Commencez par administrer 0,3 milligramme par millilitre de buprénorphine par voie sous-cutanée au rat anesthésié. Montez le rat sur le cadre stéréotaxique. Ensuite, utilisez un rasoir pour raser la fourrure de la tête.
Désinfectez la peau avec trois cycles alternés de povidone iodée à 10 % et d’alcool, à l’aide de cotons-tiges stériles, en frottant dans des directions différentes pendant trois à cinq secondes à chaque fois. Appliquez une pommade pour les yeux pour prévenir la sécheresse. Maintenant, faites une incision de deux centimètres le long de la ligne médiane de la tête à l’aide d’un scalpel stérile, puis nettoyez méticuleusement le crâne à l’aide d’écouvillons stériles et de solution saline.
Identifiez le bregma à l’aide d’une aiguille de seringue Hamilton de 10 microlitres montée sur le dispositif stéréotaxique et réglez-le sur 00. Déplacez les coordonnées antérieures, postérieures et latérales de l’appareil. Créez un trou de bavure d’un millimètre à l’aide d’une perceuse dentaire.
Chargez quatre microlitres du cocktail libératoire dans la seringue Hamilton de 10 microlitres, puis abaissez soigneusement l’aiguille avec un bord émoussé ou conique pour entrer en contact avec la dure-mère. Insérez l’aiguille à la profondeur souhaitée de 3,5 millimètres. Infuser deux microlitres du cocktail libératoire à raison d’un microlitre par minute.
Laissez l’aiguille en place pendant deux minutes supplémentaires, puis récupérez-la lentement pour éviter que le cocktail de libération ne remonte à la surface. Suturez l’incision à l’aide de nylon 5/0 et nettoyez la zone suturée avec un antiseptique. Transférez ensuite l’animal dans la zone de surveillance post-opération.
L’injection de plus de trois microlitres du cocktail libératoire a entraîné des lésions mécaniques non spécifiques. L’injection de deux microlitres du cocktail a conduit à l’émergence d’amas immunopositifs à la doublecortine qui étaient visibles même après huit mois. L’immunomarquage cérébral a révélé des sites de dénudation sur la couche épendymaire, proches du niveau des injections.
Un déclin progressif des perturbations de la couche épendymaire a été observé dans les zones plus postérieures et plus antérieures de la zone sous-épendymaire.
