Commencez par transférer les poissons zèbres de leurs bassins principaux dans les bassins individuels, puis remettez-les dans les bassins après l’imagerie. Immergez le poisson zèbre dans du sulfonate de méthane de tricaïne à 0,05 % pour anesthésier le poisson. À l’aide d’un appareil photo, prenez une image de chaque poisson à côté d’une règle pour enregistrer la taille, la longueur et l’état de santé.
Ensuite, placez le poisson anesthésié sur une boîte de Pétri avec un mouchoir humide. Placez le poisson sur le côté et effectuez une imagerie de flanc à l’aide d’un stéréomicroscope au grossissement approprié. Prélever des écailles à l’aide d’une pince à épiler fine et d’une pince sous le microscope stéréoscopique et les transférer dans des tubes de collecte de 1,5 ou 2 millilitres pour une coloration ultérieure.
Pour effectuer la phosphatase alcaline et la coloration de von Kossa, transférez les tartres dans des tubes avec de l’eau Milli-Q déminéralisée. Capturez des images des écailles récoltées individuellement avant de les transférer dans des tubes. Des motifs précoces d’écailles nouvellement formées peuvent être observés au jour 2 de la régénération.
Les écailles régénérées ont montré une expression OSX plus élevée par rapport au jour 0 sur les échelles génétiques.
