Pour commencer, placez la souris donneuse anesthésiée sous le microscope à haute puissance. À l’aide d’une paire de ciseaux, effectuez une laparotomie médiane du processus xiphoïde à la synthèse pubienne. Ensuite, faites une incision transversale sous les côtes pour créer un motif en forme de croix.
Après avoir rétracté le processus xiphoïde, éviscérez les intestins et placez-les sur l’éponge de gaze humide sur le côté gauche de la cavité abdominale. Pour mobiliser le foie, séparez-le de toutes ses attaches ligamentaires. Une fois que l’artère hépatique appropriée ou PHA est exposée, à l’aide d’une pince incurvée, squelettez-la.
Après avoir ligaturé le PHA, disséquez toute la longueur du canal cholédoque, ou CBD. Insérez l’endoprothèse des voies biliaires dans le CBD et fixez-la avec une suture en nylon 10-O, puis ligaturez la face distale du CBD. À l’aide d’une éponge de gaze humide, rétractez le lobe hépatique droit vers le xiphoïde et exposez la veine cave inférieure, ou IVC.
Mobiliser la veine cave infra hépatique inférieure, ou IHIVC, loin du rétropéritoine et cautériser la veine surrénale droite. Une fois que l’artère rénale et la veine droites sont disséquées et ligaturées, coupez les deux et les attaches ligamentaires restantes. Après avoir retiré le rein droit, injectez 0,5 millilitre de solution froide d’histidine trytophane cétoglutarate avec 100 unités d’héparine par la veine porte, ou PV. Après une minute d’injection, coupez la veine porte supérieure aux veines splénique et mésentérique supérieure.
Pour perfuser le foie, injectez lentement une solution froide de conservation du cétoglutarate d’histidine trytophane dans l’IHIVC jusqu’à ce que le liquide provenant du PV soit clair. Placez une micro-pince ou une suture fine sur l’IHIVC juste au-dessus de la veine rénale droite et coupez juste en dessous de la pince. Une fois que le CBD est coupé distalement à l’endoprothèse, identifiez et ligaturez le canal cystique avec une suture en nylon 10-O.
À l’aide d’une pince, saisissez le dôme de la vésicule biliaire et, à l’aide de ciseaux à ressort, coupez le canal cystique au-dessus de la suture pour terminer la cholécystectomie. Rétractez le foie vers le bas pour exposer la veine cave inférieure supra-hépatique, ou SHIVC, et coupez-le, en préservant une longueur adéquate pour l’anastomose chez les souris receveuses. Après avoir retiré les attaches ligamentaires supplémentaires.
Placez le foie dans une solution saline froide.