Pour commencer, préparez deux milligrammes par millilitre de solution de nanoparticules d’oxyde de zinc à l’aide de DPBS. Effectuez une double dilution en série pour obtenir des concentrations différentes. Ajoutez 100 microlitres de chaque concentration de nanoparticules d’oxyde de zinc testée dans une plaque de 96 puits.
Diluez la culture bactérienne à un million d’UFC par millilitre avec du bouillon de soja tryptique ou un milieu TSB. Ajoutez 100 microlitres dans chaque puits contenant différentes concentrations de solution de nanoparticules d’oxyde de zinc. Incuber la plaque à 37 degrés Celsius pendant 24 heures.
Pipeter 100 microlitres de nanoparticules d’oxyde de zinc avec une solution bactérienne de chaque puits et préparer diverses dilutions de céréales dix fois supérieures jusqu’à 10 puissance moins six. Transférez 50 microlitres de quatre dilutions sur des plaques de milieu TSA de gélose de soja tryptique. Incuber les plaques de gélose à 37 degrés Celsius pendant 24 heures.
Après avoir sélectionné un facteur de dilution dénombrable pour chaque groupe, marquez toutes les colonies sur la plaque de dilution dénombrable et recalculez de manière à ce que la concentration devienne le nombre d’UFC par millilitre. Utilisez les données obtenues pour représenter le pourcentage de bactéries vivantes par rapport à celles du témoin négatif. Les propriétés antibactériennes des nanoparticules d’oxyde de zinc ont été testées sur 0,5 million d’UFC par millilitre de souche de Pseudomonas aeruginosa.
L’activité antimicrobienne des nanoparticules a augmenté en fonction de la concentration. Cependant, une diminution visible du nombre de colonies bactériennes par rapport à la culture bactérienne non diluée initiale n’était pas évidente. Lorsqu’elles ont été testées contre une souche de SARM de 0,5 million d’UFC par millilitre, ces nanoparticules ont montré une activité antibactérienne accrue, entraînant une réduction significative de la formation de colonies bactériennes.