Pour commencer, prenez une plaque à 96 puits contenant des électrodes de connexion à doigts interdigitées couvrant une surface d’environ quatre millimètres carrés. Placez la plaque sur la station de puits et cliquez sur le bouton de configuration. Si les puits sont correctement connectés, des lectures vertes apparaîtront.
Tous les puits non raccordés seront identifiés en rouge. Ajoutez 200 microlitres de média à chaque puits utilisé, puis placez la plaque dans la station de détection d’impédance du substrat de la cellule électrique, ou station ECIS. Pour stabiliser les puits et les préparer pour les expériences, cliquez sur Configuration, puis sur Vérifier, puis sur Stabiliser.
Après 40 minutes, retirez la plaque de la station et retirez le média de chaque puits. Ensemencez les cellules B2B à une densité de 40 000 cellules par millilitre dans les puits contenant les cellules, et placez la plaque sur la station ECIS dans l’incubateur. Ensuite, cliquez sur vérifier pour vous assurer que toutes les électrodes sont lues par les capteurs de la station.
Sélectionnez le temps de fréquence multiple pour mesurer chaque électrode à sept fréquences différentes. Cliquez sur démarrer et laissez-le fonctionner pendant 24 heures afin que les cellules puissent former une monocouche confluente. La lecture de chaque puits est affichée dans une couleur différente.
Après environ 24 heures, les puits contenant des cellules montreront une résistance accrue sur le moniteur, indiquant la fixation des cellules aux électrodes. Appuyez sur pause pour interrompre la collecte de données. Par exemple, pour les modifications de support, l’édition de réactifs, etc.
Exposez les nanoparticules ZIF8 au puits vierge et aux puits de cellules avec un volume de 100 microlitres par puits, Placez la plaque sur la station et cliquez à nouveau sur vérifier pour vous assurer que les capteurs lisent toutes les électrodes. Cliquez sur reprendre pour reprendre les expériences après la pause choisie. Après la collecte des données, cliquez sur Terminer pour enregistrer les données sous forme de feuille de calcul.
Pour obtenir les paramètres alpha, cliquez sur modèle, et sur l’écran contextuel, cliquez sur le puits de média uniquement, puis sélectionnez le puits qui ne contient que des médias. Cliquez sur définir la référence pour l’évaluation des données et sélectionnez la référence liée à l’expérience de contrôle. Cliquez sur trouver pour démarrer le raccord de référence.
Sélectionnez l’ensemble, puis ajustez la plage T pour traiter les données relatives à la référence sélectionnée. Pour évaluer l’attachement de cellule, sélectionnez alpha. Enfin, une fois l’analyse terminée, cliquez sur Enregistrer RBA et enregistrez les paramètres sous forme de feuille de calcul.
L’analyse du comportement de la cellule lors de l’exposition aux MOF ZIF8 a été réalisée par détection d’impédance de substrat de cellule électrique. Les images ont montré des changements dans les interactions entre les substrats cellulaires et les changements dépendent du moment de l’exposition et de la dose utilisée.
