Pour commencer, positionnez la souris anesthésiée sur la table d’opération. Maintenez la température corporelle à l’aide d’une sonde rectale reliée à un coussin chauffant. Faites une incision sur la peau de la tête en direction de la suture sagittale, en partant des oreilles jusqu’à la zone entre les yeux.
Rétractez la peau et retirez le périoste sur le côté droit du crâne. Trouvez ensuite les coordonnées, à 2,5 millimètres de la hauteur de bregma. Appliquez du cyanoacrylate sur le support Doppler et fixez-le pour la débitmétrie laser-Doppler.
Une fois la colle sèche, connectez la sonde Doppler. Ensuite, vérifiez la lecture correcte du signal pour évaluer le flux sanguin cérébral. Pour effectuer l’occlusion de l’artère, retournez la souris en décubitus dorsal et fixez-la à la table d’opération avec du ruban adhésif médical.
Ensuite, faites une incision médiane sur le cou. Tirez la peau latéralement, puis retirez les glandes salivaires à l’aide d’écarteurs. Cela expose le territoire carotidien.
Identifier l’anatomie vasculaire de l’artère carotide commune, ou ACC, l’ICA et l’ECA, ainsi que les différentes artères qui en dérivent. Pour faciliter la manipulation, détachez l’ACC, puis l’ECA du tissu conjonctif. Ensuite, cautériser l’artère thyroïdienne supérieure et détacher l’ICA du tissu conjonctif.
Vérifiez à nouveau pour vous assurer que les artères principales sont complètement détachées du tissu conjonctif. Ensuite, enroulez des sutures en soie 6-0 autour de l’ECA au niveau de la bifurcation linguale maxillaire. Ensuite, suturez autour de l’ACC.
Placez un clip vasculaire en interrompant la circulation sanguine de l’ICA. Faites une petite incision dans l’ECA près de la zone où se trouve le nœud serré. Insérez le monofilament jusqu’à ce que le revêtement épais ait complètement pénétré dans la lumière artérielle.
Serrez le deuxième nœud pour maintenir le monofilament à l’intérieur de l’artère et éviter que la pression exercée par le sang ne le pousse vers l’extérieur. Coupez l’ECA sous le premier nœud et faites pivoter la souche pour l’orienter dans la direction de l’ICA. Faites avancer le monofilament via l’ICA jusqu’au point où le MCA se ramifie.
L’occlusion se traduit par une chute brutale du flux sanguin dans la lecture du LDF. Après 40 minutes, anesthésiez à nouveau la souris et replacez-la sur la table d’opération. Retirez les mailles de l’encolure.
Après 45 minutes d’occlusion, desserrez le nœud qui maintient le monofilament en place. Tirez lentement et doucement sur le filament et vérifiez que la recanalisation tissulaire se produit. Ensuite, retirez le filament et serrez le nœud pour éviter la perte de sang, nettoyez le sang et dénouez le nœud CCA.
Assurez-vous qu’il n’y a pas de dommages à la paroi artérielle. Retirez les écarteurs et repositionnez les muscles, les glandes et la peau. Suturez la peau à l’aide d’une suture 6-0 et appliquez un désinfectant.
Débranchez la sonde Doppler et détachez le support. Enfin, suturez et désinfectez la peau de la tête. Le résultat de la procédure d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne a été évalué à l’aide d’une neuroimagerie IRM in vivo.
L’évolution des lésions évaluée à différents moments après la reperfusion a montré que la progression du volume de la lésion prend environ deux jours. Des tests comportementaux, tels que le test de force de préhension, ont montré une perte de force chez les souris après 24 heures d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne. De plus, lors de la stimulation dans le test d’angle, les souris ont montré une préférence pour se tourner vers le côté droit, qui était ipsilatéral à la lésion, indiquant une occlusion réussie de l’artère cérébrale moyenne du côté droit.
