Laser Capture Microdissection of Oral Submucous Fibrosis Tissues for Morphology and Spatial Information Analysis

Pour commencer, allumez le système et le logiciel de microdissection laser. Placez la lame A contenant des sections colorées de trois microns de tissus de fibrose sous-muqueuse buccale sur la platine de la lame. Observer la morphologie histologique afin d’identifier la zone d’intérêt pour la microdissection laser.

Retirez la lame A et placez la lame B avec le côté mouchoir vers le bas sur la platine de la lame. Ensuite, cliquez sur le bouton Décharger pour pousser le périphérique de collecte. Insérez un tube PCR dans le dispositif de prélèvement et assurez-vous que le tube est fixé.

Cliquez ensuite sur le bouton OK. Sélectionnez un bouchon en cliquant sur le cercle rouge correspondant, en marquant le dispositif collecteur sur les bouchons de tube, et attendez que le cercle sélectionné devienne vert. Cliquez ensuite sur le bouton Dessiner et sur le bouton Dessiner plus Couper et utilisez la souris pour esquisser la zone d’intérêt.

Cliquez sur Start Cut pour capturer la zone d’intérêt, qui sera collectée par le bouchon. Appuyez ensuite sur le bouton inférieur pour vous assurer que l’échantillon capturé est prélevé. Cliquez sur le bouton de l’échantillon pour capturer l’échantillon suivant.

Enfin, cliquez sur Décharger pour décharger le tube PCR contenant l’échantillon capturé. Dans cette étude, à l’aide de la microdissection laser de la fibrose sous-muqueuse buccale, des tissus de l’épithélium et du stroma avec des motifs différents sont capturés. Des alternances du nombre de copies étaient présentes dans les échantillons épithéliaux, mais pas dans les échantillons de stroma.

Le modèle d’alternance du nombre de copies dans l’épithélium dysplasique a été observé dans les chromosomes trois et huit, tandis que les alternances du nombre de copies ont été détectées à une fréquence plus faible dans le chromosome huit de l’épithélium atrophique.