Pour commencer, prenez les ganglions de la racine dorsale récoltés. Sur un banc propre, remplissez une boîte de Pétri de 60 millimètres avec un milieu de coupe. Disposez la lunette de dissection et le stérilisateur à billes de verre, et placez une boîte à outils d’autoclave avec des outils de coupe à côté de la lunette.
À l’aide de la lunette de dissection, retirez tout excès de tissu autour du ganglion de la racine dorsale et coupez les racines nerveuses près du corps du ganglion de la racine dorsale. Maintenant, remplissez une deuxième boîte de Pétri de 60 millimètres avec un milieu frais. À l’aide de la lunette de dissection, coupez les ganglions de la racine dorsale coupés à environ 0,5 millimètre.
Transférez les ganglions de la racine dorsale coupés dans une assiette fraîche de 24 puits contenant du milieu sur de la glace. Ensuite, pipetez 65,1 et 52,8 microlitres de l’hydrogel prémélangé dans les compartiments soma et neurite, respectivement. Enfoncez soigneusement les ganglions de la racine dorsale coupés dans le compartiment soma.
Réticuler thermiquement l’hydrogel dans l’incubateur à 37 degrés Celsius pendant 30 minutes. Ensuite, réticulez l’hydrogel pendant 90 secondes. Ensuite, ajoutez un milieu de croissance des ganglions de la racine dorsale à l’hydrogel et aux ganglions de la racine dorsale.
Effectuez un changement complet de support au bout d’une heure pour retirer tout photo-initiateur non réactif ou résiduel dans le support.