Pour commencer, stérilisez la chambre de l’appareil acoustique avec de l’alcool à 75 % pendant cinq minutes. Ensuite, nettoyez l’appareil avec du PBS stérile et irradiez-le avec une lumière UV pendant une heure. Montez le dispositif acoustique stérile sur une platine de microscope pour une observation de dessus de l’intérieur de la chambre.
Placez un microscope numérique sur le côté de l’appareil qui est exempt de transducteurs PZT, ce qui permet d’observer l’intérieur de la chambre en vue latérale. Connectez indépendamment les fils des trois transducteurs PZT en série à trois amplificateurs de puissance et trois canaux de sortie des générateurs de fonctions. Programmez les paramètres sur les générateurs de fonctions pour chaque transducteur PCT, en spécifiant des paramètres tels que les formes d’onde sinusoïdales, la fréquence et l’amplitude.
Cultiver des cellules 3CA dans du DMEM avec 10 % de FBS et 1 % de pénicilline streptomycine dans un flacon de culture cellulaire T25. Lorsque les cellules deviennent confluentes à 80 %, lavez la culture deux fois avec du PBS. Après avoir retiré le PBS, ajoutez deux millilitres de trypsine-EDTA à 0,05 % dans le flacon et incubez à 37 degrés Celsius pour le détachement cellulaire.
Ajouter deux millilitres de milieu de culture cellulaire complet dans le flacon pour arrêter la trypsinisation. Transférez la suspension cellulaire dans un tube de 15 millilitres et centrifugez à 200 G pendant cinq minutes.
