acridine &#xC624;&#xB80C;&#xC9C0; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; (TTC) 6 &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;.(GAA) 6 &#xD569;&#xC131; &#xD568;&#xC218; (TTC) 6 &#xC0BC;&#xBC15;&#xC790;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; NMR &#xBC0F; &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; GAA/TTC triplexes &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xB9AC;&#xC778;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870;, &#xC5ED;&#xD559;, &#xBC0F; DNA&#xC640; DNA &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

GAA/TTC DNA triplexes &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xBC0F; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La formaci&oacute;n de un triple de ADN GAA/TTC se ha implicado en la ataxia de Friedreich. La desestabilizaci&oacute;n de Triplex ADN GAA/TTC por pH o atando a ligandos apropiados se analiz&oacute; mediante resonancia magn&eacute;tica nuclear (RMN) y espectrometr&iacute;a de masas por electrospray iones positivos. Se identificaron los Triplex y duplex por cambios en los desplazamientos qu&iacute;micos de NMR de H8, H1, H4, 15N7 y 15N4. El pH m&aacute;s bajo que el duplex es detectable depende de la estabilidad global y el n&uacute;mero relativo de la funci&oacute;n compuesta de Hoogsteen C G a la funci&oacute;n compuesta T un basepairs. Un pH de fusi&oacute;n (MSP) de 7,6 se observ&oacute; para la desestabilizaci&oacute;n de la 2T4 (GAA) (TTC) 2T4 (CTT) 2 triplex duplex Watson-Crick correspondiente y la proyecci&oacute;n de la T4 (CTT) 2. Los an&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa de (TTC) 6.Iones de 6 funci&oacute;n compuesta (TTC) 6 triple detectado (GAA) debido a los oligonucle&oacute;tidos de triples y monocatenario bajo condiciones &aacute;cidas. Los iones triples desaparecieron totalmente en pH alcalino. D&uacute;plex y solo era perceptibles s&oacute;lo con valores de pH neutro y alcalino. An&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa tambi&eacute;n demostraron ranura vinculante ligandos berenil menores, netropsin y Chromosom&#x173; y el naranja de acridina ligando intercalante desestabilizan el (TTC) 6.(GAA) 6 funci&oacute;n compuesta (TTC) 6 triplex. Estas NMR y espectrometr&iacute;a de masa m&eacute;todos puede funcionar como ensayos para el descubrimiento de agentes que desestabilizan Triplex GAA/TTC y como m&eacute;todos generales para la caracterizaci&oacute;n de la estructura, din&aacute;mica y estabilidad de complejos ADN y ADN-ligando.

An&aacute;lisis de Triplex GAA/TTC ADN mediante resonancia magn&eacute;tica nuclear y espectrometr&iacute;a de masas de ionizaci&oacute;n por electrospray.

&#x8109;&#x7EDC;&#x4E1B; (CP) &#x751F;&#x6210;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; (CNS) &#x8111;&#x810A;&#x6DB2; (CSF)&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;CP &#x540E;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53; &#xFF08;&#x7B2C;&#x56DB;&#x8111;&#x5BA4;&#xFF09;&#x3001; &#x95F4;&#x8111; &#xFF08;&#x7B2C;&#x4E09;&#x8111;&#x5BA4;) &#x548C;&#x7AEF;&#x8111;&#x80CC;&#x53CC;&#x8FB9; &#xFF08;&#x4FA7;&#x8111;&#x5BA4;&#xFF09;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7AD9;&#x70B9;&#x90FD;&#x6492;&#x8C0E;&#x6216;&#x80DA;&#x80CE;&#x80CC;&#x4E2D;&#x7EBF; (DM) &#x4F5C;&#x4E3A; CNS &#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684; DM-CP &#x5173;&#x7CFB;&#x548C; Gdf7 (Bmp12) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x6620;&#x5C04;&#x6216; ablate &#x5FB7;&#x56FD;&#x9A6C;&#x514B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;Gdf7 &#x547D;&#x8FD0;&#x5730;&#x56FE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5927;&#x591A;&#x6570; CP (CPe) &#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#x8111;&#x95F4;&#x8111;&#x3002;&#x7AEF;&#x8111;&#xFF0C;telencephalic CPe (tCPe) &#x7684;&#x5C0F;&#x524D;&#x57DF;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0; Gdf7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8C31;&#x7CFB;&#x800C;&#x5176;&#x5927;&#x540E;&#x57DF;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C31;&#x7CFB;&#x3002;&#x524D;&#x540E; tCPe &#x57DF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x5206;&#x5F00; diencephalic CPe &#x8FDE;&#x7EED;&#x5B57;&#x6BB5;&#x5185;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x5C55;&#x51FA;&#x4E86;&#x4E0D;&#x540C;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x7F3A;&#x4E4F; Gdf7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8C31;&#x7CFB;&#x540E;, tCPe &#x57DF;&#x5931;&#x8D25;&#x70E7;&#x8680; Gdf7 &#x8868;&#x793A; DM &#x7EC6;&#x80DE;&#x795E;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x9636;&#x6BB5;&#x540E;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;TCPe &#x635F;&#x5931;&#x662F;&#x653E;&#x5C04;&#x7EBF;&#x7684;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D; (Bmp) &#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5DF2;&#x77E5; tCPe &#x611F;&#x5E94;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4EB2;&#x5BC6; DM CPe &#x5173;&#x7CFB;&#x6574;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C; tCPe &#x57DF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5176;&#x6210;&#x56E0;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x975E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x65F6;&#x5C1A; DM &#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#x57DF;&#x3002;

CNS &#x80CC;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8109;&#x7EDC;&#x4E1B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x548C;&#x95F4;&#x63A5;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Choroid plexus (CP) produces the cerebrospinal fluid (CSF) of the central nervous system (CNS), but little is known about the mechanisms underlying development of this important tissue. CP forms in the hindbrain (4th ventricle), diencephalon (3rd ventricle) and dorsomedial telencephalon bilaterally (lateral ventricles). All of these sites lie at or near the embryonic dorsal midline (DM), which acts as a CNS patterning center. We therefore examined DM-CP relationships using normal and Gdf7 (Bmp12) transgenic embryos to fate map or ablate DM cells. These studies revealed a Gdf7 fate map that includes most CP epithelial (CPe) cells of the hindbrain and diencephalon. In the telencephalon, Gdf7 cell lineages were found in the small anterior domain of telencephalic CPe (tCPe), but its large posterior domain was devoid of these lineages. Anterior and posterior tCPe domains, which arise within a contiguous field separate from diencephalic CPe, also exhibited different patterns of apoptosis. Despite lacking Gdf7 cell lineages, the posterior tCPe domain failed to form after ablating Gdf7-expressing DM cells at neural tube stages. The tCPe loss was associated with abrogation of high-level bone morphogenetic protein (Bmp) signaling, which is known to be required for tCPe induction. Taken together, these studies demonstrate intimate DM-CPe relationships throughout the CNS and highlight two distinct tCPe domains, including a posterior domain whose genesis depends on DM cells in a non-cell-autonomous fashion.

Direct and indirect roles of CNS dorsal midline cells in choroid plexus epithelia formation.

Plexus choro&#xEF;de (CP) produit le liquide c&#xE9;phalo-rachidien (LCR) du syst&#xE8;me nerveux central (SNC), mais peu est connu sur les m&#xE9;canismes sous-jacents au d&#xE9;veloppement de ce tissu important. Formes de CP dans le cerveau post&#xE9;rieur (4&#xE8;me ventricule), dienc&#xE9;phale (3&#xE8;me ventricule) et le t&#xE9;lenc&#xE9;phale dorsom&#xE9;dial bilat&#xE9;rale (ventricules lat&#xE9;raux). Tous ces sites se trouvent dans ou pr&#xE8;s de la ligne m&#xE9;diane dorsale embryonnaire (DM), qui agit comme un centre de structuration du SNC. Nous avons donc examin&#xE9; DM-CP relations normales et en utilisant Gdf7 (Bmp12) embryons transg&#xE9;niques &#xE0; la carte sort ou l&#x26;#39;ablation des cellules DM. Ces &#xE9;tudes ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une carte Gdf7 sort qui comprend la plupart du CP &#xE9;pith&#xE9;liales (CPE) des cellules du cerveau post&#xE9;rieur et le dienc&#xE9;phale. Dans le t&#xE9;lenc&#xE9;phale, Gdf7 lign&#xE9;es cellulaires ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s dans le petit domaine ant&#xE9;rieure de t&#xE9;lenc&#xE9;phalique CPe (TCPE), mais son grand domaine post&#xE9;rieure est d&#xE9;pourvue de ces lign&#xE9;es. Domaines TCPE ant&#xE9;rieure et post&#xE9;rieure, qui se posent dans un champ contigu distincte de dienc&#xE9;phalique CPe, &#xE9;galement pr&#xE9;sent&#xE9; diff&#xE9;rents mod&#xE8;les de l&#x26;#39;apoptose. Malgr&#xE9; le manque Gdf7 lign&#xE9;es cellulaires, le domaine TCPE post&#xE9;rieure n&#x26;#39;a pas &#xE0; se former apr&#xE8;s l&#x26;#39;ablation Gdf7 cellules exprimant DM &#xE0; des stades du tube neural. La perte TCPE a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;abrogation de haut niveau prot&#xE9;ine morphog&#xE9;n&#xE9;tique osseuse (BMP) de signalisation, qui est connu pour &#xEA;tre requise pour l&#x26;#39;induction TCPE. Pris ensemble, ces &#xE9;tudes d&#xE9;montrent intimes DM-CPE &#xE0; travers le syst&#xE8;me nerveux central des relations et mettre en &#xE9;vidence deux domaines distincts, y compris TCPE un domaine post&#xE9;rieur dont la gen&#xE8;se repose sur des cellules DM dans un mode non-cellule-autonome.

R&#xF4;les directs et indirects de SNC dorsaux cellules m&#xE9;dianes dans plexus choro&#xEF;de &#xE9;pith&#xE9;liums Formation

Direkte und indirekte Rollen von ZNS-Zellen im dorsalen Mittellinie des Plexus choroideus Epithelien Bildung.

Plesso coroideo (CP) produce il liquido cerebrospinale (CSF) del sistema nervoso centrale (SNC), ma poco si sa circa i meccanismi di sviluppo di questo importante tessuto di fondo. Form CP nel hindbrain (quarto ventricolo), diencefalo (III ventricolo) e dorsomedial telencefalo bilateralmente (laterale ventricoli). Tutti questi siti si trovano presso o vicino la mediana dorsale embrionale (DM), che agisce come un centro di patterning CNS. Abbiamo quindi esaminato DM-CP relazioni utilizzando normali e Gdf7 (Bmp12) gli embrioni transgenici al destino mappa o ablazione DM cellule. Questi studi hanno rivelato una mappa del destino di Gdf7 che comprende la maggior parte dei CP (CPe) cellule epiteliali del hindbrain e diencefalo. Nel telencefalo, Gdf7 linee cellulari sono state trovate nel piccolo dominio anteriore del CPe telencefalici (tCPe), ma suo grande dominio posteriore era privo di questi lignaggi. Domini tCPe anteriore e posteriore, che sorgono all&#39;interno di un campo contiguo separato dal CPe Diencefalica, esposto anche diversi modelli di apoptosi. Nonostante la mancanza di linee cellulari Gdf7, il dominio tCPe posteriore non &egrave; riuscito a formare dopo ablazione delle cellule che esprimono Gdf7 DM in fasi di tubo neurale. La perdita di tCPe &egrave; stata associata con abrogazione dell&#39;osso ad alto livello di segnalazione morphogenetic protein (Bmp), che &egrave; noto per essere richiesto per induzione tCPe. Presi insieme, questi studi dimostrano relazioni intime DM-CPe tutta la CNS ed evidenziano due domini distinti tCPe, tra cui un dominio posteriore cui genesi dipende dal DM cellule in maniera non-cella autonoma.

Ruoli diretti e indiretti delle cellule della linea mediana dorsale CNS in formazione epiteli plesso coroideo.

&#x8108;&#x7D61;&#x53E2;&#xFF08;CP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#xFF08;CNS&#xFF09;&#x306E;&#x8133;&#x810A;&#x9AC4;&#x6DB2;&#xFF08;CSF&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E21;&#x5074;CP&#x5F8C;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#xFF08;&#x7B2C;4&#x8133;&#x5BA4;&#xFF09;&#x3001;&#x9593;&#x8133;&#xFF08;3&#x5BA4;&#xFF09;&#x3068;&#x80CC;&#x5185;&#x5074;&#x7D42;&#x8133;&#xFF08;&#x5074;&#x8133;&#x5BA4;&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x80CC;&#x5074;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#xFF08;DM&#xFF09;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904B;&#x547D;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x307E;&#x305F;&#x306F;DM&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3068;Gdf7&#xFF08;Bmp12&#xFF09;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x80DA;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;DM-CP&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x3068;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;CP&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;CP&#x200B;&#x200B;E&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;Gdf7&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D42;&#x8133;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Gdf7&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306F;&#x3001;&#x7D42;&#x8133;CPE&#xFF08;tCPe&#xFF09;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x524D;&#x65B9;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5927;&#x81FC;&#x6B6F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9593;&#x8133;CPE&#x304B;&#x3089;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x9023;&#x7D9A;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5185;&#x3067;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x524D;&#x90E8;&#x3068;&#x5F8C;&#x90E8;tCPe&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Gdf7&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5F8C;&#x90E8;tCPe&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;Gdf7&#x767A;&#x73FE;DM&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5207;&#x9664;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; tCPe&#x640D;&#x5931;&#x306F;tCPe&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;BMP&#xFF09;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x89AA;&#x5BC6;&#x306A;DM-CPE&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x8D77;&#x6E90;&#x975E;&#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x5F8B;&#x7684;&#x306B;DM&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5F8C;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;tCPe&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8108;&#x7D61;&#x53E2;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x80CC;&#x5074;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;

&#xB9E5;&#xB77D; &#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCD1D; (CP) &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (CNS)&#xC758; &#xB1CC; &#xCC99;&#xCD94; &#xC561;&#xCCB4; (CSF)&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC57D;&#xAC04;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. Hindbrain&#xC5D0; CP &#xC591;&#xC2DD; (4 &#xC2EC;), diencephalon (3 &#xC2EC;)&#xC640; dorsomedial telencephalon &#xC591;&#xC790; (&#xC2EC;&#xC758; &#xC606;&#xCABD;). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; CNS &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xC13C;&#xD130;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB4F1; &#xC911;&#xAC04; (DM)&#xC744; &#xAC70;&#xC758; &#xAC70;&#xC9D3;&#xB9D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; DM CP &#xAD00;&#xACC4; &#xBC0F; Gdf7 &#xAC80;&#xC0AC; (Bmp12) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xD0DC;&#xC544; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD551;&#xD558;&#xAC70;&#xB098; DM &#xC140; &#xC808;&#xC81C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; hindbrain diencephalon&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; CP &#xC0C1;&#xD53C; (CPe) &#xC140;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; Gdf7 &#xC6B4;&#xBA85; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Telencephalon, Gdf7 &#xC138;&#xD3EC; &#xACC4;&#xBCF4; telencephalic CPe (tCPe)&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACC4;&#xBCF4; &#xC5C6;&#xB294; &#xD070; &#xD6C4;&#xBD80; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740;. &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xD6C4; tCPe &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; diencephalic Cpe&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xD544;&#xB4DC; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; apoptosis&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. Gdf7 &#xC140; &#xACC4;&#xBCF4; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4;&#xBD80; tCPe &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD29C;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; gdf7&#xC744; &#xD45C;&#xD604; DM &#xC140; ablating &#xD6C4;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TCPe &#xC190;&#xC2E4; tCPe &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Bmp) &#xC2E0;&#xD638;, &#xD3D0;&#xC9C0;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; CNS &#xD1B5;&#xD574; &#xCE5C;&#xBC00; &#xD55C; DM CPe &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xCC3D;&#xC138;&#xAE30; DM &#xC140; &#xC140;&#xC744; &#xC790;&#xC728; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6C4;&#xBD80; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; tCPe &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC;.

&#xB9E5;&#xB77D; &#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCD1D; &#xC0C1;&#xD53C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; CNS &#xB4F1; &#xC911;&#xAC04; &#xC140;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xBC0F; &#xAC04;&#xC811; &#xC5ED;&#xD560;.

Del plexo coroideo (PC) produce el l&#xED;quido cefalorraqu&#xED;deo (LCR) del sistema nervioso central (SNC), pero poco se sabe sobre los mecanismos que subyacen al desarrollo de este tejido importante. CP se forma en el cerebro posterior (4to ventr&#xED;culo), dienc&#xE9;falo (3 &#xBA; ventr&#xED;culo) y el telenc&#xE9;falo dorsomedial bilateral (ventr&#xED;culos laterales). Todos estos sitios se encuentran en o cerca de la l&#xED;nea media dorsal del embri&#xF3;n (DM), que act&#xFA;a como un centro de patr&#xF3;n SNC. Tanto, nuestro estudio DM-CP relaciones con embriones normales y transg&#xE9;nicos Gdf7 (Bmp12) para asignar el destino o la ablaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas DM. Estos estudios revelaron un mapa del destino Gdf7 que incluye la mayor&#xED;a del PP epiteliales (CPE) las c&#xE9;lulas del cerebro posterior y el dienc&#xE9;falo. En el telenc&#xE9;falo, Gdf7 linajes de c&#xE9;lulas se encontraron en el peque&#xF1;o dominio anterior de telencef&#xE1;lica CPE (tCPe), pero su dominio posterior de grandes carec&#xED;a de estos linajes. TCPe dominios anteriores y posteriores, que surgen dentro de un campo contiguo separado de diencef&#xE1;lico CPE, tambi&#xE9;n mostraron diferentes patrones de la apoptosis. A pesar de carecer Gdf7 linajes de c&#xE9;lulas, el dominio tCPe posterior no pudo formarse despu&#xE9;s de la ablaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas que expresan Gdf7-DM en las etapas del tubo neural. La p&#xE9;rdida tCPe se asoci&#xF3; con derogaci&#xF3;n de alto nivel de prote&#xED;na morfogen&#xE9;tica &#xF3;sea (BMP) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, que se sabe que se requiere para la inducci&#xF3;n tCPe. Tomados en conjunto, estos estudios demuestran &#xED;ntimas DM-CPE relaciones en todo el SNC y resaltar dos dominios tCPe distintos, incluyendo un dominio posterior cuya g&#xE9;nesis depende de las c&#xE9;lulas DM en una forma no celular aut&#xF3;nomo.

Funciones directas e indirectas de la l&#xED;nea media del sistema nervioso central en las c&#xE9;lulas dorsales del plexo coroideo Formaci&#xF3;n epitelio

&#x8001;&#x5E74;&#x75F4;&#x5446;&#x75C7;&#x662F;&#x8001;&#x5E74;&#x4EBA;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x529F;&#x80FD;&#x4E27;&#x5931;&#x7684;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x9010;&#x6B65;&#x4E0B;&#x964D;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x4E0E;&#x6C89;&#x79EF;&#x7684;&#x7EA0;&#x7F20; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; (Abeta)&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x6216;&#x751A;&#x81F3;&#x626D;&#x8F6C; Abeta &#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x53EF;&#x80FD;&#x7528;&#x4E8E;&#x6CBB;&#x7597;&#x6216;&#x9884;&#x9632;&#x8001;&#x5E74;&#x75F4;&#x5446;&#x75C7;&#x3002;&#x8981;&#x8BC6;&#x522B;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8D28;&#x8C31;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7B5B;&#x67E5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x4E3A;&#x4E86;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x6392;&#x5E8F;&#x987A;&#x5E8F;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; Abeta &#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6267;&#x884C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;Abeta &#x88AB;&#x5B75;&#x5316; 20 h &#x8DDF;&#x8D85;&#x6EE4;&#x5206;&#x5F00;&#x5176;&#x805A;&#x5408;&#x5355;&#x4F53; Abeta &#x6D4B;&#x8BD5;&#x5728; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x3002;&#x8D85;&#x6EE4;&#x6DB2;&#x7684;&#x804C;&#x4E1A;&#x4E3A;&#x5355;&#x4F53; Abeta &#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x5206;&#x6790;&#x5728; m/z 1083 &#x5F02;&#x4F53;&#x56DB; Abeta &#x8D28;&#x5B50;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;Abeta &#x7684;&#x6821;&#x51C6;&#x66F2;&#x7EBF;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x7CFB;&#x6570; (r2) &gt; 0.99 &#x81F3;&#x5C11; 11 110 microM &#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x3002;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x662F; 0.224 &#x5434; (5.18 nM&#xFF0C;10 Cfa &#x6CE8;&#x5C04;) &#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x662F; 0.747 &#x5434; (17.2 nM&#xFF0C;10 Cfa &#x6CE8;&#x5C04;)&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; Abeta &#x6216;&#x6709;&#x7528;&#x6CBB;&#x7597;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x3001; &#x892A;&#x9ED1;&#x7D20;&#x3001; methysticin&#x3001; 3 indolepropionic &#x9178;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x67D4;&#x7EA2;&#x9709;&#x7D20;&#x662F;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x548C;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684; Abeta &#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; Abeta &#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x96C6;&#x662F;&#x964D;&#x5E8F;&#x987A;&#x5E8F;&#x8DDF; 3 indolepropionic &#x9178;&#x3001; &#x892A;&#x9ED1;&#x6FC0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E; methysticin &#x67D4;&#x7EA2;&#x9709;&#x7D20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8D85;&#x6EE4;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;-&#x8D28;&#x8C31;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7B5B;&#x67E5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x57FA;&#x4E8E; Abeta &#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x9884;&#x9632;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x5242;&#x3002;

&#x57FA;&#x4E8E;&#x8D28;&#x8C31;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7B5B;&#x67E5;&#x7684; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;

Alzheimer's disease is the most common cause of the loss of cognitive function among the elderly, and the aggregation and deposition of misfolded beta-amyloid protein (Abeta) contribute to this progressive central nervous system decline. Therefore, compounds that inhibit or even reverse Abeta aggregation might be useful for the treatment or prevention of Alzheimer's disease. To identify potential therapeutic agents for the treatment of Alzheimer's disease, a mass spectrometry-based screening assay was developed to identify and rank order compounds that inhibit the aggregation of Abeta. To carry out this assay, Abeta was incubated with a test compound at 37 degrees C for 20 h followed by ultrafiltration to separate the monomeric Abeta from its aggregates. Aliquots of the ultrafiltrate were analyzed for monomeric Abeta using positive ion electrospray mass spectrometry based on the abundance the quadruply protonated molecule of Abeta at m/z 1083. The calibration curve for Abeta was linear with a correlation coefficient (r2) of >0.99 over the range of at least 11-110 microM. The limit of detection was 0.224 ng (5.18 nM, 10-microL injection), and the limit of quantitation was 0.747 ng (17.2 nM, 10-microL injection). Based on previous reports of compounds that either bind to Abeta or are useful in treating Alzheimer's disease, melatonin, methysticin, 3-indolepropionic acid, and daunomycin were assayed and ranked in order of inhibition of Abeta aggregation. The most effective inhibitor of aggregation of Abeta protein was daunomycin followed in descending order by 3-indolepropionic acid, melatonin, and then methysticin. These data suggest that this ultrafiltration LC-MS screening assay may be used to identify potential therapeutic agents for the treatment of Alzheimer's disease based on the prevention of Abeta aggregation.

Mass spectrometry-based screening for inhibitors of beta-amyloid protein aggregation.

La maladie d&#39;Alzheimer est la cause la plus fr&eacute;quente de la perte des fonctions cognitives chez les personnes &acirc;g&eacute;es, et l&#39;agr&eacute;gation et des d&eacute;p&ocirc;ts de prot&eacute;ines mal repli&eacute;es de b&ecirc;ta-amylo&iuml;de (Ab&ecirc;ta) contribuent &agrave; ce d&eacute;clin progressif du syst&egrave;me nerveux central. Par cons&eacute;quent, compos&eacute;s qui inhibent ou m&ecirc;me inverser l&#39;agr&eacute;gation amylo&iuml;de b&ecirc;ta peuvent &ecirc;tre utiles pour le traitement ou la pr&eacute;vention de la maladie d&#39;Alzheimer. Pour identifier les agents th&eacute;rapeutiques potentiels pour le traitement de la maladie d&#39;Alzheimer, un test de d&eacute;pistage bas&eacute; sur la spectrom&eacute;trie de masse a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute; pour identifier et classer les compos&eacute;s d&#39;ordre qui inhibent l&#39;agr&eacute;gation de la b&ecirc;ta-amylo&iuml;de. Pour r&eacute;aliser cet essai, Abeta est incub&eacute;e avec un test compos&eacute; &agrave; 37 degr&eacute;s C pendant 20 h suivie d&#39;ultrafiltration pour s&eacute;parer l&#39;Ab&ecirc;ta monom&egrave;re de ses agr&eacute;gats. Des parties aliquotes de l&#39;ultrafiltrate ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s pour monom&egrave;re Ab&ecirc;ta par spectrom&eacute;trie de masse des ions positifs par &eacute;lectron&eacute;bulisation bas&eacute;e sur l&#39;abondance du quadruply proton&eacute; mol&eacute;cule de b&ecirc;ta-amylo&iuml;de &agrave; m/z 1083. La courbe d&#39;&eacute;talonnage pour la b&ecirc;ta-amylo&iuml;de &eacute;tait lin&eacute;aire avec un coefficient de corr&eacute;lation (r2) de &gt; 0,99 sur la plage d&#39;au moins 11-110 microM. La limite de d&eacute;tection &eacute;tait 0,224 ng (5,18 nM, 10-microL injection) et la limite de quantification &eacute;tait 0,747 ng (17,2 nM, 10-microL injection). Bas&eacute; sur les rapports pr&eacute;c&eacute;dents des compos&eacute;s qui se lient &agrave; la b&ecirc;ta-amylo&iuml;de ou qui sont utiles dans le traitement de la maladie d&#39;Alzheimer, la m&eacute;latonine, methysticine, acide 3-indolepropionic et daunomycine ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s et class&eacute;s par ordre d&#39;inhibition de l&#39;agr&eacute;gation de la b&ecirc;ta-amylo&iuml;de. L&#39;inhibiteur le plus efficace d&#39;agr&eacute;gation de la prot&eacute;ine b&ecirc;ta-amylo&iuml;de &eacute;tait daunomycine suivie par ordre d&eacute;croissant de methysticine, la m&eacute;latonine et ensuite l&#39;acide 3-indolepropionic. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que ce test de d&eacute;pistage de l&#39;ultrafiltration LC-MS peut servir &agrave; identifier les agents th&eacute;rapeutiques potentiels pour le traitement de la maladie d&#39;Alzheimer bas&eacute; sur la pr&eacute;vention de l&#39;agr&eacute;gation de la b&ecirc;ta-amylo&iuml;de.

Bas&eacute; sur la spectrom&eacute;trie de masse de d&eacute;pistage des inhibiteurs de l&#39;agr&eacute;gation de la prot&eacute;ine b&ecirc;ta-amylo&iuml;de.

Alzheimer-Krankheit ist die h&auml;ufigste Ursache f&uuml;r den Verlust von kognitiven Funktionen bei &auml;lteren Menschen, und die Aggregation und Ablagerung von misfolded Beta-Amyloid-Protein (Abeta) tragen zu dieser progressive ZNS-R&uuml;ckgang. Daher k&ouml;nnte die Verbindungen, die hemmen oder sogar umkehren Abeta-Aggregation zur Behandlung oder Pr&auml;vention der Alzheimer-Krankheit weiterhelfen. Um potenzielle Therapeutika zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit zu identifizieren, wurde ein Spektrometrie-basierten Massen-Screening-Test entwickelt, um zu identifizieren und Rang Reihenfolge-Verbindungen, die die Aggregation von Abeta zu hemmen. Um diesen Test durchzuf&uuml;hren, wurde mit einem Test bei 37 Grad C zusammengesetzte f&uuml;r 20 h gefolgt von Ultrafiltration, das Monomer Abeta von seiner Aggregate zu trennen Abeta inkubiert. Referenzl&ouml;sungen der Ultrafiltrate wurden analysiert f&uuml;r Monomer Abeta mit positiven Ionen Electrospray Massenspektrometrie basierend auf die F&uuml;lle der Vierfach protoniert Molek&uuml;l Abeta bei m/Z 1083. Die Kalibrierkurve f&uuml;r Abeta war mit einem Korrelationskoeffizienten (r2) linear &gt; 0.99 &uuml;ber den Bereich von mindestens 11-110 MicroM. Nachweisgrenze wurde 0.224 ng (5,18 nM, 10-MicroL Injektion) und die Begrenzung auf quantitative Bestimmung war 0.747 ng (17,2 nM, 10-MicroL Injektion). Basierend auf fr&uuml;heren Berichten von Verbindungen, die entweder an Abeta binden oder sind n&uuml;tzlich bei der Behandlung von Krankheit Alzheimers, Melatonin, Kavapyrone, 3-Indolepropionic-S&auml;ure und Daunomycin wurden normalisiert und geordnet in der Reihenfolge der Hemmung der Abeta-Aggregation. Die effektivste Inhibitor der Aggregation Abeta-Eiwei&szlig; war Daunomycin gefolgt in absteigender Reihenfolge von 3-Indolepropionic Acid, Melatonin und dann Kavapyrone. Diese Daten legen nahe, dass dieser Ultrafiltration LC-MS-Screening-Test verwendet werden, kann um potenzielle Therapeutika zur Behandlung der Alzheimer-Krankheit auf der Grundlage der Pr&auml;vention von Abeta-Aggregation zu identifizieren.

Spektrometrie-basierten Massen-Screening f&uuml;r Inhibitoren von Beta-Amyloid-Protein Aggregation.

La malattia di Alzheimer &egrave; la causa pi&ugrave; comune della perdita della funzione cognitiva tra gli anziani, e l&#39;aggregazione e la deposizione della proteina malpiegata di beta-amiloide (Abeta) contribuiscono a questo declino progressivo del sistema nervoso centrale. Composti che inibiscono o addirittura invertire Abeta aggregazione potrebbero pertanto essere utile per il trattamento o la prevenzione della malattia di Alzheimer. Per identificare potenziali agenti terapeutici per il trattamento della malattia di Alzheimer, un test di screening basato su spettrometria di massa &egrave; stato sviluppato per identificare e classificare i composti di ordine che inibiscono l&#39;aggregazione di Abeta. Per svolgere questa analisi, Abeta &egrave; stata incubata con un test composto a 37 gradi C per 20 h seguita da ultrafiltrazione per separare l&#39;Abeta monomerico dai suoi aggregati. Aliquote dell&#39;ultrafiltrato sono stati analizzati per monomerico Abeta usando spettrometria totale di ioni positivi electrospray basata sull&#39;abbondanza il quadruplo protonati molecola di Abeta a m/z 1083. La curva di taratura per Abeta era lineare con un coefficiente di correlazione (r2) di &amp;gt; 0,99 sopra la gamma di almeno 11-110 microM. Il limite di rilevazione era 0.224 ng (5,18 nM, 10-microL iniezione) e il limite di quantificazione &egrave; stato 0.747 ng (17,2 nM, 10-microL iniezione). Sulla base di precedenti rapporti di composti che legano a Abeta o sono utili nel trattamento della malattia di Alzheimer, melatonina, methysticin, acido 3-indolepropionic, e daunomicina sono stati analizzati e classificati in ordine di inibizione dell&#39;aggregazione di Abeta. Il pi&ugrave; efficacia inibitore dell&#39;aggregazione di proteine Abeta era daunomicina seguita in ordine decrescente di methysticin, melatonina e quindi l&#39;acido 3-indolepropionic. Questi dati suggeriscono che questo test di screening di ultrafiltrazione LC-MS pu&ograve; essere utilizzato per identificare potenziali agenti terapeutici per il trattamento della malattia di Alzheimer basata sulla prevenzione dell&#39;aggregazione Abeta.

Screening basato su spettrometria di massa per gli inibitori dell&#39;aggregazione della proteina beta-amiloide.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x3001;&#x9AD8;&#x9F62;&#x8005;&#x306E;&#x8A8D;&#x77E5;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x96C6;&#x7D04;&#x3068;&#x8AA4;&#x3063;&#x3066;&#x6298;&#x308A;&#x305F;&#x305F;&#x307E;&#x308C;&#x305F; &beta;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&#x306A;) &#x306E;&#x6C88;&#x7740;&#x3053;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x9006;&#x306A;&#x96C6;&#x8A08;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x6CBB;&#x7642;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x306A;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x6CE8;&#x6587;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x4ED8;&#x3051;&#x3059;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x9042;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x306A;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306A;&#x305D;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066; 20 h &#x306E; 37 &#x306E;&#x6442;&#x6C0F;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x56E0;&#x6570;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x898B;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306A;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;m/z 1083 &#x3067; quadruply &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x306A;&#x306E;&#x3002;&#x306A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6821;&#x6B63;&#x66F2;&#x7DDA;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x95A2;&#x4FC2;&#x6570; &#xFF08;r2&#xFF09; &#x306E;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x76EE; 0.99 &#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 11 110 microM &#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x9650;&#x754C;&#x306F; 0.224 &#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F; ng (5.18 nM, 10-microL &#x6CE8;&#x5165;) &#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4E0B;&#x9650;&#x3060;&#x3063;&#x305F; 0.747 ng &#xFF08;17.2 nM&#x3001;10 microL &#x6CE8;&#x5165;&#xFF09;&#x3002;&#x306A;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;, &#x30E1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;, methysticin, 3-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30C0;&#x30A6;&#x30CE;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3044;&#x305F;&#x8A66;&#x91D1;&#x3057;&#x306A;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x3067;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x4ED8;&#x3051;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x964D;&#x9806;&#x3067; 3-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x30E1;&#x30E9;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; methysticin &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x30C0;&#x30A6;&#x30CE;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E; LC MS &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306A;&#x96C6;&#x7D04;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6CBB;&#x7642;&#x85AC;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; &beta;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC740; &#xC778;&#xC9C0; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xB178;&#xC778; &#xB4E4;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC6D0;&#xC778; &#xBC0F; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC640; misfolded &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Abeta)&#xC758; &#xC99D; &#xCC29;&#xC774; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; Abeta &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xBC18;&#xB300; &#xD558;&#xB294; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC758; &#xC608;&#xBC29; &#xB610;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xC11C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; Abeta &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC21C;&#xC704;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; Abeta 20 h monomeric Abeta&#xB294; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD55C; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; 37&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xD569; incubated&#xB294;. Aliquots&#xB294; ultrafiltrate&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC628; &#xBD84;&#xBB34; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; monomeric Abeta&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; m/z 1083&#xC5D0; Abeta&#xC758; quadruply protonated &#xBD84;&#xC790;. Abeta&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD50;&#xC815; &#xACE1;&#xC120; &#xC120;&#xD615;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4; &#xACC4;&#xC218; (r2)&#xB294; &amp;gt; 0.99 &#xC774;&#xC0C1; 11-110 microM &#xBC94;&#xC704;. &#xAC80;&#xCD9C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; 0.224 ng (5.18 nM, 10-microL &#xC8FC;&#xC0AC;) &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xD55C;&#xACC4;&#xB294; 0.747 ng (17.2 nM, 10-microL &#xC8FC;&#xC0AC;). Abeta &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xB610;&#xB294; 3 indolepropionic &#xC0B0;, methysticin, &#xBA5C; &#xB77C; &#xD1A0; &#xB2CC;, &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xB97C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xBA70; daunomycin &#xBD84;&#xC11D; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; Abeta &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC758; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC21C;&#xC704;&#xAC00;. Abeta &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; daunomycin 3 indolepropionic &#xC0B0;, &#xBA5C; &#xB77C; &#xD1A0; &#xB2CC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; methysticin &#xB0B4;&#xB9BC;&#xCC28;&#xC21C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xAE30;&#xBC18; Abeta &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xC608;&#xBC29;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC694;&#xC6D0;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30;&#xC774; &#xD55C; LC MS &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xBC18; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;.

La enfermedad de Alzheimer es la causa m&aacute;s com&uacute;n de la p&eacute;rdida de la funci&oacute;n cognitiva de las personas mayores, y la agregaci&oacute;n y la deposici&oacute;n de prote&iacute;nas mal plegadas de beta-amiloide (Abeta) contribuyen a este deterioro progresivo del sistema nervioso central. Por lo tanto, los compuestos que inhiben o incluso revertir la agregaci&oacute;n de Abeta podr&iacute;an ser &uacute;tiles para el tratamiento o la prevenci&oacute;n de la enfermedad de Alzheimer. Para identificar a posibles agentes terap&eacute;uticos para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, un ensayo de investigaci&oacute;n basadas en espectrometr&iacute;a de masa fue desarrollado para identificar y clasificar los compuestos de orden que inhiben la agregaci&oacute;n de Abeta. Para realizar este an&aacute;lisis, se incub&oacute; Abeta con una prueba compuesta a 37 grados C durante 20 horas seguida de ultrafiltraci&oacute;n para separar la Abeta monom&eacute;rica de sus agregados. Al&iacute;cuotas del ultrafiltrado se analizaron para monom&eacute;rica Abeta usando iones positivos electrospray espectrometr&iacute;a total basado en la abundancia la quadruply protonada mol&eacute;cula de Abeta en m/z 1083. La curva de calibraci&oacute;n para Abeta fue lineal con un coeficiente de correlaci&oacute;n (r2) de &gt; 0.99 sobre la gama de al menos 11-110 microM. El l&iacute;mite de detecci&oacute;n fue 0224 ng (5,18 nM, 10-microL inyecci&oacute;n) y el l&iacute;mite de cuantificaci&oacute;n fue 0.747 ng (17,2 nM, 10-microL inyecci&oacute;n). Basado en informes anteriores de compuestos que son &uacute;tiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, melatonina, methysticin, &aacute;cido 3-indolepropionic o enlazar a Abeta y daunomycin fueron analizadas y se ubicaba en orden de inhibici&oacute;n de la agregaci&oacute;n de Abeta. El m&aacute;s efectivo inhibidor de la agregaci&oacute;n de Abeta prote&iacute;na fue daunomycin, seguido en orden decreciente de methysticin, melatonina y &aacute;cido 3-indolepropionic. Estos datos sugieren que este ensayo de proyecci&oacute;n de ultrafiltraci&oacute;n LC-MS puede ser usado para identificar a posibles agentes terap&eacute;uticos para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer basado en la prevenci&oacute;n de la agregaci&oacute;n de Abeta.

Espectrometr&iacute;a de masa basada en detecci&oacute;n de inhibidores de la agregaci&oacute;n de la prote&iacute;na beta-amiloide.

&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7AEF;&#x8111;&#x548C;&#x5171;&#x540C;&#x53D1;&#x5E03; &#xFF08;HPE&#xFF09; &#x7578;&#x5F62;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x5145;&#x6EE1;&#x4E86;&#x4E0D;&#x786E;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x8702;&#x7A9D; ablations&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x5931;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5931;&#x8D25;&#x7684;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x611F;&#x5E94;&#x548C; HPE &#x80CC;&#x7AEF;&#x8111;&#x3002;&#x6B64;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x8868;&#x578B;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;Bmps&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4FE1;&#x53F7;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x5728;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5916;&#x6E90; Bmp4 &#x8DB3;&#x4EE5;&#x6A21;&#x4EFF;&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x62EF;&#x6551;&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x9635;&#x5217;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7531;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;&#x7ED3;&#x6784;&#x7F3A;&#x9677;&#x7136;&#x540E;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4EBA;&#x7C7B; HPE &#x60A3;&#x8005;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4E3A;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x89D2;&#x8272;&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x4F9D;&#x8D56; Bmp &#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x80CC; telencephalic &#x9635;&#x5217;&#x548C; HPE &#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6DF7;&#x4E71;&#x65B0;&#x578B;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;

&#x5C4B;&#x9876;&#x677F;&#x7684; telencephalic &#x5F00;&#x53D1;&#x548C;&#x53D1;&#x5E03;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The roof plate is a well known signaling center in CNS development, but its roles in the developing telencephalon and the common holoprosencephaly (HPE) malformation have been uncertain. Using cellular ablations in mice, we show that roof plate cell loss causes failed midline induction and HPE in the dorsal telencephalon. This morphologic phenotype is accompanied by selective deficits in midline gene expression and a reduced activity gradient for bone morphogenetic proteins (Bmps), the major signals produced by the roof plate. In dissociated cells and mutant explants, exogenous Bmp4 is sufficient to mimic roof plate selectivity in midline gene regulation and to rescue roof plate-dependent midline patterning. Previously unrecognized neuroanatomical defects predicted by the mouse model are then confirmed in human HPE patients. These findings establish selective roles for roof plate-dependent Bmp signaling in dorsal telencephalic patterning and HPE and define novel candidate genes for the human disorder.

Central roles of the roof plate in telencephalic development and holoprosencephaly.

Le toit en t&#xF4;le est un centre bien connu de signalisation dans le d&#xE9;veloppement du SNC, mais ses r&#xF4;les dans le d&#xE9;veloppement et le t&#xE9;lenc&#xE9;phale commune holoprosenc&#xE9;phalie (HPE) malformation ont &#xE9;t&#xE9; incertain. Utilisation des ablations cellulaires chez la souris, nous montrons que la perte de cellules toiture en t&#xF4;le provoque pas d&#x26;#39;induction ligne m&#xE9;diane et HPE dans le t&#xE9;lenc&#xE9;phale dorsal. Ce ph&#xE9;notype morphologique est accompagn&#xE9;e par des d&#xE9;ficits s&#xE9;lectifs de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique ligne m&#xE9;diane et un gradient de r&#xE9;duction de l&#x26;#39;activit&#xE9; de prot&#xE9;ines morphog&#xE9;n&#xE9;tiques osseuses (BMP), les signaux majeurs produits par la plaque de toit. Dans les cellules dissoci&#xE9;es et d&#x26;#39;explants mutantes, Bmp4 exog&#xE8;ne est suffisante pour imiter la s&#xE9;lectivit&#xE9; plaque de toit dans la r&#xE9;gulation g&#xE9;nique ligne m&#xE9;diane et la ligne m&#xE9;diane pour sauver structuration toiture en t&#xF4;le-d&#xE9;pendante. Non reconnues ant&#xE9;rieurement d&#xE9;fauts neuroanatomiques pr&#xE9;dites par le mod&#xE8;le de la souris sont ensuite confirm&#xE9;s chez les patients humains HPE. Ces r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent les r&#xF4;les s&#xE9;lectifs pour toiture en t&#xF4;le signalisation d&#xE9;pendante Bmp dans la structuration t&#xE9;lenc&#xE9;phalique dorsale et HPE et de d&#xE9;finir de nouveaux g&#xE8;nes candidats pour la maladie humaine.

R&#xF4;les centrale de la plaque de toit dans le d&#xE9;veloppement et t&#xE9;lenc&#xE9;phalique holoprosenc&#xE9;phalie

Die Dach-Platte ist ein bekannter Signalisierung in CNS-Entwicklung, aber seine Rolle in den Entwicklungsl&auml;ndern Telencephalon und die gemeinsame Holoprosenzephalie (HPE)-Malformation unsicher gewesen. Anhand zellul&auml;re Ablatio bei M&auml;usen zeigen wir, dass Dach Platte Zelle Verlust in der dorsalen Telencephalon fehlgeschlagenen Mittellinie Induktion und HPE verursacht. Diese morphologische Ph&auml;notyp wird durch selektive Defizite in Mittellinie-Genexpression und eine verminderte Aktivit&auml;t Farbverlauf f&uuml;r Bone morphogenetic Proteins (Bmps), die wichtigsten Signale, die von der Dach-Platte produziert begleitet. In getrennten Zellen und mutant Explantaten reicht exogene Bmp4, Dach Platte Selektivit&auml;t in Mittellinie Genregulation zu imitieren und Dach Platte-abh&auml;ngige Mittellinie Musterung zu retten. Unbekannte neuroanatomischen M&auml;ngel vom Mausmodell vorhergesagt werden zuvor dann in menschlicher HPE-Patienten best&auml;tigt. Diese Befunde f&uuml;r Dach-Platte-abh&auml;ngige Bmp signalisieren in den dorsalen Teleenzephalischer Musterung und HPE selektive Rollen einrichten und neuartige Kandidatengenen f&uuml;r menschliche St&ouml;rung zu definieren.

Zentrale Rollen der Dach-Platte in Teleenzephalischer Entwicklung und Holoprosenzephalie.

La piastra del tetto &egrave; un ben noto centro segnalazione nello sviluppo di CNS, ma i relativi ruoli nel telencefalo in via di sviluppo e la malformazione di oloprosencefalia (HPE) comuni sono stati incerti. Utilizzando ablazioni cellulare in topi, mostriamo che perdita di cellule tetto piatto provoca induzione della linea mediana non riuscita e HPE nel telencefalo dorsale. Questo fenotipo morfologico &egrave; accompagnato da deficit selettivo nell&#39;espressione del gene della linea mediana e un gradiente di attivit&agrave; ridotta per bone morphogenetic proteins (BMP), i segnali pi&ugrave; importanti prodotti dalla piastra di copertura. Nelle cellule dissociate ed espianti mutante, Bmp4 esogeno &egrave; sufficiente per imitare la selettivit&agrave; piastra tetto nella regolazione genica della linea mediana e di salvataggio patterning di piastra-dipendente della linea mediana del tetto. In precedenza non riconosciuti neuroanatomiche difetti previsti dal modello del mouse sono poi confermati in pazienti umani HPE. Queste scoperte stabilire ruoli selettivi per tetto piastra-dipendente segnalazione Bmp nella dorsale patterning telencefalici e HPE e definiscono nuovi geni per il disturbo umano.

Ruoli centrali della piastra tetto in sviluppo telencefalici e oloprosencefalia.

&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x7D42;&#x8133;&#x3068;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x5168;&#x524D;&#x8133;&#x75C7;&#xFF08;HPE&#xFF09;&#x5947;&#x5F62;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x640D;&#x5931;&#x304C;&#x80CC;&#x5074;&#x7D42;&#x8133;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;HPE&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x9AA8;&#x5F62;&#x6210;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;BMP&#xFF09;&#x3001;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x3067;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x89E3;&#x96E2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5916;&#x690D;&#x7247;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;BMP4&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x4E2D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x795E;&#x7D4C;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;HPE&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;BMP&#x306E;&#x80CC;&#x5074;&#x7D42;&#x8133;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;HPE&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x306A;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3002;

&#x7D42;&#x8133;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x5168;&#x524D;&#x8133;&#x75C7;&#x306E;&#x5C4B;&#x6839;&#x677F;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;

&#xC9C0;&#xBD95; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB294; CNS &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC2E0;&#xD638; &#xC13C;&#xD130; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; holoprosencephaly (HPE) &#xAE30;&#xD615; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C; telencephalon&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xBD88;&#xD655;&#xC2E4; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC950; &#xC138;&#xD3EC; &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xBD95; &#xD310; &#xC140; &#xC190;&#xC2E4; &#xC2E4;&#xD328; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xC120; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; HPE &#xC9C0; telencephalon&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xAC04; &#xC120; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xBF08; &#xC804;&#xCCB4;&#xC801; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Bmps) &#xC9C0;&#xBD95; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC801;&#xC790; &#xD615;&#xD0DC; &#xB860; &#xC801; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC774; &#xD568;&#xAED8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC9C;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC140; &#xBC0F; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; explants exogenous Bmp4 &#xC911;&#xAC04; &#xC120; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBD95; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xBD95; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xC885;&#xC18D; &#xC911;&#xAC04; &#xC120; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC778;&#xC2DD;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD574;&#xBD80;&#xD559; &#xACB0;&#xD568; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC608;&#xCE21; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HPE &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0;&#xBD95; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xC885;&#xC18D; Bmp &#xB4F1; telencephalic &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC640; HPE &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBB34;&#xC9C8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Telencephalic &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; holoprosencephaly &#xC9C0;&#xBD95; &#xD310;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC5ED;&#xD560;.

La placa del techo es un conocido centro de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el desarrollo del sistema nervioso central, pero sus papeles en el desarrollo del telenc&#xE9;falo y el com&#xFA;n de malformaci&#xF3;n de holoprosencefalia (HPE) han sido incierto. Uso de ablaciones celulares en ratones, nos muestran que la placa de techo de la p&#xE9;rdida de c&#xE9;lulas provoca la inducci&#xF3;n no la l&#xED;nea media y HPE en el telenc&#xE9;falo dorsal. Este fenotipo morfol&#xF3;gico se acompa&#xF1;a de d&#xE9;ficits selectivos en la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica l&#xED;nea media y un gradiente de disminuci&#xF3;n de la actividad de prote&#xED;nas morfogen&#xE9;ticas &#xF3;seas (BMP), las se&#xF1;ales m&#xE1;s importantes producidos por la placa del techo. En las c&#xE9;lulas disociadas y explantes mutantes, Bmp4 ex&#xF3;gena es suficiente para imitar la selectividad chapa de techo en la regulaci&#xF3;n g&#xE9;nica y la l&#xED;nea media para rescatar a la placa del techo que dependen de los patrones la l&#xED;nea media. Defectos neuroanat&#xF3;micos no reconocidos anteriormente predichas por el modelo de rat&#xF3;n se confirman en los pacientes humanos HPE. Estos hallazgos establecen las funciones selectivas para el techo de placa de se&#xF1;alizaci&#xF3;n dependiente de BMP en el patr&#xF3;n dorsal telencef&#xE1;lica y HPE y definir nuevos genes candidatos para el trastorno humano.

Papel central de la placa del techo en el Desarrollo y la telencef&#xE1;licas Holoprosencefalia

&#x65B0;&#x5174;&#x4E9A;&#x6D32;&#x7684;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x6297;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x5B66;&#x6CA1;&#x6709;&#x5145;&#x5206;&#x5B9A;&#x4E49;&#xFF0C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x6574;&#x5408;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x76D2;&#x7B49;&#x4E3B;&#x8981;&#x6C60;&#x5185;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5341;&#x5206;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x4ECE;&#x6211;&#x56FD;&#x5357;&#x65B9;&#x67D0;&#x5927;&#x533B;&#x9662;&#x7684;&#x4F4F;&#x9662;&#x75C5;&#x4EBA;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86; 22 &#x4E2A;&#x975E;&#x91CD;&#x590D;&#x4E0D;&#x52A8;&#x6746;&#x83CC;&#x83CC;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x4E94;&#x5341;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5305;&#x542B; 1 &#x7C7B;&#x6574;&#x5408;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E14;&#x65E0;&#x5173;&#x514B;&#x9686;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6C34;&#x5E73;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x516C;&#x5171;&#x6C60;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x76D2;&#x7531;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5361;&#x5E26;&#x6570;&#x7EC4;&#xFF1A; arr3-aacA4 (24 &#x65E0;&#x5173;&#x51E0;&#x682A;&#x682A;&#xFF09; &#xFF1B;aacC1-orfP-orfQ-aadA1a &#xFF08;11 &#x682A;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x540C;&#x4E00;&#x682A;&#xFF09; &#xFF1B;aacA4-catB8-aadA1 &#xFF08;2 &#x682A;) &#xFF1B;&#x548C; dfrVII &#xFF08;1 &#x682A;)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x6027;&#x7247;&#x6BB5;&#x957F;&#x5EA6;&#x591A;&#x6001;&#x6027; (RFLP)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x76D2;&#x5F0F;&#x78C1;&#x5E26;&#x7684;&#x62A5;&#x9053;&#x5728;&#x4E2D;&#x56FD;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x73B0;&#x6210;&#x7684;&#x9176;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x6765;&#x81EA;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5357;&#x65B9;&#x7684;&#x4E0D;&#x52A8;&#x6746;&#x83CC;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x4E2D;&#x6574;&#x5408;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x76D2;&#x3002;

The epidemiology of emerging antibiotic resistance genes in Asia is inadequately defined and studies within the major pools of transmissible genes such as integron gene cassettes are important. One hundred and twenty-two non-repetitive Acinetobacter spp. isolates were obtained from inpatients of a major hospital in South China. Fifty-three of these isolates contained class 1 integrons, and there is evidence of horizontal gene transfer between unrelated clones. The common pool of gene cassettes was dominated by four cassette arrays: arr3-aacA4 (24 isolates of several unrelated strains); aacC1-orfP-orfQ-aadA1a (11 isolates, probably all the same strain); aacA4-catB8-aadA1 (2 isolates); and dfrVII (1 isolate). We developed a simple restriction fragment length polymorphism (RFLP)-based identification of these and other cassettes reported in China, using readily available enzymes, to facilitate further studies of this type.

Integron gene cassettes in Acinetobacter spp. strains from South China.

L&#39;&eacute;pid&eacute;miologie des g&egrave;nes de r&eacute;sistance aux antibiotiques &eacute;mergents en Asie est mal d&eacute;fini et les &eacute;tudes dans les bassins majeurs des g&egrave;nes transmissibles comme integron g&egrave;nes cassettes sont importantes. Isolats de cent vingt - deux non r&eacute;p&eacute;titives Acinetobacter spp. ont &eacute;t&eacute; obtenus de patients hospitalis&eacute;s de l&#39;h&ocirc;pital majeur en Chine du Sud. Cinquante-trois de ces isolats contenaient des int&eacute;grons de classe 1, et il n&#39;y a preuve du transfert horizontal de g&egrave;nes entre les clones ind&eacute;pendants. La piscine commune de g&egrave;nes cassettes a &eacute;t&eacute; domin&eacute;e par quatre baies de cassette : arr3-aacA4 (24 isolats de plusieurs souches non apparent&eacute;s) ; aacC1-orfP-orfQ-aadA1a (11 isolats, probablement tous la m&ecirc;me souche) ; aacA4-catB8-aadA1 (2 isolats) ; et dfrVII (1 isolat). Nous avons d&eacute;velopp&eacute; une simple restriction fragment length polymorphism (RFLP)-fonction d&#39;identification de ces et d&#39;autres cassettes rapport&eacute; en Chine, &agrave; l&#39;aide d&#39;enzymes disponibles, pour faciliter la poursuite des &eacute;tudes de ce type.

Integron g&egrave;nes cassettes dans les souches de Acinetobacter spp de Chine du Sud.

Die Epidemiologie der aufstrebenden Antibiotikaresistenzgenen in Asien ist unzureichend definiert und Studien innerhalb der gro&szlig;en Pools transmissible Gene wie Integron gen Kassetten sind wichtig. Ein hundert und zwanzig nicht wiederholende Acinetobacter spp.-Isolaten wurden von Patienten eines gro&szlig;en Krankenhauses in S&uuml;d-China erzielt. Dreiundf&uuml;nfzig diese Isolate enthaltenen Klasse 1 Integrons und gibt Hinweise auf Horizontaler Gentransfer zwischen unabh&auml;ngigen Klone. Der gemeinsame Pool von Gen-Kassetten war gepr&auml;gt von vier Kassetten-Arrays: arr3-aacA4 (24 Isolaten von mehreren unabh&auml;ngigen St&auml;mme); aacC1-OrfP-OrfQ-aadA1a (11-Isolaten, wahrscheinlich die gleiche Stamm); aacA4-catB8-aadA1 (2 Isolate); und DfrVII (1 isolieren). Wir entwickelten eine einfache Beschr&auml;nkung Fragment-L&auml;nge-Polymorphismus (RFLP)-basierte Identifikation von diesen und anderen Kassetten berichtet in China verf&uuml;gbar Enzyme, mithilfe von Studien dieser Art weiter zu erleichtern.

Integron gen Kassetten in Acinetobacter spp. St&auml;mme aus S&uuml;dchina.

L&#39;epidemiologia dei geni di resistenza antibiotica emergenti in Asia &egrave; adeguatamente definito e studi all&#39;interno di piscine principali dei geni trasmissibili quali cassette gene Integrone sono importanti. One-twenty - two non ripetitivi Acinetobacter isolati spp sono stati ottenuti da pazienti ricoverati di un importante ospedale nel sud della Cina. Cinquanta-tre di questi isolati contenuti integrons classe 1, e non c&#39;&egrave; evidenza di trasferimento genico orizzontale tra cloni non correlati. Piscina comune di cassette gene era dominata da quattro matrici cassetta: arr3-aacA4 (24 isolati di diversi ceppi indipendenti); aacC1-orfP-orfQ-aadA1a (11 isolati, probabilmente tutto il ceppo stesso); aacA4-catB8-aadA1 (2 isolati); e dfrVII (1 isolato). Abbiamo sviluppato un semplice restriction fragment length polymorphism (RFLP)-basato su identificazione di queste e altre cassette segnalati in Cina, usando gli enzimi prontamente disponibili, per facilitare ulteriormente gli studi di questo tipo.

Cassette di gene Integrone in ceppi di Acinetobacter spp. dal sud della Cina.

&#x30A2;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x65B0;&#x8208;&#x306E;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x75AB;&#x5B66;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4F1D;&#x9054;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30ED;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1 &#x3064; 100 &#x3068; 20-2 &#x975E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x30A2;&#x30B7;&#x30CD;&#x30C8;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E;&#x83CC;&#x5206;&#x96E2;&#x682A;&#x306F;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5357;&#x90E8;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x75C5;&#x9662;&#x306E;&#x5165;&#x9662;&#x60A3;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E94;&#x5341;&#x304B;&#x3089;&#x4E09;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; 1 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x6C34;&#x5E73;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4F1D;&#x64AD;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB; 4 &#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#xFF1A; arr3-aacA4 &#xFF08;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E; 24 &#x83CC;&#x682A;);aacC1-orfP-orfQ-aadA1a &#xFF08;11 &#x83CC;&#x682A;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#xFF09;;aacA4-catB8-aadA1 &#xFF08;2 &#x83CC;&#x682A;);dfrVII &#xFF08;1 &#x5206;&#x96E2;&#xFF09;&#x3002;&#x5358;&#x7D14;&#x578B;&#x5236;&#x9650;&#x65AD;&#x7247;&#x9577;&#x591A;&#x5F62; (RFLP) &#x3092;&#x958B;&#x767A;-&#x4E2D;&#x56FD;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30ED;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30B7;&#x30CD;&#x30C8;&#x30D0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x5C5E;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x304B;&#x3089;&#x5357;&#x4E2D;&#x56FD;&#x3067;&#x3002;

&#xC544;&#xC2DC;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD765; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xC800;&#xD56D; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC740; inadequately &#xC815;&#xC758;&#xC640; &#xC8FC;&#xC694; &#xD480; integron &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xB4F1; &#xC804;&#xC1A1; &#xAC00;&#xB2A5; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xBC31; &#xC2A4; &#xBB3C; &#xB458; &#xBE44; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; Acinetobacter &#xC885; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB294; &#xC911;&#xAD6D; &#xB0A8;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC758; &#xC785;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; 50-3 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 1 integrons, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xD074;&#xB860; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC218;&#xD3C9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC774;&#xB3D9;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD480; 4 &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;: arr3 aacA4 (&#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD00;&#xB828; &#xC5C6;&#xB294; &#xC885;&#xC790;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; 24); aacC1-orfP-orfQ-aadA1a (11 &#xACA9;&#xB9AC;, &#xC544;&#xB9C8; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAC19;&#xC740; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;); aacA4-catB8-aadA1 (2 &#xACA9;&#xB9AC;); &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; dfrVII (1 &#xBD84;&#xB9AC;)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xC81C;&#xD55C; &#xC870;&#xAC01;&#xC758; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E4;&#xD615;&#xC131; (RFLP) &#xAC1C;&#xBC1C;-&#xC27D;&#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xC774;&#xB7F0;&#xC774; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC774;&#xB4E4;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xAE30;&#xBC18;&#xB41C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC911;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xACE0;.

&#xC911;&#xAD6D; &#xB0A8;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; Acinetobacter &#xC885; &#xC885;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; Integron &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;.

Se define la epidemiolog&iacute;a de los genes de resistencia a los antibi&oacute;ticos emergentes en Asia y estudios en las piscinas principales de genes transmisibles tales como cintas de gene integron son importantes. Ciento y veinte y dos no son repetitivos Acinetobacter spp. aislantes fueron obtenidos de pacientes hospitalizados de un importante hospital en el sur de China. Cincuenta y tres de estos aislantes contienen integrones de clase 1, y hay evidencia de transferencia horizontal del gene entre clones sin relaci&oacute;n. La piscina com&uacute;n de cassettes de gene fue dominada por cuatro matrices de cassette: matriz3-aacA4 (24 aislamientos de varias cepas sin relaci&oacute;n); aacC1-orfP-orfQ-aadA1a (11 aislamientos, probablemente todos la misma cepa); aacA4-catB8-aadA1 (2 cepas); y dfrVII (1 cepa). Desarrollamos un polimorfismo de longitud de fragmentos de simple restricci&oacute;n (RFLP)-identificaci&oacute;n en base de estas y otras cintas registrados en China, utilizando enzimas disponibles, para facilitar a&uacute;n m&aacute;s estudios de este tipo.

Xun Cheng

Research and Development

Stemgent

The use of SC1 (Pluripotin) to Support mESC Self-renewal in the Absence of LIF

Xun Cheng

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