Pour commencer, prenez les extraits aqueux et éthanol obtenus à partir de la Gracilaria gracilis séchée. Dans une microplaque à 96 puits, distribuer deux microlitres de chaque échantillon et 198 microlitres de DPPH dissous dans de l’éthanol absolu. Ensuite, à l’aide d’un spectrophotomètre à microplaques, mesurez l’absorbance à 517 nanomètres.
Prenez les kératinocytes humains cultivés dans des plaques à 96 puits pendant la nuit. Ajouter deux microlitres d’extraits dissous de DMSO à 198 microlitres de milieu dans des puits de microplaques. Retirez le milieu de culture.
Ajoutez 100 microlitres de MTT aux cellules et incubez dans l’obscurité pendant 30 minutes. Pour solubiliser les cristaux intracellulaires de formazan, ajoutez 100 microlitres de DMSO. À l’aide d’un lecteur de microplaques, mesurez l’absorbance à 570 nanomètres.
Le test DPPH a démontré que la température de 40 degrés Celsius présentait des valeurs d’inhibition de l’activité oxydante plus élevées par rapport aux extraits obtenus à température ambiante ou à 70 degrés Celsius. Aucun effet cytotoxique n’a été observé sur les kératinocytes humains, ce qui suggère qu’à la concentration maximale du test, les extraits aqueux et à l’éthanol sont sans danger pour une utilisation cutanée.
