Extraction chimique de cal de carotte traité aux pesticides pour évaluer la cytotoxicité des métabolites du pesticide

Pour commencer, mélangez 0,2 gramme de poudre moulue de chaque échantillon de carotte calleuse lyophilisée et traitée aux pesticides, avec trois millilitres d’acétonitrile dans un tube à centrifuger de 10 millilitres. Faites vortex le tube de centrifugation pendant huit minutes, puis sonisez-le pendant cinq minutes à 150 watts et 40 kilohertz. Ensuite, centrifugez le tube à 8 000 G et quatre degrés Celsius pendant 10 minutes, avant de prélever le surnageant par pipetage.

À l’aide d’un concentrateur d’azote à 40 degrés Celsius, concentrez les extraits mélangés jusqu’à ce qu’ils soient secs. Redissolvez les résidus de l’extrait dans un millilitre de DMEM, contenant 0,3 % de DMSO pour obtenir la solution d’exposition aux métabolites du pesticide. De la même manière, dissoudre à nouveau les résidus de l’extrait obtenu à partir des échantillons blancs calleux.

dans un millilitre de DMEM, contenant 0,3 % de DMSO. Ensuite, dissolvez un milligramme de chaque pesticide utilisé dans différents tubes contenant la solution de résidu d’échantillon blanc pour obtenir des solutions d’exposition apparente aux pesticides.