Dissoudre les aliquotes Fura-2 AM dans la solution de Tyrode pour obtenir une concentration finale de 1 micromolaire Fura-2 AM à ajouter aux cellules. Aspirez le milieu et remplacez-le par la solution Tyrode contenant Fura-2 AM. Incuber pendant 15 minutes à 37 degrés Celsius dans un incubateur ou le système de mesure basé sur l’optique. Retirez la solution de Tyrode contenant Fura-2 AM et lavez les puits deux fois avec de la solution de Tyrode fraîche.
Enfin, incuber les cellules dans la solution de Tyrode pendant encore cinq minutes à 37 degrés Celsius pour permettre la désestérification de Fura-2 AM. Placez la plaque à l’intérieur du système de mesure optique pour procéder aux mesures de contractilité. Sélectionnez un puits, choisissez une zone dans le puits pour observer la contraction et la relaxation synchronisées, puis cliquez sur Démarrer et ajoutez une mesure. En plus des traces de contractilité, un transitoire calcique ratiométrique en temps réel apparaît à l’écran.
