Human Endometrial Tissue Embedding and Sectioning for Immunohistochemistry and Digital Image Analysis

Pour commencer, sélectionnez un moule d’enrobage approprié qui correspond à la taille de l’échantillon d’endomètre déshydraté. Remplissez-le de cire de paraffine, chauffée à 70 degrés Celsius. Placez immédiatement le tissu endométrial humain déshydraté dans le moule.

Utilisez des pinces pour ajuster soigneusement le tissu, afin de vous assurer qu’il est placé au centre. Maintenant, transférez le moule sur la plaque de refroidissement et appuyez doucement sur le tissu avec une pince à épiler pendant que la paraffine au fond se solidifie. Placez la cassette incrustée sur le moule et recouvrez-la de cire.

Replacez ensuite le moule sur la plaque de refroidissement. Une fois que la paraffine s’est complètement solidifiée, retirez le bloc et la cassette attachée du moule. Pour le sectionnement, insérez le bloc sur le clip d’échantillon du microtome.

Placez la lame dans le support et ajustez l’angle entre le plan des blocs et la lame. Ajustez maintenant l’épaisseur de la section à quatre micromètres. Tournez ensuite le volant pour commencer à trancher.

Découpez des sections minces du bloc pour exposer la surface de tissu appropriée. Utilisez le pinceau pour rassembler les sections continues et complètes. Une fois que suffisamment de sections ont été obtenues, utilisez une pince à épiler pour retirer les sections non qualifiées à l’avant.

À l’aide d’un pinceau, transférez les sections dans un bain d’eau tiède, chauffée à 42 degrés Celsius. Lorsque les sections sont complètement aplaties, utilisez des glissières anti-détachement pour les soulever. Ensuite, faites-les cuire dans un chauffe-lames à 65 degrés Celsius pendant plus de 60 minutes avant de les retirer.