Commencez par diluer de manière appropriée les médicaments à base d’anticorps monoclonaux pour l’enrichissement en protéines de la cellule hôte. Pour diluer les produits pharmaceutiques avec des concentrations supérieures à 50 milligrammes par millilitre, ajouter de l’eau déminéralisée à 15 milligrammes de l’anticorps monoclonal dans un microtube à centrifuger de deux millilitres. Pour les produits pharmaceutiques dont les concentrations sont inférieures à 50 milligrammes par millilitre, transférez 20 milligrammes de celui-ci dans un dispositif de filtration centrifuge de 10 kilodaltons.
Centrifuger le contenu à 14 000 g pendant 25 minutes à température ambiante pour laisser environ 100 microlitres de solution dans le tube. Ajoutez ensuite 350 microlitres de tampon histidine à 10 millimolaires, ayant un pH de six dans le filtre, puis faites tourbillonner le tube avant de le centrifuger à 14 000 G pendant 25 minutes à température ambiante. Retournez le filtre et placez-le dans le tube de prélèvement de l’échantillon.
Centrifuger l’échantillon à 1000 G pendant cinq minutes à température ambiante, en récupérant toute la solution dans le tube de prélèvement. Ajouter 200 microlitres de tampon histidine à 10 millimolaires dans le filtre et pipeter de haut en bas pour récupérer l’échantillon de protéine restant. Transférez l’ensemble de la solution dans le même tube de prélèvement.
Vortex et spin down comme démontré précédemment. Après avoir mesuré la concentration de l’échantillon par nano goutte, ajustez-la à 50 milligrammes par millilitre en ajoutant le tampon d’histidine. Enfin, transférez 300 microlitres de l’échantillon dans un microtube à centrifuger de deux millilitres.
