Pour commencer, sélectionnez des aimants rectangulaires plats pour assembler les ensembles d’aimants pour les motifs de bandes. Découpez des plaques de silicone de 2 millimètres d’épaisseur en rectangles de dimensions 2 x 8 x 30 millimètres. Ensuite, assemblez les aimants rectangulaires et les plaques de silicone couche par couche.
Pour les motifs de réseau de points, assemblez les aimants cylindriques miniatures en veillant à ce que chaque ensemble d’aimants se compose de 36 aimants cylindriques disposés dans une grille de 6 x 6. Pour préparer un dispositif de culture cellulaire, utilisez un perforateur pour créer un trou rectangulaire de 1 x 1 centimètre dans la plaque de silicone de 2 millimètres d’épaisseur. Coupez la plaque de silicone autour du trou pour fabriquer un moule rond avec le trou au centre.
Pour la stérilisation, placez les moules dans le nettoyeur à ultrasons. Stérilisez les moules avec de l’eau pure pendant 10 minutes. Ensuite, remplacez l’eau par de l’éthanol à 75 % pendant 10 minutes.
Séchez les moules dans une boîte de stérilisation à 65 degrés Celsius pendant 60 minutes. Ensuite, fixez le moule en silicone stérilisé à une lame de cellule en verre ronde de 25 millimètres et appuyez doucement sur le moule pour que le silicone adhère au verre. Placez les ensembles d’aimants sur une plaque à 6 puits et positionnez le dispositif de culture cellulaire sur le dessus de l’ensemble d’aimants.
Pour préparer une solution injectable de Gd-DTPA de 30 millimolaires, mélangez 30 microlitres de Gd-DTPA avec 470 microlitres de milieu de culture cellulaire complet. Pour créer les motifs cellulaires, centrifugez la suspension HUVECs à 200G pendant 5 minutes. Et remettre la pastille en suspension dans un milieu contenant du Gd-DTPA.
Après le comptage des cellules, ajustez la densité cellulaire à environ 2 fois 10 à 5 cellules par millilitre à l’aide d’un milieu contenant du Gd-DTPA. Mélangez délicatement la suspension cellulaire et ajoutez 200 microlitres dans la cavité du moule de culture cellulaire pour créer une surface liquide pleine à ras bord. Incubez la plaque pendant 3 à 6 heures jusqu’à ce que les cellules adhèrent au substrat.
Après l’incubation, remplacez le milieu contenant du Gd-DTPA par un milieu de culture complet et retirez le dispositif de culture cellulaire de l’ensemble d’aimants. Pour préparer un dispositif de culture cellulaire pour un motif de cellules rayées, remplacez les plaques de silicone épaisses de l’appareil par des plaques minces. Après avoir modelé le premier type de cellules, comme indiqué précédemment, déplacez le dispositif de culture cellulaire de 1 millimètre des aimants situés en dessous vers la droite.
Appliquez la même procédure de création de motifs au deuxième type de cellules. Et déplacez le troisième dispositif de culture cellulaire de 1 millimètre des aimants ci-dessous vers la droite. Modélisez le troisième type de cellules comme démontré.
Après avoir modelé tous les types de cellules, lavez les lames de verre deux fois avec 200 microlitres de PBS. Enfin, remplacez le PBS par un milieu de culture cellulaire complet. Les tests de viabilité effectués sur les HUVEC traités avec du Gd-DTPA pendant 12 heures n’ont montré aucune diminution significative de la viabilité cellulaire, à l’exception de 50 millimolaires de Gd-DTPA, ce qui a entraîné une différence statistique, mais a préservé un taux de vie d’environ 90 %.
