Pour commencer, allumez le système de mesure optique, la source de diodes électroluminescentes du microscope et l’ordinateur. Démarrez le programme sur l’ordinateur et ouvrez un nouveau fichier en cliquant sur Nouveau sous le fichier en haut à gauche de l’écran. Cliquez sur collecter, choisissez expériences, puis sélectionnez IPSC et mesures de calcium.
Ensuite, remplacez le milieu de culture cardiomyocytaire IPSC humain par 0,5 millilitre par puits de solution de Tyrode. Dans une plaque de 24 puits. Remplacez le couvercle de la plaque par le couvercle de la climatisation et placez la plaque à l’intérieur du système de mesure optique dans l’appareil réglé à une température de 37 degrés Celsius.
Cliquez sur ouvrir le localisateur de cellules sous la barre d’outils et attendez qu’un nouvel écran apparaisse. Sélectionnez le format de plaque sous Type de chambre et bien en haut de l’écran. Choisissez un puits et choisissez une zone à l’intérieur du puits pour observer la contraction et la relaxation synchronisées.
Appuyez sur Démarrer en bas à gauche de l’écran. Cliquez ensuite sur Ajouter une mesure pour mesurer la surface. Mesurer environ 10 zones par puits dans une plaque de 24 puits.
Pour les mesures de référence uniquement, continuez la mesure à partir du puits suivant. Pour tester les composés, appuyez sur Compléter une fois que les zones à l’intérieur d’un puits sont mesurées. Ouvrez l’instrument de mesure optique et ajoutez le facteur de stress ou le composé souhaité au puits.
Après l’incubation à la période souhaitée, cliquez sur Mesure automatique pour effectuer des mesures appariées dans les mêmes zones du puits où les mesures de base ont été effectuées. Appuyez sur Terminé une fois toutes les mesures effectuées. Choisissez le puits suivant en haut à droite de l’écran et continuez les mesures pour tous les puits requis.
Après avoir mesuré tous les puits requis, cliquez sur Arrêter et enregistrez le fichier à l’emplacement souhaité.
