Commencez par vous préparer à une craniotomie en plaçant un coussin de paillasse propre sur la surface de travail. Collez le cône de nez d’un vaporisateur d’isoflurane sur la surface de travail. Ensuite, placez le tube silastic à l’extrémité d’une aiguille de calibre 18, en veillant à ce qu’un millimètre de la pointe de l’aiguille dépasse.
Entraînez-vous à bouger l’aiguille en marquant une feuille de papier avec un point de départ pour le bregma, un autre 0,2 millimètre latéralement, et faites une marque finale, un millimètre caudal à la deuxième marque. Entraînez-vous à déplacer l’aiguille du point de départ à la deuxième marque, puis à la marque finale, en veillant à ce que le mouvement soit répétable sans guides. Ensuite, rasez la tête de l’animal anesthésié.
Placez la souris sur la surface de travail, en gardant la tête dans le cône de nez pour maintenir l’anesthésie et appliquez un lubrifiant oculaire sur les deux yeux. Maintenant, frottez le site d’injection avec de la gaze stérile trempée dans une solution d’iode. Ensuite, essuyez la zone avec un tampon à récurer à base d’alcool.
Répétez ce processus trois fois. Tenez fermement la tête avec la main non dominante, en posant la souris à plat sur le plan de travail. Faites glisser l’aiguille de calibre 18 préparée sur la peau de la tête, le long de la ligne médiane dans une direction rostrale et caudale pour identifier le bregma.
Maintenant, déplacez l’aiguille de deux millimètres latéralement et d’un millimètre caudal jusqu’au site d’injection. En tenant l’aiguille verticalement, poussez-la fermement à travers la peau et l’os, jusqu’à ce que le tube affleure la peau. Rétractez l’aiguille, faites-la pivoter et appuyez à nouveau sur la peau et l’os, en répétant le processus pour créer un petit trou dans l’os.
À l’aide de l’aiguille émoussée, vérifiez qu’il y a un trou suffisant dans l’os, assez grand pour permettre à l’aiguille de passer à travers. Retirez la souris du cône de nez. Procédez au nettoyage du sang du site d’injection à l’aide d’une gaze stérile.
Placez la souris dans une cage, sur un chauffe-cage, jusqu’à ce qu’elle soit réveillée.
