Drosophile Dissection cérébrale pour analyser l’élagage synaptique dépendant de l’expérience du butyrate d’éthyle (EB) du récepteur Or42a

Pour commencer, prenez des mouches drosophiles exposées à l’huile minérale et à l’EB pendant 24 heures. Étiquetez les flacons en tant que témoin de véhicule ou EB exposé, et maintenez ces désignations tout au long de la dissection et du traitement du cerveau. À l’aide d’une pince, transférez une seule mouche anesthésiée dans un petit plat de PBS fraîchement préparé.

Immergez complètement la mouche dans PBS pour une dissection cérébrale complète. Ensuite, positionnez une mouche côté ventral vers le haut. Prenez deux pinces fines et aiguisées pour saisir le haut du thorax avec une pince et la tête, sous la trompe avec l’autre.

Tirez la tête et le reste du corps dans des directions opposées pour retirer la tête. Assurez-vous que la tête se détache facilement du thorax et quitte la tête isolée pour la dissection. Faites glisser la pince, précédemment utilisée pour saisir le thorax, sous le côté opposé de la trompe.

Tirez doucement la cuticule de l’exosquelette dans des directions opposées pour la déchirer entre les yeux et révéler le cerveau. Continuez à retirer la cuticule de l’exosquelette de la tête, en vous assurant que toutes les parties sont retirées. Maintenant, rincez une pointe de pipette P20 avec du PBS et 0,2 % de Triton X-100.

Transférez les cerveaux dans la solution de fixation dans le tube de capuchon immédiatement après la dissection.